NLRP3炎性小体与慢性疼痛

慢性疼痛是一类机制复杂的疾病,神经炎症被广泛认为是一种重要的促进机制.而NLRP3炎性小体是模式识别受体激活后形成的一种多蛋白复合体,在接收到外源性和内源性信号后,能促进炎性细胞因子的产生,继而引发神经炎症.众多证据表明,NLRP3炎性小体介导的神经炎症在慢性疼痛的发生发展中起着重要作用,靶向NLRP3可能是一种新颖而...     

异氟醚通过NLRP3炎性小体调控炎症微环境的研究

目的探讨异氟醚处理对小胶质细胞NLR家族热蛋白结构域包含蛋白3(NLR family pyrin domain containing 3,NLRP3)炎性小体通路相关炎症微环境的调控作用。方法脂多糖(LPS;1μg·m L-1)预活化小胶质细胞株(BV2)30 min,分别采用异氟醚单独处理和LPS预活化后异氟醚处理6小时。实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测NLRP3的m RNA表达量;蛋白免疫印迹(Western-blot)分析NLPR3蛋白表达变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的分泌情况;CCK8细胞活性试验评估异氟醚处理的毒性作用。结果q RT-PCR及Western-blot结果表明异氟醚单独处理不引起BV2细胞的NLRP3表达变化,LPS预活化后异氟醚处理上调预活化BV2细胞的NLRP3表达;ELISA结果表明异氟醚单独处理不引起BV2细胞IL-1β分泌,LPS预活化后异氟醚处理促进活BV2细胞IL-1β分泌;各组实验条件下BV2细胞活性均无显著改变。结论异氟醚可通过激活NLRP3炎性小体调控小胶质细胞IL-1β的表达。     

阿魏酸钠对大鼠脊髓损伤中NLRP3炎性小体的影响及机制

目的:探究阿魏酸钠(SF)对大鼠脊髓损伤(SCI)模型中NLRP3炎性小体的影响及机制。方法:体内研究采用压迫法建立大鼠脊髓损伤模型,雌性SD大鼠随机分成3组(n=12),Sham组不损伤脊髓,SCI+SF组按100mg/kg/d的剂量连续腹腔注射SF给药7d,SCI组给予等量的生理盐水溶液,术后第3天提取脊髓组织蛋白进行Western blot检测NLRP3和激活效应蛋白pro-caspase-1、P20、IL-1β以及自噬蛋白P62、LC3Ⅱ的表达,并对脊髓样本进行免疫荧光染色观察NLRP3变化,术后第7天对脊髓样本进行Nissl染色检测神经元存活情况。体外实验中对大鼠小胶质细胞(正常培养为对照组)采用LPS诱导NLRP3表达(LPS组),加入自噬阻断剂氯喹(CQ)(CQ组及LPS+CQ组)检测NLRP3激活效应以及溶酶体组织蛋白酶B(Cathepsin B,CTSB)活性,验证自噬与溶酶体功能对NLRP3激活的影响,再通过SF干预(LPS+CQ+SF组)带来的分子水平变化探讨其中的机制。结果:与Sham组相比,SCI组NLRP3表达升高并被激活,pro-caspase-1降解减少,活性产物P20、IL-1β增多,且自噬蛋白p62、LC3Ⅱ均在较高水平(P0.05);与SCI组比较,SCI+SF组NLRP3数量减少,激活减弱,P62、LC3Ⅱ水平下降(P0.05),Nissl染色显示前角神经元存活情况改善(P0.05)。与之相似,体外实验中,相比对照组,LPS组细胞NLRP3的表达上升(P0.05),但激活不显著,而LPS+CQ组NLRP3的水平更高,激活明显,pro-caspase-1降解,活性产物P20、IL-1β增多,此外,P62、LC3Ⅱ的水平异常升高,CTSB活性下降(P0.05),而相比LPS+CQ组,LPS+CQ+SF组中P62、LC3Ⅱ的水平出现同步下降,CTSB活性增强(P0.05),自噬流恢复。结论:阿魏酸钠通过保护自噬和溶酶体的功能,能够抑制NLRP3炎性小体的产生和激活,从而减轻SCI大鼠神经细胞损伤。     

带状疱疹患者皮损程度与血清免疫球蛋白水平和NLRP3炎性小体水平的相关性研究

目的:探究带状疱疹(Herpes zoster,HZ)患者皮损程度与血清免疫球蛋白水平和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain containing 3,NLRP3)炎性小体水平的相关性.方法:选取2018年11月-2020年11月就诊于笔者医院的100例带状疱...     

丙磺舒对大鼠急性脊髓损伤后NLRP1炎性小体活化的影响

[目的]研究丙磺舒(probenecid, PROB)对大鼠急性脊髓损伤后NLRP1炎性小体活化的影响。[方法]成年雄性SD大鼠90只,随机分为Sham组(Sham组)、脊髓SCI组(SCI组)和丙磺舒治疗组(PROB组),参照Rivlin及Tator方法在SCI组和PROB组制作急性脊髓损伤模型。采用BBB评分量表评估大鼠神经功能情况,HE染色观察组织的病理形态变化,Western-blot法和免疫组化法检测Caspase-1、XIAP和IL-1β蛋白表达水平。[结果]Sham组的BBB评分各时间点显著高于SCI组和PROB组;损伤后3、7、14和21 d,PROB组的BBB评分显著高于SCI组,差异均具有统计学意义(P0.05)。HE染色显示:PROB组与SCI组比较,中性粒细胞浸润、组织水肿减轻,神经元变性坏死减少,脊髓空洞面积减少。Western-blot检测显示:与Sham组比较,SCI组各个时间点的Caspase-1蛋白表达水平明显升高,并且呈现一定时间依赖性,损伤72h表达最高,而PROB组的Caspase-1蛋白表达显著低于SCI组,差异均具有统计学意义(P0.05);Sham组各个时间点的XIAP蛋白表达水平显著高于SCI组和PROB组,并且SCI组各个时间点的XIAP蛋白表达呈现一定时间依赖性降低,损伤72 h最低,而PROB组的XIAP蛋白表达显著高于SCI组,差异均具有统计学意义(P0.05)。免疫组化检测显示:与Sham组比较,SCI组的Caspase-1和IL-1β蛋白表达水平明显升高;PROB组显著低于SCI组,差异均具有统计学意义(P0.05)。[结论]PROB可能通过抑制XIAP的裂解和Caspase-1的活化,进而抑制NLRP1炎性小体的活化,减少脊髓继发性损伤。     

内质网线粒体结构偶联在NLRP3 炎症小体形成与活化中的作用及机制研究进展

内质网线粒体结构偶联(endoplasmic reticulum–mitochondria contacts,ERMC)在细胞内不同的信号通路中发挥着重要作用,其结构异常可导致机体出现多种病理状态,进而引起多种疾病。近年来,有学者发现ERMC异常可促进内质网内钙离子转移至线粒体内最终引起线粒体钙超载,线粒体钙超载能够生成的大量活性氧(reactive oxygen species,ROS),ROS可以促进NLRP3炎症小体的过度活化[1]。本综述主要针对ERMC在细胞内炎症小体形成过程中的作用。     

NLRP3炎性小体在激素性股骨头坏死骨代谢及其稳态中的作用

大量的糖皮质激素使用导致股骨头中骨代谢及稳态失衡是激素性股骨头坏死的重要机制之一。细胞焦亡关键因子NLRP3炎性小体在SANFH机制中发挥着重要作用,明确NLRP3炎性小体的结构,激活途径和调控机制,以及NLRP3炎性小体和下游炎性因子IL-1β、IL-18对激素性股骨头坏死中成骨细胞、破骨细胞以及骨髓间充质干细胞的作用机制,将为激素性股骨头坏死的防治提供新的思路与靶点。该文对NLRP3炎性小体在骨代谢及稳态中的相关作用机制进行综述,系统阐述NLRP3炎性小体与SANFH成骨和破骨分化中的具体作用机制,以期为临床治疗和基础研究提供一定的借鉴。     

凉血活血方通过抑制NLRP3炎性小体活化保护脓毒症急性肺损伤小鼠的实验研究

目的:观察凉血活血方对脓毒症急性肺损伤(ALI)小鼠的保护作用并探索其作用机制.方法:将72只雄性C57BL/6小鼠72只,采用盲肠结扎穿刺术(CLP)制备ALI小鼠模型,将小鼠随机分为3组:假手术组、模型组和凉血活血方组.凉血活血方组灌胃给予凉血活血方水煎剂(6 g/kg)连续2 d(1次/d),假手术组和模型组给予...     

炎性乳腺癌的治疗新进展

炎性乳腺癌是一种特殊的局部晚期乳腺癌,肿瘤侵袭性和转移性强,病死率非常高.由于炎性乳腺癌恶性程度极高,病情发展迅速,早期即有全身广泛转移而危及生命,预后很差.目前临床上主要采取以手术、放疗、化疗等综合治疗措施来治疗这类疾病,但是治疗效果极其有限.而现代分子生物学和肿瘤免疫学领域的突破进展为这类疾病的治疗带来了希望.本文...     

NLRP3炎性小体在治疗性浅低温后处理大鼠心肌缺血-再灌注中的作用

目的 分析NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体在治疗性浅低温(34℃)后处理的大鼠离体心肌缺血-再灌注模型中的作用并探讨其机制。方法 选择清洁级成年雄性SD大鼠60只,7～10周龄,体重250～300 g。采用随机数字表法将大鼠分为五组：空白对照组(S组)、心肌缺血-再灌注组(IR组)、34℃浅低温后处理心肌缺血-再灌注组(MH组)、34℃浅低温后处理心肌缺血-再灌注+3-TYP组(HT组)和34℃浅低温后处理心肌缺血-再灌注+3-TYP+MCC950组(HTM组),每组12只。S组在37℃灌流液平衡灌流大鼠心脏180 min; IR组在37℃灌流液平衡灌流大鼠心脏30 min后,缺血30 min, 37℃灌注液再灌注120 min; MH组在37℃灌流液平衡灌流大鼠心脏30 min后,缺血30 min, 34℃灌注液再灌注120 min; HT组在37℃灌流液平衡灌流大鼠心脏30 min后,缺血30 min,在灌注液中加入沉默信息调节因子2同源蛋白3(sirt3)抑制剂3-TYP后行34℃灌注液再灌注120 min; HTM组在37℃灌流液平衡灌流大鼠心脏30 m...     

NLRP3炎性小体在右美托咪定减轻大鼠臂丛神经损伤后神经病理性疼痛的作用

目的 研究右美托咪定和NLRP3炎性小体在臂丛神经损伤后神经病理性疼痛中的作用.方法 取成年SD大鼠54只,随机分为3组,假手术组(Sham)、臂丛神经损伤疼痛组(NP)、臂丛神经损伤疼痛+右美托咪定注射组(Dex).建立SD大鼠左侧全臂丛神经根性撕脱大鼠模型.术前及术后3、5、7和14 d检测各组50％机械缩爪阈值和...     

炎性乳腺癌26例诊治分析

目的探讨炎性乳腺癌的综合治疗方法,以期延长炎性乳腺癌患者的生存期。方法回顾性分析26例炎性乳腺癌患者的治疗方法。结果目前炎性乳腺癌的推荐治疗策略为诱导化疗→乳腺切除和（或）放疗→辅助化疗,该治疗策略对炎性乳腺癌的治疗可使3年或者5年生产率提高到35%～55%。结论炎性乳腺癌比较罕见,是局部进展期乳腺癌中预后最差的一类,侵袭性强,恶性程度高,病情进展迅速,有效治疗方法少,疗效差,生存期短,单纯手术治疗或手术加放疗,平均生存期短,合理的综合治疗可明显提高患者的生存期。     

达格列净通过抑制NLRP3炎性小体缓解糖尿病大鼠肾脏损伤

目的:观察达格列净对2型糖尿病(T2DM)大鼠肾脏损伤的影响及分子机制。方法:应用高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)腹腔注射建立T2DM大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组(Model)、二甲双胍组(Met)和达格列净组(DAPA),并设立正常对照组(Control),每组5只。Met组给予每日150 mg/kg灌胃,DAPA组给予每日10 mg/kg灌胃,Control组和Model组予以等体积蒸馏水灌胃,持续治疗6周,每周称重1次,根据体重变化调整给药剂量。于第6周,将各组大鼠放代谢笼中,检测24 h尿量、24 h尿白蛋白总量(UTP)、尿白蛋白/尿肌酐比值(ACR)。6周末处死大鼠,检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG);HE、PAS染色观察大鼠肾脏病理变化;免疫组织化学法观察大鼠肾组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体及相关组分蛋白的表达;Western blot检测肾脏NLRP3炎症小体及相关组分蛋白表达。结果:与Control组比较,Model组大鼠FBG、TC、TG升高(P<0....     

炎性乳腺癌的现状与进展

炎性乳腺癌（IBC）作为局部晚期乳腺癌的一种特殊类型,恶性程度高,预后极差。IBC在组织学上并无特殊性,存在一定误诊率,乳腺组织空心针穿刺活检为确诊手段,影像学检查可辅助诊断、协助分期和评估新辅助治疗疗效。本文就IBC的临床表：睨以及诊治、预后情况进行简要概述,以提高对该病的认识。     

亚甲蓝对大鼠机械通气相关肺损伤中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体的影响

目的评价亚甲蓝对大鼠机械通气相关损伤(VILI)中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响。方法清洁级成年雄性SD大鼠36只,8周龄,体重240～260 g,采用随机数字表法分为三组:自主呼吸对照组(C组)、大潮气量模型组(H组)和大潮气量+亚甲蓝组(MB组),每组12只。三组大鼠均行气管切开插管术,MB组经腹腔注射1%亚甲蓝50 mg/kg,10 min后以V_T 20 ml/kg行机械通气;C组经腹腔注射等容量生理盐水后保持自主呼吸;H组经腹腔注射等容量生理盐水,10 min后以V_T 20 ml/kg行机械通气。通气参数:FiO_2 21%,I∶E 1∶1,RR 80次/分,PEEP 0,通气时间4 h。于基础状态、通气结束时经颈总动脉取血行血气分析,通气结束后颈总动脉放血处死大鼠,收集肺组织标本、支气管肺泡灌洗液(BALF)。光镜下观察肺组织病理学改变,记录肺损伤评分,计算肺组织湿/干重比值(W/D)。采用ELISA法测定BALF中总蛋白含量以及血清、BALF中白细胞介素(IL)-1β、IL-18浓度;鲁米诺化学发光法检测肺组织中活性氧(ROS)含量;RT-PCR法及Western blot法分别检测肺组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)mRNA表达量及蛋白含量。结果与C组比较,H组肺损伤评分、W/D明显升高(P0.01),BALF中总蛋白以及血清、BALF中IL-1β和IL-18浓度明显升高(P0.01),肺组织中ROS含量、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达量及蛋白含量明显升高(P0.01)。与H组比较,MB组肺损伤评分、W/D明显降低(P0.05),BALF中总蛋白以及血清、BALF中IL-1β和IL-18浓度明显降低(P0.05),肺组织中ROS含量、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达量及蛋白含量明显降低(P0.05)。结论亚甲蓝通过抑制大鼠肺组织中NLRP3炎性小体的激活,阻碍促炎因子IL-1β及IL-18的形成,减轻大鼠VILI。     

含pyrin结构域NOD样受体家族3炎性小体的翻译后修饰及其在脓毒症发生发展中的作用

翻译后修饰(post-translational modification, PTM)主要包括磷酸化、泛素化、烷基化、S-亚硝基化和ADP-核糖基化等,能够通过多分子多位点调控含pyrin结构域NOD样受体家族3(NOD-like receptors family pyrin domain containing 3, NLRP3)炎性小体。NLRP3炎性小体激活将造成炎症级联反应不断扩大。而这种炎症反应紊乱是推动脓毒症进展的重要因素。文章详细阐述了NLRP3炎性小体的PTM,并介绍了NLRP3的PTM在脓毒症中的作用,以期干预NLRP3炎性小体的活化,进而调控炎症,为未来脓毒症治疗提供新思路。     

NLRP3炎症小体在不孕不育相关生殖疾病中的作用研究进展

NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体是一种多聚蛋白质复合体,可被多种信号激活,其激活与体内诸多的免疫和代谢紊乱疾病密切相关。目前已知多囊卵巢综合征(PCOS)、子宫内膜异位症(EMs)以及卵巢早衰(POF)等多种不孕不育相关的生殖疾病均与NLRP3炎症小体的激活有着密切的联系。本文对近年来NLRP3炎症小体在PCOS、EMs、POF中的作用进行综述,并对NLRP3炎症小体在各种生殖疾病中的活化及作用机理进行探讨,以期为不孕不育相关生殖疾病的发病机制研究及临床诊疗提供理论依据。     

灵菌红素通过促进Bim调控人乳腺癌细胞凋亡

目的探讨Bim在灵菌红素调控人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡中发挥的作用。方法培养人乳腺癌MCF-7细胞、采用灵菌红素处理MCF-7细胞,应用MTT检测细胞活力增殖及流式细胞计数检测细胞凋亡率,RT-PCR和Western blot检测Bim mRNA和蛋白表达情况。结果灵菌红素能抑制MCF-7细胞增殖,并诱导MCF-7细胞凋亡,效果呈时间和浓度依赖性(P0.05)。灵菌红素处理后MCF-7细胞S期显著减少、增殖指数下降,G1期显著增加(P0.05)。灵菌红素促进MCF-7细胞内促凋亡蛋白Bim表达升高,细胞凋亡率亦显著上升;沉默Bim能拮抗灵菌红素对MCF-7细胞凋亡的促进作用(P0.05)。结论灵菌红素通过上调Bim从而抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖和促进其凋亡。