三氧化二砷诱导人食管癌Ec109细胞凋亡伴随c-myc基因的降调节

目的　探讨三氧化二砷 (As2 O3)对食管癌 Ec10 9细胞系的生物学效应及细胞和分子机制。方法　通过四氮唑 (MTT)还原法检测三氧化二砷 (As2 O3)对食管癌 Ec10 9细胞系存活率的影响 ,从形态观察、流式细胞仪分析、DNA凝胶电泳、细胞凋亡原位检测 (TU NEL)研究三氧化二砷诱导食管癌 Ec10 9细胞凋亡的情况 ,并以 Western blot检测基因表达。结果　 Ec10 9细胞经 As2 O3处理后 ,存活率明显降低。光学显微镜下可见到明显的凋亡细胞 ,在细胞周期 G1期前有低于 2倍体的凋亡峰 ;DNA凝胶电泳显示出典型的凋亡特征 :DNA有规律断裂形成的梯状图谱 ,细胞凋亡原位检测发现 DNA断裂 ,Western blot检测表明 c- myc基因的表达下降。结论　 As2 O3能诱导人食管癌Ec10 9细胞凋亡 ,并伴随 c- m yc基因的降调节。     

三氧化二砷诱导人食管癌Ec109细胞凋亡伴随c—myc基因的降 …

探讨三氧化二砷对食管癌Ｅｃ１０９细胞系的生物学效应及细胞和分子机制。方法通过四氮唑还原法检测三氧化二砷对食管癌Ｅｃ１０９细胞系存在活率的影响,从形态观察,流式细胞仪分析、ＤＮＡ凝胶电泳、细胞凋亡原位检测（ＴＵＮＥＬ）研究三氧化二砷诱导食管癌Ｅｃ１０９细胞凋亡的情况,并以Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测基因表达。结果Ｅｃ１０９细胞经Ａｓ２Ｏ３处理后,存活率明显降低。光学显微镜下可见到明显的凋亡细胞,在细胞     

MBP-1在人食管癌细胞株Ec109细胞增殖、凋亡和侵袭中的作用

目的 探讨癌症-MYC基因(C-myc)启动子结合蛋白1(MBP-1)在人食管癌细胞株Ec109细胞增殖、凋亡和侵袭中的作用.方法 培养人食管癌细胞系Ec109,分为MBP-1模拟物组、siRNA-MBP-1组、阴性对照组和空白对照组,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测各组细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期,Transwell检测细胞侵袭能力,Western blot检测与细胞周期相关的C-myc、周期蛋白D1 (Cyclin D1)和周期蛋白E(Cyclin E).结果 与阴性对照组和空白对照组相比,转染MBP-1模拟物可使食管癌细胞Ec109中MBP-1表达上调(P＜0.05),食管癌细胞增殖能力降低,凋亡比例升高,G0/G1期细胞比例降低,侵袭细胞数减少,细胞中C-myc、Cyclin D1和Cyclin E蛋白表达被抑制;沉默MBP-1后,siRNA-MBP-1组食管癌细胞Ec109中MBP-1表达下调,食管癌细胞增殖能力增加,凋亡比例下降,G0/G1期细胞比例升高,侵袭细胞数增加,细胞中C-myc、Cyclin D1和Cyclin E蛋白表达上调.结论 MBP-1与人食管癌细胞株Ec109细胞增殖、凋亡、侵袭能力密切相关,其机制可能与细胞周期异常有关.     

金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446细胞增殖的影响

目的:观察金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞增殖的影响.方法:①采用CCK-8法检测0.793、1.586、3.172、6.344、9.516、12.688 g/L金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞株增殖的影响.②采用流式细胞术观察0.793、1.586、3.172 g/L金莲花黄酮对K562细胞周期的影响.结果:①金莲花黄酮在0.793～12.688 g/L范围内对体外培养的K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用,且抑制作用呈剂量依赖性(F=6.72,9.81,8.54,4.83,P均＜0.05).②金莲花黄酮可使K562 G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(F=12.56,20.86,P均＜0.05).结论:金莲花黄酮对体外培养的K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞株的增殖均有很强的抑制作用;金莲花黄酮可使体外培养的K562细胞周期阻滞在G0/G1期,可能是其抑制K562肿瘤细胞增殖的机制.     

SRB法检测4HPR对HeLa细胞生长的影响

目的；检测４ＨＰＲ对ＨｅＬａ细胞生长的影响。方法；采用ＳＲＢ实验法。结果：１０６４４ｇ／ｍｌ，２μｇ／ｍｌ，４μｇ／ｍｌ，８μｇ／ｍｌ，１６μｇ／ｍｌ，的４ＨＰＲ作用２４ｈ，４８ｈ，７２ｈ后ＨｅＬａ细胞其ＯＤ值分别为１．７８，１．７７，１．７２，１．６８，１．６０，１．５９，１．５５，１．４０，１．３３，１．３２，１．１６，１．０３，０．７５，０．６９，０．５４。对照组为１．７０，１７１，１．７７     

芹菜素在体外对宫颈癌HeLa细胞生长的影响

目的探讨芹菜素在体外对宫颈癌HeLa细胞生长的影响。方法通过四甲基偶氮唑蓝法及平板克隆形成实验研究芹菜素在体外对宫颈癌HeLa细胞生长的影响。结果不同浓度的芹菜素(5、10、20 mg/L)对HeLa细胞的生长均有显著的抑制作用,随着芹菜素浓度的增加,抑制作用显著增强;平板克隆实验结果表明,芹菜素能使HeLa细胞的平板克隆形成能力减弱,不论从克隆的大小还是克隆的数目上,实验组均较对照组明显下降,芹菜素浓度越大,平板克隆形成能力越弱。结论芹菜素在体外对宫颈癌HeLa细胞的生长有显著的抑制作用。     

紫杉醇与褪黑素联合使用对HeLa细胞的生长影响研究

目的；研究紫杉醇与褪黑素联合应用对ＨｅＬａ细胞的生长影响。方法；通过生长曲线，集落形成试验观察二者联合应用对ＨｅＬａ的影响作用。结果；单独应用紫杉醇和褪黑素对二者联合应用其生长曲线，集落形成试验的结果无明显差别。结论：紫杉醇与褪黑素联合应用对ＨｅＬａ细胞的生长影响与单独应用二者无明显判别。     

青蒿琥酯对HeLa细胞生长的抑制作用

目的 研究青蒿琥酯对HeLa细胞生长抑制作用。方法 MTT法测定青蒿琥酯对HeLa细胞增殖抑制；用透射电镜观察青蒿琥酯对肿瘤细胞形态学影响；用流式细胞仪检测肿瘤细胞周期变化和细胞凋亡率；用免疫组化法观察肿瘤细胞端粒酶活性。结果 MTT实验表明青蒿琥酯作用HeLa细胞72h后，细胞存活率明显下降，而且随着药物浓度的增加，抑制作用增强；流式细胞仪检测青蒿琥酯可引起HeLa细胞阻滞于G1期，细胞凋亡率在一定范围内与药物浓度呈正比；透射电镜观察细胞超微结构呈现典型的凋亡特征；免疫组化检测细胞端粒酶活性降低。结论 青蒿琥酯可抑制HeLa细胞生长，诱导细胞发生凋亡，可降低细胞端粒酶活性。     

黄芪注射液联合顺铂对HeLa细胞生长的影响

目的研究不同浓度黄芪注射液单独或联合顺铂对HeLa细胞生长的影响。方法单独或联合应用不同浓度的黄芪注射液、顺铂作用于人宫颈癌HeLa细胞系,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测其对细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白p53、Bax、Bcl-2的表达。结果 MTT法检测结果显示黄芪注射液对HeLa细胞生长影响的最佳作用浓度为1 000 g.L-1,最佳作用时间为48 h。黄芪注射液组、顺铂组、黄芪注射液联合顺铂组HeLa细胞凋亡率均高于对照组,且黄芪注射液联合顺铂组HeLa细胞的凋亡率显著高于黄芪注射液组和顺铂组,各组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。各组间比较,黄芪注射液联合顺铂组Bax、p53蛋白的表达量最高,Bcl-2蛋白的表达量最低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高浓度的黄芪注射液对HeLa细胞有促凋亡作用,可协同顺铂增强对HeLa细胞的促凋亡作用,其作用机制与增强p53、Bax蛋白的表达、减弱Bcl-2蛋白的表达有关。     

青蒿素对体外培养的HeLa细胞生长的影响

目的：研究青蒿素对体外培养的HeLa细胞生长的抑制作用。方法：用台盼蓝染色观察药物对细胞的增殖抑制率；MTT法测定药物的抗肿瘤活性；透射电镜观察药物对肿瘤细胞形态学的影响；流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：台分蓝染色法证实青蒿素对HeLa细胞有抑制作用，抑制率与药物浓度正相关；细胞经药物作用48h后的IC50为55．58μmol/L；电镜观察细胞有典型的凋亡形态特征（凋亡小体）；流芪细胞仪检测细胞凋亡率在一定范围内与药物浓度正相关。结论：青蒿素可抑制HeLa细胞的生长，诱导HeLa细胞凋亡。     

siRNA转染浓度和时间对HeLa细胞ANXA5表达的抑制作用

目的：优化靶向ANXA5的siRNA转染HeLa细胞的条件,为进一步研究ANXA5低表达对宫颈癌细胞生物功能的影响奠定基础。方法：将靶向ANXA5的siRNA转染HeLa细胞,设置不同的siRNA与脂质体的比值和转染时间,Western Blot检测ANXA5蛋白的表达。结果：siRNA与脂质体的比值为0.4：1时,转染入HeLa细胞72h后,HeLa细胞ANXA5蛋白的表达水平最低,即抑制作用最强。结论：siRNA与脂质体的比值和转染时间可影响HeLa细胞ANXA5的表达,存在最佳比值和转染时间。     

阿司匹林对人食管癌细胞株Eca-109生长及凋亡的影响

目的 通过体外实验观察阿司匹林（ASA）是否有诱导人食管癌Eca-109细胞发生凋亡及增殖抑制的作用.方法 通过噻唑蓝（MTT）实验测定细胞生长抑制情况;流式细胞仪（FCM）检测凋亡率;通过电镜、Hoechst 33258染色从形态上观察细胞凋亡.结果 （1）阿司匹林能抑制人食管癌Eca-109细胞的生长,并在一定剂量和时间范围内呈现剂量、时间依赖关系.（2）流式细胞仪（FCM）观察细胞的凋亡率随阿司匹林浓度的增大而增加.（3）电镜下凋亡细胞体积缩小,染色质浓缩致密,并沿核膜边集.（4）Hoechst 33258染色后可见典型的细胞凋亡形态学变化.结论 阿司匹林对人食管癌Eca-109细胞具有增殖抑制作用,能诱导细胞凋亡,凋亡率随阿司匹林浓度的增大而增加.     

牡荆苷对人食管癌EC-109细胞生长及凋亡的影响

目的 观察金莲花中提取的牡荆苷体外对人食管癌EC-109细胞生长及诱导EC-109细胞凋亡的作用,探讨p53及bcl-2蛋白表达在牡荆苷抗肿瘤细胞机制中的作用。方法 用不同浓度牡荆苷作用于对数生长期的EC-109细胞,通过CCK-8法检测其对EC-109细胞体外生长、增殖的抑制作用;Hoechst33258荧光染色观察细胞形态的变化;琼脂糖凝胶电泳检测DNA 条带;AnnexinV-FITC/PI双标法流式细胞术观察牡荆苷对EC-109细胞凋亡的诱导作用;流式细胞术检测EC-109细胞中抑癌基因p53和促癌基因bcl-2蛋白的表达。结果 牡荆苷对EC-109细胞生长、增殖具有明显的抑制作用,能够诱导EC-109细胞凋亡,且作用与牡荆苷浓度、作用时间呈正相关,可上调p53蛋白表达,下调bcl-2蛋白表达。结论 牡荆苷可能通过上调p53蛋白和下调bcl-2蛋白的表达,促进EC-109细胞凋亡,抑制EC-109细胞生长。     

黄芩素对人子宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用

目的:探讨黄芩素对人子宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用及可能机制。方法:采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测黄芩素对HeLa细胞生长的抑制作用;Hoechst 33258荧光染色法观察黄芩素对HeLa细胞凋亡的诱导作用;比色法测定黄芩素对HeLa细胞内caspase-3活性的影响。结果:不同浓度黄芩素作用24、36、48h后均可抑制HeLa细胞生长(P<0.05~P<0.01);黄芩素作用24h后,HeLa细胞凋亡率增加(P<0.01),细胞内caspase-3活性增强(P<0.05~P<0.01)。结论:黄芩素能抑制HeLa细胞生长,其机制可能与诱导细胞凋亡及增强caspase-3活性有关。     

紫杉醇脂质体对宫颈癌HeLa细胞生长及其claudin-7表达的影响

目的 探讨注射用紫杉醇脂质体对人宫颈癌HeLa细胞增殖及claudin-7蛋白表达水平的影响.方法 体外培养人宫颈癌 HeLa细胞,采用 MTT法观察不同浓度紫杉醇脂质体（0.01、0.1、1、10、100 μmol/L）对HeLa细胞增殖的抑制作用;采用Western blot法检测HeLa细胞claudin-7蛋白表达水平在不同浓度紫杉醇脂质体作用下的变化.结果 5个浓度的紫杉醇脂质体均能显著抑制HeLa细胞的增殖,且呈时间和剂量依赖性;Western blot显示HeLa细胞经不同浓度紫杉醇脂质体处理48 h后,随着紫杉醇脂质体浓度的增高,claudin-7蛋白表达逐渐减弱.结论 紫杉醇脂质体对宫颈癌HeLa细胞体外生长具有明显的抑制作用,HeLa细胞claudin-7蛋白的表达在紫杉醇脂质体影响下是下调的.     

hTERT siRNA表达载体的构建及对转染的HeLa细胞生长抑制作用

目的:通过RNA干涉技术抑制肿瘤细胞端粒酶表达,探讨干涉后对肿瘤细胞生长的抑制作用. 方法:根据人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA编码序列,设计RNA干涉靶点,构建siRNA(small interferencing RNA)表达载体,并转染HeLa细胞,通过RT-PCR法观察重组质粒转染肿瘤细胞后端粒酶mRNA、蛋白含量及细胞生长情况. 结果:构建的siRNA表达载体可以使HeLa细胞端粒酶逆转录酶mRNA及其蛋白含量降低,转染质粒的细胞生长增殖速度减慢. 结论:成功构建了针对人端粒酶逆转录酶的siRNA表达载体,通过转染HeLa细胞,可有效抑制细胞中端粒酶的表达,并引起细胞生长抑制.     

丹参酮ⅡA对HeLa宫颈癌细胞凋亡的影响

目的探讨丹参酮ⅡA（TanⅡA）诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及可能的机制。方法 MTT法检测不同浓度（0.5、1、2、4、8 mg/L）TanⅡA处理24、48、72 h对HeLa细胞的抑制率;免疫印记法（Western blot）测定Cx43及skp2表达。结果 MTT实验显示TanⅡA对宫颈癌hale细胞的生长具有明显抑制作用,其作用强度随药物作用时间及浓度的增加而增强;免疫印记法显示丹参酮ⅡA上调cx43,同时降低skp2表达。结论丹参酮ⅡA能明显抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖,其机制可能与上调cx43的表达,抑制skp2的表达有关。