慢性移植肾肾病肾组织中转化生长因子β1、金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制剂1的表达及意义

背景:相关实验表明,转化生长因子β1、金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制剂1在慢性移植肾肾病中发挥着重要作用,但发病机制尚不十分明确.目的:探讨转化生长因子β1、金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制剂1在慢性移植肾肾病患者肾组织及正常肾组织中的表达及意义.设计、时间及地点:细胞组织形态对照观察实验,于2008 06/10在福建漳州解放军第一七五医院病理实验室完成.材料:24例慢性移植肾肾病患者的移植肾组织,10例正常肾组织做对照.方法:34例参试者肾组织标本均进行免疫组织化学染色:常规甲醛固定,石蜡包埋,切成厚3 μm的切片,正常非免疫性血清封闭,依次加一抗、二抗及SP复合物,DAB显色,苏木精复染,透明封固.主要观察指标:免疫组织化学染色观察34例肾组织标本的转化生长因子β1、金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制剂1的表达情况,并分析3者间及与慢性移植肾肾病病理分级之间的相互关系.结果:定性分析:在移植肾肾病的肾组织中转化生长因子β1、金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制剂1在肾小管上皮细胞胞浆和胞膜多呈强阳性表达.定量分析:转化生长因子β1,金属蛋白酶组织抑制剂1、金属蛋白酶2在正常组和慢性移植肾肾病组间的表达有显著差异(P<0.01),且转化生长因子β1、金属蛋白酶组织抑制剂1的表达随慢性移植肾肾病的病理分级的增加而增加,而金属蛋白酶2则略有下降趋势.同时转化生长因子β1和金属蛋白酶组织抑制剂1的表达之间呈正相关(r=0.651,P<0.05).结论:转化生长因子β1、金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制剂1的表达异常是慢性移植肾肾病的重要表现,转化生长因子β1可能通过上调金属蛋白酶组织抑制剂1的表达从而抑制细胞外基质的降解引起移植肾纤维化.     

基质金属蛋白酶-9及金属蛋白酶组织抑制剂-1比例失衡与支气管哮喘

基质金属蛋白酶家族（MMPs）是生物进化中高度保守的一组锌离子依赖性蛋白水解酶,几乎能降解构成细胞外基质的所有成分,其中MMP-9与哮喘的关系最密切。金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）家族是MMPs天然的内源性抑制因子,TIMP-1是TIMPs中活性最强并能特异性抑制MMP-9的活性。MMP-9／TIMP-1的动态平衡被视为反映气道组织破坏和修复的标志。     

同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶1及金属蛋白酶组织抑制剂1的影响

背景:同型半胱氨酸已被证实是动脉粥样硬化发生的一个独立危险因素。目的:观察同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶1及金属蛋白酶组织抑制剂1的分泌量和活性的影响。设计:自身对照观察。单位:吉林大学再生医学科学研究所病理室。材料:体外培养的鼠龄4～6周,体质量150g左右雄性Wistar大鼠的血管平滑肌细胞。大鼠由吉林大学白求恩医学部实验动物室提供。方法:实验于2001-05/2003-05在吉林大学再生医学科学研究所病理室完成。采用体外培养大鼠血管平滑肌细胞,分成5组,分别加入浓度为0(对照组),0.10,0.25,0.50和1.00mmol/L同型半胱氨酸作用48h,通过酶谱分析同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞细胞基质金属蛋白酶1活性的影响,Western blot技术和半定量RT-PCR方法观察细胞基质金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1分泌量及其mRNA的表达。主要观察指标:细胞基质金属蛋白酶1的活性,金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1分泌量及其mRNA的表达。结果:①金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1分泌量:半胱氨酸0.25,0.50和1.00mmol/L组金属蛋白酶1显著低于对照组(P<0.05～0.01);半胱氨酸0.10,0.25,0.50和1.00mmol/L组金属蛋白酶组织抑制剂1均高于对照组(P<0.05～0.01);②基质金属蛋白酶1活性随着半胱氨酸剂量增加而降低,0.50和1.00mmol/L组降低显著(P<0.01);③加入同型半胱氨酸4组金属蛋白酶1mRNA表达显著低于对照组(P<0.01)],半胱氨酸0.25mmol/L组金属蛋白酶组织抑制剂1mRNA高于对照组(P<0.05),0.50和1.00mmol/L组显著高于对照组(P<0.01))。结论:同型半胱氨酸通过抑制细胞基质金属蛋白酶1的分泌,抑制其酶活性,减少胶原降解而使胶原蓄积。提示同型半胱氨酸减少胶原降解可能是动脉粥样硬化的发病机制之一。     

系统性红斑狼疮患者外周血中基质金属蛋白酶-3及其金属蛋白酶组织抑制剂-1的表达及其临床意义

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的表达,分析MMP-3、TIMP-1与各临床指标及不同肾脏病理类型之间的关系。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)对60例SLE患者及30例健康人血清中MMP-3及TIMP-1的水平同时检测后进行分析。结果 SLE患者血清MMP-3、TIMP-1水平均较正常人降低,MMP-3/TIMP-1比值较正常人升高(P<0.001);狼疮肾炎(LN)患者血清MMP-3、TIMP-1水平均较非LN患者降低(P<0.001);活动期患者血清MMP-3、TIMP-1水平均较缓解期患者降低(P<0.001);各病理类型LN组间血清MMP-3、TIMP-1水平差异无统计学意义(P>0.05);血清MMP-3、TIMP-1水平与尿蛋白、SLE疾病活动指数(SLEDAI)、抗ds-DNA呈负相关(rs-MMP-3分别为-0.507、-0.817、-0.457,P<0.001;rs-TIMP-1分别为-0.416、-0.720、-0.506,P<0.001),与补体C3、C4呈正相关(rs-MMP-3分别为0.346、0.377,P<0.01;rs-TIMP-1分别为0.418、0.361,P<0.01),与ESR、CRP、BUN、Scr无明显相关性(P>0.05)。结论血清MMP-3、TIMP-1水平在SLE患者中降低,降低的程度可以反映SLE病情活动情况;MMP-3与TIMP-1比例失衡可能在SLE的发病机制中起重要作用。     

基质金属蛋白酶抑制剂-1在肝纤维化诊断中的临床应用

目的 评估血清基质金属蛋白酶抑制剂-1 (TIMP-1)在在肝纤维化诊断中的临床价值.方法 285例慢性乙型肝炎(CHB)患者,根据肝穿刺病理诊断结果分为无明显纤维化组(S0-S1)和明显纤维化组(S2-S4).将病理诊断结果作为金标准,使用ROC曲线评估TIMP-1诊断肝纤维化的敏感度、特异性和符合率,并和肝纤维化标记物HA、PCⅢ、CⅣ、LN比较其诊断性能,结果 对照组、S0-S1组、S2-S4组TIMP-1血清浓度分别为146,6±29.2、161.2±43.2、221.6±93.8 μg/L,对照组和S2-S4组及S0-S1组和S2-S4组间差异有统计学意义(t分别为5.32、4.98,P均小于0.01).TIMP-1区分慢性乙肝明显纤维化和轻度纤维化的ROC曲线下面积(AUC)为0.841(95％CI:0.762～0.920),TIMP-1在临界值为170.3 μg/L时,其敏感度、特异度分别为71.5％、82.4％,高于HA(75.6％、72.5％)、PCⅢ(70.5％、76.5％)、CⅣ(63.6％、78.4％)、LN(79.5％、64.7％).结论 血清TIMP-1诊断肝纤维化有较高的敏感度和特异性,血清TIMP-1可能是预测肝纤维化分期一个较好的指标.     

慢性阻塞性肺疾病患者血浆基质金属蛋白酶-12和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1水平变化的研究

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病患者血浆基质金属蛋白酶-12和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1水平变化.方法:慢性阻塞性肺疾病患者30例为观察组,同期健康体检者30例为对照组.检测观察组急性加重期、稳定期及对照组第1秒用力呼气量,第1秒用力呼气量/用力肺活量,血浆基质金属蛋白酶-12和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1水平并进行比较,并对基质金属蛋白酶-12和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1进行相关性检验.结果:观察组急性加重期、稳定期第1秒用力呼气量,第1秒用力呼气量/用力肺活量较对照组显著降低(P<0.05),血浆基质金属蛋白酶-12和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1水平及基质金属蛋白酶-12/基质金属蛋白酶组织抑制剂-1比值较对照组显著增高(P<0.05).血浆基质金属蛋白酶-12和基质金属蛋白酶组织抑制剂水平呈显著的正相关.结论:基质金属蛋白酶-12/基质金属蛋白酶组织抑制剂-1的平衡失调参与了慢性阻塞性肺疾病的发病,监测基质金属蛋白酶-12和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1水平可反映病情变化并指导治疗.     

人血管内皮生长因子165和人组织基质金属蛋白酶抑制剂1基因过表达对心肌梗死大鼠的作用

目的:探讨携带人血管内皮生长因子165（vascular endothelial growth factor 165, VEGF 165）的重组腺病毒（Ad-hVEGF 165）和携带人组织基质金属蛋白酶抑制剂1（tissue inhibitor of metalloproteinase 1, ...     

雷公藤多甙对哮喘大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及其抑制剂1表达的影响

目的:探讨雷公藤多甙对哮喘大鼠肺组织中细胞外基质相关因子基质金属蛋白酶9及金属蛋白酶组织抑制因子1的表达的影响。方法:①实验于2004-01/09在南京医科大学实验动物中心、南京医科大学生化教研室实验室和病理教研室实验室完成。选用健康雄性Wis-tar大鼠18只。按随机数字表将大鼠分为3组:对照组、哮喘组、药物组,每组6只。②哮喘组和药物组于第1,8天每只腹腔内注射抗原混悬液1mL致敏;第15天开始雾化吸入10g/L鸡卵清蛋白激发哮喘,1次/d,20min/次,连续4周制作哮喘模型。每天激发前30min,药物组预先灌胃雷公藤多甙悬浮液(1.5mL)50mg/(kg·d)。对照组以等量生理盐水行致敏和激发,1次/d,20min/次,连续吸入4周。③采用免疫组化法观察大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1的蛋白表达,采用反转录聚合酶联反应技术测定3组大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA的表达。④多组间均数的比较采用方差分析,组间两两比较采用q检验。结果:大鼠18只均进入结果分析。①大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9和组织金属蛋白酶抑制剂1蛋白含量:哮喘组明显高于对照组(q=9.75,7.87,P<0.01);经药物干预后,明显低于哮喘组(q=5.99,3.27,P<0.05),但仍明显高于对照组(q=3.76,4.59,P<0.05)。②大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1比值:哮喘组>1,明显高于对照组(q=3.87,P<0.05);经药物干预后<1,明显低于对照组(q=3.47,P<0.05),更低于哮喘组(q=7.34,P<0.01)。③大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA表达水平:哮喘组明显高于对照组(q=16.71,15.37,P<0.01);经药物干预后显著下降,明显低于哮喘组(q=11.14,7.21,P<0.01),但未完全降至正常,仍明显高于对照组(q=5.57,8.17,P<0.01)。④大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA比值:哮喘组>1,明显高于对照组(q=3.45,P<0.05);经药物干预后<1,明显低于对照组(q=3.45,P<.05),更低于哮喘组(q=6.89,P<0.01)。结论:雷公藤多甙可能下调基质金属蛋白酶9的表达,调节基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1比值的平衡,干预细胞外基质重塑。     

雷公藤多甙对哮喘大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及其抑制剂1表达的影响

目的：探讨雷公藤多甙对哮喘大鼠肺组织中细胞外基质相关因子基质金属蛋白酶9及金属蛋白酶组织抑制因子1的表达的影响。 方法：①实验于2004—01／09在南京医科大学实验动物中心、南京医科大学生化教研室实验室和病理教研室实验室完成。选用健康雄性Wistar大鼠18只。按随机数字表将大鼠分为3组：对照组、哮喘组、药物组，每组6只。②哮喘组和药物组于第1，8天每只腹腔内注射抗原混悬液1mL致敏；第15天开始雾化吸入10g／L鸡卵清蛋白激发哮喘，1次／d，20min／次，连续4周制作哮喘模型。每天激发前30min，药物组预先灌胃雷公藤多甙悬浮液（1．5mL）50mg／（kg&#183;d）。对照组以等量生理盐水行致敏和激发，1次／d，20min／次，连续吸入4周。③采用免疫组化法观察大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1的蛋白表达，采用反转录聚合酶联反应技术测定3组大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA的表达。④多组间均数的比较采用方差分析，组间两两比较采用q检验。 结果：大鼠18只均进入结果分析。①大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9和组织金属蛋白酶抑制剂1蛋白含量：哮喘组明显高于对照组（q=9．75，7．87，P〈0．01）；经药物干预后，明显低于哮喘组（q=5．99，3．27，P〈0．05），但仍明显高于对照组（q=3．76，4．59，P〈0．05）。②大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1比值：哮喘组〉1，明显高于对照组（q=3．87，P〈0．05）；经药物干预后〈1，明显低于对照组（q=3．47，P〈0．05），更低于哮喘组（q=7．34，P〈0．01）。③大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA表达水平：哮喘组明显高于对照组（q=16．71，15．37，P〈0．01）；经药物干预后显著下降，明显低于哮喘组（q=11．14，7．21，P〈0．01），但未完全降至正常，仍明显高于对照组（q=5．57，8．17，P〈0．01）。④大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA比值：哮喘组〉1，明显高于对照组（q=3．45，P〈0．05）；经药物干预后〈1，明显低于对照组（q=3．45，P〈．05），更低于哮喘组（q=6．89，P〈0．01）。 结论：雷公藤多甙可能下调基质金属蛋白酶9的表达，调节基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1比值的平衡，干预细胞外基质重塑。     

组织基质金属蛋白酶抑制剂-1与尿毒症血管中膜钙化

目的研究终末期尿毒症患者桡动脉血管壁上基质金属蛋白酶及其抑制剂表达与钙盐沉积的关系,探讨基质金属蛋白酶及其抑制剂是否参与血管钙化。方法选择大连医科大学附属第一医院肾内科80例尿毒症患者的桡动脉为尿毒症组;10例因上肢外伤行截肢手术时取得桡动脉为正常对照组。HE染色观察血管;应用von Kossa染色判断钙盐沉积程度;应用免疫组化方法测定uMP-9、TIMP-1、骨桥蛋白（OPN）、I型胶原、核心结合因子（Cbfa1）在血管壁上的表达;同时测定外周血中钙、磷、三酰甘油（TG）、总胆固醇（Tch）、低密度脂蛋白（LDL）、白蛋白（ALB）、血红蛋白（Hb）、甲状旁腺激素（iPTH）、C反应蛋白（CRP）。结果80例尿毒症桡动脉血管标本中出现血管钙化36例,发生率45%;其中轻中度钙化25例,重度钙化11例,钙化均发生在血管中膜。钙化的血管中膜均有MMP-9、TIMP-1、OPN、I型胶原、Cbfa1的阳性表达（P〈0.01）,无钙化的44例血管中有33例血管中膜有OPN的表达,29例有I型胶原的表达,但无Cbfa1的阳性表达。对照组血管均无中膜钙化表现,亦无OPN表达。两组患者的体重指数、血钙、三酰甘油（TG）、总胆固醇（Tch）、低密度脂蛋白（LDL）、白蛋白（ALB）差异无统计学意义。尿毒症患者的平均收缩压、血磷水平、钙磷乘积、iPTH、C反应蛋白水平明显高于对照组（P〈0.01）。血红蛋白水平明显低于对照组（P〈0.01）。结论尿毒症患者普遍存在血管钙化,uMP-9、TIMP-1在尿毒症患者桡动脉的血管壁表达和血管钙化程度相关,提示组织基质金属蛋白酶系统在尿毒症血管钙化中可能有重要作用。     

MMP-9和TIMP-1在不明原因不孕症患者子宫内膜的表达

Objective To study the expression situation of matrix metalloproteinase-9(MMP-9) and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1) in the endometrium of women with unexplained infertility and normal endometrium, and to explore the relationship between MMP-9/TIMP-1 expres-sion and unexplained infertility. Methods Immunohistochemieal assay(SP method) was employed to deteet the expression of MMP-9/TIMP-1 in 20 cases of impaired endometrium(unexplained infertility group,endometrial plantation window phase)and 20 cases of normal endometrium(heahhy control group). Results There were different levels of MMP-9/TIMP-1 expression in kytoplasms of glandular epicytes and stromal cells of all endometrial samples. The expression of MMP-9/TIMP-1 was signifi-cantly weaker in unexplained infertility group than that in healthy control group(P＜0.05). Conclusion Low expression of MMP-9/TIMP-1 in the endometrial plantation window phase may be one of impor-tant factors for unexplained infertility.     

MMP-9和TIMP-1在不明原因不孕症患者子宫内膜的表达

目的检测基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和组织金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）在不明原因不孕症子宫内膜和正常子宫内膜中的表达,探讨两者与不明原因不孕的关系。方法应用免疫组化SP法,检测MMP-9和TIMP-1在20例不孕症患者的种植窗期子宫内膜和20例正常子宫内膜中的表达。结果MMP-9／TIMP-1在2组子宫内膜的腺上皮细胞和基质细胞的胞浆中均有不同程度的表达。MMP-9／TIMP-1在正常子宫内膜中呈高表达状态;在不孕子宫内膜表达较低,与正常子宫内膜组织相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论不明原因不孕症妇女子宫内膜种植窗期MMP-9和TIMP-1的低表达,可能是导致不明原因不孕症的重要因素之一。     

纤溶酶原激活物抑制因子-1对肝星状细胞转化生长因子β1、透明质酸、基质金属蛋白酶抑制因子-1的影响

目的 探讨外源性纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)对人肝星状细胞(HSC)转化生长因子β1(TGFβ1)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)及透明质酸(HA)表达的影响.方法 培养液中加入PAI-1,采用四甲基偶氮唑盐法检测人HSC株LX-2的增殖变化,确定PAI-1的最佳干预浓度.将LX-2培养液中加入PAI-1分别培养12、24、48 h,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中TGFβ1、TIMP-1及HA的变化.结果 阴性对照组A492为0.473±0.035;PAI-1浓度为5、10、20、40、80μg/L时,A492分别为1.249±0.440、1.636±0.315、1.283±0.413、0.938±0.263、0.303±0.125,PAI-1浓度为10μg/L时刺激作用最为明显(F=11.697,P＜0.01).加入PAI-1培养12、24、48 h组较阴性对照组细胞上清液中TGFβ1、HA及TIMP-1表达增加(F=1566.752、P＜0.01,F=235.632、P＜0.01,F=67.359、P＜0.05).结论 PAI-1可促进肝星状细胞TGFβ1、TIMP-1及HA的表达,从而影响肝纤维化的发生发展.

Abstract：

Objective To study the effect of plasminogen activator inhibitor type-1 ( PAI-1 ) on the protein expression of transforming growth factor-beta 1 ( TGFβ1 ), hyaluronic acid ( HA ) and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1) of hepatic stellate cells(HSC). Methods Methyl thiazolyl tetrazolium (MTT)was performed to detect the effect of PAI-1 on the proliferation of LX-2 ,and to determine the perfect intervention concentration of PAI-1. After incubation with PAI-1 in LX-2 culture solution for 12 h,24 h,48 h,the protein expression of TGFβ1 ,TIMP-1 and HA was observed with enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Results A492 in the negative control was 0. 473 ± 0. 353, and 1. 249 ± 0. 440, 1. 636 ± 0. 315,1.283 ± 0. 413,0. 938 ±0. 263 and 0. 303 ±0. 125 when the concentration of PAI-1 was 5,10,20,40 and 80 μg/L,respectively,a concentration of 10 μg/L of PAI-1 showed the strongest stimulation remarkablely ( F = 11. 697, P ＜ 0. 01 ).After incubation with PAI-1 for 12 h,24 h,48 h,the protein expression of HA,TGFβ1 and TIMP-1 in the LX-2 supernatant significantly increased compared to negative control (F = 1566. 752,235. 632 and 67. 359,respectively,P ＜ 0. 01 or ＜ 0. 05 ). Conclusion PAI-1 may influence the development of hepatic fibrosis through promoting the protein expression of HA ,TGFβ1 and TIMP-1 of HSC.     

应用胰岛素样生长因子结合蛋白-1预测胎膜早破60例分析

目的 :探讨宫颈分泌物中的脱磷酸化的胰岛素样生长因子结合蛋白 -1(IGFBP -1)在胎膜早破预测中的意义。方法 :应用免疫层析法检测 60例胎膜早破孕妇宫颈阴道分泌物中脱磷酸化的IGFBP -1的含量。结果 :胎膜早破组 ,正常孕妇组IGFBP-1的阳性率分别为 98 3 %和 8 3 %两组结果相比 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。结论 :检测宫颈阴道分泌物中的IGFBP -1是诊断胎膜早破快速、准确的方法     

羟苯磺酸钙胶囊联合血管紧张素转换酶组织抑制剂对早期糖尿病肾病患者肾功能及血清结缔组织生长因子、金属蛋白酶抑制剂-1水平的影响

目的探讨羟苯磺酸钙胶囊+血管紧张素转换酶抑制剂对早期糖尿病肾病患者肾功能及血清结缔组织生长因子(CTGF)、金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平的影响。方法将我院2015年1月至2018年1月收治的112例早期糖尿病肾病患者采用随机数字表法分为对照组(n=56)与研究组(n=56)。对照组采取血管紧张素转换酶抑制剂治疗,研究组在对照组基础上采取羟苯磺酸钙胶囊治疗。比较两组临床疗效、治疗前、后血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、β2-微球蛋白(β2-MG)、CTGF、TIMP-1水平、24 h尿蛋白定量及不良反应发生情况。结果研究组治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,研究组血清Scr、BUN、UA、β2-MG、CTGF、TIMP-1水平及24 h尿蛋白定量低于对照组(P<0.05)。两组不良反应总发生率无显著差异(P>0.05)。结论早期糖尿病肾病患者采取羟苯磺酸钙胶囊+血管紧张素转换酶抑制剂治疗效果确切,能改善其肾功能,降低血清CTGF、TIMP-1水平,且安全性高。     

L-精氨酸对任意型移植皮瓣组织中基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶2抑制因子表达的影响

目的：观察L-精氨酸对任意型移植皮瓣组织中基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶2抑制因子表达的影响，分析L-精氨酸对移植皮瓣保护作用的途径。方法：于2005—06／09在武汉大学人民医院动物实验室完成取材、组织学和组织化学实验；2005—10／2006—02在武汉大学医学院人体解剖与组织胚胎实验室完成图像分析、照相和统计学处理。①实验材料和分组：取Wistar大白鼠79只，按随机数字表法分为3组：正常对照组（n=5），仅接受生理盐水处理，不形成皮瓣，只切开皮肤；皮瓣模型组（n=37），形成皮瓣，接受生理盐水处理；L-精氨酸干预组（n=37），形成皮瓣，接受L-精氨酸处理。②实验评估：肉眼观察皮瓣成活情况，利用HPIAS-2000多媒体彩色病理图像分析系统求出皮瓣平均成活面积率。应用光镜观察皮瓣组织学变化；用免疫组织化学SP法检测基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶2抑制因子抗原。比较各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均吸光度、阳性面积率并作统计学分析。结果：纳入85只大鼠，79只大鼠进入结果分析，皮瓣模型组和L-精氨酸干预组各有3只大鼠死亡。①术后7d，L-精氨酸干预组皮瓣成活面积率显著高于皮瓣模型组（P〈0．01）。②术后24h，72h皮瓣模型组皮瓣组织中基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶2抑制因子呈强阳性表达，L-精氨酸干预组呈弱阳性或阴性，正常对照组呈阴性。③皮瓣模型组皮瓣组织中基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶2抑制因子的平均吸光度及阳性面积率均显著高于L-精氨酸干预组和正常对照组（P〈0．01）。结论：外源性L-精氨酸可能通过抑制任意型移植皮瓣组织中基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶2抑制因子的过度表达，提高任意型皮瓣的成活率。     

人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因重组慢病毒多表达质粒的构建及活性检测

背景：前期试验显示单个病毒载体介导的多基因共表达系统能够显著提高椎间盘退变转基因疗效。目的：构建人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因重组慢病毒多表达质粒。方法：应用全基因合成技术,以＂自剪切多肽2A＂串联目的基因,并克隆到慢病毒表达质粒构建重组慢病毒质粒Lenti-TGF-β3-P2A-CTGF-T2A-TIMP1。转染293细胞后,应用RT-PCR和Western-Blot技术分别检测转染后不同时间点目的基因mRNA和蛋白质表达水平。结果与结论：RT-PCR和Western-blot技术检测结果显示重组质粒成功表达了3种目的基因,并于转染后48h左右达到峰值,＂2A＂结构下游基因蛋白质表达量约为上游基因的80%。说明成功构建了携带人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因的慢病毒多表达质粒。     

人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因重组慢病毒多表达质粒的构建及活性检测

背景:前期试验显示单个病毒载体介导的多基因共表达系统能够显著提高椎间盘退变转基因疗效。目的:构建人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因重组慢病毒多表达质粒。方法:应用全基因合成技术,以"自剪切多肽2A"串联目的基因,并克隆到慢病毒表达质粒构建重组慢病毒质粒Lenti-TGF-β3-P2A-CTGF-T2A-TIMP1。转染293细胞后,应用RT-PCR和Western-Blot技术分别检测转染后不同时间点目的基因mRNA和蛋白质表达水平。结果与结论:RT-PCR和Western-blot技术检测结果显示重组质粒成功表达了3种目的基因,并于转染后48h左右达到峰值,"2A"结构下游基因蛋白质表达量约为上游基因的80%。说明成功构建了携带人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因的慢病毒多表达质粒。