七氟醚麻醉对大鼠脑ATP酶的动态影响

目的 观察七氟醚吸入麻醉不同时期大鼠各脑区Na~ 、K~ -ATP酶和Ca~(2 )-ATP酶活性动态变化规律,以了解脑ATP酶活性变化在七氟醚麻醉效应中的地位。方法 40只SD大鼠随机均分为对照组、诱导期组、麻醉期组、恢复期组和清醒期组。分光光度法测定不同时期大脑皮质、脑干、海马Na~ 、K~ -ATP酶和Ca~(2 )-ATP酶活性变化。结果 与对照组比较,大鼠大脑皮质、脑干、海马Na~ 、K~ -ATP酶活性在诱导期分别降低21.9％、10.5％、19.3％(P<0.05),麻醉期分别降低37.2％、33.5％、38.9％(P均<0.01),恢复期又开始回升,但仍低于对照组水平(P<0.05或P<0.01),而清醒期基本恢复至对照组水平(P>0.05);大脑皮质、脑干、海马Ca~(2 )-ATP酶活性在诱导期分别降低34.3％、44.3％、25.5％(P<0.05 or P<0.01),麻醉期分别降低39.6％、60.4％、57.6％(P均<0.01),恢复期开始回升,清醒期基本恢复至对照组水平(P>0.05)。结论七氟醚对大鼠大脑皮质、脑干、海马Na~ 、K~ -ATP酶和Ca~(2 )-ATP酶活性的抑制程度与麻醉时相相对应,ATP酶活性与麻醉深度具有相同的变化趋势,表明上述脑区ATP酶可能是七氟醚的作用靶点,与七氟醚的麻醉效应有关。     

不同液相浓度七氟醚和异氟醚对罗库溴铵结合骨骼肌成人型乙酰胆碱受体的影响

目的探讨不同液相浓度的挥发性麻醉药七氟醚、异氟醚对非去极化肌松药罗库溴铵抑制骨骼肌成人型乙酰胆碱受体(ε-nAChR)内向电流的影响。方法通过脂质体转染建立表达ε-nAChR的HEK293细胞,用全细胞膜片钳检测乙酰胆碱(Ach)激动受体峰电流。计算七氟醚、异氟醚、罗库溴铵抑制受体的半数有效抑制浓度(IC50)。分别用浓度为IC5、0.5IC50、IC50的液相七氟醚、异氟醚预处理ε-nAChR,记录0.5IC50浓度的罗库溴铵对受体内向电流的抑制率。各组以单独使用相应浓度罗库溴铵作为对照。结果七氟醚、异氟醚、罗库溴铵的IC50值分别为:(824.27±14.73)μmol/L;(1031.53±62.91)μmol/L、(150.45±12.5)μmol/L。三种浓度七氟醚、异氟醚增强罗库溴铵抑制Ach诱发电流的幅度不同,呈浓度依赖性(P<0.05);两种吸入麻醉药增强0.5IC50浓度罗库溴铵拮抗受体的作用相似。结论七氟醚、异氟醚增强罗库溴铵对ε-nAChR的阻滞作用呈浓度依赖性,且作用相似。     

异丙酚对大鼠脊髓背角神经元河豚毒素敏感型电压门控钠电流的影响

目的 探讨异丙酚对大鼠脊髓背角神经元河豚毒素敏感型电压门控钠电流的影响.方法 出生后1周的SD雄性大鼠,体重12～20 g,断头处死,取腰膨大段脊髓(L3-6),急性分离背角神经元,随机分为6组,对照组背角神经元施加细胞外液,不同浓度异丙酚组于距离神经元100 μm处施加0.3、1、3、10、30 μmol/L异丙酚,应用全细胞膜片钳记录模式,记录单刺激诱发的钠电流幅度,每组记录14个神经元.计算异丙酚的半数抑制浓度.向神经元施加半数抑制浓度的异丙酚,给予刺激电压-40～30 mV,梯度为10 mV的连续刺激,记录给药前后不同刺激电压下电流到达峰值的时间,共记录16个神经元.结果 与对照组比较,不同浓度异丙酚组钠电流峰值降低(P＜0.05),异丙酚的半数抑制浓度为(5.35±0.23)μmol/L.施加5.35 μmol/L异丙酚后,-30～10 mV刺激电压对应电流到达峰值时间较给药前延长(P＜0.05).结论 0.3～30 μmol/L异丙酚可抑制大鼠脊髓背角神经元河豚毒素敏感型电压门控钠通道电流,可能与延长钠通道电流到达峰值时间有关.     

七氟醚吸入麻醉与丙泊酚复合七氟醚麻醉对血糖的影响

目的 探讨七氟醚吸入麻醉对血糖水平的影响.方法 30例全麻患者随机分成七氟醚吸人麻醉组(A组)和丙泊酚复合七氟醚麻醉组(B组),每组15例.观察术前以及手术2h时的血糖浓度.结果 A、B两组手术2h的血糖均比术前明显升高[(6.23±1.45)mmol/L vs.(4.86±0.85)mmol/L和(6.66±1.48)mmol/L vs.(5.11±0.43)mmol/L](P<0.05);但组间差异无统计学意义.结论 七氟醚吸人麻醉与内泊酚复合七氟醚麻醉均不能抑制应激性血糖升高.     

地氟醚对大鼠顶叶皮层神经元延迟整流钾电流的影响

目的 探讨地氟醚对大鼠顶叶皮层神经元延迟整流钾电流(Ik)的影响.方法采用酶消化法急性分离Wistar大鼠顶叶皮层神经元,接种于培养皿,采用随机数字表法,将培养皿随机分为3组(n=10),不同浓度地氟醚组(D1～3组),在培养皿中加入含0.3 mmol/L(D1组)、0.6 mmol/L(D2组)、0.9 mmol/L(D3组)地氟醚的细胞外液灌流液.于地氟醚给药前、给药后1 min时采用全细胞膜片钳技术,记录顶叶皮层神经元Ik,计算Ik抑制率,绘制0.6 mmol/L地氟醚作用下顶叶皮层神经元Ik的电流.电压曲线、激活曲线和失活曲线.结果 与给药前比较,各组给药后顶叶皮层神经元Ik降低(P＜0.01);地氟醚对顶叶皮层神经元Ik的抑制作用呈浓度依赖性(P＜0.01);0.6 mmol/L地氟醚给药后顶叶皮层神经元Ik的电流-电压曲线下移,但曲线形状和阈电位没有改变;与给药前比较,0.6mmol/L地氟醚给药后Ik的激活和失活曲线的半数激活电压和曲线斜率因子差异无统计学意义(P＞0.05).结论 地氟醚对大鼠顶叶皮层神经元延迟整流钾通道具有抑制作用,且呈浓度依赖性,而对其激活和失活速率无影响,提示地氟醚对延迟整流钾通道的抑制作用并不是通过改变该通道的兴奋性而实现的,可能与其他原因有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of desflurane on the delayed rectifier potassium current (Ik ) in acutely dissociated rat parietal cortical neurons. Methods Wistar rats between 10- and 14-day old of both sexes were used. The parietal cortical neurons were acutely dissociated enzymatically. The extracellular fluid saturated with 0.3,0.6 and 0.9 mmol/L desflurane was added to the culture dish, then the effects of different concentrations of desflurane on Ik were investigated by using the whole-cell patch-clamp technique in acutely dissociated rat parietal cortical neurons. Results IK was inhibited by desflurane in a concentration-dependent manner ( P ＜0.01). The V1/2 of the activation and inactivation curves and the slop factor had no change after giving 0.6 mmol/L desflurane (P ＞ 0.05). Conclusion Desflurane inhibits delayed rectifier potassium channels of parietal cortical neurons of rats in a concentration-dependent manner, and has no effect on the activation and inactivation of delayed rectifier potassium channels, indicating that the change in the excitability of the channel is not involved in the mechanism of inhibitory effect of desflurane, and the other reasons may be involved in the mechanism.     

异氟醚对大鼠海马脑片突触长时程增强的影响

目的 评价异氟醚对大鼠海马脑片突触长时程增强(LTP)的影响.方法 雄性SD大鼠,断头后取出海马组织,制备厚400 μm的海马脑片.采用细胞外微电极记录技术,记录海马脑片CA1区细胞外群体峰电位(PS).取28张脑片,随机分为4组(n=7):用正常的人工脑脊液(ACSF)灌流海马脑片,记录正常的PS,待其稳定后,对照组继续灌流ACSF,不同浓度异氟醚组分别用含异氟醚0.125 mmol/L(异氟醚0.125组)、0.25 mmol/L(异氟醚0.25组)、0.5 mmol/L(异氟醚0.5组)的ACSF灌流,记录PS幅值.另取70张脑片,随机分为10组(n=7):用正常ACSF灌流海马脑片,记录稳定正常的PS 30 min,LTP组继续灌流ACSF,其余各组分别用含异氟醚0.125 mmol/L(异氟醚LTP 0.125组)、0.25 mmol/L(异氟醚LTP 0.25组)、0.5 mmol/L(异氟醚LTP 0.5组)、印防己毒素0 μmol/L(印防己毒素组)、荷包牡丹碱10 μmol/L(荷包牡丹碱组)、CGP353485 μmol/L(CGP35348组)、印防己毒素50 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(印防己毒素+异氟醚组)、荷包牡丹碱10 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(荷包牡丹碱+异氟醚组)、CGP353485 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(CGP353485+异氟醚组)的ACSF灌流,记录PS 30 min后,施以100 Hz的高频强直刺激(HFS),记录PS幅值.结果 与对照组比较,异氟醚0.125组给药后10～45 min PS幅值降低,异氟醚0.25组和异氟醚0.5组给药后5～45 min PS幅值降低(P＜0.05或0.01).LTP组HFS后5～60 min PS幅值增高,较刺激前增加了(52±12)%(P＜0.01).与HFS前比较,异氟醚LTP 0.125组、异氟醚LTP 0.25组和异氟醚LTP 0.5组给予HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05);与LTP组比较,3组PS幅值降低(P＜0.01).与HFS前比较,印防己毒素组、荷包牡丹碱组和CGP 35348组HFS后PS幅值增加(P＜0.01);与LTP组比较,3组PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05).与HFS前比较,印防己毒素+异氟醚组和荷包牡丹碱+异氟醚组HFS后PS幅值增加(P＜0.01),CGP 353485+异氟醚组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05);与LTP组比较,印防己毒素+异氟醚组和荷包牡丹碱+异氟醚组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05),CGP353485+异氟醚组HFS后PS幅值降低(P＜0.01);与异氟醚LTP 0.25组比较,印防己毒素+异氟醚组和荷包牡丹碱+异氟醚组HFS后PS幅值增加(P＜0.01),CGP 353485+异氟醚组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异氟醚可通过激活大鼠海马GABAA受体,抑制LTP的形成,从而影响记忆功能.     

N受体α4β2亚型在异氟醚抑制大鼠海马突触长时程增强中的作用

目的 评价海马神经元N受体α4β2亚型在异氟醚抑制大鼠海马突触长时程增强(LTP)中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠,取海马组织,制备海马脑片.取70张脑片,随机分为10组(n=7):各组用正常人工脑脊液(aCSF)灌流海马脑片,记录稳定正常的细胞外群峰电位(PS)30 min,LTP组继续给予正常的aCSF灌流,其余各组分别用含异氟醚0.125 mmol/L(I1组)、0.25 mmol/L(I2组)、0.5 mmol/L(I3组)、地棘蛙素0.1 mmol/L(E1组)、1.0 μmol/L(E2组)、地棘蛙素0.1 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(E1+I2组)、地棘蛙素1.0 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(E2+I2组)、双氢β-刺酮碱(DHβE)0.1μmol/L(D组)、DHβE0.1μmol/L+异氟醚0.125 mmol/L(D+I1组)的aCSF灌流.采用细胞外微电极记录技术,记录海马脑片CA1区细胞外PS 30 min后,施以高频强直刺激(HFS)15 min,诱发LTP,记录各组HFS结束后5、10、15、20、25、30、40、50、60 min时的PS幅值.结果 与LTP组比较,I1.2.3组、D组、D+I1组、E1+I2组HFS后PS幅值降低,E1.2组HFS后PS幅值升高(P＜0.05),E2+I2组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05).与I1组比较,D+I1组HFS后PS幅值降低(P＜0.05).与I2组比较,E1+I2组、E2+I2组HFS后PS幅值升高(P＜0.01).结论 异氟醚通过拮抗海马神经元N受体α4β2亚型从而抑制了突触LTP的形成.     

七氟醚对豚鼠耳蜗外毛细胞Ca2+跨膜内流和内质网钙释放功能的影响

目的 观察七氟醚对豚鼠耳蜗外毛细胞Ca2+跨膜内流和内质网钙释放功能的影响,探讨其对听觉外周感受器(耳蜗)作用的可能机制.方法 第一部分成年豚鼠,雌雄不拘,迅速断头,取耳蜗,酶孵育后,机械分离法分离外毛细胞,30个活力良好的外毛细胞随机分为3组(n=10):对照组(C组),低浓度七氟醚组(S1组)和高浓度七氟醚组(S2组),用Fluo-3AM钙荧光指示剂染色后,分别给予纯氧、1.7%七氟醚、3.4%七氟醚处理20min,然后加入40mmol/L氯化钾,测定细胞内游离钙离子浓度([Ca2+];).第二部分以20 mmol/L 咖啡因代替氯化钾其余处理及分组同第一部分.结果 第一部分与基础值比较,各组给予七氟醚后[Ca2+];差异无统计学意义(P＞0.05),加入氯化钾后[Ca2+];升高(P＜0.01);S1组和S2组加入氯化钾后[Ca2+];低于C组,且S2组低于S1组(P＜0.05).第二部分与基础值比较,各组给予七氟醚后[Ca2+];差异无统计学意义(P＞0.05),加入咖啡因后[Ca2+];升高(P＜0.0);加入咖啡因后各组[Ca2+];差异无统计学意义(P＞0.05).结论 七氟醚可浓度依赖性地抑制豚鼠耳蜗外毛细胞电压依赖型Ca2+通道开放,而对内质网Ryanodine敏感性钙释放功能无影响.     

氟哌利多对大鼠海马锥体细胞钠通道电流的影响

目的　研究氟哌利多对大鼠海马锥体细胞钠通道电流的影响。方法　用酶消化法急性分离SD大鼠 (1 0～ 1 4d)海马锥体细胞 ,全细胞膜片钳技术记录氟哌利多对钠通道电流的影响。结果　在钳制电压 (Vh) 80mV、刺激电压 (Vt) 0mV条件下 ,0 3～ 30 0 μmol/L氟哌利多对钠电流抑制率为 1 3 1 2 %～ 82 2 5 % (P <0 0 5 ,n =7) ,IC50 为 2 6 0 1 μmol/L。 30 μmol/L的氟哌利多使电流 电压曲线峰值电流平均降低 4 1 93% (P <0 0 1 ) ,但不影响其形状 ,对激活曲线无明显的影响 (P >0 0 5 )。用药前、后 5 0 %通道激活时的去极化电压 (V1 / 2 )分别为 6 6 89mV和 6 5 35mV ;使稳态失活曲线向超极化方向移动 ,用药前、后 5 0 %的通道灭活时的条件脉冲电压 (V1 / 2 )分别为 5 8 75mV和 6 8 81mV。结论　氟哌利多对海马锥体细胞钠通道电流有明显浓度依赖性的抑制作用 ,其抑制作用主要与优先结合钠通道的失活状态而影响钠通道的失活有关     

17β-雌二醇对小鼠生精细胞T型Ca~(2+)通道的作用

目的:研究17β-雌二醇(E2)对小鼠生精细胞T型钙电流(ICaT)的影响。方法:采用膜片钳全细胞记录技术观察E2对急性机械分离的小鼠生精细胞ICaT的影响。结果:E2(1、10、100μmol/L)呈浓度、电压依赖性抑制小鼠生精细胞钙电流,抑制率分别为(13.48±1.86)%、(28.98±2.70)%和(52.93±3.42)%(n=6,P<0.05)。E2对T型钙通道的半数最大抑制浓度(K50)为8.89μmol/L。100μmol/LE2显著改变T型钙通道的激活和失活特性:半数激活电压(Va1/2)和激活斜率因子(κa)分别从(-48.94±0.22)mV、(5.19±0.19)mV变为(-54.34±1.02)mV和(6.02±0.84)mV(n=5,P<0.05);而半数失活电压(Vi1/2)和失活斜率因子(κi)分别从(-56.51±0.13)mV、(3.36±0.11)mV变为(-61.78±0.50)mV、(4.25±0.37)mV(n=5,P<0.05)。结论:E2对生精细胞T型钙通道有抑制作用,呈浓度依赖性。     

Diabetes-induced changes in cardiac voltage-gated ion channels

Diabetes mellitus affects the heart through various mechanisms such as microvascular defects, metabolic abnormalities, autonomic dysfunction and incompatible immune response. Furthermore, it can also cause functional and structural changes in the myocardium by a disease known as diabetic cardiomyopathy(DCM) in the absence of coronary artery disease. As DCM progresses it causes electrical remodeling of the heart, left ventricular dysfunction and heart failure. Electrophysiological changes in the diabetic heart contribute significantly to the incidence of arrhythmias and sudden cardiac death in diabetes mellitus patients. In recent studies, significant changes in repolarizing K~+ currents, Na~+ currents and L-type Ca~(2+) currents along with impaired Ca~(2+) homeostasis and defective contractile function have been identified in the diabetic heart. In addition, insulin levels and other trophic factors change significantly to maintain the ionic channel expression in diabetic patients. There are many diagnostic tools and management options for DCM, but it is difficult to detect its development and to effectively prevent its progress. In this review, diabetes-associated alterations in voltage-sensitive cardiac ion channels are comprehensively assessed to understand their potential role in the pathophysiology and pathogenesis of DCM.     

电压门控钠离子通道β3亚基在小鼠神经病理性痛中的作用

目的 评价电压门控钠离子通道β3亚基(Scn3b)在小鼠神经病理性痛中的作用.方法 采用转基因手段,将目的基因Scn3b嵌入pBROAD-mcs载体中,成为pBROAD-rosa-Scn3b质粒,孕育原代小鼠.将原代小鼠和C57/B6小鼠进行配种,得到转基因小鼠.通过DNA、RT-PCR和Western blot实验鉴定过表达成功后,进行后续实验.随机选择Scn3b过表达转基因小鼠(Scn3b组)和同窝阴性对照小鼠(Con组)各10只,2月龄,雌雄不拘,体重25 ～ 30 g,制备神经病理性痛模型.分别于术前、术后3、5、7和14 d时,测定机械痛阈.结果 2组间不同时间点机械痛阈比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Scn3b不参与小鼠神经病理性痛的形成和维持.     

神经病理性痛大鼠背根神经节TRESK mRNA表达的变化

目的 探讨神经病理性痛大鼠背根神经节(DRG) 孔钾离子通道TRESK mRNA表达的变化.方法 雄性SD大鼠32只,体重22、0～250 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为2组(n=16):假手术组(S组)和神经病理性痛组(NP组).采用坐骨神经分支选择性损伤法制备神经病理性痛模型.S组仅暴露神经,不结扎.于术前1 d和术后1、3、5、7、14 d取8只大鼠,测定左后肢机械缩足反应阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL).于术前1 d和术后14 d痛阈测定结束后取L4,5术侧DRG,采用RT-PCR法测定TRESK mRNA的表达.结果 与S组比较,NP组MWT明显降低,DRG TRESK mRNA表达明显下调(P<0.05或0.01),TWL差异无统计学意义(P>0.05).结论 神经病理性痛大鼠DRG TRESK mRNA表达下调,该变化可能与神经病理性痛的形成有关.     

新型钙通道TRPV5在慢性前列腺炎患者前列腺上皮细胞中的表达及其意义

目的探讨新型钙通道在慢性前列腺炎发病机制中的作用。方法收集我院病案管理室前列腺手术病例资料,根据术后病理结果调出2001年1月~2003年12月73例病人标本的病理号,病人年龄61~82岁,其中炎症组41例,非炎症组32例,然后调出相应的HE切片和包埋蜡块,在光学显微镜下复查HE染色结果。应用SP法对其进行免疫组化染色,检测TRPV5在慢性前列腺炎患者前列腺上皮细胞中的表达。结果41例炎症组前列腺标本中TRPV5强表达的有22例,中表达的10例,低表达的9例;32例非炎症前列腺标本中TRPV5强表达的有7例,中表达的9例,低表达的16例。两组间差异有统计学意义,x2=8.795,P=0.012。结论TRPV5通道在炎症组和非炎症组标本前列腺上皮细胞中表达有明显差异,钙通道的改变可能是慢性前列腺炎的发病机制之一。     

神经病理性痛大鼠背根神经节TRESK mRNA表达的变化

目的 探讨神经病理性痛大鼠背根神经节(DRG) 孔钾离子通道TRESK mRNA表达的变化.方法 雄性SD大鼠32只,体重22、0～250 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为2组(n=16):假手术组(S组)和神经病理性痛组(NP组).采用坐骨神经分支选择性损伤法制备神经病理性痛模型.S组仅暴露神经,不结扎.于术前1 d和术后1、3、5、7、14 d取8只大鼠,测定左后肢机械缩足反应阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL).于术前1 d和术后14 d痛阈测定结束后取L4,5术侧DRG,采用RT-PCR法测定TRESK mRNA的表达.结果 与S组比较,NP组MWT明显降低,DRG TRESK mRNA表达明显下调(P<0.05或0.01),TWL差异无统计学意义(P>0.05).结论 神经病理性痛大鼠DRG TRESK mRNA表达下调,该变化可能与神经病理性痛的形成有关.     

罗哌卡因对豚鼠心室肌细胞膜离子通道的影响

目的 研究罗哌卡因对豚鼠心室肌细胞膜离子通道的影响，探讨其心脏毒性作用的发生机理。方法 用酶解法获得单个的左心室肌细胞，用标准的全细胞膜片钳技术记录用药前后的钠流（ＩＮａ）、Ｌ－型钙流（ＩＣａ－ｌ）、延迟整流性钾流（ＩＫ）和内向整流性钾流（ＩＫ１）的变化。结果 罗哌卡因对ＩＮａ及ＩＣａ－Ｌ都有抑制作用，且呈浓度依赖性。５０ｕｍｏｌ．Ｌ＾－１罗哌卡因可使ＩＮａ、ＩＣａ－Ｌ分别下降３６．８％、７．６８     

Ion channels,receptors, agonists and antagonists

This article describes the physiology of ion channels and the principal molecular mechanisms responsible for modulating their activity by commonly used drugs in anaesthesia and intensive care. The concept of efficient and selective transport of ions across ‘impermeable’ plasma membranes is introduced, together with the mechanisms influencing electrochemical signalling within cells. The classification and composition of voltage-gated ion channels are described in the context of their contribution to action potential generation in excitable cells. Drug–receptor interaction of the four main classes of receptor, that is, ligand-gated ion channels (in particular Cys-loop channels), G-protein-coupled, enzyme-linked and nuclear receptors, are described together with an overview of the various signal-transduction mechanisms adopted by metabotropic receptors to control cellular function. Finally, the principles of drug–receptor interaction of agonists, antagonists and inverse agonists are discussed in relation to their affinity, efficacy and potency.     

Signal transduction pathways of muscarinic receptor mediated activation in the newborn and adult mouse urinary bladder

OBJECTIVE

To study the role of M₂ and M₃ muscarinic receptor subtypes, sources of activator Ca²⁺, and mechanisms involved in increased force oscillations in muscarinic contractions in the bladders of newborn and adult mice, as in the adult bladder muscarinic M₃ receptors are considered to mediate the main part of bladder contraction, and this has not been established in the newborn bladder.

MATERIALS AND METHODS

Bladder preparations from newborn (0–2 days) and adult (10–12 weeks) mice were mounted for in vitro force registration and activated with carbachol and high‐K⁺ solution in the presence of M₃ (4‐DAMP 30 nm ) or M₂ (methoctramine, 100 nm ) receptor antagonists. Thapsigargin (1 µm ) or ryanodine (10 µm ) were used to inhibit sarcoplasmic reticulum Ca²⁺ release. L‐NAME (300 µm ) and 1H‐[1,2,4]oxadiazolo[4,3‐a]quinoxalin‐1‐one (ODQ; 10 µm ) were used to inhibit nitric oxide synthase and guanylyl cyclase, respectively. Gap‐junction function was inhibited with by 18‐β‐glycyrrhetinic acid (18‐β‐GA; 0.1–100 µm ). Big‐conductance (BK) and small‐conductance (SK) K⁺ channels were inhibited by apamine and charybdotoxin (0.3 µm ), respectively.

RESULTS

Concentration–response relations for carbachol in the presence of 4‐DAMP and methoctramine showed that M₃ receptors are the main activating pathway also in the newborn bladder. Neither thapsigargin nor ryanodine influenced the muscarinic responses of the newborn and adult bladders. Carbachol‐induced contractions were not influenced by L‐NAME or ODQ. The 18‐β‐GA inhibited carbachol‐induced contractions in both newborn and adult tissue in a similar manner. Apamine and charybdotoxin slightly increased the amplitude of the contractile responses.

CONCLUSION

These results suggest that in the newborn mouse bladder, as in adult bladders, the M₃ muscarinic receptor subtype is mainly responsible for carbachol‐induced contractile responses. The main mechanism for muscarinic receptor‐induced activation is influx of Ca²⁺ from the extracellular medium, and there seems to be no major contribution of Ca²⁺ release from intracellular stores. The phasic contractile activity induced by carbachol in the newborn bladder is not influenced by gap junction inhibition and does not involve SK and BK channels.