微小RNA Let-7/Lin28调节环与鼻咽癌血管新生的关系研究

目的  探讨微小RNA Let-7/Lin28调节环与鼻咽癌促血管生成因子的关系,并研究这一关系的作用机制。方法  选取2012年4月-2014年在湖北省襄阳市中心医院耳鼻喉科就诊的鼻咽癌患者54例。另选取同期40例慢性鼻炎患者和32例健康者作为对照组。采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测组织中Lin28A、Lin28B及Let-7a miRNA相对表达量,ELISA检测血清中血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维生长因子（bFGF）及内皮抑素（ES）水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测H-Ras/PTEN/PI3K/Akt通路蛋白表达情况,分析miRNA Let-7a/Lin28调节环与血管新生因子的关系。结果  RT-PCR检测发现鼻咽癌患者Lin28A miRNA和Lin28B miRNA相对表达量均高于慢性鼻炎组和健康对照组（P <0.05）,而Let-7a miRNA的相对表达量低于上述两组（P <0.05）;ELISA检测结果发现鼻咽癌患者组VEGF、bGFG、ES表达量均高于慢性鼻炎组和健康对照组（P <0.05）;Western blot检测发现鼻咽癌患者组病理组织中H-Ras、p-PI3K及p-Akt表达量高于慢性鼻炎患者组和健康对照组（P <0.05）,而p-PTEN表达量低于上述两组（P <0.05）;相关性分析发现,Lin28A、Lin28B miRNA与VEGF、bFGF、H-Ras、p-PI3K及p-Akt呈正相关（P <0.05）,Let-7a miRNA与VEGF、bFGF、H-Ras、p-PI3K及p-Akt呈负相关（P <0.05）。结论  miRNA Lin28/Let-7调节环与血管新生有定的关联性,而这一关联性可能与激活Ras/PI3K/PTEN/Akt通路有关。

     

Lin28B蛋白在人肺癌中表达及临床意义

目的:探讨Lin28B蛋白在人肺癌表达及其与临床病理特征、3年生存率的关系。方法:免疫组织化学检测了103例肺癌组织和40例人癌旁组织的Lin28B蛋白表达情况。结果:Lin28B蛋白在人肺癌组织的阳性表达率高于癌旁组织(46.60%vs20.00%),两组表达差异性有统计学意义(P<0.05);Lin28B蛋白表达与组织分化程度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期有关(P<0.05);肺癌中Lin28B阳性表达组的3年生存率高于阴性表达组(P<0.05)。结论:Lin28B蛋白在肺癌的发生发展中可能发挥了作用并具有一定预后评估价值。     

Lin28与肝癌细胞紫杉醇耐药关系的研究

[目的]Lin28是一种重编程因子和保守的RNA结合蛋白,存在Lin28A和Lin28B两种同源基因,两者结构和功能类似。本研究旨在探讨Lin28与肝癌细胞对紫杉醇耐药的关系。[方法]MTT法检测紫杉醇对HepG2、Hep3B、SMMC-7721肝癌细胞的IC50;用荧光定量PCR法（简称RTPCR）在RNA水平检测Lin28A和Lin28B在Hep3B、HepG2、SMMC-7721中的表达,蛋白质印迹法分析Lin28A和Lin28B蛋白在Hep3B、HepG2、SMMC-7721细胞中的表达情况。[结果]Hep3B、HepG2、SMMC-7721细胞株对紫杉醇的IC50分别为：Hep3B为0.194μM、HepG2为19.54μM、SMMC-7721为0.444μM。HepG2、SMMC-7721细胞株中的Lin28A基因表达量分别是Hep3B的5.06、3.10倍;HepG2、SMMC-7721细胞株中的Lin28B基因表达量分别是Hep3B的7.16、3.16倍。Hep3B、HepG2、SMMC-7721细胞株中Lin28A和Lin28B蛋白的表达量与从荧光定量数据显示的趋势一致。[结论]Lin28与肝癌细胞对紫杉醇耐药密切相关,肝癌细胞中Lin28表达与肝癌细胞对紫杉醇的耐药性成正比,暗示Lin28表达可能是肝癌细胞紫杉醇耐药的潜在机制并有望成为逆转肝癌紫杉醇耐药的靶点。     

血管内皮生长因子与乳腺癌淋巴结转移及预后的关系

目的探讨血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEG-F)与乳腺癌淋巴结转移和预后的关系.方法应用链霉菌抗生物素蛋白--过氧化酶免疫组化染色法检测93例乳腺癌组织的VEGF表达.结果乳腺癌的肿瘤大小与VEGF表达呈密切正相关(P＜0.01).VEGF阳性者淋巴结转移率和术后肿瘤复发转移率较VEGF阴性者明显增高(P＜0.05～0.01).VEGF阳性组的术后无瘤生存率和总生存率显著低于VEGF阴性组(P＜0.01).结论VEGF表达阳性对乳腺癌的淋巴结转移和术后肿瘤复发转移有促进作用,VEGF对乳腺癌患者的预后有一定的临床预测价值.     

血管内皮生长因子A与肿瘤淋巴管新生的研究进展

肿瘤中淋巴管新生因子的过量表达会诱导更多的新生淋巴管而促进肿瘤的转移。淋巴管新生是影响肿瘤转移的一个重要因素。VEGF-A是VEGF家族中的一员,研究表明VEGF-A不仅能促进肿瘤淋巴管生成使肿瘤发生淋巴转移,且能够在原发肿瘤在发生转移之前,产生淋巴管生成因子使信号转导到前哨淋巴结。VEGF-A促进淋巴结转移已成为继血管转移研究后的又一热点,在此就VEGF-A与肿瘤淋巴管新生的研究近况予以综述。     

小鼠Lin28基因的克隆及原核表达

目的 探讨获取小鼠Lin28蛋白的方法.方法 提取8.5 d ICR小鼠胚胎mRNA后反转录为cDNA序列,用一对两端引入特定酶切位点(Nco Ⅰ及Xho Ⅰ)引物,从该cDNA中扩增出Lin28基因编码区序列;将获得的Lin28基因编码区序列克隆到pMD18-T载体上.对质粒双酶切回收其中Lin28基因片段,与pET-30a(+)载体相连接并转化Rosetta( DE3)型大肠杆菌,用IPTG诱导表达,最后采用SDS-PAGE对表达结果进行分析.结果 对所克隆的Lin28蛋白编码区的DNA序列分析表明,Lin28 CDS区包括终止密码子在内为630 bp,与参照DNA( NM_145833)相比同源性为99.37％,与参照氨基酸序列相比同源性为100％;在IPTG诱导下pET-30a(+)-Lin28重组质粒可表达与预期相符的约为27.5×103的蛋白质.结论 利用克隆的小鼠Lin28基因,采用原核表达方法,成功获得小鼠Lin28蛋白,为进一步开展以重组蛋白诱导体细胞重编程研究奠定基础.     

脊柱转移癌新生血管形成与预后关系

目的 :探讨新生血管形成和脊柱转移癌预后之间的关系。方法 :应用免疫组化技术 ,检测 77例人脊柱转移癌组织血管内皮细胞生长因子 (vascular endothelial cell growth factor,VEGF)、VEGF受体 1(flm s- like tyrosine kinase,FL T)、VEGF受体 2 (kinase insertdomain containing receptor,FL K- 1)表达和微血管密度 (microvessels density,MVD)计数。采用 Spearm an等级相关判断 VEGF、FL K- 1、FL T表达之间及与 MVD计数之间的关系 ,以 COX回归分析判别 VEGF、FL K- 1、FL T表达与预后的关系。 结果 :VEGF、FL T、FL K- 1主要表达于转移癌细胞。新生血管形成多位于转移癌的侵袭性边缘。MVD计数 4 .2～ 5 6 .4 (2 1.6 3± 10 .95 )个。FL K- 1、FL T、VEGF表达和 MVD计数之间均呈显著正相关 (P<0 .0 1)。平均随访时间 15 .6个月(5 .2～ 36个月 ) ,3年生存率为 6 .98%。COX回归分析表明 VEGF、FL K- 1表达及 MVD计数为影响脊柱转移癌患者预后的重要因素 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1) ,其中 VEGF表达上调对患者生存的影响最大。 结论 :新生血管生成对脊柱转移癌患者预后有重要影响     

乳腺癌VEGF的表达及其与转移的关系

目的：探讨血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）的表达与也腺癌转移的关系及其作用。方法：应用免疫组织化学方法，比较伴有和不伴有淋巴结转移的乳腺癌中ＶＥＧＦ的表达情况。结果：有转移的乳腺癌和无转移的乳腺癌组织中均呈阳性表达，且有转移乳腺癌表达程度大于无转移乳腺癌（Ｐ〈０．０５）。结论：ＶＥＧＦ与乳腺癌转移密切相关，ＶＥＧＦ表达升高能促进肿瘤     

血管粘附因子—1在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌转移的关系

为探讨血管粘附因子－1（VCAM－1）在乳腺组织中的表达及其与乳腺癌转移的关系。采用免疫组化的方法（SABC法）检测50例乳腺癌标本VCAM－1的表达情况。结果显示：VCAM－1的表达与乳腺癌转移及术后早期复发存关。乳腺癌淋巴结转移组和无淋巴结转移组VCAM－1的阳性表达率分别为70．00％和31．75％,2组间差异有极显著性（P＜0．01）。提示检测VCAM－1的表达可作为乳腺癌的预后指标。有助于对术后患者选择放、化疗提供依据。     

血管内皮生长因子与乳腺癌的生长和转移

肿瘤的生长和转移依赖于血管生长[1] 。血管生长因子直接或间接地刺激宿主的免疫细胞或基质细胞 ,促进内皮细胞的增殖与迁移 ,最终导致血管生长。许多生长因子都可以刺激血管的生长 ,尤其是血管内皮生长因子[2 ] ,但目前肿瘤中支持血管生长的机制仍不太清楚。作为最重要的促血管生长因子 ,血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)与肿瘤的关系也正是建立在ＶＥＧＦ的促血管新生作用的基础上。自从1989年发现了ＶＥＧＦ ,国内外实验室对ＶＥＧＦ在肿瘤细胞中的表达开展了广泛的研究 ,因而成为近年来肿瘤生长和转移研究热点。近 30年来肿瘤领域研究的重大…     

缺氧微环境中HIP68/RAP1B信号通路对乳腺癌侵袭转移的作用

目的 探讨HIP68/RAP1B信号通路对乳腺癌侵袭转移的作用机制。方法 选取西安交通大学第一附属医院2012—2013年乳腺癌组织样本共73例,通过免疫组化标本及临床资料分析HIP68/RAP1B的表达情况及其与病理特征的关系。将体外培养的乳腺癌细胞系（MCF-7和MDA-MB-231）构建成缺氧乳腺癌细胞,分别测定缺氧乳腺癌细胞系（MCF-7和MDA-MB-231）及正常乳腺上皮细胞系SK-BR-3中HIP68/RAP1B 蛋白表达情况。构建高/低表达HIP68的乳腺癌细胞,观察其对RAP1B蛋白的影响及对乳腺癌细胞生物学行为的影响;沉默/过表达乳腺癌细胞RAP1B,观察其对HIP68蛋白的影响及对细胞生物学行为的影响;免疫共沉淀检测HIP68/RAP1B的结合位点。结果 HIP68和〖JP〗RAP1B蛋白在乳腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织（P<0.05）;HIP68表达与TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05),RAP1B的表达与TNM分期、淋巴结转移、ER、RR状态相关(P<0.05);HIP68表达与RAP1B表达呈正相关(r=0.427,P<0.05)。HIP68/RAP1B在缺氧乳腺癌系细胞中高表达;RAP1B蛋白的表达与HIP68表达呈正相关并且高表达HIP68/RAP1B促进细胞侵袭转移,低表达HIP68/RAP1B抑制细胞侵袭转移; HIP68蛋白不因RAP1B蛋白的高/低表达而改变,但是高表达RAP1B促进乳腺癌细胞增殖及侵袭转移;免疫共沉淀结果显示RAP1B可能为HIP68基因的     

乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)与宫颈癌变临床病理参数的关系研究

目的探讨乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)与宫颈癌变临床病理参数的关系。方法选取2017年4月22日～2018年4月22日期间我院收治的100例具有完整病理资料的宫颈疾病患者为实验对象,其中29例为轻度慢性宫颈炎,11例为CINⅠ级,10例为CINⅡ～Ⅲ级,50例为宫颈癌,对所有患者均进行BRMS1基因检测。结果从宫颈组织中的BRMS1表达角度分析,CINⅡ～Ⅲ期和CINⅠ期患者表达率无差异性(P0.05),宫颈癌、CINⅡ～Ⅲ期、CINⅠ期患者与慢性宫颈炎患者相比,BRMS1蛋白阳性表达率下降(P0.05)。从BRMS1表达的临床病理特征角度分析,不同浸润程度、FIGO分期、有无淋巴转移患者BRMS1表达阳性率存在明显差异(P0.05),不同组织学分型、分化程度、肿瘤大小、年龄患者的BRMS1表达阳性率差异均无统计学意义(P0.05)。结论宫颈癌变与BRMS1表达可呈负相关性,当BRMS1蛋白表达下降时,则意味着癌细胞处于转移、浸润、发展趋势。     

Lin28基因功能的研究进展

Lin28是一种高度保守的RNA结合蛋白,可以与miRNA家族中let-7家族的前体RNA的终末环相结合,并阻断let-7的成熟过程。Lin28/let-7通路参与了干细胞的功能及肿瘤的发生。将Lin28、OCT4、SOX2、NANOG转入成人的体细胞中,可以将其逆分化为多能干细胞。Lin28/Lin28B高表达的肿瘤多呈现低分化,预后较差。     

乳腺癌术后复发转移的因素分析

目的　探讨乳腺癌术后复发转移的相关因素 ,比较不同疗法的疗效。方法　对 4 84例乳腺癌术后复发转移的病例作回顾性分析 ,应用卡方检验比较病期、原发灶大小、淋巴结转移、手术方式、综合治疗等因素对复发转移的影响。结果　复发转移发生于术后 3年内占 85 .5 5 % ,3年后占 14 .5 %。病期越晚复发转移率越高 ,Ⅰ期6 0 .0 % ,Ⅱ期 82 .9% ,Ⅲ期 92 .6 % ,Ⅳ期 10 0 %。病灶 >5cm(96 .6 % )复发转移率明显高于 <2cm(6 9.9% ) ;淋巴结转移 (80 .4 % - 10 0 % )明显高于淋巴结无转移者 (48.1% ) ;单纯手术治疗 (98.5 % )明显高于手术 +放疗 +化疗组(77.7% )。结论　乳腺癌术后的复发转移多发生于术后 3年内。术后定期随访 ,对复发转移者也应做到“三早” ,进行综合治疗 ,可提高疗效     

Rab5A与CXCR4在乳腺癌组织中的表达及其相关性

目的探讨乳腺癌组织中Rab5A与CXCR4蛋白的表达及其相关性.方法应用免疫组织化学S-P法检测106例术后乳腺癌标本、30例乳腺良性肿瘤标本Rab5A与CXCR4蛋白的表达.结果 Rab5A与CXCR4蛋白在乳腺癌组的表达率显著高于良性肿瘤组;Rab5A和CXCR4蛋白在有淋巴结转移的乳腺癌组中的表达率显著高于在无淋巴结转移组中的表达率,并且二者的表达程度均与淋巴结状态相关,二者的表达程度增强,发生淋巴结转移的概率增加.结论 Rab5A和CXCR4蛋白在乳腺癌的发生发展、侵袭转移中可能起到协同作用.两者联合检测对于早期诊断乳腺癌及判断其预后有重要的临床意义.     

miR-10b与乳腺癌转移相关性的研究进展

乳腺癌在女性癌症死亡中占有重要地位,侵袭转移是目前乳腺癌治疗的一大难点.近年来,多种miRNAs已被证明涉及乳腺癌的发生发展.其中miR- 10b在转移性乳腺癌中高度表达,通过TwistmiR- 10b-HOXD 10-RhoC信号通路在乳腺癌的侵袭和远处转移中发挥重要作用,这使它成为针对乳腺癌转移治疗的新靶点.     

BRMS1 mRNA在乳腺癌中的表达与腋淋巴结转移的关系

目的:探讨乳腺癌组织中乳腺癌转移抑制基因(breastcancermetastasis-suppressor1,BRMS1)mRNA表达水平与腋淋巴结转移之间的关系。方法:根据腋淋巴结转移状况,将58例乳腺癌标本分为转移组(31例)和非转移组(27例);以β-actin为内参照,用半定量RT-PCR方法检测58例乳腺癌组织中BRMS1mRNA的表达。结果:BRMS1mRNA在乳腺癌组织中的表达为0.397±0.023;BRMS1mRNA在乳腺癌腋淋巴结转移组和非转移组中的表达分别为0.327±0.038、0.475±0.041,转移组BRMS1mRNA的表达水平显著低于非转移组(P<0.05)。结论:BRMS1mRNA在乳腺癌组织中的表达水平与腋淋巴结转移呈负相关,而与病理类型、肿瘤大小无相关性,BRMS1mRNA成为判断乳腺癌患者腋淋巴结转移的指标。     

食管癌血管生成与淋巴结转移的关系

目的 探讨食管因管生成与淋巴结转移的关系,方法 采用免疫组织化学的方法检测了1994－1995年手术切除的50例食管癌病人石蜡标本中微血管密度和血管内皮生长因子及受体蛋白的表达。其中有食管旁淋巴结转移者18例,胃左动脉旁淋巴结转移15例。光镜下行MVD、VEGF、Flt、KDR蛋白表达细胞的计数。结果 食管旁和胃左动脉旁淋巴结转移组的微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）、血管同皮生长因子受体（Flt、KDR）蛋白表达均高于未转移组,结论 食管癌中MVD、VEGF、Flt、KDR蛋白表达与肿瘤转移行为密切相关,有可能作为判定肿瘤生物学行为、转移潜能及预后的指标。