人肝细胞癌转铁蛋白受体显像及靶向治疗研究

目的 探讨^131I-D2C5用于肿瘤受体成像和放射免疫治疗的价值。方法 人肝细胞癌SMMC-7721采用隧道包埋法植入Balb／c（-／-）裸鼠肝左叶,建立原位种植肿瘤模型。①12只荷瘤裸鼠随机分为两组,每组6只,分别经尾静脉注射^131I-D2C5、^131I-mIgG,放射剂量均为14．8MBq／只;SPECT采集^131I-D2C5和^131I-mIgG注射后6h、24h放射白显影图像;γ计数器检测体内放射性分布。②18只荷瘤裸鼠随机分为两组,每组9只,每周分别经腹腔注射^131I-D2C5 ,^131I-mIgG,连续6周;另外9只荷瘤裸鼠每周腹腔注射生理盐水200肛l作为对照组。8周后比较各组肿瘤体积,计算其生长抑制率,评估肿瘤坏死程度。结果 注射^131I-D2C5后6h时,裸鼠肝肿瘤部位显影,24h时肿瘤显影最清晰。注射^131I-mIgG后,肿瘤部位未见明显放射性浓聚。24h时^131I-D2C5组裸鼠体内肿瘤／血为6．6,肿瘤／肝为2．2,肿瘤／肌肉为20．8。静脉注射^131I-D2C5导向治疗较^131I-mIgG更显著抑制人肝细胞癌裸鼠模型中肿瘤的生长,促进肿瘤坏死。结论 ^131I-D2C5能与人肝细胞癌SMMC-7721高特异性、高亲和力地结合。在肝癌显像及生物靶向治疗中具有广泛的应用前景。     

抗肝癌抗原单链抗体在荷人肝癌裸鼠体内的放射免疫显像效果

目的 :研究13 1I标记抗肝癌鼠源性单链抗体 (mouse derivedscFv2 5 ,mscFv2 5 )在荷人肝癌裸鼠体内放射免疫显像效果 .方法 :采用高效碘标法制备13 1I mscFv2 5 ,2 0只荷人肝癌裸鼠分别通过静脉和ip13 1I mscFv2 5后 1,4 ,8,16 ,2 4 ,2 8h进行裸鼠的体内分布和放射免疫显像研究 .结果 :2 0只荷肝癌裸鼠在 6～ 8h全部明确显像 ,对照组鼠瘤区未出现放射性浓聚 . 13 1I标记的mscFv2 5的瘤 /肝比值 2 4h为(9.6 3± 0 .0 5 ) .结论 :13 1I mscFv能提高瘤 /肝比值 (T/NT) ,缩短显像时间 ,有可能成为肝癌诊断的一项重要技术     

生长抑素受体显像对胰腺癌诊断价值的实验研究

目的探讨99mTc-Sandostatin显像对胰腺癌的诊断价值及与肿瘤组织生长抑素受体(SSR)表达之间的关系。方法观察99mTc-Sandostatin在裸鼠体内的生物分布。对16只荷胰腺癌裸鼠模型行99mTc—Sandostatin显像,计算瘤体与对侧正常组织的放射性比值(T/N);用RT-PCR方法检测肿瘤组织的SSR1、SSR2、SSR5mRNA的表达。结果99mTc-Sandostatin在裸鼠血液内清除迅速。11只荷瘤鼠的肿瘤组织有较高的放射性浓聚,注射99mTc-Sandostatin后6hT/N达2.53±0.84;5只荷瘤鼠的肿瘤显像阴性,T/N为1.04±O.06。显像阳性的肿瘤组织的SSR1、SSR2、SSR5mRNA表达均明显高于显像阴性的肿瘤组织(均P<0.01)。显像阳性鼠T/N值与SSR2mR—NA水平成显著正相关。结论99mTc—Sandostatin生长抑素受体显像对胰腺肿瘤有较好的诊断价值;可在活体中评估胰腺肿瘤生长抑素受体亚型Ⅱ的表达水平,为今后受体介导靶向治疗胰腺癌提供依据。     

131I-D2C5在荷瘤裸鼠体内分布实验

目的 探讨131I-D2C5在荷瘤裸鼠体内的生物分布.方法 12只荷瘤裸鼠随机分为二组(每组各6只),鼠尾静脉注射131I-D2C5 或131I-mIgG 4 h、24 h、48 h后,采用γ计数器检测体内放射性分布.结果 静脉注射131I-D2C5后4 h,131I-D2C5主要分布在血、心、肝、肾、脾中,肿瘤在4h开始略有浓集.24 h后肿瘤组织内131I-D2C5聚集达到高峰,此时每克组织的放射性占注射剂量的百分比(%ID/g)达到4.12.131I-D2C5注射后4 h、24 h、48 h肿瘤/肌肉的放射性比值依次为3.96、7.63、8.21,而131I -mIgG依次为3.30、2.80、2.60,两者变化趋势差异显著.结论 131I-D2C5 能在裸鼠肿瘤组织内特异性聚集,有望用于肿瘤组织的受体显像和导向治疗.     

抗人胰腺癌细胞单克隆抗体SZ-121的放射免疫显像实验研究

目的研究^99mTc标记抗人胰腺癌单克隆抗体SZ-121在荷人胰腺癌裸鼠体内的显像及生物分布,探讨其用于胰腺癌早期诊断的可行性。方法采用皮下种植法建立荷人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,以2-亚氨基噻吩盐酸盐（2-IT）修饰SZ-121,^99mTc-葡庚糖酸钠（GH）配体交换法标记SZ-121,经裸鼠尾静脉注入^99mTc-SZ-121后1、4h对裸鼠进行γ显像,于24h测定荷瘤小鼠体内组织的放射性分布。结果γ显像及生物分布显示,^99mTc-SZ-121被静脉注入荷瘤鼠后1h,肿瘤即清晰显影,随时间延长趋于增浓,且瘤组织与非瘤组织的放射性比值（T/NT）也逐渐增高,肿瘤每克组织百分注射剂量率（%IDPg）均高于注射^99mTc-IgG的对照组（P〈0.05）。结论^99mTc-SZ-121具有活体内定位导向能力,显像时间短,可能是一种有前途的胰腺癌显像剂。     

硒镉对裸鼠人肝癌细胞的协同影响作用

目的 研究微量元素硒镉对裸鼠人肝癌细胞的协同影响作用。方法 将SMMC-7721人肝癌细胞接种于BALB／C—nu／nu裸鼠。成瘤后，分组分别每日腹腔注射同体积不同浓度的硒镉溶液。分别于第5、10、15、20天观察肿瘤的变化。结果 腹腔注射镉组抑瘤率减小并变为负值。且随着镉浓度的增加抑瘤率负值的绝对值逐渐加大；而腹腔注射硒组。抑瘤率增大，且硒的抑瘤率与硒浓度成正相关。结论 镉可促进肝癌细胞在体内的生长，而硒可明显抑制机体肝癌细胞的生长。     

~(99)Tc~m标记VEGFR-3高亲和融合多肽在荷人卵巢癌裸鼠体内的分布和显像研究

目的 研究~(99)Tc~m标记VEGFR-3高亲和融合肽(phage-SHSWHWLPNLRHYAS)在荷人卵巢癌裸鼠体内分布和放射免疫定位显像.方法 用NHS-MAG3为双功能鳌合剂,固相法合成多肽.~(99)Tc~m预亚锡直接标记法进行标记,纸层析法测定标记率.经尾静脉注射于荷瘤鼠体内,取不同时相进行SPECT显像,测定标记物在体内的分布情况并进行分析.结果 融合多肽的~(99)Tc~m标记率为95.27%,放射化学纯度为96%,放射性浓度24.6 MBq/ml.经鼠尾静脉注射后1 h,植瘤部位开始出现放射性浓集,肾脏、肝脏及膀胱组织也可见显像;注射后3 h肿瘤显像最清晰,每克组织注射百分剂量率(%ID/g)为(30.20±6.89).其余大部分脏器的T/NT值均达最高,最高为肌肉(13.13);注射后4 h肿瘤部位显像逐渐消退.对照组裸鼠的肿瘤部位始终未见显像.结论 筛选获得的VEGFR-3高亲和融合肽能够靶向荷瘤鼠体内肿瘤组织,实现肿瘤的靶向受体显像.     

碘-131标记重组人肿瘤坏死因子-α治疗荷人肝癌裸鼠的实验研究

目的 研究碘-131标记的重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)在荷人肝癌裸鼠的治疗应用.方法 通过131I-rhTNF-α和人肝癌SMMC-7721细胞的体外结合以检测131I-rhTNF-α的生物学活性;采用单细胞悬液接种法,制备荷人肝癌裸鼠模型;在一定的时间(30 min、1 h、6 h、12 h、24 h、48 h)将相同数量的荷人肝癌裸鼠分批处死,研究131I-rhTNF-α在荷人肝癌裸鼠体内的分布,获得131I-rhTNF-α在荷人肝癌裸鼠的主要浓聚组织及在肿瘤组织的浓聚特点;通过大体观察、活组织病理检查等考察131I-rhTNF-α对荷人肝癌裸鼠肿瘤生长的影响.结果 131I-rhTNF-α与SMMC-7721细胞体外结合实验得出,131I-rhTNF-α有很好的生物学活性,与SMMC-7721细胞的结合存在饱和,在一定范围内呈剂量依赖.131I-rhTNF-α在肿瘤组织的浓聚特点为,肿瘤组织可以浓聚较多的131I-rhTNF-α,且储留时间较长;给药后6 h肿瘤组织的放射性达到高峰,48 h仍旧保留有高峰时放射性的67.5%. 与阴性对照组(生理盐水组)相比,静脉或瘤内注射131I-rhTNF-α 2次(每次注射量相当于50 kg人体注射41.58 GBq,间隔为14 d)均有较强的肿瘤抑制作用,抑瘤率分别为68.9%和72.5%,二者的抑瘤作用与阳性对照组(阿霉素组)比较差异无统计学意义 (P>0.05),与131I(9.2%)、rhTNF-α(20.3%)和阴性对照组比较差异有统计学意义 (P<0.05).结论 131I-rhTNF-α在荷人肝癌裸鼠体内能有效抑制肿瘤生长.     

荷肝癌小鼠的99Tcm-HL91乏氧显像的实验研究

[目的] 探讨99Tcm-HL91(4,9-二氮-3,3,10,10-四甲基十二烷-2,11-二酮二肟)在荷肝癌H22的高淋巴道转移亚系(Hca-F)瘤细胞的BALB/c小鼠中的显像价值.[方法] 用1110MBq/2mL的99TcmO4淋洗液溶解HL91(1 mg),另用10 mL生理盐水溶解1 mg DTPA后,迅速取出50 μL注入上述HL91瓶中,室温下放置10 min后,标记率＞95%. 13只荷肝癌BALB/c小鼠麻醉后,经尾静脉注射37 MBq 99Tcm-HL91后,2 h 3只、4 h 5只、6 h 5只行SPECT平面显像,利用感兴趣区技术(ROI),分别计算不同时相的靶与非靶T/NT(肿瘤与头部、肿瘤与对侧、肿瘤与腹部)的比值. [结果] 99Tcm-HL91在各时相所有荷瘤小鼠的肿瘤均有摄取.注射后4 h放射性最高,随时间推移,6 h略有下降,其放射性下降较其他组织缓慢.HL91在肿瘤乏氧区域高于除腹部外的其他组织.注射后4 h肿瘤/头部、肿瘤/对侧和肿瘤/腹部的比值分别为4.26±2.29、3.40±0.91和0.41±0.19.肿瘤/头部和肿瘤/对侧比值在4、6 h均高于2 h(P＜0.01).随时间推移,T/NT逐渐增高.99Tcm-HL91在肝、肾中滞留最多.[结论] 99Tcm-HL91在荷肝癌BALB/c小鼠的肿瘤中摄取良好、清除缓慢.99Tcm-HL91注射后4 h进行显像可以得到较理想的T/NT比值.乏氧显像中T/NT比值是一个非常重要的指标.     

99mTC-5-FU免疫纳米粒在荷人胃癌SCID鼠模型体内的分布

目的 探索制备99mTc标记载5-FU抗VEGF单克隆抗体纳米粒(99mTc-5-FU-Ab-NPs)的方法,并观察99mTc-5-FU-Ab-NPs胃癌移植瘤模型体内的分布情况.方法 用改进的Schwarz方法对载5-FU抗VEGF单克隆抗体纳米粒进行99mTc标记,经SephadexG250柱分离纯化,用纸层析法测定标记率与放化纯度;ELISA法和免疫组化法测定标记物的免疫活性;经荷人胃癌鼠静脉注射99mTc-Ab-5-FU-NPs(实验组)及99mTc标记鼠源性多克隆IgG纳米粒(对照组),并于2、6 h行放射免疫ECT显像,用感兴趣区(ROI)技术获得实验组和对照组荷人胃癌鼠全身和肿瘤放射性计数及肿瘤与对侧正常组织(T/NT)的放射性比值;24 h显像后处死鼠,测定体内放射性分布,计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g)及T/NT比值.高效液相色谱法检测两组鼠肿瘤组织和血液中5-FU的浓度.结果 制备所得99mTc-5-FU-Ab-NPs标记率为90%～95%,抗体的活性在标记前后无明显下降;荷人胃癌鼠放射免疫显像结果提示静脉注射99mTc-5-FU-Ab-NPs 2 h后肿瘤已显影,随时间延长到6 h更清晰,2和6 h肿瘤组织ID%/g均显著高于对照组;6 h时实验组肿瘤组织ID%/g和肿瘤与血液的放射性比值较2 h时升高;同时,实验组肿瘤组织中5-FU浓度随着时间延长呈持续升高且与对照组5-FU浓度相比有显著性差别.结论 本研究制备所得99mTc-5-FU-Ab-NPs能较好地满足放射免疫显像的要求;抗VEGF单克隆抗体的免疫导向作用可靠,注射后6 h,99mTc-5-FU-Ab-NPs在肿瘤组织中有相对较高的特异性浓聚.     

谷氨酸受体辅助亚单位的研究进展

谷氨酸受体是中枢神经系统重要的兴奋性氨基酸受体,参与调节学习记忆、突触可塑性等生理功能。新近发现的谷氨酸受体辅助亚单位是一系列膜蛋白,能够与突触后膜谷氨酸受体相互作用,具有调节突触后膜谷氨酸受体的转运与定位等生物学功能,这些蛋白的发现与研究,揭示了突触传递的复杂性。     

23例鼻咽癌雌、孕激素和雄激素受体检测的初步研究

目的 探讨雌孕激素受体和雄激素受体与鼻咽癌的关系。方法 对23例鼻咽癌蜡块标本用免疫组化SP法进行测定，DAB显色，在光镜下计算阳性细胞数。结果 ER阳性率为65．2％(15／23)，PR阳性率为26．1％(6／23)，AR阳性率为56．5％(13／23)。鼻咽癌ER阳性中组织胞核含量高于胞浆11例，胞浆含量高于胞核仅4例；PR阳性中组织胞核含量高于胞浆和胞浆含量高于胞核相同，都是3例；鼻咽癌AB阳性中组织胞核含量高于胞浆10例，胞浆含量高于胞核仅3例。结论 ER鼻咽癌具在高表达性，定位于鼻咽癌组织中的细胞核；ER、PR的阳性情况与年龄、性别无关。     

熟地黄对雌性小鼠老化进程中雌、孕激素受体含量的上调作用

目的 :探讨熟地黄对雌性小鼠老化进程中血清雌激素 (E2 )浓度、脾细胞雌激素受体 (ER)含量、成骨细胞孕激素受体(PR)含量的调节作用。方法 :应用放射免疫法、放射配体结合分析法技术 ,研究熟地黄对雌性小鼠老化进程中上述指标的调节作用。结果 :对照组随着老化进程的发展 ,血清中E2 浓度、脾细胞ER含量和成骨细胞PR含量均明显下降 ,并随老化程度呈阶段性变化 ;熟地黄组对应指标也有所下降 ,与对照组相比 ,PR、ER含量的下降速度明显减慢 (P <0 .0 1)。结论 :熟地黄有抵抗老化进程中血清E2 浓度、脾细胞ER含量和成骨细胞PR含量下降这种生理性变化的功能 ,即有抗衰老作用。     

绝经期妇女子宫内膜息肉中激素受体的表达及临床意义

目的通过评价雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的表达来探讨绝经后妇女子宫内膜息肉的可能发生机制。方法对16例正常绝经后妇女的子宫内膜及35例并发子宫内膜息肉的绝经后妇女的内膜息肉及其邻近内膜行ER、PR免疫组化测定并行半定量分析。结果各组中ER的表达无明显差异(P>0.05),息肉组腺体和间质内PR的表达明显低于其他两组的表达(P<0.05)。结论绝经后妇女PR的异常表达在子宫内膜息肉的发生中起重要作用。     

雄激素受体、孕激素受体在脑膜瘤中的表达及其意义

目的了解雄激素受体(AR)、孕激素受体(PR)在脑膜瘤组织中的表达情况及其与肿瘤良恶性的关系.方法采用免疫组织化学二步法对57例脑膜瘤切片进行AR、PR的检测.结果(1)AR的表达阳性率在全部病例中为50.8%(29/57),良性组为44.4%(20/45),不典型组为60.10%(3/5),恶性组为85.7%(6/7),3组间阳性率的差别有显著性意义(P<0.05).(2)PR表达阳性率在全部病例中为67.9%(38/57),良性组为71.1%(32/45),不典型组为60.10%(3/5),恶性组为42.9%(3/7),3组之间的差别有非常显著性意义(P<0.01).结论PR、AR在良性、不典型性和恶性脑膜瘤中的表达显著不同,检测脑膜瘤中AR、PR的表达可用于判断肿瘤的良恶性,并可能预测其预后.     

大鼠屏状核神经元中雄激素与雌激素受体的表达

目的:研究雄激素受体(androgenreceptor,AR)与雌激素受体(estrogenreceptor,ER)在大鼠屏状核神经元中的表达及生物学意义。方法:取80只性成熟期Wistar大鼠,雌雄各半。随机分为A、B、C、D、E、F、G、H、I、J组。用免疫组织化学染色方法检测AR、ER在屏状核神经元中的表达,四格表确切概率法行χ2检验分析。结果:AR在大鼠屏状核神经元中的阳性表达率,在D组(去势雄性雄激素干预)与F组(去势雄性)、H组(正常雄性雄激素干预)与J组(正常雄性)、F组与J组、G组(正常雌性雄激素干预)与I组(正常雌性)、F组与E组(去势雌性)之间差异有统计学意义(P<0.05);余各组间差异无统计学意义(P>0.05)。ER在大鼠屏状核神经元中的阳性表达率,在E组与I组、E组与A组(去势雌性雌激素干预)、G组与I组之间差异有统计学意义(P<0.05);余各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)鼠脑屏状核神经元中AR、ER均有表达;(2)大鼠屏状核为雌、雄激素的靶组织之一,雌、雄激素可能通过其受体作用于屏状核神经元而发挥其生物学效应;(3)雌、雄激素对ER、AR表达的影响在雌、雄两性可能有不同之处;(4)屏状核可能在对性冲动的唤醒及性行为中起着重要的内分泌作用。     

乳房外Paget病三种激素受体表达的研究

目的：研究雄激素受体（AR）、雌激素受体（ER）以及孕酮受体（PR）在乳房外Paget病（EMPD）中的表达，探讨性激素对EMPD 的影响。方法：用免疫组化方法定性检测AR、ER及PR在21例EMPD组织标本中的表达。结果：21例EMPD中16例AR表达阳性，阳性率高达75%，所有病例均未检测到ER、PR。结论：雄激素对EMPD的发生、发展起重要作用；无法手术而AR表达阳性的EMPD患者中可试用抗雄激素治疗。     

雌孕激素受体在绝经期子宫内膜息肉中的表达及其对治疗方式的启示

目的 探讨绝经后妇女子宫内膜息肉的治疗方法.方法 绝经期子宫内膜息肉患者71例,均接受宫腔镜下经宫颈息肉切除术(TCRP)治疗,术后未应用其他治疗.术后病理均诊断为子宫内膜息肉.采用免疫组化法检测蜡块组织中的雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的表达.判定标准:计数10个高倍镜(×400)视野下的有黄染颗粒细胞个数,0个为阴性,1%～10%为( ),11%～50%为( ),＞50%为( ).结果 ER和PR在患者子宫内膜中的表达水平均较低,有74.6%和70.4%的患者无ER和PR的表达.而在绝经期子宫内膜息肉中ER和PR的表达水平较高,表达率分别为77.5%和69.0%,与子宫内膜比较有显著性差异(P值分别为0.019和0.001).在4例曾经应用激素替代治疗的患者中,3例绝经时间＞5年,内膜中ER、PR均为阴性;另1例绝经2年,内膜中受体表达ER( ),PR( ),但无临床症状.结论 绝经后,ER和PR的表达水平在正常子宫内膜与子宫内膜息肉中不同,提示绝经期子宫内膜息肉的发生可能同时与雌、孕激素受体水平有关,治疗时可以考虑单纯手术去除病灶.     

核受体激动剂对人卵巢颗粒细胞和乳腺癌MCF-7细胞芳香化酶的调节作用

目的：探讨各种核受体包括过氧化酶体增生物激活受体γ(PPARγ)和α(PPARα)、维甲酸受体(RAR)、维甲类X受体(RXR)、维生素D受体(VDR)、甲状腺素受体(TR)和糖皮质激素受体(GR)的激动剂对人卵巢颗粒细胞和乳腺癌MCF—7细胞芳香化酶活性的调节作用。方法：测定人卵巢颗粒细胞和MCF—7细胞在上述各种核受体激动剂处理前后芳香化酶活性的变化和细胞色素P450芳香化酶(P450arom)mRNA的表达水平。结果：(1)PPARγ和RXR激动剂均能显著抑制人卵巢颗粒细胞芳香化酶活性，两者结合使用抑制作用更进一步增强，并且伴有P450arom mRNA水平下降；(2)RAR和RXR激动剂合用能显著刺激乳腺癌MCF—7细胞芳香化酶活性，并使P450arom mRNA表达水平升高。结论：人卵巢颗粒细胞和乳腺癌MCF—7细胞芳香化酶活性受不同的核受体激动剂调节。