5种营养琼脂培养基细菌生长情况比较

营养琼脂培养基是微生物实验中最为常见的培养基。为了解不同单位生产的营养琼脂培养基对细菌生长情况是否存在影响 ,我们选用了枯草芽胞杆菌黑色变种作为试验菌株 ,对 5种营养琼脂培养基进行了实验比较。材料与方法1　枯草芽胞杆菌黑色变种ＡＴＣＣ9372 ,取其第七代琼脂斜面新鲜培养物接种加有 0 0 0 1%氯化锰的营养琼脂培养基上 ,于 5 6℃培养 5天 ,放置室温 3天 ,镜检芽胞达 95 %以上 ,用 0 0 3Ｍ磷酸盐缓冲液 (ｐＨ7 2 )洗下 ,转入放有玻璃珠的瓶内振摇 5分钟 ,将芽胞悬液放 80℃水浴中 10分钟后 ,离心 (30 0 0ｒｐｍ ,15分钟 ) ,取沉…     

一种在菌落总数测定中防止芽胞杆菌菌落弥漫生长的方法

目的研究一种在菌落总数测定中利用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)有效防止芽胞杆菌弥漫生长的方法。方法取适宜稀释度的枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)、蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)、大肠埃希菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),在平板计数琼脂培养基中分别添加0.01%、0.05%、0.08%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.8%、1.0%TTC水溶液,同时以不添加TTC的计数琼脂培养基作为对照,观察细菌的生长状况。结果 TTC浓度为0.2%～0.3%时,能有效防止枯草芽胞杆菌和蜡样芽胞杆菌在计数琼脂培养基上出现菌落弥漫生长,同时对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的生长无显著影响。结论菌落总数测定时,在培养基中加入0.2%～0.3%浓度的TTC,可以有效防止芽胞杆菌菌落出现弥漫现象,便于准确计数。     

细胞壁缺陷对枯草芽胞杆菌芽胞形成及代谢影响

芽胞是产芽胞细菌生长发育到一定阶段,在一定条件下菌细胞内形成的一个圆形或椭圆形的强折光性小体.芽胞的形成不但受到细菌染色体上芽胞形成相关基因的控制,同时也受到细菌生活环境中金属离子、温度、分子氧、pH值等因素的影响[1].酸溶性小分子芽胞蛋白(Small Acid-SolubleSpore Protein,SASP)是芽胞合成过程中产生的特殊物质,被视为芽胞合成代谢与鉴别芽胞的重要指标[2].文献报道[3-5],细胞壁对细菌的许多生理特性具有重要的影响,细胞壁缺陷可导致细菌形态结构、代谢活性、致病性、药物敏感性等多种性状发生改变.为进一步探讨细胞壁缺陷对枯草芽胞杆菌形成芽胞以及芽胞代谢的影响,本研究采用常规细菌学、生理学及分子生物学方法检测枯草芽胞杆菌稳定L型芽胞形成及SASP合成情况.现将结果报告如下.     

屠猪抗菌性物质残留检测方法应用研究

筛选枯草芽胞杆菌(B、subtilis、1011)。藤黄八叠球菌(M.luteus,28001),蜡样芽胞杆菌(B.cereus,63301)三株试验菌株,分别制备营养琼脂检测平。标准抗菌性物质,对三株试验菌株敏感性不同,分为青霉素、链霉素、四环素(氯霉素)、磺胺、呋喃等五类。现场采取肾、肝、肌肉组织,直接滤纸片法,32±1℃,15—18h,培养,呈抑菌圈者,示抗菌性物质残留阳性。人工注射抗菌素和常规屠猪抗菌性物质残留率(量)高低,与贮养时间,注射剂量有关,126头屠猪抗菌性物质残留检出率,肾脏54.8％,其中磺胺类54.0％,青霉素0.8％,肌肉组织阴性。 建立的抗菌性物质残留简易生物分类快速筛选方法简便、省时、省费用、灵敏度高,回收良好,为确证提供了线索,适应于屠猪流水线应用。     

脱脂奶粉中蜡样芽胞杆菌的污染

在日本以往曾有用进口脱脂奶粉向学校供应后引起蜡样芽胞杆菌食物中毒的报告,鉴于此,作者对其国内A、B、C三家公司生产的脱脂奶粉采取了302份样品作检查,所得结果如下。 91％的样品中一般菌落数都<300/g,9％在1000/g左右,检出的菌落均为芽胞杆菌属细菌,而10.3％(31/302)的样品中有蜡样芽胞杆菌检出,其检出的菌株数占芽胞杆菌总     

微波消毒口腔印模的试验研究

目的 评价微波消毒法对口腔印模的消毒效果.方法 用乙型肝炎病毒及枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞对口腔印模进行污染,用微波消毒法对污染印模消毒,用核酸扩增荧光定量技术进行乙型肝炎病毒DNA及枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞的检测,评价消毒效果.结果 微波消毒3 min,印模中乙型肝炎病毒无检出,消毒合格率均达100.0％,与消毒1、2 min比较差异有统计学意义(P＜0.01);消毒5 min枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞无检出,与其他各组比较均差异有统计学意义(P＜0.01);消毒5 min生理盐水和血清中枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞与HBV-DNA的阳性检出率均为0.结论 微波消毒口腔印模可与高温高压灭菌达到同样效果,而且经济、有效,是一种良好的印模消毒方法.     

应用α-唾液淀粉酶结合能力鉴定血链球菌

目的分析血链球菌群中的细菌与α-唾液淀粉酶结合能力,探讨四种细菌的结合能力,以及这种能力的意义.方法取40株血链球菌群中不同细菌的标准菌株和临床分离菌株与唾液的α-淀粉酶结合.通过淀粉水解圈大小来测定淀粉酶活性,从而了解它和α-唾液淀粉酶的结合能力.结果所有高登氏链球菌和66.7%的缓症链球菌与α-淀粉酶结合能力为阳性,而血链球菌与口腔链球菌与α-唾液淀粉酶结合均为阴性.结论血链球菌、口腔链球菌不能结合α-唾液淀粉酶,而高登氏链球菌、缓症链球菌能结合α-唾液淀粉酶,利用此特性可快速且有效地鉴定不同血链球菌群中各菌株.     

康洁灵对餐茶具、物体表面、垃圾及压舱水消毒实验研究

经现场实验表明，康洁灵配制不同浓度的消毒剂对餐茶具、物体表面、垃圾和压舱水均有较好的消毒作用。实验结果0．4％康洁灵可杀灭物体表面污染的大肠杆菌和腊样芽胞杆菌，10分钟即达99．9％，20分钟可达100％，0．4％康洁灵溶液可杀灭垃圾中的大肠杆菌和腊样芽胞杆菌，作用30分种即达到99．9％。0．1％康洁灵溶液3分钟即可杀灭大肠杆菌和腊样芽胞杆菌，杀灭率可达99．4％。     

一起由“石家庄芽胞杆菌”引起的食物中毒

芽胞杆菌属(Bacillus)细菌自然存在于土壤和水中,也污染食品。少数菌种可引起食物中毒。其中腊样芽胞杆菌(B.cereus)多见,短芽胞杆菌(B.brevis)、坚强芽胞杆菌(B.firmus)少见。我们于1986年9月从一起76人的食物中毒标本中分离出一种需氧杆菌,经系统鉴定和中国科学院微生物研究所     

部队医疗机构室内空气中细菌抗消毒剂基因qacE△1检测

目的 研究西北地区东片部队医疗机构室空气细菌抗消毒剂基因qacE△1的阳性率,为部队医疗机构空气消毒及医院感染预防治疗提供指导依据.方法 用PCR方法检测空气中分离的细菌的qacE△1基因.结果 98株细菌中有23株携带抗消毒剂基因qacE△1,阳性率为23.5％;大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌qacE△1的检出率分别为36.7％、36.4％、27.8％、20.0％、10.0％;白色假丝酵母菌、蜡样芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞、流感嗜血菌未检出qacEA1基因.结论 西北地区东片部队医疗机构空气中的细菌抗消毒剂基因qacE△1、阳性率不高,但应注意消毒剂的交替使用.     

枯草芽胞杆菌1.88株抗真菌物质的分离纯化与性质研究

[目的]分离纯化枯草芽胞杆菌1.88株抗真菌物质并研究其抗真菌活性.[方法](1)使用生理生化法和16SrDNA法鉴定杆菌1.88株.(2)通过将1.88菌株的发酵液离心,酸沉淀,乙醇抽提以及反相高效液相层析分离纯化真菌成份并对其做理化性质分析.(3)测定抗真菌活性物质对5种常见皮肤真菌的最小抑菌浓度(MIC),并与氟康唑,两性霉素B做比较.[结果](1)杆菌1.88株为枯草芽胞杆菌.(2)分离纯化得到2种抗真菌物质,暂命名为G-1和G-2,为多肽类物质.(3)G-1抗真菌的作用远高于氟康唑,与两性霉素B类似.[结论]此抗真菌物质具有很强的抗真菌的作用,在医药以及农业领域可能会有效好的潜在应用价值     

老年人下呼吸道感染的病原菌分布及药敏结果分析

目的 了解湘潭地区老年人下呼吸道感染病原学种类及药物敏感情况。方法 从痰标本中分离出2027株细菌，细菌鉴定采用法国生物梅里埃API系统，药敏试验采用纸片扩散法(KB法)，按NCCLS标准判定结果。结果 本地区老年人下呼吸道感染病原菌中革兰氏阳性菌(G^ )占24．9％，革兰氏阴性菌(G^-)占64％，真菌感染率占11．1％。革兰氏阳性球菌以葡萄球菌占第一位，肺炎链球菌占第二位。革兰氏阴性菌前四位分别是肺炎克雷伯氏菌(19．0％)、铜绿假单胞菌(12．9％)、大肠杆菌(12．0％)、不动杆菌(8．0％)。革兰氏阴性杆菌对氨苄西林，第一、二代头孢菌素耐药率高，大多数菌株对头孢他啶、哌拉西林／他唑巴坦、亚胺培南敏感。产超广谱β-内酰胺酶(ESBLS)菌占肺炎克雷伯氏菌和大肠肝菌的17％，葡萄球菌对大多数抗生素耐药，所有菌株对万古霉素均敏感，其中耐甲氧西林葡萄球菌占42％。     

新型消毒剂对内镜消毒效果的研究

目的 了解目前新型高水平消毒剂对内镜中病原菌的现场杀灭程度,验证消毒效果.方法 分别选取酸性氧化电位水与2％的碱性戊二醛消毒剂对15份污染培养龟分枝杆菌脓肿亚种的内镜进行现场模拟消毒效果比对,邻苯二甲醛、过氧乙酸与2％碱性戊二醛对10份枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞污染的内镜进行现场模拟消毒效果比;检测方法采用无菌毛刷头振荡后,再经过采用0.45 μm孔径负压膜过滤法直接用滤膜培养.结果 经过中和剂鉴定,龟分枝杆菌脓肿亚种和枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞满足现场消毒试验要求,酸性氧化电位水和2％戊二醛浸泡消毒后,对龟分枝杆菌的除菌率均≥99.99％,但酸性氧化电位水消毒后龟分枝杆菌脓肿亚种菌数明显少于戊二醛组(P=0.019);过氧乙酸、2％戊二醛和邻笨二甲醛泡消毒后,对枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞除菌率均≥99.99％,但经氧乙酸消毒后枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞菌数结果明显少于其他两组(F=15838.512,P=0.000).结论 目前新型内镜专用消毒剂能满足目前内镜高水平消毒需要,采样方法及龟分枝杆菌培养技术在试验中得到了应用.     

复方邻苯二甲醛杀枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞效果及机制研究

目的 研究复方邻苯二甲醛杀枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞的效果及其机制.方法 采用悬液定量杀菌试验法研究复方邻苯二甲醛对枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞杀灭效果,从蛋白质、DNA漏出、超微结构探讨其杀芽胞机制.结果 在(20±1)℃条件下,含邻苯二甲醛(OPA)5000 mg/L的复方邻苯二甲醛作用枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞30 min,平均杀灭对数值＞5.00,枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞经复方邻苯二甲醛作用后,有蛋白质漏出,但无DNA漏出;透射电镜观察发现复方邻苯二甲醛作用后,芽胞形状不规则,外壳电子密度深浅不均,甚至部分缺损,核心区偏位,出现电子透明区.结论 复方邻苯二甲醛可有效杀灭枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞,其机制是在苯扎溴铵的协同作用下,芽胞的渗透压改变,通透性增加,OPA更易进入细胞内导致蛋白质变性、漏出而起杀灭作用.     

北京朝阳164株蜡样芽胞杆菌耐药性及腹泻毒力基因分析

目的了解北京朝阳2013年-2014年164株蜡样芽胞杆菌生化分型、耐药及毒力基因携带情况。方法全自动细菌鉴定药敏系统进行药敏试验,手工生化分型,PCR检测毒力基因。结果 164株蜡样芽胞杆菌分成13型,主要为3型(45株)、8型(29株)、1型(19株)、12型(16株)、9型(14株)、6株未分型; 8种基因携带率依次为nheC(59. 15%)、hblC (49. 39%)、bceT (23. 17%)、cytK (16. 46%)、hblA (14. 02%)、nheA (9. 14%)、hblD (8. 54%)、nheB(6. 70%); 164株蜡样芽胞杆菌对氨苄青霉素、头胞西丁、青霉素G 100%耐药,对其余20种抗生素均敏感。结论 164株蜡样芽胞杆菌主要为3型,无13型、15型; 78%菌株至少携带一种毒力基因,52%菌株携带2种以上毒力基因,nheC携带率最高,食品来源菌株均不携带cytK;青霉素类、头孢类药物100%耐药。     

血球凝集技术测定蜡样芽胞杆菌的肠毒素

用血球凝集技术能查出食品和培养基中蜡样芽胞杆菌的肠毒素。用蜡样芽胞杆菌肠毒素皮下注射家兔所得的抗血清致敏红血球后,与蜡样芽胞杆菌的肠毒秦及培养物滤液进行凝集,其凝集价很高,纯毒素(1.5毫克/毫升)为1:262,000,培养物滤液为1:32,768。在同样条件下,用炭疽杆菌、巨大芽胞杆菌、马铃薯芽胞杆菌、枯草杆菌、蜡样芽胞杆菌变种蕈状芽胞杆菌、B.thuringiensis var. gallerae、痢疾志贺氏菌、大肠埃希氏菌、韦氏梭菌和霍乱弧菌等培养物滤液以及葡萄球菌A型和B型肠毒素作对照试验,其凝集价都很低(1:0～1:16)。将蜡样芽胞杆菌接种     

贵州省织金县一起皮肤炭疽疫情的病原体分离鉴定及基因分型研究

目的对贵州省织金县一起疑似皮肤炭疽疫情来源标本进行病原体分离鉴定和基因分型,了解菌株的分子流行病学特征,为疫情判定提供病原学依据。方法对患者皮肤渗出液、血液及病死牛刨剐地土壤进行炭疽芽胞杆菌分离鉴定,采用Real-time PCR检测炭疽芽胞杆菌Pag A、Cap及rpo B基因,进一步采用基于15个串联重复序列(Variable number tandem repeat,VNTR)的多位点可变数量串联重复序列分析(Multiple locus VNTRs analysis,MLVA-15)和单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)技术对炭疽芽胞杆菌进行分子分型。结果从本次疫情中患者皮肤渗出液和血液各分离出1株疑似炭疽菌株,传统方法将2株分离菌株鉴定为炭疽芽胞杆菌,土壤标本未分离到炭疽菌。2株菌Pag A、Cap和rpo B阳性,其15个VNTR位点的重复次数谱型均为9-20-12-53-16-2-8-8-8-4-4-4-4-10-4,SNP结果显示2株菌同属A.Br.001/002簇。结论从本次疫情患者皮肤渗出液和血液检出具有致病基因的炭疽芽胞杆菌,2株菌的MLVA-15和SNP型别特征一致,提示该起疫情为感染炭疽芽胞杆菌所致。     

3株超耐硒细菌的分离 筛选与鉴定

目的:在高硒区自然环境中寻找超耐硒并能还原硒的微生物。方法:通过对湖北省恩施市新塘乡渔塘坝硒矿床带采集的10种检样分别进行富集、分离、筛选、纯化培养出具有超耐硒能力的菌株3株,经鉴定分别为鲍氏不动杆菌、地衣芽胞杆菌和枯草芽胞杆菌。初步研究了这3株菌的培养特性、形态特征和生化学与分子生物学性状。结果:地衣芽胞杆菌和枯草芽胞杆菌在含硒量为33000μg/ml的营养琼脂培养基中能正常生长并能还原无机硒为红色单质硒,在含硒量为46500μg/ml时仍能缓慢生长。结论:超耐硒微生物的发现,在治理环境硒污染、富硒农产品开发等方面具有重要意义。     

蜡样芽胞杆菌的生化学分型

本文报告了用淀粉水解、DNA分解、蔗糖发酵、VP反应和尿素分解试验,将蜡样芽胞杆菌分为32个生物型。在对494株蜡样芽胞杆菌分型中,以1型最多。实验结果表明,本法较村上、小佐和Jinbo氏三种生化学分型法为优。     

溴甲酚紫胨水等干燥培养基的质量研究

在压力蒸汽和环氧乙烷灭菌的效果检测中 ,使用的生物试剂———培养基 ,其质量优劣直接影响灭菌检测和灭菌效果的评价。我们应用分值计算法[1～ 8] 对溴甲酚紫胨水和酚红肉汤等干燥培养基的质量进行研究 ,现将结果报告如下 :1　方法1 1　芽胞悬液制备　试验菌株为嗜热脂肪杆菌芽胞 (ＢａｃｉｌｌｕｓＳｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓＡＴＣＣ795 3　以下简称枯热芽胞 )和枯草杆菌黑色变种芽胞 (ＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓｖａｒｎｉｇｅｒＡＴＣＣ93 72　以下简称枯黑芽胞 ) ,试验时将两菌株接种于营养肉汤中 ,分别在5 4℃和 3 …