黄芪对实验性糖尿病大鼠血管内皮细胞形态的影响

糖尿病持续的高血糖所致血管内皮细胞的完整性破坏是血管病变的始发因素,如能有效地保护血管内皮细胞是防治糖尿病血管病变的一个重要而有效的措施.目的:观察中药黄芪对糖尿病大鼠血管内皮细胞形态的影响,探讨黄芪防治糖尿病合并血管病变的作用及其机理.方法:用四氧嘧啶制作糖尿病大鼠模型,以黄芪水煎液灌胃治疗,优降糖灌胃进行对照.治疗4周后进行血糖检测;并取一段主动脉,采用血管内皮细胞(VEC)平铺技术,观察血管内皮细胞的形态.结果:糖尿病对照组大鼠血糖持续升高,血管内皮细胞形态受损;黄芪可降低血糖,但效果不如优降糖明显;但黄芪能保护VEC的形态,且明显优于优降糖对照组.提示:黄芪对糖尿病大鼠血管内皮细胞具有保护作用.     

黄芪对实验性糖尿病大鼠血管内皮细胞形态的影响

糖尿病持续的高血糖所致血管内皮细胞的完整性破坏是血管病变的始发因素，如能有效地保护血管内皮细胞是防治糖尿病血管病变的一个重要而有效的措施。目的：观察中药黄芪对糖尿病大鼠血管内皮细胞形态的影响，探讨黄芪防治糖尿病合并血管病变的作用及其机理。方法：用四氧嘧啶制作糖尿病大鼠模型，以黄芪水煎液灌胃治疗，优降糖灌胃进行对照。治疗4周后进行血糖检测；并取一段主动脉，采用血管内皮细胞(VEC)平铺技术，观察血管内皮细胞的形态。结果：糖尿病对照组大鼠血糖持续升高，血管内皮细胞形态受损；黄芪可降低血糖，但效果不如优降糖明显；但黄芪能保护VEC的形态，且明显优于优降糖对照组。提示：黄芪对糖尿病大鼠血管内皮细胞具有保护作用。     

川芎嗪配伍黄芪多糖对血管内皮细胞的保护作用

目的:探讨川芎嗪(TMP)、黄芪多糖(APS)及其配伍对血管内皮细胞(VECs)的保护作用。方法:用浓度为10%高血压病患者血清作用于脐静脉内皮细胞株(ECV-304)24h进行造模,实验分为模型组、对照组、TMP组、APS组、TMP与APS配伍组。其中药物各组是将患者血清与药物共同培育细胞。以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)浓度,非平衡法测定内皮素(ET),激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内游离钙浓度。结果:各药物组浓度依赖性增强细胞活性、增加NO释放、而抑制细胞ET释放、增加胞内游离钙浓度,且这两个中药单体配伍后比单独使用作用更显著。结论:TMP、APS及其配伍对VECs具有明显保护作用,且两者可能存在一定的协调作用。     

翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞一氧化氮合酶表达的影响

目的研究翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法采用四氧嘧啶建立糖尿病大鼠模型,造模成功后,给予翻白草水煎液灌胃,连续给药4周;采用组织化学技术和图像分析系统检测血管内皮细胞NOS活性。结果翻白草组大鼠血管内皮细胞NOS平均吸光度值显著高于模型对照组和实验对照组(P<0.01),与正常对照组无差异(P>0.05)。结论翻白草能有效防止NOS的破坏,提高NOS的活性,提示其对血管内皮细胞有一定的保护作用。     

翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞形态结构的影响

目的：研究翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞的作用。方法：采用四氧嘧啶建立糖尿病大鼠模型，自造模成功后，灌胃给予翻白草水煎液，连续给药4周，采用血管内皮细胞平铺技术制作血管内皮铺片．镜下观察。结果：翻白草组大鼠血管内皮细胞胞膜呈柔和锯齿状，边界清晰、连续，胞核椭圆形、居于细胞中央。结论：翻白草能有效保护血管内皮细胞。     

黄连总生物碱对糖尿病大鼠血管内皮细胞的影响

目的:观察黄连总生物碱对糖尿病大鼠血管内皮细胞的影响。方法:链脲佐菌素一次性腹腔注射复制糖尿病大鼠模型。给药组灌胃给予黄连总生物碱(50,100,200mg/kg)、格列齐特(20mg/kg),正常组和模型组给予等容量生理盐水,每天1次,连续8周。实验结束后,分光光度法检测大鼠血糖水平,放射免疫法测定6-酮-前列腺素(6-Keto-PG)F1α、血栓素(TX)B2、血管紧张素(Ang)Ⅱ的含量;ELISA法检测血管性血友病因子(vWF)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)-1的水平;取胸主动环观察不同累积浓度的乙酰胆碱(Ach)对去甲肾上腺素(NE)引起的血管收缩的抑制率;免疫组化技术测定主动脉细胞间粘附分子(ICAM)-1蛋白的表达。结果:黄连总生物碱不仅能显著降低糖尿病大鼠血糖水平、血浆TXB2、AngⅡ、vWF、PAI-1含量,升高6-Keto-PGF1α的水平,改善糖尿病大鼠内皮依赖性舒张功能,同时还能有效抑制糖尿病大鼠主动脉ICAM-1蛋白的表达。结论:黄连总生物碱对糖尿病大鼠血管内皮细胞具有一定的保护作用。     

翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞形态结构的影响

目的:研究翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞的作用.方法:采用四氧嘧啶建立糖尿病大鼠模型,自造模成功后,灌胃给予翻白草水煎液,连续给药4周,采用血管内皮细胞平铺技术制作血管内皮铺片,镜下观察.结果:翻白草组大鼠血管内皮细胞胞膜呈柔和锯齿状,边界清晰、连续,胞核椭圆形、居于细胞中央.结论:翻白草能有效保护血管内皮细胞.     

姜黄对实验性糖尿病大鼠血管内皮细胞功能的影响

1材料 1．1动物 SD大鼠60只，清洁级，雄性，体重180g～200g，购于华中科技大学同济医学院实验动物学部，动物合格证书为医动字第TJLA－2002－176号。     

黄芪多糖对兔动脉粥样硬化内皮细胞功能的影响

目的探讨黄芪对新西兰兔动脉粥样硬化内皮细胞功能的影响。方法将40只雄性新西兰兔随机分为4组,每组10只,空白组：正常颗粒饲料;其余3组从实验第1天起给予高脂饲料,牛血清1mL/kg从耳缘静脉注射1次,黄芪多糖（APS）组：每天同时腹腔注射APS（500mg/kg）;卡托普利组：同时灌喂卡托普利（5mg/kg）,相当于临床剂量的5倍;空白组、模型对照组给予等体积的生理盐水4mL/kg,10周后,测定各组空腹血清或血浆三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）、丙二醛（MDA）、C反应蛋白（CRP）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性,并计算主动脉内膜粥样斑块面积。结果模型对照组与空白组比较,TG、TC、MDA、ET-1、NO、CRP明显升高（P〈0.05或P〈0.01）,HDL-C/TC比值、SOD活性明显下降（P〈0.05或P〈0.01）,主动脉内膜粥样斑块面积较大（P〈0.05）;卡托普利组与模型组比较,各项指标无明显差异;而APS组与模型组比较,TG、CRP、NO、MDA、ET-1明显下降（P〈0.05或P〈0.01）,TC无明显变化,HDL-C/TC比值、SOD活性明显升高（P〈0.01）,主动脉内膜粥样斑块面积明显减少（P〈0.01）。结论黄芪多糖对动脉粥样硬化有明显的预防和治疗作用,可能与抗氧化、免疫调节、保护血管内皮细胞有关。     

黄芪卫矛合剂对糖尿病肾病大鼠肾小球内皮细胞VACM-1表达的影响

目的:从影响糖尿病肾病内皮细胞血管细胞粘附分子-1(VACM-1)的角度,探讨黄芪卫矛合剂对糖尿病肾病的治疗作用和机制。方法:采用单侧肾切除并链脲佐菌素尾静脉注射建立大鼠糖尿病肾病模型,随机分为假手术组、糖尿病肾病组、糖尿病肾病+黄芪卫矛合剂组和糖尿病肾病+氯沙坦钾组。观察12周末各组大鼠体重、尿量、饮水量、尿蛋白排泄率、血糖、糖化血蛋白、血肌酐、尿素氮、Ⅳ型胶原蛋白、层粘连蛋白的变化。用免疫组织化学染色法检测肾小球VACM-1和α-SMA的表达。结果:黄芪卫矛合剂按40g(生药)/kg给药和氯沙坦钾按16mg/kg给药可减少模型组大鼠饮水量、尿蛋白排泄率和层粘连蛋白,降低VACM-1和α-SMA在肾小球内表达。黄芪卫矛合剂还可减少模型组大鼠尿量,降低血糖、糖化血红蛋白、血脂,在减少尿量和降低糖化血红蛋白方面优于氯沙坦钾组。结论:黄芪卫矛合剂可减少糖尿病肾病大鼠肾组织中VACM-1表达,抑制内皮细胞的表型转化,保护肾脏内皮细胞,从而对糖尿病肾病大鼠肾组织有保护作用。     

黄芪多糖对大鼠心肌缺血-再灌注损伤后的保护作用

目的探讨黄芪多糖对再灌注后心脏血流动力学的影响、作用机制及其与氧自由基的关系。方法应用大鼠离体工作心脏模型进行缺血-再灌注,并设定程序对照组、缺血-再灌注损伤组、黄芪多糖(50mg/mL灌注液)治疗组。结果缺血-再灌注组主动脉压(AP)、左室收缩压(LVSP)、左室内压最大变化速率(±dp/dtmax)显著下降(P<0.05),而左室舒张末期压(LVEDP)、等容舒张期心室内压下降的时间常数(T值)显著增高(P<0.05),心输出量(CO)、每搏量(SV)、心脏指数(CI)、每搏指数(SI)显著减小(P<0.05,或P<0.01),冠脉流量(CF)显著下降(P<0.05),黄芪多糖治疗组其收缩舒张功能均得以良好的恢复,有显著扩冠作用(P<0.05)。缺血-再灌注组心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)含量明显下降,LPO含量增高、心肌组织氧自由基波谱信号(OFR)增强,黄芪多糖治疗组SOD含量增高,LPO含量、OFR波谱信号降低,与缺血-再灌注组比较均P<0.05。结论黄芪多糖抗氧自由基的作用可能是其改善心脏血流动力学、抗心肌缺血-再灌注损伤的重要机制。     

黄芪多糖增强小鼠免疫功能的实验研究

目的 研究黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响.方法 采用ConA诱导小鼠淋巴细胞转化试验及迟发性变态反应试验测试黄芪多糖(Astragalus Polysaccharide APS)对小鼠细胞免疫功能的影响;采用抗体生成细胞检测及半数溶血值实验测试黄芪多糖对小鼠体液免疫的影响;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验测试黄芪多糖对小鼠非特异性免疫的影响.结果 黄芪多糖能明显提高小鼠的足跖肿胀度、脾脏生成抗体细胞数、半数溶血值及巨噬细胞吞噬功能,黄芪多糖对小鼠淋巴细胞增殖能力无明显影响.结论 黄芪多糖对正常小鼠的细胞免疫、体液免疫及巨噬细胞功能均有明显的增强作用.     

黄芪注射液对外周血内皮祖细胞数量及功能的影响

目的观察黄芪对外周血内皮祖细胞(EPCs)数量、功能及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响。方法采用密度梯度离心法从外周血获得单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7d后收集贴壁细胞,加入不同浓度黄芪(分别为10,20,50,100g/L)培养24h,同时,对照组与黄芪50g/L组分别培养6,12,24,48h。激光共聚焦显微镜鉴定EPCs,将其在倒置荧光显微镜下计数。然后分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、黏附能力测定实验和体外血管生成试剂盒来观察EPCs的增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,免疫印迹杂交法半定量测定iNOS含量。结果黄芪能增加外周血EPCs数量,促进EPCs的增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,并随黄芪浓度和作用时间的增加而增加,黄芪还能增加EPCs中iNOS含量。结论黄芪能增加EPCs的数量,促进EPCs的增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,这可能与其增加iNOS含量有关。     

小鼠血管内皮细胞的原代培养

目的:建立简单有效地获取小鼠血管内皮细胞(VEC)的培养方法。方法:从实验动物、培养基、植块方法、胎牛血清浓度等方面对植块培养法进行改进,应用C57BL小鼠腹主动脉血管组织进行血管内皮细胞的原代培养并传代培养培养小鼠血管内皮细胞,并进行倒置显微镜下观察和免疫组织化学进行鉴定。结果与结论倒置显微镜观察小鼠血管内皮细胞生长情况,培养48h后,可见大部分贴壁细胞连接形成网状,细胞密度较低;3～5d后,内皮细胞岛出现;约7～9d后细胞融合成片,细胞呈单层镶嵌状排列,呈现"鹅卵石样"或"铺路石样",出现接触抑制现象。兔抗鼠抗Ⅷ抗体和荧光素标记抗体鉴定结果显示清晰的血管内皮细胞核。     

电针对VD大鼠脑微血管内皮细胞一氧化氮合酶表达的影响

目的:观察一氧化氮合酶(iNOS)在血管性痴呆(VD)大鼠脑微血管内皮细胞中的表达情况及电针对其的影响。方法:采用夹闭再通大鼠双侧颈总动脉的方法建立缺血再灌注损伤性VD模型,电针组用G-6805电针治疗仪,以疏密波刺激“百会”“大椎”“足三里”“膈俞”,治疗20 min,每日1次,连续治疗7 d。利用SP免疫组织化学染色方法,观察脑微血管内皮细胞iNOS的活性,并与假手术组、模型组做比较。结果:电针组大鼠脑微血管内皮细胞iNOS的活性较模型组减弱,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:电针可抑制VD大鼠脑微血管内皮细胞iNOS的活性,对脑缺血再灌注损伤具有脑保护作用。     

银耳多糖对实验性2型糖尿病大鼠血糖及血脂的影响

目的:观察银耳多糖对链脲佐菌素(STZ)和高能量饲料诱发的2型糖尿病模型大鼠血糖、血脂的影响。方法:取Wister雄性大鼠65只,随机分为正常组、糖尿病和模型对照组、银耳多糖低中高剂量治疗组及罗格列酮治疗组,除正常组外,其他各组均采用高能量饮食4周后小剂量腹腔注射STZ的方法建立2型糖尿病大鼠模型。持续给药8周后测空腹血糖、血脂的含量。结果:采用高能量饮食加STZ诱发的2型糖尿病大鼠空腹血糖、血清TG(甘油三酯)、TCH(总胆固醇)、LDL(低密度脂蛋白)水平明显高于正常对照组(P<0.05),HDL(高密度脂蛋白)明显下降(P<0.05);银耳多糖可降低2型糖尿病模型大鼠的血糖、TG、TCH及LDL水平,升高HDL水平,与模型组比较有明显改善(P<0.05),与罗格列酮药物治疗组无显著性差异(P>0.05)。结论:银耳多糖能有效地降低2型糖尿病模型大鼠的血糖,调节血脂。     

黄连总生物碱对糖尿病模型大鼠血管内皮功能的保护作用

目的观察黄连总生物碱对糖尿病模型大鼠血管内皮功能的保护作用。方法链脲佐菌素一次性腹腔注射复制糖尿病大鼠模型。黄连总生物碱高、中、低剂量及格列齐特分别灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水,每日1次,连续8周。实验结束后,分光光度法测定血清中一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）含量;放射免疫法测定血浆中内皮素（ET）-1、细胞间黏附分子（ICAM）-1的含量;HE染色法观察主动脉病理学改变。结果黄连总生物碱各剂量组不仅能显著降低糖尿病大鼠MDA、ET-1、ICAM-1水平,减轻主动脉病理损伤程度,还能升高NO、SOD水平。结论黄连总生物碱对糖尿病大鼠血管内皮功能具有一定的保护作用。     

清热养阴活血法对糖尿病大鼠心肌细胞VEGF表达和超微结构的影响

目的:观察清热养阴活血方剂逐瘀化消饮对DM大鼠心脏VEGF表达和心肌细胞超微结构的影响。方法:采用β-cytotoxins大鼠模型,将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、胰岛素组、逐瘀化消饮低、中、高剂量+胰岛素组,观察糖尿病大鼠在胰岛素控制血糖基本一致的情况下,逐瘀化消饮治疗8周,用免疫组化方法检测DM大鼠心肌组织VEGF的分布状况,用H-600透射电镜观察心肌细胞的超微结构。结果:与胰岛素组相比,逐瘀化消饮能抑制DM大鼠心肌VEGF的表达,有效地保护心肌细胞的超微结构。结论:逐瘀化消饮通过多种机制来有效地抑制DM大鼠心脏微血管病变的发生发展,这可能是其防治DM大鼠心脏微血管病变发生发展的机理之一。     

强肌健力方及黄芪多糖对脾虚大鼠胃肠激素水平的影响

目的 观察强肌健力方及其有效组分黄芪多糖对脾虚大鼠血清淀粉酶(AMS)、胃泌素(Gas)和血浆胃动素(MTL)水平变化的影响,探讨强肌健力方防治脾虚证的作用机理.方法 将雄性SD大鼠随机分为正常对照组、脾虚模型组、强肌健力组、黄芪多糖组、强肌健力方去黄芪加黄芪多糖组(简称强肌多糖组),除正常对照组灌服蒸馏水外,其余各组采用大黄复制脾虚模型,分别给予强肌健力方、黄芪多糖、强肌多糖药液灌胃,连续15d.第16天从眼球眶下静脉采血,放射免疫分析法测定Gas和MTL的含量,比色法检测AMS的含量.结果 脾虚模型组大鼠血清AMS、Gas和血浆MTL含量均比正常对照显著降低(P均＜0.01);而强肌健力和强肌多糖组能使大鼠血清AMS、Gas和血浆MTL含量显著升高,与脾虚模型组比较有统计学差异(P均＜0.01),但黄芪多糖组对其影响不明显.结论 强肌健力方能改善和促进消化道机能及胃肠动力学,其作用机理与调节Gas和MTL分泌水平有关.但黄芪多糖对Gas和MTL分泌没有调节作用,需与方中其他药物联合应用方能显效.     

基于人心脏微血管内皮细胞的黄芪多糖分子调控机制研究

〔摘 要〕 目的：探究基于人心脏微血管内皮细胞的黄芪多糖分子调控机制。 方法：选择 2019 年 1 月至 2020 年 12 月在 洛阳东方医院进行体外培养的人心脏微血管内皮细胞第 4、5 代为观察对象,通过染色法、细胞酶联免疫吸附试验（ELISA）、 免疫化学法等,对黄芪多糖分子的调控机制进行观察分析。 结果： 黄芪多糖会对人心脏微血管内皮细胞的表面黏附分子产 生作用,主要是细胞间黏附分子 1（ICAM–1）的表达能够得到促进,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）,并且对于淋巴细 胞表面 CD18 表达没有明显影响,差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。 结论：在人心脏微血管内皮细胞环境中,黄芪多糖分 子可以很好地提升细胞表面黏附分子的表达,有益于淋巴细胞的再循环,并且让淋巴细胞与内皮细胞的黏附作用得到促进, 是黄芪多糖分子起到免疫增强作用的重要表现。