葡萄胎恶变相关因素的探讨及基质金属蛋白酶-9在妊娠滋养细胞疾病中表达的临床意义

目的 通过测定基质金属蛋白酶(MMP)-9在不同类型滋养细胞疾病中的表达,探讨其预测葡萄胎恶变和转移的可能性;并对葡萄胎恶变相关因素进行分析,以提高对葡萄胎预后的判断.方法 应用链霉菌抗生物素蛋白,过氧化物酶免疫组织化学方法 对30例正常早孕(＜12周)绒毛组织、32例部分性葡萄胎、93例完全性葡萄胎、30例侵蚀性葡萄胎、5例绒毛膜癌组织中MMP-9进行检测.分析7例发生恶变的葡萄胎患者的发病年龄、子宫大小、卵巢黄素囊肿、血β-人绒毛膜促性腺激素(hCG)等因素.结果 MMP-9在正常早孕绒毛组织、部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌组织中均有表达,但随着滋养细胞疾病恶性程度的增加,其表达强度显著升高(X2=23.49,P＜0.05).结论 MMP-9与正常早孕滋养细胞的侵袭过程有关,MMP-9在滋养细胞疾病组织中表达的强度,与滋养细胞恶性程度的强度有关,对临床早期预测葡萄胎的恶变及预防性化疗有一定的参考意义.葡萄胎恶变还与患者发病年龄、β-hCG水平、子宫大小、卵巢黄素囊肿等因素有关.     

基质金属蛋白酶MMP-9及其组织抑制剂TIMP-1在不同类型滋养细胞中的表达

目的通过研究基质金属蛋白酶MMP-9及其组织抑制剂TIMP-1在不同类型滋养细胞中的表达，探讨预测滋养细胞疾病恶变和转移的可能性。方法应用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学方法对20例正常早孕（〈12周）绒毛组织、15例部分性葡萄胎、55例完全性葡萄胎、15例侵蚀性葡萄胎、8例绒毛膜癌组织中MMP-9、TIMP-1进行检测。结果（1）MMP-9在正常早孕绒毛组织、部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌中均有表达，但随着滋养细胞恶性程度的增加其表达显著升高，差异有显著性（x^2=26．421，P〈0．0001）；（2）TIMP-1在正常早孕绒毛组织均有表达，而在部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌中分别有6．67％、5．45％、6．67%、12．50％不表达，且随着肿瘤恶性程度的升高，其染色程度和染色细胞百分率减少，差异有显著性（x^2=9．575，P〈0．05）；结论MMP-9和TIMP-1与正常早孕滋养细胞的侵袭过程有关，MMP-9与TIMP-1比值的改变可能参与了滋养细胞疾病的恶变和转移，对临床早期预测滋养细胞疾病的恶变及预防性化疗有一定的参考意义。     

血管生成素及其受体在妊娠滋养细胞疾病中的表达变化

目的 探讨血管生成素-1(Ang-1)、血管生成素-2(Ang-2)及受体Tie-2在妊娠滋养细胞疾病中的表达变化及意义。方法 运用实时荧光定量RT-PCR技术分别检测18例部分性葡萄胎、19例完全性葡萄胎、15例侵蚀性葡萄胎、20例绒毛膜癌和20例正常妊娠者绒毛组织中Ang-1、Ang-2、Tie-2 mRNA的表达,Western blot印迹法检测组织中Ang-1、Ang-2、Tie-2蛋白质的表达。结果 正常妊娠组相比,部分性葡萄胎组、完全性葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎组、绒毛膜癌组Ang-1、Ang-2、Tie-2 mRNA及其蛋白质的表达水平依次显著增高,绒毛膜癌组最高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 滋养细胞Ang-1、Ang-2及其受体Tie-2表达增高,可能在妊娠滋养细胞疾病的发病机制中发挥重要作用。     

MMP-13和上皮细胞钙粘附蛋白在胎盘部位滋养细胞肿瘤和绒癌中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-13 (MMP-13)和上皮细胞钙粘附蛋白在胎盘部位滋养细胞肿瘤和绒癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测20例早孕胎盘绒毛,15例葡萄胎,20例绒癌,10例胎盘部位滋养细胞肿瘤中MMP-13和上皮细胞钙粘附蛋白的阳性表达率及相关性。结果 MMP-13定位于细胞浆,而上皮细胞钙粘附蛋白定位于细胞膜。MMP-13在葡萄胎、正常早孕绒毛、胎盘部位滋养细胞肿瘤、绒癌中阳性表达率逐渐升高,差异有统计学意义(P0. 05),在胎盘部位滋养细胞肿瘤中的阳性表达率高于正常早孕绒毛和葡萄胎,差异均有统计学意义(均P0. 05),在胎盘部位滋养细胞肿瘤中的阳性表达率低于绒癌,差异有统计学意义(P0. 05)。上皮细胞钙粘附蛋白在正常早孕绒毛、葡萄胎、胎盘部位滋养细胞肿瘤、绒癌中表达逐渐下降,差异有统计学意义(P0. 05),在胎盘部位滋养细胞中的阳性表达率低于正常早孕绒毛和葡萄胎,差异均有统计学意义(均P0. 05),在胎盘部位滋养细胞肿瘤和绒癌中的阳性表达率比较差异无统计学意义(P0. 05)。MMP-13和上皮细胞钙粘附蛋白在4组中的表达呈明显负相关(r=-0. 718,P=0. 000)。结论 MMP-13高表达和上皮细胞钙粘附蛋白表达降低或表达缺失,表明其可能在胎盘部位滋养细胞肿瘤和绒癌发生、发展过程中起重要作用。     

Flk-1/KDR在妊娠滋养细胞疾病中的表达及其与葡萄胎恶变的相关性研究

目的:探讨妊娠滋养细胞疾病(GTD)胎肝激酶-1(Flk-1/KDR)表达特征及其与葡萄胎恶变的关系。方法:采用免疫组织化学(immunohistochemisty)法对78例GTD组织和10例正常早孕绒毛组织Flk-1/KDR进行半定量检测。结果:GTD组织和正常早孕绒毛组织均表达Flk-1/KDR,在GTD中的表达水平显著高于正常早孕绒毛组,在完全性葡萄胎中Flk-1/KDR的表达水平显著高于部分性葡萄胎(P<0.05)。日后恶变组葡萄胎Flk-1/KDR表达量显著高于非恶变组葡萄胎(P<0.01)。结论:完全性葡萄胎中Flk-1/KDR的表达水平显著高于部分性葡萄胎,恶变组葡萄胎Flk-1/KDR表达量显著高于非恶变组葡萄胎,可能与葡萄胎恶变有关,有可能成为预测葡萄胎恶变的新指标。     

Kiss-1、E-cadherin在胎盘部位滋养细胞肿瘤中的表达及相关性

目的:探讨肿瘤抑制蛋白Kiss-1和黏附分子E-cadherin在胎盘部位滋养细胞肿瘤中的表达及相关性。方法:采用免疫组化PowerVision二步法检测20例正常早孕绒毛、15例葡萄胎、15例绒癌、10例胎盘部位滋养细胞肿瘤(PSTT)中Kiss-1和E-cadherin的表达情况及相关性。结果:Kiss-1、E-cadherin在正常早孕绒毛、葡萄胎、PSTT、绒癌中表达呈下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。Kiss-1、E-cadherin在正常早孕绒毛和葡萄胎的表达差异无统计学意义(P>0.05);在PSTT中表达低于正常早孕绒毛和葡萄胎中表达,差异有统计学意义(P<0.05);PSTT和绒癌的表达差异无统计学意义(P>0.05)。Kiss-1和E-cadherin在正常早孕绒毛、葡萄胎、PSTT、绒癌中表达呈正相关(r=0.627,P<0.05)。结论:Kiss-1和E-cadherin低表达或表达缺失可能在PSTT的浸润和转移过程中发挥重要作用,二者具有协同作用。     

Fas及FasL在妊娠滋养细胞疾病中的表达及意义

目的 探讨Fas及FasL在妊娠滋养细胞疾病中的表达及意义.方法 应用免疫组化方法分别检测Fas及FasL蛋白在正常滋养细胞(40例)、完全性葡萄胎(36例)、侵蚀性葡萄胎(15例)、绒毛膜癌(11例)中的表达.结果 Fas在正常滋养细胞组、完全性葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎组和绒毛膜癌的阳性表达率分别为95.0%、88.9%、46.7%和36.4%.Fas随着妊娠滋养细胞疾病的进展阳性率逐渐降低.正常滋养细胞组分别与侵蚀性葡萄胎组及绒毛膜癌组比较有显著性差异(χ2=14.036,P=0.000;χ2=16.575,P=0.000),完全性葡萄胎组与侵蚀性葡萄胎组和绒毛膜癌组比较有显著性差异(χ2=8.275,P=0.004;χ2=10.202,P=0.001),而正常滋养细胞组与完全性葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎与绒毛膜癌组比较无显著性差异(χ2=0.314,P=0.575;χ2=0.015,P=0.902).FasL在正常滋养细胞组、完全性葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎组和绒毛膜癌组的阳性表达率分别为17.5%、44.4%、53.3%和81.8%.FasL随着妊娠滋养细胞疾病的进展阳性率逐渐增高.正常滋养细胞组分别与完全性葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎组及绒毛膜癌组比较有显著性差异(χ2=6.518,P=0.035;χ2=5.371,P=0.005;χ2=13.724,P=0.000),完全性葡萄胎组与绒毛膜癌组比较有显著性差异(χ2=4.727,P=0.030),完全性葡萄胎组与侵蚀性葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎与绒毛膜癌组比较无显著性差异(χ2=0.336,P=0.562;χ2=1.191,P=0.275).Fas与FasL表达在各组之间均呈负相关.结论 Fas的低表达和FasL的高表达降低了妊娠滋养细胞凋亡,可能是妊娠滋养细胞疾病的发病机制之一.Fas和FasL的表达在各组之间均呈负相关提示二者在妊娠滋养细胞疾病进展中可能相互影响,共同作用.     

p-ERK在早孕绒毛组织中的表达及意义

目的:研究人早孕绒毛组织中磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶(p-ERK)的表达水平,探讨流产及其有关生殖过程发生的分子机制。方法:采用免疫组织化学、图像分析方法检测30例正常早孕绒毛组织(正常早孕组)和30例自然流产的早孕绒毛组织(自然流产组)中p-ERK的表达水平。结果:人早孕绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞均有p-ERK的表达,自然流产组中p-ERK蛋白表达面积及强度均明显低于正常早孕组,两者差异有显著性意义(P<0.05)。结论:ERK/MAPK(丝裂原活化蛋白激酶)通路可能是人早孕绒毛滋养细胞增殖、分化及侵入过程中的主要信号转导途径之一。     

Survivin及p53与葡萄胎恶变的相关研究

目的:探讨Survivin及P53蛋白的表达在葡萄胎发生、发展及恶变中的作用。方法:采用免疫组织化学PV-6000法测定42例葡萄胎(其中12例恶变)和18例正常绒毛组织中p53和Survivin蛋白表达情况。结果:Survivin正常绒毛组和葡萄胎组的表达差异无统计学意义(P>0.05);p53在正常绒毛组和葡萄胎组表达差异具有统计学意义(P<0.05);Survivin及p53蛋白阳性表达率在葡萄胎恶变组中的表达均高于葡萄胎未恶变组(P<0.05)。结论:Survivin及p53可能与滋养细胞的侵袭过程及程度有关,检测葡萄胎组织中P53及Survivin的蛋白表达,可预测葡萄胎恶变,为临床预防性化疗提供一定的理论依据。     

E-钙黏素和β-连环素在妊娠滋养细胞疾病的表达与临床意义

目的:探讨E-钙黏素和β-连环素在妊娠滋养细胞疾病的表达与临床意义。方法:应用免疫组化SP法检测22例正常早孕绒毛和55例妊娠滋养细胞疾病石蜡包埋组织中E-钙黏素和β-连环素的表达情况,结合临床资料进行分析。结果:E-钙黏素和β-连环素在正常早孕绒毛和非恶变葡萄胎的表达差异无统计学意义(P0.05);恶变葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌的表达量明显低于正常早孕绒毛和非恶变葡萄胎(P0.05);侵蚀性葡萄胎和绒癌的表达量低于恶变葡萄胎(P0.05)。妊娠滋养细胞肿瘤中E-钙黏素的表达与临床分期呈负相关(P0.05);β-连环素的表达与WHO预后评分呈负相关(P0.05)。结论:E-钙黏素和β-连环素的表达下调可能是滋养细胞恶性转化的早期事件,在妊娠滋养细胞疾病的恶化进展中起重要作用;E-钙黏素和β-连环素可作为葡萄胎恶变预测以及妊娠滋养细胞疾病预后评估的参考指标。     

The c-erbB-related oncoproteins in normal placenta and in gestational trophoblastic diseases (in vitro study)]

In this study the expression of epidermal growth factor receptor (EGFR) and c-erbB-2, c-erbB-3 and c-erbB-4 oncogenes were investigated in gestational trophoblastic diseases and normal first trimester placenta. Furthermore, the possibility that macrophage (IL-1 alpha, IL-1 beta, TNF) and lymphocyte (IL-2, gamma-IFN, GM-CSF) cytokines effects are mediated by changes in EGFR expression were studied. Paraffin sections of 16 cases of partial mole, 25 cases of complete mole, 10 cases of gestational choriocarcinoma and 11 cases of therapeutic abortion were studied immunohistochemically for EGFR, c-erbB-2, c-erbB-3 and c-erbB-4 proteins. The presence of EGFR mRNA was studied using in situ hybridization. JEG-3 human choriocarcinoma cells were incubated with varying concentrations of interleukin 1-alpha, interleukin 1-beta, interleukin 2, gamma-interferon, granulocyte-macrophage colony stimulating factor and tumor necrosis factor-alpha, and the expression of EGFR was measured by radioimmunoassay using a murine monoclonal antibody with specificity for EGFR. Staining for EGFR was detected immunohistochemically in all cell type in gestational trophoblastic diseases and normal placenta. The levels of expression of EGFR in choriocarcinoma and syncytiotrophoblasts and cytotrophoblasts in complete mole were significantly greater than those in syncytiotrophoblasts and cytotrophoblasts in both normal placenta and partial mole (p < 0.01, p < 0.01). The immunoreactivity of c-erbB-2 was significantly stronger in choriocarcinoma and extravillous trophoblast in complete mole than that in extravillous trophoblast in partial mole and normal placenta (p < 0.02, p < 0.01, respectively). Strong immunostaining for EGFR (p = 0.02) and c-erbB-3 (p < 0.01) in extravillous trophoblasts of complete mole was found to be significantly correlated with the development of persistent postmolar gestational trophoblastic tumor. Macrophage-derived cytokines IL-1 alpha, IL-1 beta and TNF significantly suppressed cell growth; this was associated with a significant increase in EGFR expression. The lymphocyte (IL-2, gamma-IFN, GM-CSF) cytokines had no significant effect on either EGFR expression or cell growth. These findings support the concept that cytokines may act as paracrine mediators of autocrine processes involved in choriocarcinoma cell growth regulation by modulating growth factor receptor expression. The EGFR-related family of oncogenes may be important in the pathogenesis and prognosis of gestational trophoblastic diseases.     

MMP-7、MMP-26在妊娠滋养细胞疾病中的表达研究

目的：研究基质金属蛋白酶（ MMP）-7、MMP-26在滋养细胞疾病中的表达及与研究滋养细胞肿瘤相关因素之间的关系,为早期临床诊断滋养细胞疾病,判断其恶性程度提供有价值的线索。方法应用免疫组织化学S-ABC 法检测10例正常绒毛,15例完全性葡萄胎,5例部分性葡萄胎,14例侵蚀性葡萄胎,8例绒癌组织中MMP-7、MMP-26的表达,进行统计学分析。结果①MMP-7在正常绒毛组、葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎组、绒癌组表达的阳性率分别为60．000％、45．000％、85．714％、100．000％,且有明显的统计学差异（χ2＝11．011,P＝0．012）,同时,MMP-7阳性率与胎盘绒毛滋养细胞非正常增生有显著相关性（r＝7．709, P＝0．005）,正常绒毛组、葡萄胎组分别和侵蚀性葡萄胎组、绒癌组之间阳性率比较具有明显的统计学差异（P＜0．05）;②MMP-26在正常绒毛组、葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎组、绒癌组的表达阳性率分别为90．000％、45．000％、35．714％、25．000％,且有明显的差异（χ2＝9．680,P＝0．021）,同时,MMP-26阳性率与胎盘绒毛滋养细胞非正常增生有显著相关性（r＝7．519,P＝0．006）。正常绒毛组、葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎组、绒癌组MMP-26阳性率两两之间比较均有明显差异（P＜0．05）。结论 MMP-7高表达MMP-26低表达可能提示妊娠滋养细胞侵袭性增强,对葡萄胎清宫组织检测MMP-7、MMP-26表达强度,有助于判断葡萄胎的侵袭性强弱。     

CD99和MMP-2在妊娠滋养细胞疾病中的表达及意义

目的:研究黏附因子CD99及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在水泡状胎块和水肿性流产中的定位和表达及二者表达的相关性。方法:采用免疫组化SP法检测30例水肿性流产(HA)、20例完全性水泡状胎块(CHM)、20例部分性水泡状胎块(PHM)患者中CD99和MMP-2的表达水平。结果:①CD99主要表达于细胞滋养细胞胞膜,在HA、CHM和PHM中的表达率分别为49.83%、25.85%和25.40%;②MMP-2主要表达于合体滋养细胞胞质,在HA、CHM和PHM中的阳性表达率分别为36.7%、80.0%和85.0%;③CD99在HA组织中的表达率高于CHM和PHM组织,MMP-2在HA组织中的表达率低于CHM和PHM组织,且差异均有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性检验,CD99和MMP-2在三者中的表达率均呈负相关〔γ(HA)=-0.133,P<0.05;γ(CHM)=-0.154,P<0.05;γ(PHM)=-0.153,P<0.05〕。结论:CD99在水泡状胎块(HM)中表达下降,可能与其影响滋养细胞黏附及分化有关,MMP-2在HM中表达上升,可能与CD99表达下调,从而激活MMP-2表达,导致MMP-2过表达有关。二者均参与了HM的发生和发展,且CD99表达的下降在一定程度上促进了MMP-2的表达,从而为HM的早期诊断和临床治疗提供了依据。     

P57免疫组化结合CEP17倍体分析在葡萄胎鉴别诊断中的作用

目的：探讨P57免疫组化结合CEP17倍体分析在葡萄胎鉴别诊断中的意义。方法收集乌鲁木齐市妇幼保健院病理科45例完全性葡萄胎,25例部分性葡萄胎及25例水肿性流产标本,运用免疫组化进行P57检测和FISH技术进行CEP17的倍体检测。进一步分析P57免疫组化结合CEP17倍体分析在葡萄胎鉴别诊断中的意义。结果 P57蛋白在部分性葡萄胎和水肿性流产组织中主要分布在绒毛的细胞滋养细胞和间质细胞中,阳性表达比例分别为100％（25／25）和100％（25／25）;但在绝大部分完全性葡萄胎中滋养细胞和间质细胞中P57表达缺失。 P57在完全性葡萄胎中的阳性表达率为4．4％（2／45）,与部分性葡萄胎（χ2＝61．9,P＜0．05）和水肿性流产比较（χ2＝61．9,P＜0．05）,存在统计学差异。 FISH分析结果显示：在水肿性流产中90．9％病例为CEP17二倍体（20／22）;部分葡萄胎中87．0％病例为CEP17三倍体（20／23）;在完全性葡萄胎中97．7％的病例为CEP17二倍体（42／43）。统计学分析结果显示：部分性葡萄胎三倍体的发生率明显高于水肿性流产（χ2＝27．3,P＜0．05）及完全性葡萄胎（χ2＝49．6,P＜0．05）。结论 P57免疫组化结合CEP17倍体分析对完全性葡萄胎,部分性葡萄胎和水肿性流产的鉴别诊断中具有重要的作用。     

早期流产者绒毛和蜕膜组织中MMP-9、TIMP-3的表达及其意义

目的:了解MMP-9和TIMP-3在早孕、先兆流产和药物流产绒毛及蜕膜组织中的定位及表达水平,探讨其水平及平衡在维持正常妊娠中的作用。方法:选取90例早孕妇女作为研究对象,其中行负压吸宫术者30例为对照组,行药物流产术者30例为药物流产组;自愿行吸宫术的先兆流产妇女30例为先兆流产组,均留取绒毛和蜕膜组织,应用免疫组织化学技术和计算机图像分析系统检测MMP-9和TIMP-3在不同早孕流产绒毛和蜕膜组织中的表达。结果:MMP-9和TIMP-3在3组绒毛的合体滋养细胞、细胞滋养细胞、毛细血管内皮细胞的胞浆,蜕膜的蜕膜细胞、腺上皮细胞和血管内皮细胞的胞浆呈不同程度的阳性染色。通过定量分析,药物流产组绒毛和蜕膜MMP-9的表达高于先兆流产组,先兆流产组高于对照组(P<0.05);3组绒毛和蜕膜TIMP-3的表达差异无统计学意义(P>0.05)。绒毛和蜕膜中MMP-9/TIMP-3药物流产组高于先兆流产组,先兆流产组高于对照组(P<0.05)。结论:MMP-9表达水平的升高在流产发生过程中具有重要作用,MMP-9和TIMP-3的平衡对维持正常妊娠起重要作用。     

CD9蛋白在滋养细胞中的表达及其意义

目的:探讨妊娠滋养细胞疾病中CD9的表达及临床意义。方法:应用免疫组化S-P法,检测CD9在正常绒毛及妊娠滋养细胞疾病中的表达。结果:正常绒毛组织及葡萄胎组织中CD9阳性表达率明显高于侵蚀性葡萄胎及绒癌组织,其差异有显著性。结论:CD9蛋白在滋养细胞的浸润转移中起重要调控作用。     

40岁以上滋养细胞疾病86例临床分析

目的:滋养细胞疾病是妇科常见病,但对于40岁以上滋养细胞疾病的诊治在临床上是经常容易被忽视、被误诊的疾病。该文探讨40岁以上滋养细胞疾病的临床特点、诊断、治疗及预后。方法:采用回顾性方法分析1982年7月~2002年12月共收治滋养细胞疾病392例,其中40岁以上患者86例。侵蚀性葡萄胎46例(Ⅰ期29例、Ⅱ期5例、Ⅲ期12例)。绒癌17例(Ⅰ期9例、Ⅱ期3例、Ⅲ期3例、Ⅳ期2例)。结果:86例滋养细胞疾病病人中,误诊23例,误诊率为26.7%。75例行子宫全切术手术治疗。其中全子宫加双附件切除者48例,全子宫加单附件切除者12例,单纯子宫切除者15例(附件切除均行卵巢动静脉高结扎)。术后病理证实为恶性者66例,恶变率为76.7%。术后患者全部进行化疗。结论:40岁以上滋养细胞疾病临床诊断误诊率高,恶变率高,应引起临床高度重视。