膀胱癌组织MDR_1基因产物P-GP_(170)表达的意义

为证实肿瘤多项耐药基因（ Ｍ Ｄ Ｒ１） 产物 Ｐ Ｇ Ｐ１７０ 与膀胱癌化疗失败及复发的关系,利用免疫组化方法对７２例膀胱癌进行了研究。发现膀胱癌术后丝裂霉素膀胱灌注化疗失败者的 Ｐ Ｇ Ｐ１７０ 阳性率及强阳性率均明显高于初发膀胱癌,并且高分级肿瘤的 Ｐ Ｇ Ｐ１７０ 阳性及强阳性表达均高于低分级肿瘤。通过本实验可以认为膀胱癌化疗效果如何与膀胱癌组织中 Ｍ Ｄ Ｒ１ 产物的量有关。     

膀胱癌MDR_1基因表达与化疗效果的关系

78例膀胱癌标本均取自天津泌尿外科研究所,为1996年1月至1998年12月手术切除的标本,其中男性56例,女性22例,年龄45～76岁,病理组织学分级按WHO标准:G1期10例,G2期41例,G3期27例。26例正常膀胱黏膜均取自天津泌尿外科研究所的前列腺增生症病人。     

恶性血液病患者MDR_1和MRP表达水平及其意义

用ＲＴ－ＰＣＲ检测１９例急性白血病和６例多发性骨髓瘤患者ＭＤＲ１和ＭＲＰ表达水平。结果显示：临床耐药患者ＭＤＲ１表达水平明显增高；与临床耐药之间呈显著正相关（ｒ＝０．６１２，Ｐ＜０．０１）；与ＭＲＰ之间无明显相关性（ｒ＝０．０３５，Ｐ＞０．０５）。表明ＭＤＲ１是临床耐药的主要机制。     

人膀胱癌多药耐药细胞株多药蛋白表达的研究

多药耐药性（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ）是膀胱肿瘤化疗失败的重要原因之一。多药耐药相关蛋白（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇａｓｏｃｉａｔｅｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｐｒｏｔｅｉｎ,ＭＲＰ）和Ｐ－糖蛋白（Ｐｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ,Ｐｇｐ）...     

转基因法建立膀胱癌多药耐药细胞株

目的:建立高效、稳定的人膀胱癌多药耐药性细胞模型。方法:采用基因重组技术构建真核表达载体pcDNA3.1( )/bcl-2,通过脂质体将人bcl-2基因转染膀胱癌细胞BIU-87,RT-PCR检测基因转录水平,应用MTT比色法进行耐药性检验。结果:酶切鉴定和基因测序证明真核表达载体pcDNA3.1( )/bcl-2构建成功;RT-PCR分析表明,转染bcl-2基因的BIU-87/bcl-2细胞的bcl-2基因表达水平较BIU-87细胞和转染空载体的BIU-87/neo细胞显著提高;与BIU-87细胞和BIU-87/neo细胞相比,BIU-87/bcl-2细胞具有较高的耐药性。结论:基因转染法是建立人膀胱癌多药耐药细胞模型的理想方法。     

EGR-1的表达对乳腺癌细胞株耐药的调节作用

目的 探讨转录因子EGR-1对人乳腺癌阿霉素耐药细胞MCF-7/Adr耐药的调节作用.方法 采用脂质体转染法将EGR-1质粒转入细胞,Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术、MTT法和Western印迹分别检测MCF-7/Adr细胞早晚期凋亡、细胞增殖活性.结果 细胞稳定转染EGR-1质粒后,与阴性对照组和空载体组比较,细胞凋亡率(41.43±2.34)%高于阴性对照组(4.32±0.87)%及pcDNA3.1空载体转染(5.28±1.46)%(P＜0.05);在一定阿霉素药物浓度范围内,MCF-7/Adr细胞存活率抑制率明显下降(P＜0.05);Western印迹检测见MCF-7/Adr-EGR-1细胞中Caspase-3蛋白均较转染前明显增加,而p-gp蛋白质水平较转染前明显下降(P＜0.05).结论 上调EGR-1表达能有效逆转乳腺癌细胞阿霉素耐药性,其作用机制可能与EGR-1上调耐药细胞中Caspase-3的水平、诱导细胞发生凋亡相关.     

促凋亡基因Bax在膀胱癌表达的免疫组化检测

目的：研究促凋亡基因Ｂａｘ在膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）中的表达，探讨Ｂａｘ在ＴＣＣ发生、发展中的作用和预后复发中的意义。方法：采用兔抗人Ｂａｘ多克隆抗体及Ｓ－Ｐ免疫组化法检测。结果：５６例ＴＣＣ中有３４例Ｂａｘ蛋白表达阳性，阳性率６０．７％。２０例正常膀胱粘膜中有６例表达阳性，阳性率３０％。两组差异显著（Ｐ＜０．０５）。Ｂａｘ蛋白表达部位在细胞胞浆中。Ｂａｘ蛋白表达与病理分级、临床分期及肿瘤复发无显著相关性。结论：促凋亡基因Ｂａｘ在大部分ＴＣＣ中具有不同程度的表达与其发生有关，与ＴＣＣ分级、分期及复发无关。     

重视细菌耐药基因检测提高抗感染治疗水平

近年来细菌耐药性已成为全球医疗领域中的重要问题,各类耐药菌感染已给人类健康及生命构成重大威胁,早期给予恰当的抗感染药物对挽救患者生命具有重要意义.     

组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC基因在胰腺癌耐药细胞株中的表达

目的:研究组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC在培美曲塞诱导的胰腺癌耐药细胞株Puta8988中的基因和蛋白表达水平,以明确HIST1H2AC和HIST1H2BC基因与胰腺癌耐药的关系.方法:以两种剂量的培美曲塞诱导胰腺癌细胞株Puta8988,使其形成两个等级的获得性耐药细胞株Puta8988+、Puta8988++.采用qRT-PCR和Western blotting方法分别检测HIST1H2AC和HIST1H2BC在耐药细胞株及其亲本(对照)中的基因和蛋白表达水平.结果:qRT-PCR检测结果显示,组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC基因在胰腺癌耐药株Puta8988+和Puta8988++中的表达水平显著上调(P<0.05);Western blotting检测结果显示,组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC在胰腺癌耐药株Puta8988+和Puta8988++中的蛋白表达水平也显著上调(P<0.05).结论:胰腺癌细胞株经培美曲塞诱导后,其组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC在基因和蛋白表达水平上均出现上调,提示HIST1H2AC和HIST1H2BC基因可能与耐药有关.     

葡萄球菌耐药基因检测

葡萄球菌属(Staphylococcus)共有葡萄球菌32个种，15个亚种，引起人类疾病的重要菌种有金黄色葡萄球菌(S．aureus)、表皮葡萄球菌(S．epidermidis)，头状葡萄球菌(S．capitis)，人型葡萄球菌(S．hominis)和腐生葡萄球菌(S．saprophyticus)。金黄色葡萄球菌的致病性主要与各种侵袭性酶类(血浆凝固酶、透明质酸酶、磷脂酶、触     

基因芯片技术检测鼻咽癌紫杉醇耐药及耐药逆转相关基因的表达

目的:比较药物处理前后鼻咽癌亲本细胞系CNE-1及鼻咽癌紫杉醇耐药细胞系CNE-1/Taxol的基因表达差异,试图发现与鼻咽癌紫杉醇耐药及耐药逆转相关的基因。方法:使用基因芯片检测药物处理前后6组细胞系之间的基因表达差异,运用多重筛选和针对已知耐药相关基因的具体分析相结合的方式进行数据分析。结果:经过多重筛选,筛选出297个差异表达的基因;比较亲本细胞,在耐药细胞中上调或下调超过5倍的有17个基因。通过对已知耐药相关基因的分析,结果显示:具有药物转运作用的ATP结合盒家族中多药耐药基因(MDR1)在各组细胞中都未出现阳性表达; P450家族中CYP1A1在亲本细胞中不表达,在耐药细胞中出现较强的阳性表达,经紫杉醇处理后,其表达进一步大幅下调,顺铂处理后其表达下调;肿瘤坏死因子家族中在耐药细胞系表达下调,经顺铂处理后出现逆向表达增强的基因有TNFAIP1, 3和TNFRSF12A, 21; caspase家族出现差异表达的基因有caspase-4和caspase-6;β-微管蛋白Ⅱ在耐药细胞中表达下调;TSP1在耐药细胞中表达明显下调,经紫杉醇处理后,表达进一步下调,但是,经顺铂作用后,其表达明显上调。结论:可能与鼻咽癌紫杉醇耐药及耐药逆转相关的基因有:经过多重筛选得到的297个差异表达的基因、CYP1A1、部分肿瘤坏死因子家族成员以及另外17个在亲本细胞和耐药细胞之间表达差异超过5倍的基因;结合全部基因数据的多重筛选和已知耐药相关基因的具体分析研究肿瘤细胞耐药及耐药逆转机制是比较理想的方法。     

膀胱癌病人血清和尿液中bFGF表达水平的检测

目的检测膀胱癌病人的血清和尿液中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达水平,并探讨其临床意义。方法采用ELISA方法检测36例膀胱癌病人术前和术后1周及14例健康对照者的血清及尿液中bFGF表达水平。结果膀胱癌病人血清和尿液中bFGF水平分别为(8.7±3.3)pg/mL、(4.1±2.0)pg/mL,均分别显著高于正常对照者的(4.6±1.8)pg/mL、(1.9±0.6)pg/mL,P<0.01。膀胱癌病人术后血清和尿液中bFGF水平均显著低于术前。膀胱癌病人术前血清和尿液中bFGF水平均与肿瘤病理分级、分期和复发之间密切相关。结论膀胱癌病人的血清和尿液中bFGF水平显著升高,且可能是膀胱癌诊断和生物学行为评价有价值的标记。     

hMLH1基因对人卵巢癌耐药细胞株顺铂敏感性的研究

目的 探讨错配修复基因hMLH1对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP顺铂耐药的逆转作用及其机制.方法 分别用重组质粒pcDNA3.1-hMLH1和空质粒pcDNA3.1转染SKOV3/DDP细胞.RT-PCR和Western blot检测hMLH1的表达.MTT检测转染前后SKOV3/DDP细胞对顺铂敏感性的变化.经顺铂DDP作用后,流式细胞术和Western blot法检测细胞凋亡情况.结果 与对照组相比,瞬时转染24 h后,SKOV3/DDP细胞中hMLH1 mRNA和蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05).MTT结果显示,转染细胞的IC50值(13.95±2.45)较未转染的细胞(94.16±5.18)明显减小.流式细胞仪和Western blot检测结果表明,顺铂作用24 h后,转染了重组质粒的耐药细胞的凋亡率提高到(33.33±2 31)%,同时凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达受到抑制(1.35±0.39),与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 hMLH1基因能增强卵巢癌耐药细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与降低该耐药细胞内Bcl-2的表达水平,促进细胞凋亡有关.     

RASSF1A基因在膀胱癌中的表达及意义

目的：研究RASSF1A基因在膀胱移行细胞癌（BTCC）中的表达，探讨RASSF1A在BTCC发生、发展中的作用。方法：采用鼠抗人RASSF1A单克隆抗体及免疫组化检测8例正常膀胱组织及37例膀胱移行细胞癌组织中的RASSF1A蛋白表达。结果：RASSF1A蛋白的表达率在正常膀胱组织中为100％（8／8），在膀胱癌组织中为24．3％（9／37）。两组间表达率差异具有统计学意义（P〈0．05）。其中在表浅型（Ta—T1）组表达率为25％（4／16），浸润型（T2-T4）组表达率为23．8％（5／21），二组中表达率差异无统计学意义（P〉0．05）。其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级表达率分别为27．3％（3／11）、22．22％（4／18）、25．0％（2／8）。该三组之间表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：RASSF1A基因的失表达或低表达，可能与膀胱移行细胞癌的发生有关，而与其临床分期、病理分级无关。该基因有望作为早期诊断膀胱肿瘤发生的肿瘤学标记物。     

Kiss-1基因在人鼻咽癌细胞株中的表达探讨

目的检测Kiss-1基因在5种不同转移习性的人鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2Z、SUNE-1、SUNE-1-5-8F、SUNE-1-6-10B中的蛋白和mRNA水平的表达情况。方法应用逆转录酶聚合酶链式反应（RT-PCR）和免疫组织化学法在mRNA和蛋白水平检测5种细胞株中Kiss-1基因的表达。结果 5种细胞株中Kiss-1蛋白的表达皆为阳性,在低转移性细胞株SUNE-1-6-10B中Kiss-1基因在蛋白水平的表达显著高于其他具有较高转移习性细胞株中的表达（P〈0.01）。5种细胞株中均扩增出Kiss-1 mRNA,在低转移性细胞株SUNE-1-6-10B中Kiss-1基因在mRNA水平的表达显著高于其他具有较高转移习性细胞株中的表达（P〈0.01）。结论 Kiss-1基因在低转移性人鼻咽癌细胞株细胞中高表达,而在高转移性人鼻咽癌细胞株细胞中低表达,提示了该基因可能在鼻咽癌肿瘤细胞转移机制中发挥重要的抑制作用。     

肿瘤耐药与相关耐药基因的表达

根据美国癌症研究协会估计 ,在每年大约 4 9万因癌症死亡的患者中 ,约 90 %以上的肿瘤患者的死亡原因是受到不同程度耐药的影响。因而 ,在耐药研究已进行 2 0余年的今天 ,研究肿瘤耐药机制及有效地克服耐药的方法在肿瘤药物治疗研究领域中仍然很重要。1　多药耐药基因 (MultidrugResistanceGene ,mdrl)1974年Ling[1] 等人详细描述了耐药细胞与细胞膜上存在的一种高分子量糖蛋白及其编码基因mdrl基因的关系。以后 ,通过对各种耐药细胞模型的研究发现它们的共同特点 :(1)对多种亲脂性大分子天然药物的交叉耐药性 ;(2 )能量依赖性药物外流 ,…     

Apoptin基因诱导膀胱癌耐药细胞凋亡的研究

目的观察Apoptin基因对膀胱癌耐药细胞株EJ／MDR细胞的杀伤效果，探讨其可能的机制。方法用脂质体将Apoptin基因导人EJ／MDR细胞，通过RT-PCR法检测ApoptinmRNA的表达，同时用SABC免疫组化法分析Apoptin和p53的表达。采用细胞计数法检测细胞生长抑制率，TUNEL法标记凋亡细胞，流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果转入Apoptin基因后，EJ／MDR细胞的生长明显受抑制（P％0．05）。细胞周期分析可见凋亡峰，凋亡率35％。细胞中可见Apoptin阳性表达（P〈0．05），p53表达无显著性差异（P〉0．05）。凋亡细胞在荧光显微镜下形成凋亡小体。结论转入Apoptin基因可显著促进EJ／MDR细胞的凋亡，Apoptin诱导的凋亡不依赖功能性p53的生成。