α7烟碱型乙酰胆碱受体基因敲除对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝脏炎症的影响研究

目的 探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7nAChR）基因敲除对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）小鼠肝脏炎症的影响。方法 2014年6月-2015年5月,选取40只SPF级雄性6周龄C57BL/6J小鼠和40只SPF级雄性6周龄α7nAChR基因敲除小鼠,采用随机数字表法分为C57普通饲料组、C57高脂高糖组、基因敲除普通饲料组、基因敲除高脂高糖组,每组20只。C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组小鼠给予普通饲料喂养,C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠给予高脂饲料喂养同时饮用20%果糖饮用水,喂养24周,建立NASH小鼠模型;小鼠饲养期间定期称量体质量,并且尾静脉取血检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）水平。21周时 C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠给予400 μg/kg烟碱腹腔注射;C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组小鼠给予等量0.9%氯化钠溶液腹腔注射,均1次/d,共3周。24周后处死小鼠,眼球取血,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清炎性细胞因子白介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,观察小鼠肝脏外观变化及肝脏湿重,肝脏病理切片染色观察炎症程度和脂肪变性情况。结果 第12、15、18、21、24周时,C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠体质量较C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组升高（P＜0.05）;第12、15、18、21、24周时,基因敲除高脂高糖组小鼠体质量较C57高脂高糖组升高（P＜0.05）。C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠第8、16、24周时血清ALT、AST、TG、TC水平,第24周时血清IL-6、TNF-α水平、肝脏湿重较C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组升高（P＜0.05）;基因敲除高脂高糖组小鼠第8、16、24周时血清ALT、AST水平,第16、24周时血清TG、TC水平,第24周时血清IL-6、TNF-α水平、肝脏湿重较C57高脂高糖组升高（P＜0.05）。病理切片苏木素-伊红（HE）、油红染色结果显示：C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组小鼠炎症程度和脂肪变性均不明显,C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠在第8周开始出现轻微炎症和脂肪变性,以小脂滴为主,到第16、24周,炎症和脂肪变性逐渐加重,脂肪变性以中、大滴为主,基因敲除高脂高糖组小鼠肝脏组织炎症程度和脂肪变性均明显重于C57高脂高糖组小鼠。结论 α7nAChR基因敲除能够明显加重NASH小鼠的肝脏炎症。     

幼兔非酒精性脂肪肝炎模型的建立

目的：以高脂饲料喂养的幼兔模型模拟青春期前肥胖儿童非酒精性脂肪肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）的形成，评价脂联素等炎症相关因子在NASH形成中的作用。方法：38只新西兰大耳兔根据饮食及喂养时间的不同分为：对照组、模型A组和模型B组。实验结束后，取肝脏进行HE染色、组织学诊断，取血清测血生化、脂联素、IL-6、IL-10、TNF-α浓度。结果：HE染色显示模型组大耳兔全部符合NASH病理特征。与对照组比较，模型组血清ALT、AST、TG、TC显著升高（P〈0．01），脂联素、IL-10下降（P〈0．05），两个模型组之间没有差异。前炎症因子IL-6、TNFα在模型B组明显高于模型A组和对照组，但是在模型A组与对照组之间没有差别。多元回归分析发现，肝细胞脂肪变性和TC是血清脂联素的两个独立决定因素，两者系数（8）分别为-0．97和-1．3，P值分别为0．038、0．006；常数项系数为27．89，P=0．000，决定系数（R^2）为0．294。结论：本实验所建立的幼兔NASH模型能较好地反映疾病形成的关键；血清脂联素能在一定程度上反映幼兔肝脏脂肪变性的严重度。     

游泳训练对胰岛素抵抗大鼠肝脏抵抗素mRNA表达的影响

目的观察游泳训练对胰岛素抵抗大鼠肝脏抵抗素mRNA表达的影响,初步探讨游泳训练改善胰岛素抵抗的作用机制。方法 30只8周龄正常雄性大鼠随机分为正常饮食对照组（n=9）和高脂高糖喂养造模组（n=21）。喂养6周后,将造模成功的18只胰岛素抵抗大鼠再随机分为模型组（n=9）：继续予高脂高糖饮食;运动组（n=9）：高脂高糖喂养加游泳训练。造模6周和干预6周后采血清全自动生化分析仪测空腹血糖（FPG）,放射免疫法测各组小鼠空腹胰岛素（FIN）,计算胰岛素敏感指数（ISI）。干预6周后留取肝脏组织RT-PCR法检测抵抗素mRNA表达水平。结果高脂高糖饲养6周后,造模组的FPG（6.65±0.98）、FIN（31.04±6.57）均高于对照组,其ISI低于对照组（P〈0.01）。6周干预后,与模型组比较,运动组肝脏组织抵抗素mRNA表达均降低（P〈0.05）,ISI升高（P〈0.05）。结论游泳训练改善胰岛素抵抗可能与下调抵抗素的表达有关。     

不同血糖状态下的妊娠小鼠脂代谢特点与肝脏病理学特征

目的通过高脂高糖诱导妊娠糖尿病（GDM）小鼠模型,探讨不同血糖状态下的妊娠小鼠脂代谢特点及其肝脏的病理学特征。方法将C57BL/6J雌鼠随机分为普通饮食组和高脂高糖饮食组,确定受孕后,普通饮食组继续给予普通饲料喂养,高脂高糖饮食组给予高脂高糖饲料喂养。检测孕期体重情况、空腹血糖、空腹胰岛素,计算胰岛素抵抗指数,同时检测甘油三酯、胆固醇和游离脂肪酸,并且进行肝脏组织病理学观察。结果高脂高糖饮食喂养孕鼠组空腹血糖水平明显升高且高血糖水平较稳定,体重增加明显,妊娠晚期胰岛素水平及胰岛素抵抗指数增加,动物模型稳定。高脂高糖饮食孕鼠组小鼠血甘油三酯、总胆固醇和游离脂肪酸较高脂高糖饮食未孕组小鼠、普通饮食未孕组小鼠及普通饮食孕鼠组小鼠明显增高。肝脏组织病理显示,高脂高糖饮食孕鼠组肝板排列不整齐,肝细胞胞浆内可见大小不等的脂肪空泡。结论运用高脂高糖饮食诱导C57BL/6J小鼠能够模拟人类GDM发病特点在不同饲养方式和不同学堂状态下的妊娠小鼠脂质代谢紊乱不一致,GDM小鼠其血脂代谢紊乱程度严重,并且可以引起明显的肝脏病理学变化。     

大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝郁脾虚证模型的建立

目的采用高糖高脂饲料结合慢性情志刺激+饮食不节的方法,建立符合中医证候特点的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝郁脾虚证大鼠模型。方法将40只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、NASH模型组(NASH组)、肝郁脾虚证模型组(GYPX组)和NASH肝郁脾虚证病证模型组(N+G组)。正常对照组予以基础饲料常规喂养,NASH组给予高糖高脂饲料喂养,GYPX组予以基础饲料喂养并采用慢性情志刺激+饮食不节进行造模,N+G组采用高糖高脂饲料结合慢性情志刺激+饮食不节进行造模。造模14周后,观察各组大鼠行为学改变情况,肝组织内甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC),血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),海马组织去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)含量,尿D-木糖排泄率及肝脏HE染色变化和非酒精性脂肪性肝病活动度积分(NAS)情况。结果GYPX组和N+G组大鼠的症状和体征均符合中医肝郁脾虚证的证候表现,NASH组仅有毛发不泽的表现。与正常对照组比较,GYPX组和N+G组大鼠海马组织5-HT和NE含量、尿D-木糖排泄率显著降低(P0.05,P0.01);NASH组和N+G组大鼠血清ALT和肝组织TG、TC含量明显增高(P0.05,P0.01)。NASH组和N+G组大鼠肝脏分别呈大泡性中、重度脂肪性肝炎改变,N+G组可见肝细胞点状坏死及明显炎细胞浸润。GYPX组可见部分肝细胞水肿,未见明显脂变和炎性浸润。与正常对照组比较,NASH组和N+G组大鼠NAS评分显著升高(P0.01)。结论高糖高脂饲料结合慢性情志刺激+饮食不节的方法所建立的大鼠NASH肝郁脾虚证病证模型符合人类NASH病理特点和中医肝郁脾虚证证候特点,是较为理想的NASH肝郁脾虚证模型。     

高脂饮食诱导C57BL/6J小鼠肥胖及减重手术模型的建立

 目的 建立饮食诱导的肥胖小鼠模型,研究建立肥胖小鼠胃袖状切除术模型的可行性及有效性。方法 将40只4周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠随机分为普通饮食组（n=20）和高脂饮食组（n=20）,均喂养20周。20周后随机分为4个亚组：普通饮食假手术组,普通饮食手术组,高脂饮食假手术组,高脂饮食手术组。定期测量体重及空腹血糖,喂养20周后检测葡萄糖耐量、血脂水平及肝组织病理学。结果 高脂饮食喂养4周后,高脂饮食组小鼠体重即开始显著高于普通饮食小鼠（P < 0.05）。喂养20周后,与普通饮食小鼠相比,高脂饮食小鼠平均体重[（42.71±2.30）g vs.（32.23±1.73）g]、血糖[（8.82±0.51）mmol/L vs.（6.74±0.31）mmol/L]及血脂水平[血清总胆固醇：（4.40±0.57）mmol/L vs.（2.31±0.35）mmol/L;血清三酰甘油：（2.26±0.25）mmol/L vs.（1.11±0.24）mmol/L]均明显升高（P均 < 0.01）。高脂饮食及普通饮食假手术组小鼠存活率为100%,高脂饮食手术组存活率为70%（7/10）,普通饮食手术组存活率为80%（8/10）。术后第1周,各组小鼠体重均显著下降（P < 0.01）;术后第4周,高脂饮食及普通饮食手术组小鼠较术前体重下降约20%;术后第3周,高脂饮食及普通饮食假手术组小鼠体重恢复至术前水平。结论 高脂饮食喂养20周可诱导肥胖小鼠模型,进一步建立胃袖状切除术模型可行且有效。     

脂联素与非酒精性脂肪性肝病相关性分析

目的：建立高脂饮食诱导的NAFLD大鼠模型,初步探讨脂联素在NAFLD发病机制中的作用以及其与肝脏脂肪变性和炎症程度的相关性。方法：将Wistar雄性大鼠随机分成2组,每组15只。正常对照组喂养普通饲料12周、模型组予高脂饲料喂养12周。12周后处死全部大鼠,称体重和肝湿重,计算肝指数,行肝脏的病理检查,判断肝脏脂肪变性程度、计算肝脏炎症积分,生化法测定血清谷丙转氨酶（ALT）、血清谷草转氨酶（AST）、血清甘油三酯（1、G）、总胆固醇（TC）、肝匀浆TG、TC,酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测血清脂联素。结果：高脂饮食12周后成功建立了NAFLD大鼠模型。与对照组比较,模型组大鼠肝细胞呈中一重度脂肪变性,肝脏炎症积分显著升高（P〈0．01）;肝湿重及肝指数明显增高（P〈0．01）;血清ALT（P〈0．05）、AST、TC值以及肝匀浆TG、TC值明显升高（P〈0．01）;血清脂联素值明显降低（P〈0．05）;血清脂联素水平与肝脏脂肪变性及炎症积分无相关性,与肝匀浆TC呈负相关（r=-0．638,P=0．038）。结论：NAFLD存在低脂联素血症,脂联素在NAFLD的发病中可能有一定的作用,但与NAFLD肝脏脂肪变性和炎症积分无相关性。     

大鼠2型糖尿病动物模型的建立

目的研究链尿佐菌素（STZ）加高糖高脂饮食诱导大鼠2型糖尿病模型的建立。方法将30只SD雄性大鼠随机分为实验组和对照组,实验组（n=20只）饲喂高糖高脂饲料,对照组（n=10只）饲喂基础饲料。实验组又分为2小组：大鼠喂养3周后,采血检测空腹血糖及血清胰岛素（高糖高脂组）;按25mg／（kg&#183;BW）剂量一次性腹腔内注射STZ,3d后,行糖耐量实验证实异常,继续喂以高糖高脂饲料,在第2、4周再2次采血检测糖尿病鼠空腹血糖及血清胰岛素（糖尿病组）。对照组腹腔内注射相应剂量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,采血方法同实验组,比较各组大鼠糖耐量、空腹血糖及血清胰岛素的变化。结果与对照组比较,高糖高脂组血清胰岛索明显上升（P〈0.01）,但血糖无变化（P〉0.05）,糖尿病组血糖及血清胰岛素均显著高于对照组（均P〈0.01）。结论高糖高脂喂养能致大鼠明显的高胰岛素血症,辅以小剂量一次性注射STZ而造成的糖耐量异常,可成功建立大鼠2型糖尿病动物模型。     

高脂饮食致非酒精性脂肪性肝病大鼠小肠、肝脏中NOD样受体蛋白3及相关炎症因子的表达*

目的 观察高脂饮食致非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠小肠、肝脏中NOD样受体蛋白3（NLRP3）及相关炎症因子表达情况。方法 SD雄性大鼠20只适应性喂养1周后,随机分为正常组、模型组,每组10只,正常组普通饲料喂养,模型组高脂饲料喂养。8周末取材,观察肝HE及油红O染色病理切片,检测各组血清和肝脏中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、白介素-18（IL-18）、白介素-1β（IL-1β）。RT-PCR、免疫组化检测肝、肠NLRP3表达。结果 与正常组相比,模型组大鼠肝脏表现出明显的脂肪变性和炎性病变,肝脏、血清中ALT、AST、TG显著升高（P＜0.05）,TC升高,差异不明显,IL-18、IL-1β显著升高（P＜0.05）;肝脏、小肠NLRP3表达量亦显著升高（P＜0.05）。结论 NAFLD可引起大鼠小肠、肝脏中NLRP3及相关炎症因子上调。     

人参皂苷Rg1对小鼠非酒精性脂肪肝的改善作用和机制研究

目的：探讨人参皂苷（ginsenoside,Rg1）对高脂饮食诱导小鼠非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）的改善作用及可能的机制。方法：将42只健康成年C57/BL雌性小鼠随机分为对照组、模型组、Rg1低剂量组、Rg1高剂量组、二甲双胍组,对照组和模型组每组各9只小鼠,其余小组每组各8只小鼠。对照组给予普通饲料喂养,其余各组给予高脂饲料喂养,持续喂养16周。16周后,对照组和模型组给予0.9％生理盐水20 mL/（kg·d）灌胃,Rg1低剂量组给予人参皂苷Rg1 20 mg/（kg·d）灌胃,Rg1高剂量组给予人参皂苷Rg1 40 mg/（kg·d）灌胃,二甲双胍组给予二甲双胍150 mg/（kg·d）灌胃。持续治疗4周后采集各组小鼠血清和肝脏组织。观察各组肝组织病理学形态,测定血清转氨酶及血脂水平、肝组织匀浆中丙二醇（malondi－aldehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、游离脂肪酸（free fatty acid,FFA）的含量及内质网应激（endoplas－mic reticulum stress,ERS）与炎症小体相关蛋白的表达情况。结果：Rg1低、高剂量组血清丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotrans－ferase,ALT）分别为（41.87±10.64）、（43.46±13.84） U/L,天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）分别为（159.56±21.29）、（159.56±25.01）U/L,甘油三酯（triglyceride,TG）分别为（0.69±0.15）、（0.75±0.12）U/L,均明显低于模型组（P=0.001,P=0.010,P=0.000）,肝组织脂肪变性程度明显轻于模型组（P=0.000）。Rg1能降低FFA,MDA含量,提高SOD活力（均P=0.000）。Rg1能下调GRP78、CHOP、Caspase12、NLRP3、IL-1β蛋白的表达（P=0.000,P=0.003）。结论：Rg1可能通过提高抗氧化酶活性、抑制ERS相关分子及炎症小体活化来改善NAFLD。     

Comparaison de la réponse métabolique du petit prématuré alimenté parentéralement, puis au lait maternel de prématurité.

The nitrogen retention and plasma amino acid concentration were determined in eight preterm infants (mean birth weight 970 +/- 130 g; mean gestational age 28 +/- 1 weeks) receiving successively total parenteral nutrition and their own mother's milk. The nitrogen retention during both regimens was comparable to the fetal accretion rate. Plasma amino acid concentrations were lower during the enteral phase of the study than during parenteral nutrition. The metabolic response of small preterm infants is related to the quality of amino acids as well as to the route of intake.     

Les médecins québécois étudieront les économies dans les pratiques médicales

The Quebec government has signed agreements with two of the province's medical federations which aim to lower health care costs over the next 20 months without reducing insured services. The government hopes to save more than $60 million by measures such as reducing specialists' billings by 1%, instituting more efficient medical practices, and limiting complete medical examinations to one per patient per year.