灵芝孢子油软胶囊对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的探索灵芝孢子油对机体免疫功能的影响。方法小鼠随机分为低、中、高剂量组以及对照组,分别给3个剂量组的小鼠以0.167 g/kg·BW、0.333 g/kg·BW、1.000g/kg·BW灵芝孢子油软胶囊内容物连续灌胃30d,对照组给予大豆油,测定小鼠免疫器官指数、细胞免疫功能、体液免疫功能以及非特异性免疫功能等指标。结果与对照组相比,试验组各剂量对小鼠体重、胸腺指数、脾指数和腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力均无影响;0.333 g/kg·BW、1.000g/kg·BW能促进小鼠脾淋巴细胞转化,增强小鼠自然杀伤细胞活性,1.000 g/kg·BW能促进小鼠迟发型变态反应和小鼠抗体生成细胞增殖,提高小鼠血清溶血素水平,增强小鼠碳廓清能力。结论灵芝孢子油软胶囊具有增强免疫功能作用,应用于预防慢性病具有较广阔的发展前景。     

黑加仑多糖对免疫功能调节作用的实验研究

目的:研究黑加仑多糖对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用。方法:给小鼠腹腔注射环磷酰胺,建立小鼠免疫功能低下模型后,以0.4,0.8和1.6g/kg的黑加仑多糖灌胃,连续10d,另设模型对照组和正常对照组。观察免疫低下小鼠的脾、胸腺指数变化情况;用分光光度法测定小鼠巨噬细胞吞噬数、抗体分泌细胞生成数、血清溶血素和IL-2等免疫指标的含量。结果:黑加仑多糖高、中、低剂量组对免疫功能低下小鼠的脾、胸腺指数有增强作用,IL-2产生增加,增强血清溶血素的功能(P0.05),其中高、中剂量组对巨噬细胞吞噬功能有增强作用(P0.05)。黑加仑多糖高剂量组对免疫功能低下小鼠抗体分泌细胞功能有增强作用(P0.05)。结论:黑加仑多糖具有增强免疫功能的作用。     

冬虫夏草氨基酸成分的药理作用分析

目的分析冬虫夏草氨基酸成分药理作用。方法取中药研究院人工培育的冬虫夏草,常规预处理,取药粉。健康雄性清洁小鼠,7 w龄,进行训练,取出与均值差异较大个体。取药粉,烘干,烘烤水解,预处理后以全自动氨基酸分析仪检查,天冬氨酸、丝氨酸等含量在0.5%~3.5%之间。取运动能力无明显差异的小鼠100只,随机分为5组,分别为模型组,空白对照组,高、中、低剂量氨基组。除模型组外,其余均灌胃给药4 w,每次0.4 ml;空白对照组为生理盐水;模型组仅进行训练,不进行灌胃。高、中、低氨基组分别给予高、中、低剂量氨基酸0.4、0.2、0.1 ml;氨基酸参照前文提到的氨基酸配比,混悬在羧甲基纤维素钠中。4 w后,末次给药前进行游泳力竭训练,继续灌胃2 d,末次灌胃30 min,进行游泳40 min,休息15 min,摘眼球采血0.1 ml,进行全血乳酸含量检测。同法分组,除空白对照组外,其余腹腔注射环磷酰胺50 mg/kg,制作小鼠免疫低下模型; 1次/d,连续2 d,灌胃2 w后,末次给药20 min,称重,摘除眼球取血,脱颈法处死;取出脾脏、胸腺称重,计算脏器指数,检测小鼠白细胞介素(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果氨基酸组可明显增强小鼠的抗疲劳能力,力竭游泳时间从0.7 min增加到10.4 min。小鼠游泳时间明显延长,同时血清乳酸水平下降,从5.1 mmol/L下降到1.3 mmol/L,与此同时脾脏指数、胸腺指数、IL-2、TNF-α水平均有所改善。5组小鼠力竭游泳时间、血乳酸水平、脾脏指数、胸腺指数、IL-2、TNF-α水平比较,差异有统计学意义(均P0.05),高、中、低氨基酸组指标呈梯度变化,逐渐接近空白对照组,差异有统计学意义(均P0.05)。结论冬虫夏草氨基酸具有抗疲劳、增强免疫作用。     

铁皮石斛对免疫抑制小鼠的免疫调节作用和血清细胞因子的影响

目的研究铁皮石斛对免疫抑制小鼠的免疫调节作用。方法 ICR小鼠分为空白对照组、模型对照组、铁皮石斛0.5、1.0和3.0 g/kg BW剂量组。经口灌胃给药连续30 d。实验结束前24 h,模型组和铁皮石斛组小鼠一次性腹腔注射200 mg/kg BW环磷酰胺。实验结束后测定免疫器官脏器系数、血常规、血生化指标、迟发型变态反应水平、抗体生成细胞数、血清溶血素水平、碳廓清能力、腹腔巨噬细胞吞噬能力、脾NK细胞和淋巴细胞活性,以及血清中细胞因子IL-2、IL-6、IFN-γ、促肾上腺皮质激素(ACTH)、c AMP的含量。结果铁皮石斛可以升高免疫抑制小鼠的脾脏指数、胸腺指数和白细胞总数;增加免疫抑制小鼠的足跖肿胀度、溶血空斑数、NK细胞活性、淋巴细胞增殖能力;上调免疫抑制小鼠的血清IL-2、IL-6、IFN-γ、ACTH、c AMP水平。结论铁皮石斛对于环磷酰胺造成的细胞免疫、体液免疫、非特异性免疫抑制具有明显改善作用。其免疫调节机制与其上调免疫抑制小鼠血清中IL-2、IL-6、IFN-γ、ACTH、c AMP等细胞因子的表达水平有关。     

用环磷酰胺建立小鼠免疫抑制动物模型

目的比较用环磷酰胺(CTX)诱导正常小鼠免疫抑制的两种方法,选择合适的免疫抑制动物模型以评价保健食品的安全性。方法以环磷酰胺为受试物,设立正常对照组、CTX-1组和CTX-2组;正常对照组每日灌胃蒸馏水,CTX-1组每日灌胃60mg/kg环磷酰胺,CTX-2组于试验结束前一天腹腔注射200mg/kg环磷酰胺,试验周期为30天。观察不同剂量及不同方式给予环磷酰胺后对小鼠各项免疫指标的影响。结果CTX-1组小鼠体重、脾脏重量、外周血淋巴细胞计数、NK细胞活性、细胞毒性T细胞活性、HC50均低于对照组(P0.05),CTX-2组小鼠外周血T淋巴细胞(%)、Th细胞(%)、Ts细胞(%)及Th/Ts比值较对照组增高(P0.001,P0.001,P0.05,P0.05,P0.001),其它各项指标均较对照组降低(P0.05)。结论灌胃给予60mg/kg环磷酰胺30天与一次性腹腔注射200mg/kg环磷酰胺均可建立小鼠免疫低下模型,但前者更适用于建立评价保健食品安全性的免疫低下模型。     

纳豆菌糖肽对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用

目的探讨纳豆菌糖肽(Bacillus natto glycopeptide,BNGP)对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用。方法KM小鼠80只随机分成BNGP低、中、高(6.25、12.5、25 mg/ml)剂量、空白、模型、5组。试验组连续灌胃BNGP 30 d,空白组与模型组以等量生理盐水代替,除空白对照组外,其余各级于24,25,26 d按80 mg/(kg·bw)腹腔注射环磷酰胺(CTX)。灌胃结束后,测定小鼠脾脏、胸腺指数,血清溶血素水平,脾细胞转化能力,细胞因子分泌以及体外脾细胞增殖作用的测定,研究BNGP对免疫低下小鼠体外免疫活性的影响。结果 BNGP中、高剂量组小鼠脾脏指数、HC50均显著高于模型组(P<0.05,P<0.01),高剂量组胸腺指数显著高于模型组(P<0.05);低、中、高剂量组ConA诱导的脾细胞增殖活性均显著高于模型组(P<0.05,P<0.01);中、高剂量组IL-2水平、高剂量组IFN-γ水平显著高于模型组(均P<0.05),而IL-10水平显著低于模型组(P<0.05,P<0.01);100²00μg/ml BNGP-1-b和12.5200μg/ml BNGP-1-b和12.5²00μg/ml BNGP-2-a可显著增强体外脾淋巴细胞增殖活性(P<0.05,P<0.01),50μg/ml BNGP-1-b和50200μg/ml BNGP-2-a可显著增强体外脾淋巴细胞增殖活性(P<0.05,P<0.01),50μg/ml BNGP-1-b和50²00μg/ml BNGP-2-a对ConA诱导的体外脾淋巴细胞增殖活性也具有显著增强作用(P<0.05,P<0.01)。结论 BNGP具有增强免疫功能低下小鼠体液和细胞免疫的作用。     

褐藻多糖对小鼠淋巴细胞功能和细胞因子产生的影响

目的 :　研究褐藻多糖 ( BSP)对正常和免疫低下小鼠淋巴细胞功能及几种细胞因子产生的影响。方法 :　用环磷酰胺造成免疫功能低下小鼠模型 ,通过腹腔注射观察 BSP对正常和免疫低下小鼠淋巴细胞增殖反应、T细胞亚群及白介素 - 2 ( IL- 2 )产生的影响 ,并在体外观察 BSP对小鼠腹腔巨噬细胞分泌白介素 - 1 ( IL- 1 )和肿瘤坏死因子 ( TNF)的影响。结果 :　 ( 1 ) BSP1 0 0 mg/( kg·d)× 1 0 d能够明显提高正常和免疫低下小鼠脾脏 T、B细胞的增殖能力 ,显著促进脾细胞产生 IL- 2 ;使免疫低下小鼠胸腺、脾脏的 L3 T+ 4细胞数显著升高 ,L3 T+ 4/Lyt- 2 + 细胞比值增加。( 2 ) BSP在体外还能促进正常小鼠腹腔巨噬细胞产生 IL - 1和 TNF。结论 :　 BSP对正常和免疫低下小鼠的免疫功能具有促进作用。     

紫贻贝粗多糖提取物对小鼠免疫相关因子的影响

目的研究紫贻贝多糖对免疫力低下小鼠的免疫相关因子的影响。方法 30只6～8周龄,体重20 g左右,雌雄随机的ICR小鼠,分成正常对照(Control)、环磷酰胺(CTX)处理的免疫抑制(CTX)、高、中、低不同剂量紫贻贝粗多糖提取物(H-MEP、M-MEP、L-MEP)5组,每组6只。H-MEP、M-MEP、L-MEP三组每天分别腹腔注射0.1 ml 16、8和2的紫贻贝粗多糖提取物1w后,与CTX组一起腹腔注射CTX,再注射相应浓度的紫贻贝粗多糖提取物5d后处死小鼠,测定小鼠脾脏NK细胞的杀伤力,小鼠腹腔巨噬细胞产生的NO量以及血清中IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α的含量。结果 H-MEP、M-MEP、L-MEP组小鼠NK细胞的杀伤力显著强于CTX组(P﹤0.05),H-MEP、M-MEP组甚至超过正常对照组(P﹤0.05);H-MEP、M-MEP组小鼠腹腔巨噬细胞产生的NO量明显超过CTX组(P<0.01),H-MEP组还显著超过正常对照组;高、中剂量多糖提取物组小鼠血清中IL-2显著高于CTX组,而IL-4与CTX组和正常对照组无差异;M-MEP组小鼠中血清IFN-γ显著高于免疫抑制组,H-MEP组TNF-α的含量显著高于免疫抑制组(P﹤0.05),与正常对照组,也明显增强(P﹤0.05)。结论紫贻贝多糖能上调免疫抑制小鼠的Th1细胞功能,纠正CTX引起的免疫抑制状态下的Th1向Th2形成的漂移,增强细胞免疫功能。     

红托竹荪对小鼠IL-12、IL-4和IFN-γ表达影响

目的探讨红托竹荪对小鼠免疫功能的影响。方法用不同浓度红托竹荪按0.02mL/g对小鼠连续灌胃30 d,在第20天开始对环磷酰胺组、红托竹荪低、中、高剂量组(5、10、15 g/kg)小鼠腹腔注射50 mg/kg环磷酰胺,连续3d,同时各剂量红托竹荪组继续进行红托竹荪灌胃。禁食24h后称重,小鼠眼球取血,分离脾脏和胸腺。测定小鼠血清中白细胞介素-12(IL-12)、IL-4和γ-干扰素(IFN-γ)水平。结果与对照组比较,环磷酰胺组小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数无明显变化;与环磷酰胺组比较,高剂量红托竹荪组小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数明显升高(P0.05)。与对照组比较,环磷酰胺组小鼠血清中IL-12、IL-4和IFN-γ含量[分别为(18.12±3.55)、(10.19±2.29)、(12.73±2.79)ng/mL]均明显下降,差异有统计学意义(P0.05);与环磷酰胺组比较,中、高剂量红托竹荪组小鼠血清中IL-12、IL-4和IFN-γ含量[分别为(32.58±3.95)、(17.81±4.23)、(22.58±3.76)和(31.73±4.30)、(23.50±1.66)、(25.27±3.86)ng/mL]均升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论红托竹荪可以促进IL-12、IL-4和IFN-γ表达,对环磷酰胺诱导的小鼠免疫功能损伤具有一定保护作用。     

灵芝孢子油对老龄小鼠免疫保护作用

目的探讨灵芝孢子油对老龄小鼠的免疫保护作用。方法将192只健康老龄(12月龄)SPF级昆明雄性小鼠随机分为A、B、C、D 4组,各组均随机分为4个小组,即对照组、低、中、高剂量组,每组12只。低、中、高剂量组小鼠经口灌胃分别为0.25、0.50、1.50mg/(kg·bw)的灵芝孢子油,对照组给予同体积的玉米油。灌胃容量0.02 ml/g,1/d。连续灌胃30d后,分别进行迟发型变态反应(DTH)实验、血清溶血素的测定、抗体生成细胞数的测定、碳廓清实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定。结果灵芝孢子油暴露后,与对照组相比,中、高剂量组小鼠足跖肿胀度、淋巴细胞增殖能力、抗体生成细胞数、抗体积数、单核-巨噬细胞碳廓清能力、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数均具有统计学意义(P0.05或P0.01),而NK细胞活性无统计学意义(P0.05)。随着灵芝孢子油灌胃剂量的升高,上述指标均呈上升趋势。结论灵芝孢子油可以增强老龄小鼠的免疫保护作用。     

灵芝孢子油免疫调节作用的研究

目的:研究灵芝孢子油对小鼠免疫功能的调节作用。方法:分别以183、367、1100 mg/kg b.wt.剂量的灵芝孢子油对小鼠连续灌胃30 d后,测定各项免疫指标。结果:灵芝孢子油能促进小鼠的脾淋巴细胞增殖转化作用及小鼠的迟发性变态反应,提高小鼠的抗体生成细胞和血清溶血素水平,增强小鼠巨噬细胞吞噬能力。结论:灵芝孢子油具有增强小鼠免疫功能的作用。     

Effect of Fish Oil Supplementation for Two Generations on Changes of Lymphocyte Function Induced by Walker 256 Cancer Cachexia in Rats

Fish oil supplementation has been shown to improve the cachectic state of tumor-bearing animals and humans. Our previous study showed that fish oil supplementation (1 g per kg body weight per day) for 2 generations had anticancer and anticachetic effects in Walker 256 tumor-bearing rats as demonstrated by reduced tumor growth and body weight loss and increased food intake and survival. In this study, the effect of fish oil supplementation for 2 generations on membrane integrity, proliferation capacity, and CD4/CD8 ratio of lymphocytes isolated from mesenteric lymph nodes, spleen, and thymus of Walker 256 tumor-bearing animals was investigated. We also determined fish oil effect on plasma concentration and ex vivo production of cytokines [tumor necrosis factor-α (TNF-α), interferon-γ (IFN-γ), interleukin-4 (IL-4), IL-6, and IL-10]. Lymphocytes from thymus of tumor-bearing rats presented lower viability, but this change was abolished by fish oil supplementation. Tumor growth increased proliferation of lymphocytes from all lymphoid organs, and fish oil supplementation abolished this effect. Ex vivo production of TNF-α and IL-6 was reduced in supplemented animals, but IL-4 and IL-10 secretion was stimulated in both nontumor and tumor-bearing rats. IL-10 and IFN-γ plasma levels was also decreased in supplemented animals. These results suggest that the anticachetic effects of fish oil supplementation for a long period of time (2 generations) in Walker 256 tumor-bearing rats may be associated to a decrease in lymphocyte function as demonstrated by reduced viability, proliferation capacity, and cytokine production.     

双酚A暴露对大鼠器官结构及细胞因子表达的影响

目的研究双酚A暴露对大鼠器官结构及细胞因子表达的影响。方法F344大鼠按体重随机分为对照组和低、中、高剂量组,分别给予0、4、40和400mg/kg双酚A,观察脾脏、胸腺、肝脏、肾脏组织形态学的改变,实时定量PCR测量脾脏IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α和胸腺Fas、FasL六种细胞因子mRNA表达的改变。结果与对照组相比,高剂量组体重降低(P<0.05),脾脏白髓减少,脾小体缩小,肾小球缩小,肝脏出现肝细胞浑浊变性和纤维化,其它指标无明显改变。与对照组相比,各剂量组脾脏IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α mRNA表达均显著降低(P<0.01),胸腺Fas表达下降(P<0.01),FasL表达在低剂量组出现一个短暂的下降后(P<0.05),在中、高剂量组明显上升(P<0.01)。结论双酚A,可改变靶器官的生长、发育及生理功能,影响细胞因子的表达,进而影响机体免疫功能。     

林蛙油对超重微波辐射小鼠免疫因子影响

目的探讨林蛙油为主要成分的保健品对超重微波辐射小鼠血清免疫因子及学习能力影响。方法制作超重微波辐射小鼠模型,用林蛙油为主要成分的保健品进行干预,检测各组小鼠血清白介素10(IL-10)、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α);通过避暗实验和跳台实验检测小鼠的学习记忆能力。结果林蛙油组血清中IFN-γ、IL-10、TNF-α水平分别为(4.533±1.544),(4.410±0.813),(4.438±0.818)pg/mL,与模型组的(3.963±0.754),(4.144±0.524),(5.367±1.042)pg/mL比较,差异均有统计学意义(P0.05);各组小鼠训练后避暗和跳台实验的错误潜伏期及次数与训练前比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论林蛙油为主要成分的保健品可通过调节免疫因子增强对超重辐射小鼠损伤的保护作用。     

三氯乙烯所致接触性皮炎小鼠免疫功能的变化

目的研究三氯乙烯(TCE)刺激BALB/c小鼠产生接触性皮炎,观察TCE对小鼠免疫功能的影响。方法采用背部皮内注射TCE染毒BALB/c小鼠,观察脾脏、胸腺脏器系数的变化情况,对脾和胸腺细胞进行体外淋巴细胞活力和增殖功能测定,腹腔巨噬细胞吞噬功能测定,NK细胞杀伤活性测定及小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素(IFN-γ)含量的测定。结果TCE实验组胸腺脏器系数显著低于阴性对照组(P<0.01);TCE实验组T淋巴细胞活力及增殖能力显著高于阴性对照组(P<0.01);TCE实验组的巨噬细胞吞噬率和NK细胞杀伤活性显著高于阴性对照组(P<0.01);TCE实验组小鼠血清中TNF-α的含量显著高于阴性对照组(P<0.01)。结论三氯乙烯能够诱发接触性皮炎,其中毒机制属于迟发型超敏反应。     

Toll样受体7激动剂对荷瘤小鼠肾癌的抑制作用及免疫机制

目的　研究Toll样受体7激动剂Imiquimod对荷瘤小鼠肾癌的抑制作用及免疫机制。方法　用Renca肾癌细胞构建BABL/c小鼠肾癌模型,实验分为control组、imiquimod组和sorafenib组。观察3组小鼠肿瘤体积及重量、抑瘤率,qPCR法检测肿瘤组织中炎性相关因子肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素1β（Interleukin-1β,IL-1β）、白细胞介素6（Interleukin-6,IL-6）、干扰素α（Interferon-α,IFN-α）、干扰素β（Interferon-β,IFN-β）、干扰素γ（Interferon-γ,IFN-γ）及Toll样受体通路相关因子Toll样受体7（Toll-like receptor 7,TLR7）、髓样分化因子88（Myeloid differentiation primary response gene 88,MyD88）、核因子κB （Nuclear factor κB,NF-κB）mRNA表达,Western blot法检测瘤组织中TLR7、MyD88、NF-κB蛋白表达。流式细胞术检测脾脏中CD4+T、CD8+T、CD4+IFN-γ和CD8+IFN-γ细胞比例。结果　与control组比较,imiquimod组和sorafenib组小鼠的肿瘤体积及瘤体重量降低（P＜0.05）;与control组相比,imiquimod组TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-α、IFN-β、IFN-γ及TLR7、MyD88、NF-κB mRNA水平升高（P＜0.05）,而sorafenib组各因子略有上升（P＞0.05）;与control组和sorafenib组比较,imiquimod组CD4+T、CD8+T细胞比例有不同程度的升高（P＞0.05）,CD4+IFN-γ和CD8+IFN-γ细胞比例增加（P＜0.05）。结论　Toll样受体7激动剂通过活化TLR7-MyD88-NF-κB信号刺激多种炎性细胞因子分泌,并上调CD4+T、CD8+T比例及功能,对荷瘤小鼠肾癌发挥抑制作用。     

褪黑素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时免疫功能的影响

目的:探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)时脾脏中肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素6(IL-6)表达的变化及外源性褪黑素(MT)对其产生的影响。方法:选用7日龄的Sprague-Dawley大鼠,随机分为生理对照组、假手术组、模型组(HIBD组)、MT治疗组。建立新生鼠HIBD模型后,于不同时间点取脾脏组织,使用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,对脾脏中TNF-α、IL-6、褪黑素受体1(MT1)mRNA的表达进行半定量检测。结果:假手术组脾脏TNF-α、IL-6、MT1的mRNA表达在24 h内均无显著变化,与生理对照组相比差异无统计学意义。HIBD组和MT治疗组TNF-α的mRNA表达在2 h升高,8 h达到高峰,随后下降,24 h内均显著高于假手术组(P<0.01),MT治疗组在24 h内各时间点TNF-αmRNA的表达均显著低于HIBD组(P<0.01)。HIBD组脾脏中IL-6的mRNA表达在8 h开始上升,24 h升高更显著。MT治疗组中脾脏IL-6 mRNA的表达在24 h内不断升高,各时间点均显著高于HIBD组(P<0.01)。脾脏中MT1的表达在HIBD组未见明显变化,而在MT治疗组,MT1在2 h较HIBD组明显下降(P<0.01),在4 h降至最低,8 h开始回升。结论:新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时,脾脏TNF-α,IL-6的表达上调,而褪黑素可以抑制TNF-α的表达而增加IL-6的表达,缺氧缺血性脑损伤对脾脏褪黑素受体的表达没有显著影响,而外源性褪黑素对褪黑素受体mRNA的表达有下调作用。     

互隔交链孢霉诱导小鼠气道变态反应性炎症动物模型的构建

目的研究使用互隔交链孢霉孢子构建C57BL/6小鼠肺部变态反应性炎症模型的方法。方法模型组、阳性对照组和阴性对照组各12只小鼠。模型组以互隔交链孢霉孢子悬液致敏和激发小鼠,分别于第0、5、10天腹腔注射霉菌孢子悬液,第14天开始连续4天鼻滴霉菌孢子悬液。阳性对照组以鸡卵蛋白(OVA)代替霉菌孢子,阴性对照组以磷酸缓冲液(PBS)代替霉菌孢子。进行肺组织病理检查,支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数分类和总蛋白浓度测定,ELISA测定BALF中的白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)及血浆中的总IgE和特异性IgE,测定小鼠气道阻力。结果模型组和阳性对照组可见明显炎症细胞浸润,特别是嗜酸性粒细胞,而阴性对照组则未见。BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞比例较阴性对照组明显升高(P<0.05);BALF上清中IL-4、总蛋白水平较阴性对照组明显升高(P<0.05),IFN-γ水平较阴性对照组降低(P<0.05)。血浆中总IgE和特异性IgE较阴性对照组明显升高(P<0.05)。小鼠气道阻力较阴性对照相比有明显升高(P<0.05)。结论使用互隔交链孢霉孢子致敏和激发C57BL/6小鼠成功的建立了小鼠气道变态反应性炎症模型。     

FTY720联用CsA在类风湿性关节炎中的治疗作用

摘要:目的　探讨FTY720、环孢菌素A（CsA）及两药联合应用对弗氏完全佐剂诱导性大鼠关节炎模型的治疗效果。方法　60只大鼠按照随机数字表法分为5组:正常对照组、模型对照组、FTY720治疗组、CsA治疗组及FTY720+CsA治疗组,每组12只。ELISA法定量检测关节液中TNF-α和IL-1β含量;28 d时处死大鼠取大鼠胸腺、脾脏,称重后评价胸腺指数及脾脏指数。结果　（1）HE染色结果:FTY720治疗组和CsA治疗组与模型对照组相比,可见血管翳形成,但管腔略小,未见炎细胞形成;FTY720联合CsA组被覆滑膜细胞下可见纤维组织增生,未见血管翳形成。（2）胸腺指数、脾脏指数及TNF-α、IL-1β含量:FTY720治疗组和CsA治疗组较正常对照组升高,且差异有统计学意义（P＜0.05）,与模型对照组相比含量降低;FTY720联合CsA组与正常对照组相比,差异无统计学意义（P＞0.05）,与模型对照组相比,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论　FTY720联合CsA可通过降低大鼠RA模型的胸腺指数、脾脏指数及TNF-α、IL-1β在类风湿性关节炎中起到治疗作用,但两者单独应用效果略差。     

Effects of natural eggshell membrane (NEM) on cytokine production in cultures of peripheral blood mononuclear cells: increased suppression of tumor necrosis factor-α levels after in vitro digestion

Tumor necrosis factor-α (TNF-α) plays an important role in inflammatory processes. This study examined the effects of natural eggshell membrane (NEM(?)) (ESM Technologies, LLC, Carthage, MO, USA) on interleukin (IL)-2, IL-4, IL-6, IL-10, interferon-γ (IFN-γ), and TNF-α cytokine production by 4-day peripheral blood mononuclear cell (PBMC) cultures exposed to serial dilutions of either an aqueous extract of natural eggshell membrane (NEM-AQ) or NEM subjected to in vitro digestion (NEM-IVD). The effects on cytokine production were also assessed in the presence of phytohemagglutinin (PHA) and pokeweed mitogen (PWM) where exposure to NEM-AQ resulted in reduced levels of proliferation and statistically significant effects on IL-6, IL-10, IFN-γ, and TNF-α cytokine production. NEM-AQ reduced levels of IL-6, IL-10, IFN-γ, and TNF-α in cultures exposed to PHA. In cultures containing PWM, NEM-AQ reduced production of IL-10 and at the highest dose tested increased IL-6 and decreased TNF-α cytokine levels. NEM-IVD, at the two lowest concentrations of product, significantly reduced TNF-α production by PBMC cultures exposed to PWM compared with the in vitro digest control or native NEM. Taken together, these results suggest that NEM-AQ can influence signaling events in response to the T cell-specific mitogen PHA as well as to the mitogen PWM that require cellular cross-talk and that these effects may be partially mediated through a reduction in level of the pro-inflammatory cytokine TNF-α. The suppression of TNF-α production in the presence of NEM-IVD is promising for the use of NEM as a consumable anti-inflammatory product.