抗凋亡基因bcl—x—1逆转录病毒表达载体的构建与鉴定

抗凋亡基因ｂｃｌ┐ｘ┐１逆转录病毒表达载体的构建与鉴定白庆咸１黄高升１陈协群２（１第四军医大学病理学教研室西安７１００３３２第四军医大学西京医院血液科）关键词凋亡ｂｃｌ－ｘ－１基因，逆转录病毒表达载体中图号Ｒ７５３ｂｃｌ－ｘ－１是ｂｃｌ－２家族的新成...     

bcl—x基因在白血病细胞中的表达及意义

目的：探讨ｂｃｌ－ｘ基因在白血病中的表达及意义，方法：采用免疫组织化学方法检测１９例白血病及４株白血病细胞中Ｂｃｌ－ｘ的表达，并用Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹法确定白血病细胞株中Ｂｃｌ－ｘ表达形式。结果：白血病中Ｂｃｌ－ｘ阳性率为７３．７％（１４／１９），４株白血病细胞均表达Ｂｃｌ－ｘ－１形式。结果：白血病细胞中Ｂｃｌ－ｘ１表达可能与白血病发病有关。     

何杰金氏病中抗细胞凋亡基因bcl－2翻译产物的定位

何杰金氏病中抗细胞凋亡基因ｂｃｌ－２翻译产物的定位｜｜［陈协群，王文亮，黄高升等，中华医学杂志，１９９４；７４（１０）：６１８～６２０］作者采用高敏感多重ＰＡＰ免疫细胞化学技术，研究抗细胞凋亡基因ｂｃｌ－２在淋巴结何杰金氏病（霍奇金病）中的表达与分布...     

非霍奇金病t(14;18)易位的PCR检测

①目的 检测非霍奇金病的微小残留病。②方法 徼增琼脂糖凝胶电泳检测法,测定５０例非霍奇金病ｂｃｌ－２基因表达与ｔ（１４;１８）染色体易位的关系。③结果 在这个易位中,位于１８ｑ＾２１上ｂｃｌ－２原癌基因与１４ｑ＾３２上的ＩｇＨ基因两便,使ｂｃｌ－２基因表达失常。本组５０例淋巴瘤病人中,１１例（２２％）表达ｔ（１４;１８）易位,５例经过治疗已获得缓解的病人中,１例检测到ｔ（１４．１８）易位随访９０ｄ     

抗凋零基因bcl－2在何杰金病中的表达及其意义

抗凋零基因ｂｃｌ－２在何杰金病中的表达及其意义陈协群，王文亮，黄高升，王成济，沈素芸（西京医院血液病科病理学教研室，生物化学教研室）关键词何杰金病；细胞凋零；ｂｃｌ－２基因；免疫组织化学中图法分类号Ｒ７３３．１人ｂｃｌ－２是细胞凋零（ａｐｏｐｔｏｓｉ...     

淋巴细胞性白血病／淋巴瘤bcl—2基因重排的研究

目的：探讨ｂｃｌ－２／ＩｇＨ基因重排的临床意义。方法：应用多聚酶链反应技术检测９种恶性淋巴瘤细胞系和不同类型淋巴系统恶性肿瘤临床标本中ｂｃｌ－２／ＩｇＨ基因重排情况。结果：２种细胞系,１例慢性淋巴细胞白血病及６例非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）有ｂｃｌ－２／ＩｇＨ基因重排,其中,３６．４％滤泡型ＮＨＬ及１８．２％弥漫性ＮＨＬ有重排。ｂｃｌ－２基因断裂点绝大多数（８／９）位于主要断裂区（ＭＢＲ）。结论：ｂｃ     

霍奇金病RS／H细胞bcl—2,fas和cyclin D1蛋白表达及其相关关系

该文利用免疫组化检测了４０例霍奇金病（ＨＤ）／Ｈ细胞ｂｃｌ－２,ｒａｓ、ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的表达,并对其相关关系进行了研究。结果显示：ｂｃｌ－２和ｆａｓ蛋白一信号在ＲＳ／Ｈ细胞中主要呈浆膜型。在ＨＤ上亚型ＬＰ,ＮＳ,ＭＣ和ＬＤ中ｂｃｌ－２阳性细胞密度逐渐增高（Ｐ〈０．０５）,而ｆａｓ阳性细胞密度依次降低（Ｐ〈０．０５）;并呈明显负相关（ｒ＝－０．５６９０）。在４０例ＨＤ中ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１阳性表达     

bcl—xS基因对化疗引起的大肠癌细胞凋亡的调节作用

目的 探讨ｂｘｌ－ｘＳ基因对化疗后大肠癌细胞生物学行为的影响。方法 用基因转染方法进行ＬｏＶｏ细胞ｂｃｌ－ｘＳ基因转染，然后用ＭＴＴ和ＥＬＩＳＡ法检测ｂｃｌ－ｘＳ转染细胞对化疗药ＭＭＣ及５－ＦＵ敏感性的影响和作用机制，结果 ｂｃｌ－ｘＳ转染可增强ＬｏＶＯ细胞对化疗药ＭＭＣ及５－ＦＵ的敏感性，与经ｎｅｏ转染的细胞相比有显著差异（Ｐ〈０．０５），ＥＬＩＳＡ细胞死亡试剂盒研究发现，ＬｏＶｏ细胞对化疗药物     

抗细胞凋亡基因bcl—2及其在肿瘤研究中的应用

ｂｃｌ－２（Ｂｃｅｌｌｙｍｐｈｏｍａ－２，ｂｃｌ－２）基因是从滤泡性淋巴瘤相关的ｔ（１４；１８）染色体易位的断裂点部位克隆出的一种原癌基因〔１〕。随着对ｂｃｌ－２基因的深入研究，人们发现ｂｃｌ－２并没有促进细胞增殖的能力，但它却能阻止细胞的凋亡，同时...     

何杰金氏病中抗细胞凋亡基因bcl－2翻译产物的定位

采用高敏感多重ＰＡＰ免疫细胞化学技术，研究抗细胞凋亡基因ｂｃｌ－２在淋巴结何杰金氏病中的表达与分布。结果表明，２１例中有７例（３３％）可检出ｂｃｌ－２蛋白阳性的Ｒｅｅｄ－Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ（Ｒ－Ｓ）细胞；其中２例（混合细胞型）尚含大量反应性淋巴滤泡，其生发中心也呈阳性反心。相反４例作为阳性对照的炎性淋巴滤泡增生中，ｂｃｌ－２蛋白主要分布于富含长寿命（ｌｏｎｇ－ｌｉｖｅｄ）Ｂ细胞的套区（ｍａｎｔｌｅｚｏｎｅ），而生发中心则均为阴性。结果提示，ｂｃｌ－２基因高表达介导的细胞凋亡障碍可能与Ｒ－Ｓ细胞发生有关。     

脂质体转染bcl-2反义核酸对HL-60细胞凋亡的影响

目的人白血病细胞系ＨＬ－６０细胞高表达凋亡抑制基因ｂｃｌ－２蛋白，是研究细胞增殖、凋亡的良好模型。通过脂质体转染ｂｃｌ－２反义核酸，观察其对细胞增殖的抑制，对ｂｃｌ－２蛋白表达影响，及诱导细胞凋亡出现。方法ＨＬ－６０细胞在３７℃、５％ＣＯ２条件下，培养于含１５％小牛血清及含青、链霉素（每毫升各１００Ｕ）的ＲＰＭＩ１６４０完全培养基中，细胞接种密度为１０７／Ｌ，反义核酸终浓度为５μｍｏｌ／Ｌ，反义核酸与脂质体比例为１．０ＯＤ：５０μｌ。脱离小牛血清转染２４ｈ，同时设置空白组、无义组、反义组、脂质体组、脂质体＋无义组，再连续培养４天，做免疫组化，检测ｂｃｌ－２蛋白表达。提取总ＲＮＡ，行ＲＴ－ＰＣＲ分析ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ表达，以及透射电镜检查，观察细胞凋亡情况及脂质体转染情形。结果脂质体转染ｂｃｌ－２反义核酸的作用：（１）抑制ＨＬ－６０细胞增殖，在转染后第五天最明显，经统计学处理，反义组与空白及无义对照组有显著性差别，脂质体转染反义核酸组与其余组均有统计上显著性差别。（２）降低ｂｃｌ－２蛋白表达水平，处理前ｂｃｌ－２免疫组化阳性率为６２±１．４８％，经转染ｂｃｌ－２反义核酸处理后，ｂｃｌ－２表达率为３２．５±１．     

血管免疫母细胞性淋巴结病bcl-2与P53蛋白表达

（１）目的 研究ｂｃｌ－２与Ｐ５３蛋白在血管免疫母细胞性淋巴结病（ＡＩＬ）中的表达,探讨ＡＩＬ的发生发展规律,病变性质及恶性转化的可能机制。（２）方法 应用免疫组化染色、ＰＣＲ技术检测ｂｃｌ－２与Ｐ５３蛋白表达及ｂｃｌ－２／ＩｇＨ融合基因,同时选择非零奇金病（ＮＨＬ）２０例及淋巴结反应性增生１０例作为对比研究。（３） 结果 ＡＩＬ病人ｂｃｌ－２与Ｐ５３蛋白阳性表达率分别为６３．６％（１４／２２）,     

bcl—xS基因诱导人大肠癌细胞凋亡

目的 研究ｂｃｌ－ｘＳ基因对体内大肠癌细胞生长的影响及作用机制。方法 将ｂｃｌ－ｘＳ基因稳定转染的人大肠癌ＬｏＶｏ细胞接种于裸鼠体内使其生长,然后取移植瘤标本原位末标记并进行电镜观察,同时将ｎｅｏ基因转染的及未经转染的ＬｏＶｏ细胞分别接种于裸鼠体内,作为对照。结果 经ｂｃｌ－ｘＳ转染的ＬｏＶｏ细胞移植瘤有明显的散在或成团的凋亡细胞,而经ｎｅｏ转染的ＬｏＶｏ细胞则无明显的细胞凋亡。结论 本研究结果捍     

霍奇金淋巴瘤细胞STAT3的活化对bcl—2蛋白表达的调控作用

目的：探讨霍奇金淋巴瘤（ＨＬ）细胞信号转导物与转录激活剂３（ＳＴＡＴ３）的活化对ｂｃｌ－２蛋白表达的调控作用。方法：采用ＳＰ免疫组织化学方法检测了４０例不同亚型ＨＬ之ＲＳ／Ｈ细胞及１３例反应性增生淋巴结（ＲＨ）的ＳＴＡＴ３和抗凋亡基因蛋白ｂｃｌ－２的表达。结果：ＳＴＡＴ３及ｂｃｌ－２蛋白拓ＨＬ不同亚型的ＲＳ／Ｈ细胞中均呈过度表达＊阳性率分别为６５％和６７．５％）,且两者的阳性率呈明显的正相关（Ｐ〈     

反义寡聚脱氧核苷酸抑制HL－60细胞中bcl－2基因表达的研究

目的：研究ＨＬ－６０细胞中ｂｃｌ－２基因的表达并探索ｂｃｌ－２基因ｍＲＮＡ特异的反义寡聚脱氧核苷酸（反义ＯＤＮ）对ＨＬ－６０细胞中ｂｃｌ－２基因表达的影响．方法：采用细胞原位杂交和免疫细胞化学染色技术检测ＨＬ－６０细胞中ｂｃｌ－２基因的表达，人工合成ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ特异性反义ＯＤＮ片段与ＨＬ－６０细胞共培养，在作用一定时间后分别测定细胞中ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和Ｂｃｌ－２蛋白表达的变化．结果：ｂｃｌ－２基因在ＨＬ－６０细胞中既有转录水平的高表达，又有翻译水平的高表达，人工合成的反义ＯＤＮ片段在一定浓度范围内，作用一段时间后细胞内ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ表达无显著改变，而蛋白表达却呈现了显著下降，与浓度和作用时间呈正相关．结论：人工合成的反义ＯＤＮ片段可以抑制ＨＬ－６０细胞中ｂｃｌ－２的转录作用．在进行白血病基因治疗的实验研究中，ｂｃｌ－２基因可以作为基因治疗的一个有用的靶基因．     

何杰金氏病中抗细胞凋亡基因bcl—2翻译产物的定位

采用高敏感多重ＰＡＰ免疫细胞化学技术，研究抗细胞凋亡基因ｂｃｌ－２在淋巴结何杰金氏病中的表达与分布。结果表明，２１例中有７例（３３％）可检出ｂｃｌ－２蛋白阳性的Ｒｅｅｄ－Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ（Ｒ－Ｓ）细胞；其中２例（混合细胞型）尚含大量反应性淋巴滤泡，其生发中心也呈阳性反应。相反４例作为阳性对照的炎性淋巴滤泡增生中，ｂｃｌ－２蛋白主要分布于富含长寿命Ｂ细胞的套区，而生发中心则均为阴性。结果提示，ｂｃ     

bcl-2基因转染小鼠造血干细胞重建造血的生物学特性

目的 观察ｂｃｌ－２基因转染小鼠造血干细胞重建造血的小鼠对放化疗的抵抗作用。方法 （１）含ｂｃｌ－２ｃＤＮＡ的逆转录病毒载体质粒,经脂质体介导转染ＰＡ３１７包装细胞,通过Ｇ４１８筛选和克隆,获得高病毒滴度的细胞株（Ｄ３）;（２）用Ｄ３细胞株的病毒上清转染小鼠胚胎肝造血干细胞;（３）经致死剂量照射小全注ｂｃｌ－２转 造血干细胞重建造血;（５）采用脾集落形成和再增殖能力观察ｂｃｌ－２转因干细胞重建造血     

胃粘膜上皮细胞系GES—1细胞凋亡密度依赖性的研究

目的：探讨细胞密度对ＧＥＳ－１细胞凋亡的影响及其机制。方法：细胞凋亡的存在以Ｇｉｅｍｓａ染色证实，ｂｃｌ－基因的表达采用细胞原位杂交技术。结果：正常培养情况下ＧＥＳ－１细胞凋亡呈细胞密度依赖性，８ｍｇ／Ｌ的五肽胃泌素能增强ｂｃｌ－２基因的表达但不能抑制密度依赖的细胞凋亡。结论：ｂｃｌ－２基因表达可能与ＧＥＳ－１细胞凋亡的密度依赖性无关。     

抗凋零基因bcl－2逆转录病毒表达载体的构建与鉴定

抗凋零基因ｂｃｌ－２逆转录病毒表达载体的构建与鉴定陈协群，王文亮，王成济，黄高升，沈素芸（西京医院血液科病理学教研室生物化学教研室）关键词调零；ｂｃｌ－２基因；逆转录病毒表达载体中图法分类号Ｒ７５３基因转染是探讨人ｂｃｌ－２基因调控细胞凋零（ａｐｏｐ...     

bcl－2和P53蛋白在中枢神经系统肿瘤中的表达

应用免疫组化ＳＰ法观察了ｂｃｌ－２和Ｐ５３蛋白在７４例中枢神经系统肿瘤中的表达情况。结果表明：（１）ｂｃｌ－２蛋白的阳性表达率为１０．８％。（２）Ｐ５３蛋白在胶质瘤中均有表达，表达率不同，颅咽管瘤、垂体瘤、脑膜瘤、反应性胶质细胞增生和正常脑组织为阴性。据此本文认为：（１）ｂｃｌ－２基因在脑瘤发生过程中的作用有限。（２）Ｐ５３蛋白可能参与了脑胶质的发生、发展过程，且与肿瘤的组织分化程度有关。（３）ｂｃｌ－２和Ｐ５３两种癌蛋白表达无明显关系。