COX-2在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨COX-2在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义。方法应用免疫组化方法检测88例非小细胞肺癌、23例癌旁正常肺组织中COX-2蛋白表达水平。结果与癌旁及正常肺组织相比,非小细胞肺癌癌组织中COX-2蛋白表达明显上调(P<0.01),COX-2蛋白表达与患者年龄、性别、有无淋巴结转移等因素无明显相关性,但与临床分期、病理组织学类型相关,肺腺癌组织中表达明显多于其他类型非小细胞肺癌。结论 COX-2蛋白在NSCLC中、特别是肺腺癌中表达上调,可探索用于预测NSCLC患者预后的指标。     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾小球信号蛋白JAK2和STAT3表达的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂氯沙坦对糖尿病大鼠肾小球信号蛋白Janus酪氨酸蛋白激酶2（JAK2）与信号转导子和转录激活子3（STAT3）表达的影响。方法雄性Wistar大鼠60只，随机分为正常对照组、糖尿病组和氯沙坦治疗组。腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱发糖尿病大鼠模型，每日灌胃氯沙坦10mg／kg。采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测肾小球细胞JAK2、STAT3和磷酸化STAT3（P-STAT3）蛋白的表达。免疫沉淀和Western blot检测磷酸化JAK2（p-JAK2）情况，逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测肾小球细胞JAK2和STAT3 mRNA的表达。结果在2周和4周时，糖尿病组较对照组肾小球JAK2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3蛋白及其JAK2和STAT3mRNA表达明显增强（P均〈0．01）。氯沙坦治疗组较糖尿病组P-JAK2和P-STAT3表达降低（P〈0．05）。氯沙坦对JAK2和STAT3蛋白及其mRNA的表达无明显影响。结论JAK2和STAT3信号蛋白可能参与了糖尿病早期肾脏的发病过程，氯沙坦对肾脏保护作用可能部分是通过影响JAK／STAT信号途径的激活而实现的。     

大黄素对IL-1β诱导血管平滑肌细胞增殖的影响及机制研究

[目的]观察大黄素对IL-1诱导下血管平滑肌细胞增殖的影响并探讨其作用机制.[方法]将IL-1β作用于平滑肌细胞,并用大黄素进行干预,实验设置对照组、IL-1β组、大黄素干预组.MTT法检测各组细胞的增殖能力;流式细胞术检测各组细胞的周期变化;RT-PCR检测各组细胞PCNA、CyclinD1 mRNA的表达;Western blot检测各组细胞PCNA、CyclinD1蛋白的表达以及JAK2、STAT 3的磷酸化情况.[结果]与对照组相比IL-1β组细胞的增殖能力显著增加(P＜0.01),与IL-1β组相比大黄素干预组细胞的增殖能力显著降低(P＜0.01).IL-1β组S期细胞所占比例(50.71±4.17)％,显著高于对照组(30.91±2.04)％(P＜0.01).大黄素干预组S期细胞所占比例(32.34±4.35)％,显著低于IL-1β组(P＜0.05),同时其G0～G1期细胞所占比例(48.83±4.55)％显著高于IL-1β组的(33.88±1.67)％(P ＜0.01).与对照组相比IL-1β组PCNA、CyclinD1 mRNA以及蛋白的表达都显著升高(P ＜0.01),而大黄素干预组PCNA、CyclinD1 mRNA以及蛋白的表达显著低于IL-1β组(P ＜0.05).与对照组相比IL-1β组JAK2、STAT3蛋白磷酸化程度显著增加(P＜0.05),与IL-1β组相比大黄素干预组JAK2、STAT 3蛋白磷酸化程度显著降低(P＜0.05).[结论]大黄素能够抑制IL-1β诱导的血管平滑肌细胞增殖,并且其抑制作用与JAK2/STAT 3信号通路的阻断有关.     

氯离子通道ClC-2在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的检测氯通道ClC-2在人非小细胞肺癌中的表达情况,探讨ClC-2在非小细胞肺癌中表达的临床意义,为ClC-2成为临床肺癌治疗的新基因靶点提供新思路。方法实验分为对照组和肺良性病组、肺鳞癌组和肺腺癌组,应用半定量RT-PCR及Western blot方法检测各组ClC-2mRNA及ClC-2蛋白表达水平并对ClC-2在非小细胞肺癌中的表达情况进行初步分析。结果 ClC-2mRNA表达水平上与对照组相比,肺鳞癌组和肺腺癌组中的ClC-2mRNA表达量明显增多,但肺良性病与正常肺组织之间无显著差异。ClC-2蛋白表达量在非小细胞肺癌及肺良性病组均比正常肺组织表达增多。结论两种实验方法均证实了ClC-2在非小细胞肺癌中明显表达。提示ClC-2通道可能在临床肺癌侵袭、发展及肺部疾病发生过程中起重要作用,ClC-2可能成为临床治疗非小细胞肺癌的新分子靶点,深入研究ClC-2与肺癌发生发展关系中提供病理生理基础。     

MiR-467b调控JAK/STAT信号通路在脂多糖诱导ATDC5细胞增殖及炎症反应中的作用

目的:探讨miR-467b调控JAK/STAT信号通路在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导ATDC5细胞增殖及炎症反应中的作用。方法:将ATDC5细胞分为4组:对照组、LPS组、NC mimics组、miR-467b mimics组。于转染培养48 h后收集细胞并进行后续实验:采用ELISA检测各组细胞TNF-α、IL-1β水平;采用qRT-PCR法检测各组细胞miR-467b的表达水平;采用MTT法检测各组细胞的增殖能力;采用蛋白质印迹和qRT-PCR法检测各组细胞JAK/STAT信号通路相关基因的蛋白质及mRNA表达水平。结果:与对照组相比,LPS组和NC mimics组ATDC5细胞TNF-α、IL-1β的表达水平均显著升高、miR-467b的表达水平显著降低(P<0.05);MTT实验结果表明:LPS组在24、48、72 h的吸光度值显著降低(P<0.05)。蛋白质印迹结果发现:与对照组相比,LPS组和NC mimics组ATDC5细胞STAT1、STAT3、JAK2、p-STAT1、p-STAT3、p-JAK2蛋白表达水平及STAT1、STAT3、JAK2 mRNA表达水平均显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与NC mimics组相比,miR-467b mimics组TNF-α、IL-1β的表达水平均显著降低而miR-467b的表达水平显著升高(P<0.05);过表达miR-467b后,细胞在24、48、72 h的吸光度值显著升高(P<0.05),而STAT1、STAT3、JAK2、p-STAT1、p-STAT3、p-JAK2蛋白表达水平及STAT1、STAT3、JAK2 mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:LPS刺激ATDC5细胞后可通过激活JAK/STAT3信号通路引起细胞炎性损伤,过表达miR-467b后可抑制JAK/STAT3信号通路的活化,降低ATDC5细胞的炎症水平。     

干扰SATB1抑制宫颈癌增殖和转移能力及增强宫颈癌放射敏感性的作用研究

目的 研究核基质结合区结合蛋白1 (SATB1)在宫颈癌组织中的表达水平及临床意义,并探讨SATB1对宫颈癌细胞增殖、转移能力和宫颈癌放疗敏感性的作用和发挥作用的分子机制。方法 采用免疫组化检测SATB1在宫颈癌组织和非癌组织中的表达,并分析宫颈癌患者中SATB1的表达水平与临床病理参数的关系及对宫颈癌患者预后的影响。常规培养宫颈癌肠转移细胞(CaSki),随机分为si-NC组和si-SATB1组,分别转染NC siRNA和SATB1 siRNA,采用western blotting检测各组细胞中SATB1的表达水平,CCK8实验检测各组细胞增殖能力,Transwell实验检测各组细胞转移能力;采用不同剂量放射线处理si-NC组和si-SATB1组细胞,CCK8实验检测si-NC组和si-SATB1组细胞放疗敏感性;Western blotting检测si-NC组和si-SATB1组细胞中Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白β-catenin及其下游蛋白细胞周期蛋白1(cyclinD1)、cMYC和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达水平的影响。结果 与非癌组织相比,SATB1在宫...     

生长抑素阻断瘦素诱导肝星状细胞增殖及基质分泌的分子机制

目的：研究生长抑素（SS）与酪氨酸蛋白酶1B（PTP1B）对瘦素诱导肝星状细胞（HSC）的增殖和基质蛋白分泌以及对JAK2／STAT3通路的影响。方法：运用MTT法检测各浓度SS对瘦素致激活的HSC细胞增殖的影响;实验分为对照组、瘦素组、瘦素＋低浓度SS组、瘦素＋高浓度SS组,运用RT-PCR、Western blot、ELISA法分别检测各组PTP1B、TIMP-1、I型胶原蛋白和mRNA以及JAK2／STAT3磷酸化程度。结果：生长抑素可抑制瘦素致HSC增殖;生长抑素可提高HSC内PTP1B的表达,高剂量生长抑素较低剂量提高明显;并减少TIMP-1mRNA、I型胶原mRNA和蛋白的表达,下调JAK2／STAT3蛋白的磷酸化,同时高剂量生长抑素较之低剂量降低明显。结论：生长抑素能上调瘦素作用下HSC内PTP1B的表达,降低JAK2／STAT3磷酸化,抑制其增殖,减少肝纤维化因子的分泌。     

肺腺癌中NDRG2与上皮-间质转化的关系

目的 探究肺腺癌中N-myc下游调节因子2(NDRG2)与上皮-间质转化(EMT)的关系及临床意义。方法 采用免疫组化EnVision法检测104例肺腺癌癌组织及癌旁组织中NDRG2及EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin的表达,分析NDRG2与EMT相关蛋白的相关性,及NDRG2与肺腺癌临床病理特征的关系。结果 肺腺癌组织中NDRG2、E-cadherin低表达率与癌旁组织差异显著(P<0.001)。肺腺癌组织Vimentin高表达率与癌旁组织差异显著(P<0.001)。NDRG2低表达与肺腺癌分化程度、pTNM分期、脉管及神经侵犯及淋巴结转移显著相关(P<0.05), Spearman相关性分析结果显示,NDRG2与E-cadherin的表达呈正相关(r=0.361,P<0.001),与Vimentin的表达呈负相关(r=-0.243,P<0.001)。结论 肺腺癌组织中NDRG2低表达,且与肺腺癌中EMT相关蛋白表达呈负相关,肺腺癌中NDRG2表达缺失或下调可能导致EMT的发生发展从而促进肿瘤转移。     

lncRNA HOTAIR通过介导JAK2/STAT3通路调节肾上腺肿瘤细胞增殖和凋亡的机制

目的探究长的非编码RNA(lncRNA)HOX转录反义基因间RNA(HOTAIR)通过介导Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)通路调节肾上腺肿瘤细胞增殖和凋亡的机制。方法前瞻性分析2019年6月至2020年7月三二〇一医院收治的接受肾上腺肿瘤手术切除的60例患者,提取人原发性肿瘤和邻近的健康组织,并分别作为病理观察组和对照组。将大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株PC12分为对照组(PC12细胞系)、过表达组(lncRNA HOTAIR过表达转染)和敲低组(shRNA lncRNA HOTAIR转染)。RT-PCR检测lncRNA HOTAIR的mRNA的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率;细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定细胞增殖能力;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测促炎因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)]水平;蛋白印迹分析JAK2/STAT3、核因子κB(NF-κB)相关通路蛋白的表达。结果病理观察组较健康对照组lncRNA HOTAIR mRNA表达升高(P<0.05)。转染24 h和48 h后,3组细胞增殖率均显著高于转染12 h(P<0.05);对照组和过表达组细胞增殖能力均随转染时间显著增强(P<0.05);转染24 h和48 h后,过表达组细胞增殖数目较对照组显著升高(P<0.05),敲低组细胞增殖数目较HOTAIR过表达组显著降低(P<0.05)。与对照组相比,过表达组细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,以及JAK2、STAT3、NF-κB(p65)蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05),敲低组细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,以及JAK2、STAT3、NF-κB(p65)蛋白相对表达量均显著降低(P<0.05),与过表达组相比,敲低组细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,以及JAK2、STAT3、NF-κB(p65)蛋白相对表达量均显著降低(P<0.05)。结论lncRNA HOTAIR通过上调促炎细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)水平,激活了JAK2/STAT3通路,调节肾上腺肿瘤细胞的增殖和凋亡。     

JAK/STAT信号通路在变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织中的表达及意义

目的探讨JAK/STAT信号通路在大鼠变应性鼻炎(AR)鼻黏膜中的表达,探讨其在变应性鼻炎中的作用。方法 40只大鼠分为两组:对照组和变应性鼻炎组。变应性鼻炎组采用二异氰酸甲苯酯(TDI)制作大鼠实验性AR模型;对照组则给予TDI溶剂醋酸乙酯滴鼻。取两组大鼠下鼻甲组织,利用实时荧光定量PCR(q-PCR)检测JAK1、JAK2、STAT1和STAT3 mRNA表达,利用Western blot检测p-JAK1、p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3蛋白表达。结果q-PCR结果显示,变应性鼻炎组JAK1、JAK2、STAT1和STAT3 mRNA表达均显著高于对照组(P0.05);Western blot结果显示,变应性鼻炎组p-JAK1、p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3蛋白表达均显著高于对照组(P0.05)。结论变应性鼻炎发生后JAK/STAT信号通路被激活,可能是变应性鼻炎治疗的靶点。     

HES5蛋白与肺腺癌患者病情及预后的相关性研究

目的探究HES5蛋白表达水平与肺腺癌患者病情及预后相关性。方法回顾性收集江苏省中医院心胸外科离体后30 min内立即冻存于液氮中的4组肺腺癌组织和癌旁组织,采用Western Blot法分析HES5表达特征;收集2017年4月至2019年4月本院切除并经病理证实的48例肺腺癌标本(其中距肿瘤边缘>5 cm组织为癌旁正常组织),采用免疫组化染色法检测癌组织和癌旁组织HES5蛋白蛋白表达量,分析HES5蛋白表达量与性别、年龄、身体质量指数(BMI)、肿瘤直径、分化程度、肿瘤转移、肿瘤分期相关性;获取由手术时间起至患者死于癌症及癌症相关事件或纳入本研究36个月止的临床资料,根据患者生存情况分为生存组和死亡组,分析影响肺腺癌预后影响因素。结果HES5蛋白在分子量约为18 k Da处有显著表达,HES5蛋白在肺腺癌组织中表达升高,HES5蛋白在癌旁正常组织中表达降低,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);肺腺癌组织中HES5阳性表达率高于癌旁组织中HES5阳性表达率(P<0.05)。TNM分期Ⅱ/Ⅲ期、有淋巴结转移、肿瘤直径>3 cm的肺腺癌患者HES5蛋白表达量高于分期I期、无淋巴结转移、肿瘤直径≤3 cm的肺腺癌患者HES5蛋白表达量(P<0.05)。3年随访期间存活患者28例(占比48.28%),死亡30例(占比51.72%);肿瘤直径>3 cm、分化程度为低/中分化、有淋巴结转移、TNM分期Ⅱ/Ⅲ期、HES5蛋白高表达的肺腺癌患者存活率低于肿瘤直径≤3 cm、分化程度为高分化、无淋巴结转移、TNM分期I期、HES5蛋白低表达的肺腺癌患者存活率(P<0.05)。COX多因素结果显示,HES5蛋白表达、TNM分期是影响肺腺癌患者预后独立影响因素(P<0.05)。结论HES5蛋白在肺腺癌肿瘤组织中呈高表达水平,可负向调控肺腺癌患者肿瘤分级、肿瘤分期、肿瘤转移及病情进展,检测HES5蛋白表达水平可为肺腺癌患者早期诊疗及预后评估提供参考依据。     

JAK2/STAT3通路在大鼠创伤性脑损伤中作用的研究

目的研究JAK2/SAT3在大鼠创伤性脑损伤过程中的作用。方法健康雄性SD大鼠72只,采用随机数字表法分为对照组、创伤组、AG490组;各组依次分为6 h、12 h、24 h、72 h四个亚组;创伤组于规定时间点采用液压冲击法致伤动物,对照组不予致伤;运用Western blot、免疫组化分析各组脑组织p-JAK2、p-STAT3蛋白表达情况;运用Real-time PCR分析各组脑组织TNF-αm RNA、IL-6 m RNA表达情况。结果大鼠创伤性脑损伤后p-JAK2、p-STAT3蛋白在6 h开始升高,72 h时仍处于较高水平,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05),给予AG490干预后,其表达显著降低,差异具有统计学意义;脑损伤后6 h可见TNF-αm RNA、IL-6 m RNA少量表达,12 h其表达水平开始增强,72 h仍有少量表达;给予JAK2选择性拮抗剂AG490干预后其表达显著降低,两组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 JAK2/STAT3信号通路可能参与了创伤性脑损伤的发展过程,阻断该通路可减轻创伤性脑损伤炎症细胞因子的表达。     

干扰LINC00857的表达促进鼻咽癌细胞放疗敏感及其作用机制

目的 研究LINC00857在鼻咽癌(NPC)组织中的表达水平及对NPC细胞放疗敏感性的作用机制。方法 收集NPC和慢性鼻炎组织,采用逆转录-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LINC00857的表达水平,分析LINC00857的表达与NPC患者放疗敏感性及预后的关系。采用RT-qPCR检测LINC00857在NPC细胞系中的表达水平。LINC00857 siRNA转染NPC细胞,分为si-NC组和si-LINC00857组。CCK8实验和平板克隆实验检测各组细胞增殖能力及对放疗敏感性的影响。si-NC组和si-LINC00857组细胞放疗照射后,流式实验检测各组细胞周期和凋亡能力。Western blot检测各组细胞中蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路关键蛋白pAKT、pmTOR的表达及下游周期相关蛋白cyclin D1,凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 LINC00857在NPC组织中的表达高于在慢性鼻咽黏膜组织中的表达,差异有统计学意义(t=3.726,P<0.001)。LINC00857高表达组预后比LINC00857低表达组预后较差...     

荔枝核总黄酮通过JAK2/STAT3信号通路抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的 探讨荔枝核总黄酮(TFL)通过酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化的作用机制。方法 将30只大鼠近照随机数字表法分为空白对照组、模型组、TFL组,各10只。除空白对照组外,其余各组大鼠采用DMN腹腔注射4周建立大鼠肝纤维化模型。造模后,TFL组给予TFL灌胃,空白对照组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,6周后处死大鼠。检测大鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平及肝组织羟脯氨酸(HYP)水平。取固定部位肝组织进行病理组织学检查,并采用Western blot检测JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原-Ⅰ(Collagen-Ⅰ)蛋白表达情况。结果 与模型组比较,TFL组大鼠DMN诱导的肝损伤病理表现改善,血清AST、ALT及肝组织HYP水平降低(P<0.05)。Western blot检测结果显示,TFL组α-SMA、Collagen-Ⅰ、p-JAK2、JAK2、p-STAT3、...     

肺腺癌组织中MCM5蛋白的表达及其意义

目的 检测肺腺癌组织中微小染色体维持蛋白5(MCM5)的表达,探讨MCM5表达异常与人肺腺癌发生、发展的关系.方法 采用免疫组化SP法检测40例肺腺癌、30例支气管扩张症等非癌病变旁正常肺组织中MCM5蛋白表达.结果 40例肺腺癌组织中MCM5蛋白的阳性表达率为100%,与正常对照组差异极显著(P<0.01).肺腺癌组中MCM5蛋白的阳性表达与淋巴结转移、组织学分级有关(P<0.05),与患者的年龄、肿瘤大小、组织学类型及TNM分期无关(P>0.05).结论 细胞复制准许因子MCM5蛋白的高表达可能涉及到人肺腺癌的发生、发展过程,其高表达与癌细胞的增殖、侵袭和转移有关,MCM5蛋白的检测可作为评价肺腺癌癌细胞增殖状态、预测肺腺癌的预后、指导临床治疗的重要生物学指标.     

钩吻总碱通过JAK2/STAT3/Survivin通路调控人舌癌细胞株Tca8113增殖、凋亡的作用探讨

目的观察钩吻总碱对人舌癌细胞株Tca8113增殖、凋亡的作用,并探讨其对酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号传导及转录激活因子3(STAT3)/Survivin通路的调控作用。方法取人舌癌细胞株Tca8113,培养至对数期,分装至6孔板中,分为对照组、A组、B组和C组,每组设置5个复孔。A组、B组和C组分别加入25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L浓度的钩吻总碱处理(20μl),对照组加入等量PBS缓冲液。以倒置显微镜观察72 h后各组细胞形态;以MTT法检测24 h、48 h、72 h后细胞增殖抑制率;以流式细胞仪检测72 h后细胞凋亡率;以RT-PCR检测72 h后JAK2、STAT3、Survivin mRNA相对表达量;以WB检测72 h后IL-6蛋白、JAK2、STAT3、Survivin蛋白表达并计算p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-Survivin/Survivin。结果72 h后,倒置显微镜下观察结果显示对照组细胞紧密,轮廓清晰,贴壁生长状态良好;A组细胞有浮起、变圆,B组和C组可见不同程度细胞壁皱缩和细胞碎片,其中C组变化最为明显,B组次之,A组变化最轻;各组24 h、48 h、72 h后增殖抑制率比较差异均有统计学意义(P<0.05),各组增殖抑制率均随时间延长显著增长,且呈时间依赖性和剂量依赖性;各组72 h后细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P<0.05),各组凋亡率均随剂量升高显著增高;各组72 h后JAK2、STAT3、Survivin mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05);各组p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-Survivin/Survivin比较差异均有统计学意义(P<0.05),每两组间比较也可见差异具有统计学意义(P<0.05),其中对照组均最高,A组均次之,B组均稍低,C组均最低;各组IL-6蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论钩吻总碱能够呈剂量依赖性抑制人舌癌细胞株Tca8113增殖、促进凋亡,推测与直接调控JAK2/STAT3/Survivin通路,抑制JAK2、STAT3、Survivin蛋白磷酸化有关。     

子痫前期孕妇外周血、胎盘组织中信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白2的表达及意义

目的 探讨信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白2(Signal peptide-CUB-EGF-like domaincontaining protein,SCUBE2)在子痫前期孕妇外周血及胎盘组织中的表达及临床意义。方法 选取2021年6月至2022年6月住院分娩的子痫前期患者58例，其中早发型子痫前期30例（发病妊娠周数<34周），晚发型子痫前期组28例（发病妊娠周数≥34周）；另选取30例足月正常分娩孕妇作为对照组。收集入院治疗前孕妇的血清样本以及分娩时新鲜胎盘组织标本。ELISA检测三组孕妇血清SCUBE2、VEGFR2表达水平，免疫组化检测三组胎盘组织中SCUBE2的定位及表达，Western blot实验及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测三组胎盘组织中SCUBE2、VEGFR2的表达水平。结果 免疫组化法检测显示，SCUBE2主要表达于胎盘合体滋养细胞及胎盘血管内皮细胞中，子痫前期组表达水平低于对照组，早发型子痫前期组表达低于晚发型子痫前期组；Western blot及RT-qPCR实验检测结果显示，三组孕妇胎盘中SCUBE2和VEGFR2蛋白及mR...     

LASS2通过AMPKα/mTORC1信号通路诱导HepG2肝癌细胞自噬和凋亡

目的 研究LAG1长寿保障基因2(LASS2)过表达对HepG2肝癌细胞凋亡、自噬的作用及可能的信号通路。方法 采用HepG2肝癌细胞进行研究,设置空白对照组、空载组(重组腺病毒Adv-GFP感染细胞)、实验组(重组腺病毒Adv-LASS2-GFP感染细胞)。感染48 h后分别提取各组细胞总RNA和蛋白,采用实时荧光定量反转录PCR(qRT-PCR)、Western blot检测LASS2 mRNA、蛋白表达水平的变化;CCK-8实验评价各组细胞增殖能力的差异及流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白(BCL2、Bax)、自噬相关蛋白(SQSTM1、LC3A/B、Beclin-1)及单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)α/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)信号通路相关蛋白(t-AMPKα、p-AMPKα、t-Raptor和p-Raptor)的表达水平。结果 与空白对照组、空载组相比,实验组LASS2 mRNA、蛋白相对表达水平均明显上调(P<0.001),且HepG2肝癌细胞增殖能力明显被抑制(P<0.001)。流式细胞仪检...