山柰酚通过Wnt/β-catenin信号通路抑制HBx-HepG2细胞增殖、侵袭及迁移

目的:探讨山柰酚对HBx-HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的影响,并研究其潜在分子作用机制。方法:利用实时荧光定量PCR检测相关基因的表达水平,利用蛋白印迹实验检测相关蛋白的水平,流式细胞术检测细胞的凋亡率,MTT实验和平板集落形成实验检测细胞的增殖,Transwell侵袭实验和划痕愈合实验检测细胞的侵袭和转移。结果:山柰酚(10~200μmol/L)能够剂量和时间依赖性地抑制HBx-HepG2细胞的增殖。山柰酚(100μmol/L)能显著抑制HBx-HepG2细胞的集落形成数量、细胞侵袭能力以及细胞愈合率,诱导HBx-HepG2细胞凋亡,引起cleaved caspase-3、cleaved caspase-9及Bax蛋白水平上升,Bcl-2蛋白水平下降,降低β-catenin、c-Myc和cyclin D1 mRNA及蛋白的表达水平。山柰酚(100μmol/L)同时能够降低p-GSK-3β蛋白水平以及细胞质和细胞核中的β-catenin蛋白水平,对GSK-3β蛋白水平没有影响。Li Cl处理能够反转山柰酚(100μmol/L)对HBx-HepG2细胞的增殖、侵袭以及迁移抑制作用。结论:山柰酚对HBx-HepG2细胞的增殖、侵袭及转移有显著的抑制作用,这种抑制作用很有可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的活性来实现的。     

ITIH5基因启动子甲基化与胃癌生物学行为关系的研究

目的 ITIH5在多种肿瘤表达下调, 且其表达下调与患者预后不良相关。我们既往研究发现ITIH5在胃癌发生发展过程中可能发挥重要的生物学作用。然而ITIH5在胃癌发生发展中的生物学意义尚不清楚。本文研究了ITIH5甲基化调控对胃癌生物学行为的影响。方法采用RT-PCR检测细胞ITIH5表达情况。用MS-qPCR分析胃癌组织中ITIH5基因启动子区甲基化水平。用BSP对胃癌细胞ITIH5启动子区进行甲基化测序。采用5-aza去甲基化以及过表达ITIH5处理细胞后, 采用MTT法、transwell实验和划痕实验检测胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力。采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果胃癌细胞系中ITIH5的表达水平低于正常胃上皮细胞系。胃癌组织中ITIH5 mRNA表达与ITIH5启动子的甲基化水平呈负相关。胃癌细胞ITIH5的表达下调与其启动子区甲基化相关。5-aza去甲基化处理和过表达ITIH5, 可以显著抑制胃癌细胞增殖, 诱导细胞凋亡, 并导致其侵袭和迁移能力减弱。结论胃癌中ITIH5基因的表达下调与启动子区甲基化修饰有关。ITIH5在胃癌的发生中可能起着抑癌基因的作用。     

miR-582-5p对顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭与迁移的影响及其机制

目的探讨miR-582-5p对顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭与迁移的影响及其机制。方法培养鼻咽癌顺铂耐药细胞株HNE1/DDP, 分为对照组和miR-582-5p组;对照组转染miR-582-5p阴性对照试剂, miR-582-5p组转染miR-582-5p模拟物。2组细胞转染后培养48 h, 收集细胞采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-582-5p、苏氨酸激酶3(AKT3)mRNA的表达, 细胞计数(CCK)-8实验检测细胞活力, 集落形成实验检测细胞增殖能力, 划痕实验检测细胞运动能力, Transwell小室检测细胞侵袭及迁移能力, Western blot检测AKT3蛋白的表达情况。结果 (1)qRT-PCR检测对照组、miR-582-5p组miR-582-5p mRNA相对表达量分别为1.02±0.08、3.01±0.05, 差异有统计学意义(t=38.76, P<0.001)。(2)细胞活力检测结果显示, 与对照组比较, miR-582-5p组细胞培养0 h光密度(OD)值差异无统计学意义(P=1.000), 培养24、48、72 h时的OD值均降...     

LINC01352对口腔鳞状细胞癌的影响及其作用机制

目的探讨LINC01352对口腔鳞状细胞癌增殖、迁移与侵袭的影响及其机制。方法培养口腔鳞癌SCC25细胞, 分为LINC01352过表达(pc-LINC01352)组及其阴性对照(pc-NC)组、miR-629-5p mimics组及其阴性对照(miR-NC)组, 将pc-LINC01352、pc-NC、miR-629-5p mimics、miR-NC分别转染相应组的SCC25细胞中。pc-LINC01352组和pc-NC组SCC25细胞转染后, 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞中LINC01352、miR-629-5p的相对表达情况, 采用细胞计数试剂盒(CCK)-8检测细胞活力, 采用EdU检测细胞增殖能力, 采用Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力。通过LncRNASNP2在线网站预测LINC01352潜在的下游靶基因及其与LINC01352的结合位点。使用转染后的miR-629-5p mimics组、miR-NC组的SCC25细胞, 采用双荧光素酶报告基因实验验证LINC01352潜在的下游靶基因及其与LINC01352的结合位点。结果 SCC25细胞转染pc-LI...     

大麻二酚通过抑制小胶质细胞激活缓解小鼠焦虑和抑郁样症状

目的探讨大麻二酚(cannabinoid, CBD)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的小鼠焦虑和抑郁样行为的作用和机制。方法腹腔注射LPS建立神经炎症诱导的C57BL/6J小鼠焦虑和抑郁模型, 对造模成功小鼠腹腔注射CBD, 行为学试验评价小鼠的焦虑和抑郁样行为, qRT-PCR方法检测小鼠皮层、海马和前额叶皮层中的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α, TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)以及CD86的表达水平。体外LPS刺激CBD预处理的小胶质细胞系BV-2, 定量PCR方法检测BV-2细胞中TNF-α、IL-1β以及CD86的表达水平。蛋白质印记法检测小鼠不同脑区和BV-2细胞核因子κB(nuclear factor kappa-B, NF-κB)的表达水平。结果 CBD显著提高了LPS组小鼠在开放旷场试验(open filed test, OFT)中央区的停留时间和中央区运动路程, 显著降低了悬尾试验(tail suspension test, TST)与强迫游泳试验(force sw...     

FRCs调控淋巴结微环境的研究进展

成纤维网状细胞(fibroblastic reticular cells, FRCs)是淋巴结内一类特殊的基质细胞。近年来大量研究发现, FRCs通过构建导管网络支撑淋巴结的三维结构, 还产生细胞外基质, 分泌细胞因子和趋化因子, 参与调控淋巴结微环境的免疫稳态。FRCs在炎症、肿瘤和其他免疫性疾病的发生发展过程中发挥重要作用。文章介绍了FRCs在淋巴结内的分化、分布及功能, 阐述了FRCs调控淋巴结微环境的相关机制及意义。     

OPN基因在妇科肿瘤中的研究进展

骨桥蛋白又称为分泌型磷酸化糖蛋白1, 是最先在骨基质中提取出的一种磷蛋白, 在人体由人的SPP1基因编码;在小鼠则由SPP1配对物编码。骨桥蛋白存在于所有的体液和细胞外基质中, 广泛分布在人体上皮、心脏、骨骼、牙齿等多个组织器官。骨桥蛋白是一种多功能的分泌型糖蛋白, 参与疾病形成和发展所需的多种生理病理过程。近年来, 一些研究表明, 骨桥蛋白的血清水平在宫颈癌、卵巢癌和子宫内膜癌中均较高, 且在不同的病理类型中有着明显差异。宫颈癌、卵巢癌和子宫内膜癌是常见的妇科恶性肿瘤, 其标准治疗方法是外科手术切除和全身化疗, 虽然在很大程度上延缓了疾病的发展, 其预后仍然较差, 并且现有的肿瘤标记物特异性较低。因此, 亟需深入研究妇科恶性肿瘤发展的分子机制以找到靶向治疗的新思路以及为疾病的早期诊断和生存预后寻找新的标记物。本文主要对骨桥蛋白的分子生物学功能以及在妇科肿瘤中的研究进展进行综述。     

腺病毒肝炎

自2022年4月以来, 儿童不明原因重症肝炎在全球多国报道。截止5月11日, 全球已有20多个国家报告了至少448例不明原因儿童急性重症肝炎病例。鉴于部分病例检测出腺病毒, 因此腺病毒感染被怀疑是造成此次儿童急性重症肝炎的可能病因。本文就既往腺病毒感染引起肝炎(腺病毒肝炎)的流行病学、临床特征及发病机制等方面的研究和报道进行简单综述, 为我国开展不明原因重症肝炎的预防和控制提供参考。     

CRISPR/Cas9技术在宫颈癌治疗中的应用进展

宫颈癌是世界上女性癌症排名第4位的恶性肿瘤, 严重威胁女性的健康。宫颈癌患者的主要治疗方案为手术或同步放化疗, 随着医学研究的发展, 研究者们致力于探究更为有效、特异的治疗方案, 以期增加宫颈癌的治疗策略和提高治疗效果。簇状规则间隔短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(Cas9)技术是Cas9蛋白利用向导RNA(gRNA)的引导进而靶向目标基因, 实现对目标基因精准编辑的方法。目前, CRISPR/Cas9技术已成为一种很有前途的强大基因编辑工具, 是一种新的有效的靶向治疗方法, 且被应用于多种肿瘤的治疗中。主要从作用靶点、联合治疗策略以及相关耐药基因筛选等方面对CRISPR/Cas9技术在宫颈癌治疗中的研究进展进行综述, 以期为宫颈癌的治疗提供新的策略。     

CYFIP2过表达对膀胱癌T24细胞的生物学功能和Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的探讨细胞质脆性X智力低下蛋白1结合蛋白2(CYFIP2)过表达对膀胱癌T24细胞的生物学功能和Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法对照组为转染pcDNA3空载体的T24细胞, 过表达组为转染CYFIP2过表达载体的T24细胞。采用逆转录酶定量聚合酶链式反应和Western Blot检测CYFIP2 mRNA和蛋白的表达, CCK-8检测CYFIP2过表达对T24细胞增殖的影响, Transwell检测CYFIP2过表达对T24细胞迁移和侵袭的影响, 并通过Western Blot检测CYFIP2过表达对T24细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响。结果与对照组相比, 过表达组CYFIP2 mRNA和蛋白的表达水平均升高(均P<0.001), 细胞增殖、迁移和侵袭能力均减弱(均P<0.01)。CYFIP2过表达的T24细胞中β-catenin、c-Myc和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的蛋白表达均下调(均P<0.05), 而p-β-catenin的蛋白水平增加(P<0.05)。结论 CYFIP2过表达能够抑制T24细胞增...     

3M综合征致病机制的研究进展

3M综合征是一种罕见的骨骼线性生长障碍的遗传病, 其与许多其他原始身材矮小综合征不同, 它是一种与生长相关的疾病。3M综合征主要由CUL7、CCDC8、OBSL1基因突变所引起的, 且CUL7、CCDC8和OBSL1可能共属于同一个未知的潜在的分子或(和)细胞机制调控的生长发育的进程。现结合近几年国内外研究进展, 阐述相关基因突变引起的3M综合征致病机制, 旨在为研究3M综合征致病机制提供新的研究方向和研究基础。     

原发性中枢神经系统T细胞淋巴瘤临床病理学分析

目的探讨原发性中枢神经系统T细胞淋巴瘤(primary central nervous system T-cell lymphomas, TPCNSL)临床病理特征、诊断及鉴别诊断, 并分析其生物学行为及预后。方法收集2014年9月至2019年9月南京医科大学第一附属医院收治的经病理确诊的TPCNSL 3例, 观察其临床及影像学表现, 分析其组织学、免疫组织化学、分子遗传学特点, 收集随访结果, 并复习相关文献。结果经电子病历系统查询, 6 816例脑肿瘤患者中原发性中枢神经系统淋巴瘤97例。其中3例为TPCNSL, 男性2例, 女性1例, 年龄60、67、82岁。临床表现多样, 均出现不同程度的肢体乏力、麻木, 行走不稳;其中1例伴有烦躁不安、易激惹;1例伴有精神萎靡、嗜睡。镜下肿瘤细胞弥漫分布或围血管生长;瘤细胞异型性明显, 可见活跃的核分裂。免疫组织化学3例均阳性表达白细胞共同抗原、CD3、CD43、T细胞胞质内抗原1、穿孔素, 2/3例表达CD5、颗粒酶B, Ki-67阳性指数70%～80%。EB病毒编码的小RNA原位杂交均阴性;T细胞受体基因重排均阳性。随访1～6个月, 术后...     

呼吸道合胞病毒

近期我国急性呼吸道疾病持续上升与多种呼吸道病原体感染有关。其中呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)感染是导致1岁以下婴幼儿肺内感染住院的第一原因。在RSV流行高发季节, 80%以上婴幼儿的急性下呼吸道感染由RSV感染引起。世界卫生组织数据表明, RSV感染是5岁以下儿童因病毒感染而住院甚至死亡的第一大因素。     

登革病毒与细胞自噬

登革病毒(dengue virus,DENV)在胞内复制、宿主间传播和机体内致病机制等方面均受到细胞自噬的影响,本文依据国内外最新研究进展以DENV与细胞自噬的关系为重点展开综述。自噬是一种真核生物普遍具备的、用于应对外界压力和维持细胞内稳态的程序性蛋白降解途径,其在保护细胞免受病毒等外源病原体侵染的机制中发挥重要作用。但是自噬在DENV的复制过程中发挥了相反的作用。自噬不仅为病毒复制提供了复制场所,而且为其提供能量来源,细胞自噬还参与了部分DENV致病过程。总之,自噬有助于DENV的复制。     

巨噬细胞-肿瘤细胞融合对肿瘤细胞迁徙与侵袭能力的影响

目的探讨巨噬细胞(RAW264.7)与肿瘤细胞(Hepa1-6)融合后的杂交细胞迁徙和侵袭的变化, 为抑制巨噬细胞与肿瘤细胞融合的治疗方法提供科学依据。方法将对数生长期的RAW264.7细胞和不换液、不传代孵育6 d的Hepa1-6细胞分别作为对照组, 将两组细胞按1∶3的比例共培养后作为实验组, 分别采用显微镜观察、划痕实验、活细胞成像系统及Transwell实验观察巨噬细胞对肿瘤细胞迁徙和侵袭能力的影响。结果 RAW264.7细胞与Hepa1-6细胞共培养24 h后, 活细胞成像系统观察到杂交子细胞的运动能力较Hepa1-6细胞明显增强;划痕实验中24 h时共培养组愈合率明显高于Hepa1-6组的愈合率[%:(86.67±3.72)比(41.70±9.37), t=7.59, P<0.05];Transwell迁移实验中Hepa1-6细胞组穿膜细胞数低于共培养组的穿膜细胞数[个:(49±20)比(133±12), t=8.25, P<0.05], 而Transwell侵袭实验中Hepa1-6组穿膜细胞数低于共培养组穿膜细胞[个:(44±10)比(173±55), t=4...     

乳腺浸润性实性乳头状癌3例

例1, 患者女, 72岁, 因"发现乳房肿块3 d"于2020年6月15日入院。患者诉3天前无意间发现左侧乳房肿块1枚, 如豌豆大小, 无疼痛, 伴乳头溢血。查体:双乳对称, 双乳头无凹陷, 左乳头溢血;左乳可触及一直径约2.5 cm的肿块, 质地中等, 活动可, 边界尚清, 无压痛, 双侧腋下未触及明显肿大淋巴结。乳腺彩色多普勒超声示:左乳1～2点钟方向可见约24 mm×15 mm×21 mm低回声结节, 呈水平位不规则生长, 边缘模糊, 未见明显钙化灶, 后方回声无明显改变, 结节周围乳腺组织结构略扭曲, 周围导管无明显改变。诊断:左乳腺结节, 乳腺影像报告和数据系统(Breast Imaging Reporting and Data System, BI-RADS)4B级。2020年6月24日行左侧乳腺癌改良根治术。术后常规病理检查:(左乳)浸润性实性乳头状癌(invasive solid papillary carcinoma, ISPC), 未见明显脉管瘤栓, 未见明显神经累犯, 左腋窝淋巴结15枚未见癌转移。见图1A。免疫组织化学检查结果:雌激素受体(estrogen re...     

微流控技术在抗感染免疫研究中的应用

抗感染免疫是机体免疫系统抵抗病原体感染的第一道免疫防线, 涉及多种免疫细胞活化、迁移及病原体清除过程。因此, 免疫细胞行为及病原体检测就成为疾病诊断和预测的重要指标。近年来, 基于微流控芯片开发的多种免疫细胞行为检测技术, 以及细菌生长和药物筛查方法, 因具有微型化、高通量、高敏感度、快速分析及低消耗等优势, 已经在生物学、药理学及临床疾病研究和诊断中广泛使用。因此, 本文对微流控技术在固有免疫细胞迁移、细胞核变形、致病菌及病毒快速检测等抗感染免疫研究中的应用进行综述, 希望能进一步推动微流控技术在抗感染免疫研究和临床诊断中的应用发展。     

肠道病毒基因重组研究进展

肠道病毒(enterovirus, EV)可引起多种感染性疾病, 临床表现复杂多样。作为RNA病毒, EV的RNA依赖的RNA聚合酶缺乏校对功能, 导致其基因发生高频率的突变和重组, 从而使EV获得进化优势, 进而发生对宿主的免疫逃逸、对抗病毒药物的抗性, 也可使病毒的传播力和致病性增强或组织嗜性发生改变。本文综述了EV的重组机制, 并对部分重要型别和新型别EV的重组情况以及重组对病毒流行、致病性的影响进行了概述。     

头颈鳞癌免疫治疗生物标记物的研究进展

肿瘤的免疫逃逸机制在肿瘤的发生和发展中发挥重要作用。近年来, 免疫治疗成为头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma, HNSCC)临床研究的热点, 美国食品药品监督局和欧洲药品管理局已批准两种免疫检查点抑制剂Pembrolizumab和Nivolumab用于复发/转移的HNSCC(R/M HNSCC), 其中, Pembrolizumab已获批作为一线治疗药物。然而, 有限的应答率和治疗相关不良反应的风险使得只有少数患者能在治疗中获益, 故如何筛选出潜在免疫治疗有效的人群、进一步提高治疗疗效至关重要。文章基于最新研究做一综述, 归纳目前HNSCC免疫治疗生物标记物的应用情况及研究进展。     

LINC01116在肝细胞癌中的表达及促癌效应的初步研究

目的研究长非编码RNA(long non-coding RNA, LncRNA)LINC01116在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中的表达及其在HCC的发生和发展中的作用。方法首先采用生物信息学方法分析LINC01116在HCC中表达水平及其与临床病理因素的关系及其在HCC进展中的预后意义, 然后通过在肝癌细胞系(Huh-7)中转染LINC01116的siRNA进行干扰, 实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR, RT-qPCR)检测干扰后LINC01116的表达情况, 细胞计数试剂盒-8(cell counting Kit-8, CCK-8)检测Huh-7细胞的增殖情况, 流式细胞术检测Huh-7细胞凋亡情况, Transwell检测对Huh-7细胞迁移能力的影响, 同时Western blot检测上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)进程相关蛋白表达情况。结果 LINC01116在HCC组织和细胞系中过表达, 且与HCC患者预后不良相关。LINC0111...