杜仲药材含量测定方法的研究

目的对2005年中国药典中杜仲药材的含量测定方法进行了简化实验性研究,并在此基础上探讨杜仲的最佳测定方法。方法用HPLC法测定松脂醇二葡萄糖苷的含量为指标,采用多因素筛选药物的简便提取方法,并进行了方法学验证。结果用体积分数50%的甲醇超声直接提取药材即可达到测定目的。结论杜仲药材可用甲醇作为提取溶剂,超声处理40min,以乙腈-0.5%甲酸的水溶液(12∶88)作流动相测定含量,方法简便实用。     

不同采收期杜仲不同部位主要有效成分的动态研究

目的对杜仲不同部位主要有效成分的含量进行动态研究,确定杜仲最佳采收期。方法采用高效液相色谱法,以杜仲主要有效成分绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷含量为评价指标,研究杜仲皮、叶、枝采收期。结果不同采收期杜仲不同部位各成分有明显差异。结论杜仲皮于5月份、6月份采收最佳;杜仲叶于4月份采摘最佳;杜仲枝的松脂醇二葡萄糖苷含量很低,从绿原酸含量方面考虑,8月份采收最佳。     

杜仲炮制前后松脂醇二葡萄糖苷含量的比较

目的 以松脂醇二葡萄糖苷的含量为质控指标,筛选优化传统盐炙杜仲的炮制工艺,并与生杜仲进行比较.方法 用正交设计法优选炮制工艺,采用RP-HPLC法测定松脂醇二葡萄糖苷的含量,作为杜仲质量控制的考察指标进行实验比较.结果 杜仲的最佳炮制工艺:用盐量2.5%、温度135℃、时间30 min,杜仲生品中松脂醇二葡萄糖苷含量高于炮制品2倍以上.结论 随着炮制品的温度升高和时间的延长,杜仲中松脂醇二葡萄糖苷含量逐渐下降.     

杜仲HPLC指纹谱图研究

摘 要 目的： 用松脂醇二葡萄糖苷为参照物,建立不同生长年限及不同品种类型的杜仲HPLC指纹图谱,以此为建立郴州大诚中药饮片有限责任公司GAP基地杜仲HPLC指纹图谱的企业质量标准提供依据。方法: 采用ZORBAX Eclipse XDB-C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸水,梯度洗脱,检测波长为277 nm,流速为1.0 ml·min^-1,柱温为25℃,进样量为5 μl。结果: 建立了以松脂醇二葡萄糖苷为参照物的杜仲HPLC指纹图谱,确定了14个共有峰,10批样品指纹图谱整体相似度均在0.939以上。结论: 该方法简便,重复性好,HPLC指纹图谱可作为郴州大诚中药饮片有限责任公司GAP基地杜仲药材的企业质量标准。     

杜仲不同的炮制对损耗率及浸出物的影响

本文以杜仲各种炮制品的损耗率和水溶性浸出物的百分数为主要指标,分析杜仲的不同炮制工艺对其损耗率和水溶性浸出物的比较。表明以烘制杜仲损耗率最低,烘制的杜仲浸出物含量最高．说明传统上要求杜仲“断丝”及颜色变化以提高药材质量和增强药物的疗效是有理论依据。     

黄连不同炮制品的醇溶性浸出物的比较

目的探讨炮制对黄连醇溶性浸出物含量的影响。方法用冷浸法测定黄连及其炮制品中醇溶性浸出物的含量。结果酒制黄连中醇溶性浸出物含量最高,其余炮制品均较生品高。结论不同炮制方法对黄连醇溶性浸出物含量有一定影响,这对临床用药指导意义。     

杜仲提取物中五个成分血浆蛋白结合率的测定

目的测定杜仲药材中5个成分的血浆蛋白结合率。方法采用平衡透析法测定血浆蛋白结合率,生物样本用甲醇沉淀蛋白进行处理,以葛根素为内标,利用超高效液相色谱-串联质谱仪测定血浆和缓冲溶液中的5个成分浓度。结果在所研究浓度范围内,京尼平苷酸、原儿茶酸、绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷和松脂醇单葡萄糖苷的平均蛋白结合率分别为(25.77±2.68)%、(57.54±3.79)%、(53.91±3.00)%、(24.15±4.92)%、(49.78±3.61)%。结论京尼平苷酸和松脂醇二葡萄糖苷的蛋白结合率较低,原儿茶酸、绿原酸和松脂醇单葡萄糖苷则与大鼠血浆蛋白有中等强度的结合。     

RP—HPLC法测定杜仲中松脂醇二葡萄糖苷的含量

杜仲（ＥｕｃｏｍｍｉａｕｌｍｏｉｄｅｓＯｌｉｖ．）有降低血压，补肾安胎的功效，主要成分为杜仲胶、氯原酸、桃叶珊瑚苷等。Ｃｈａｒｌｅｓ从中国产杜仲中分离得到了松脂醇二葡萄糖苷（ｐｉｎｏｒｅｓｉｎｄｄｉｇｌｕｃｏｓｉｄｅ），并确证了其为杜仲降压的有效成分［１］，同时向多个国家申请了专利。唯一明确的松脂醇二葡萄糖苷的含量测定法有正相高效液相色谱法［２］，我们在药典标准制订过程中，采用了反相高效液相法测定其含量，流动相为甲醇－水（２５∶７５），方法简便，松脂醇二葡萄糖苷能得到较好的分离。１　仪器与试药Ｓ…     

杜仲炮制方法的改进

通过对杜仲炮制方法的改进,提高盐炙杜仲的炮制质量,增强临床疗效。     

HPLC-ELSD法测定杜仲中绿原酸和鹅掌楸苷

目的 建立HPLC-ELSD法同时测定杜仲中绿原酸和鹅掌楸苷的方法.方法 奥泰C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.2％醋酸水,梯度洗脱;体积流量:0.9 mL/min;柱温:35℃;漂移管105℃,气体流量:2.5 L/min.结果 绿原酸和鹅掌楸苷分别在0.021 4～4.280 0 μg和0.020 6～4.120 0 μg呈良好的线性关系;绿原酸和鹅掌楸苷紫的平均回收率分别为98.57％、103.37％,RSD值分别为2.23％、2.56％.结论 本法简便、准确,可用于杜仲中绿原酸和鹅掌楸苷的测定.     

杜仲提取物直接或内皮依赖性地引起大鼠血管舒张

目的研究杜仲不同溶剂提取物的舒血管作用并探讨其乙醇提取物的血管舒张机制。方法大鼠胸主动脉环张力测定法。结果在内皮完整血管,杜仲水提物（AQEO）及醇提物（ALEO）均可显著降低PE诱发的血管张力,但醇提物作用显著大于水提物,醇提物的血管舒张活性显著高于其不同溶剂萃取物。杜仲醇提物对去内皮血管的舒张作用显著低于对内皮完整血管。L-N-硝基精氨酸甲酯（L-NAME）、1H-[1,2,4]草酸重氮[4,3-a]喹噁啉（ODQ）、吲哚美辛（INDO）可以显著降低ALEO的舒血管作用（P〈0.05）;四乙氨（TEA）、4-氨基吡啶（4-AP）对ALEO的作用无显著影响,但格列苯脲（glibenclamide）可以明显削弱（P〈0.05）ALEO的血管舒张作用。ALEO对无钙环境下肾上腺素（PE）引起的收缩有显著影响（P〈0.01）。结论杜仲乙醇提取物可以直接或内皮依赖性地引起血管舒张,其机制既与NO,PGI2介导的途径有关,也与其抑制电压依从性钙通道和激活ATP敏感钾通道有关。     

杜仲提取物中4个主要成分的大鼠在体肠吸收

考察了杜仲提取物中京尼平苷酸(1)、新绿原酸(2)、绿原酸(3)和隐绿原酸(4)在大鼠小肠的吸收动力学特性.采用大鼠在体肠循环灌流模型,建立了UPLC-MS/MS法测定1～4,考察了pH值、样品浓度、胆汁和P-糖蛋白(P-gp)抑制剂对1～4在体肠吸收的影响.结果显示,1在pH 7.4条件下吸收较差,2、4在不同pH值下的吸收有显著差异,而3对pH值不敏感.2、3在中浓度样品溶液(4.0 mg/ml)的3h累积吸收率(A)显著高于高浓度样品(8.0 mg/ml),两者在高浓度下的吸收存在饱和现象.胆汁对1～4的吸收均有显著抑制作用.1～4在整个肠段均有吸收,主要吸收部位在小肠;P-gp抑制剂不影响杜仲提取物的肠吸收,提示1～4可能不是P-gp的底物.     

毛细管区带电泳法测定杜仲药材中绿原酸的含量

目的:建立采用高效毛细管电泳测定杜仲中有效成分绿原酸(CA)含量的方法,比较不同产地杜仲中绿原酸含量。方法:采用毛细管区带电泳(CZE),以内标法测定:运行电解质为含80mmol·L-1硼砂缓冲液-100mmol·L-1氢氧化钠(20∶1,pH=9.32),工作电压30kV,柱温25℃,检测波长为340nm,内标物为盐酸小檗碱。结果:绿原酸在0.006～0.574mg·mL-1的浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9994),平均回收率为101.43%,RSD为1.44%。结论:该方法简便、准确,重复性好。     

杜仲醇提取物通过NF-kB信号通路改善大鼠牙周组织病的作用研究

目的 探讨杜仲醇提取物通过NF-kB信号通路作用于牙周病破骨细胞活化因子（IL-1β）改善大鼠牙周组织病的疗效。方法 选取SPF级Wistar大鼠60只,♂,随机数字表法分成4组,正常组,模型组,杜仲醇提取物低、高剂量组,各15只。除正常组外,其他大鼠制备牙周病模型,造模1周后杜仲醇提取物低、高剂量组分别在大鼠上颌右侧第一、第二磨牙间腭、颊侧的龈沟底内注入0.2 mL 0.1,1.0 mg·mL^-1的杜仲醇提取物,正常组与模型组大鼠注入等剂量生理盐水,连续注入5 d。Western-blot、荧光定量PCR检测大鼠牙周膜成纤维细胞内破骨细胞活化因子（IL-1β）蛋白、mRNA表达状况。结果 与正常组相比,模型组大鼠成纤维细胞内IL-1β、NF-kB mRNA相对表达量显著上升（P<0.05）;与模型组相比,杜仲醇提取物低、高剂量组大鼠成纤维细胞内IL-1β、NF-kB mRNA相对表达量显著下降（P<0.05）。与正常组相比,模型组大鼠血清IL-6、IL-1β及TNF-α含量显著上升（P<0.05）;与模型组相比,杜仲醇提取物低、高剂量组大鼠血清IL-6、IL-1β及TNF-α含量显著下降（P<0.05）。与正常组相比,模型组大鼠上颌组织内NF-kB、IL-1β蛋白表达显著上升（P<0.05）;与模型组相比,杜仲醇提取物低、高剂量组大鼠上颌组织内NF-kB、IL-1β蛋白表达下降（P<0.05）。结论 杜仲醇提取通过NF-kB信号路径对牙周病破骨细胞活化因子（IL-1β）产生作用,降低牙周组织内炎症因子含量,对牙周病起到治疗作用。     

桑白皮化学成分、质量控制、药理及炮制研究进展

综述了桑白皮近年在化学成分、质量控制、药理及炮制方面的研究进展,为桑白皮临床规范使用研究提供参考。     

不同抗凝剂、放置时间及处理方法对血糖浓度的影响

目的 探讨离体静脉血液标本不同抗凝剂、放置时间及处理方法对血糖浓度的影响.方法 选取健康体检者空腹静脉血样120份,按真空采血管所含抗凝剂和标本处理方法的不同分为6组,每组20份：A组（绿管）、B组（灰管）、C组（黄管）、D组（红管）,以上4组标本处理方法为离心后室温放置;E组（绿管）、F组（灰管）,以上2组标本处理方法为不离心室温放置.分别在0h、2h、4h、6h、8h这5个时段测定各组血糖浓度,分析各组标本在放置2h、4h、6h、8h后血糖浓度与本组0h浓度的差异,血糖检测采用己糖激酶法.结果 6组标本中,A组、E组标本在不同放置时间血糖浓度差异有统计学意义（P＜0.05）,血糖浓度随放置时间的延长逐渐下降,在8h内分别下降13.88％和40.69％,下降速度分别为1.73％/h和5.09％/h;B组、C组、F组不同放置时间的血糖浓度差异无统计学意义（P＞0.05）;D组在放置2h血糖浓度与0h浓度相比差异无统计学意义（P＞0.05）,放置4h、6h、8h血糖浓度与0h浓度相比差异有统计学意义（P＜0.05）,8h内血糖浓度下降7.24％,下降速度为0.91％/h.结论 标本抗凝剂、放置时间及处理方法均可影响血糖浓度,应根据检测需要选择合适的采血管采血并尽快离心处理和检测.     

不同炮制法对柚皮苷含量影响的研究

目的考察不同炮制方法对骨碎补中柚皮苷含量的影响。方法以炮制品与煎出液中柚皮苷含量为评价炮制方法的优劣指标,用高效液相色谱法测定柚皮苷含量,固定相为C18柱;流动相为甲醇-醋酸-水（40：3：60）;流速1.0mL.min-1;检测波长为283nm。结果盐烫法、膨化法、砂烫法、盐炙法与微波法所得骨碎补中炮制品柚皮苷含量分别是0.65%、0.59%、0.58%、0.57%、0.51%;煎出液中柚皮苷含量分别是0.52%、0.47%、0.46%、0.45%、0.39%。结论盐烫法优于其他方法 。     

The experimental study of Cortex Eucommiae on meridian tropsim: the distribution study of aucubin in rat tissues

Meridian tropism (MT) theory is a core principle of traditional Chinese medicine (TCM) theories and plays an essential role in instructing clinical pharmacy. The scientific explanation of MT theory will certainly further promote the reasonable, effective application of TCM. In view of the MT of Cortex Eucommiae (CE), aucubin (AU), the effective component of CE, was appointed and observed its distribution in rat tissues following a single intravenous (i.v.) dose. A simple, inexpensive and accurate high-performance liquid chromatographic (HPLC) method was developed and validated for the determination of AU in rat tissues. Acceptable intra-day and inter-day precision and accuracy at high, medium and low concentration ranged from 0.56% to 4.18% and 0.73% to 4.53%, respectively. Good assay and extraction recoveries were obtained with a single and relatively fast precipitation protein step. The mean assay recovery and extraction recovery of AU were 94.7% and 90.9%, respectively. All tissues reached maximum AU level at 5 min post-dose. Considerable AU was present in kidney and liver. AU concentration was highest in kidney and remained much higher than that in other tissues over the experiment course. Lung, heart, spleen and testis were also detected to contain AU. The results closely conformed to the MT of CE and clearly demonstrated that AU was one of the material bases of the MT of CE.