阿魏菇多糖对小鼠U14宫颈癌抑制作用的研究

目的观察阿魏菇多糖（PFP）对小鼠宫颈癌细胞株U14移植瘤的抑制作用及其与顺铂（DDP）联合用药的效果,并初步探讨PEP的抗肿瘤作用机制。方法建立昆明小鼠U14宫颈癌模型,并随机分为模型对照组、DDP组、PFP组、PFP＋DDP组,分别给予不同药物干预10d后检测各组小鼠的瘤质量和抑瘤率,采用免疫组化法检测各组肿瘤组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平,TUNEL法检测各组瘤组织细胞凋亡指数（AI）。结果模型对照组小鼠体内瘤质量明显高于各干预组（P〈0．01）,PFP＋DDP组小鼠体内瘤质量低于DDP组;各实验组瘤组织细胞AI均高于模型对照组,且PFP＋DDP组的Aj最高。PFP、DDP、PFP＋DDP均可降低宫颈癌U14组织内Bel-2蛋白的表达水平,并升高Bax蛋白表达水平,且PFP＋DDP组的作用优于单药组。结论PEP对小鼠宫颈癌U14细胞株移植瘤具有明显抑制作用,且与DDP联合用药效果更显著,其机制可能与下调Bcl-2蛋白及上调Bax蛋白的表达有关。     

罗汉果皂苷提取物通过调控miR-199a-3p对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的 探究罗汉果皂苷提取物对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响及潜在分子机制。方法 体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,采用高糖和罗汉果皂苷提取物干预HK-2细胞，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力，流式细胞术分析细胞凋亡率，Western印迹分析B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-199a-3p的表达，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-8的表达。结果 高糖能够抑制HK-2细胞活力，促进细胞凋亡和Bax的表达，抑制Bcl-2的表达，提高TNF-α、IL-6和IL-8的含量；罗汉果皂苷提取物能够抑制高糖诱导的HK-2细胞凋亡，提高细胞活力，促进miR-199a-3p的表达，降低TNF-α、IL-6和IL-8的含量；过表达miR-199a-3p能够抑制高糖诱导的HK-2细胞损伤，下调miR-199a-3p能够逆转罗汉果皂苷提取物对高糖诱导的HK-2细胞损伤保护作用。结论 罗汉果皂苷提取物能够通过上调miR-199a-3p的表达对高...     

青蒿琥酯对U14细胞的体内外抑制作用及机制

目的 观察青蒿琥酯（Art）对小鼠宫颈癌U14细胞体内外抑制作用及其可能的作用机制。方法 MTT法检测不同浓度Art对体外培养的U14细胞增殖的影响;建立小鼠U14腹水瘤和实体瘤模型,分别用不同浓度的Art治疗,并设阴性和阳性对照组;观察Art对实体瘤抑瘤率,腹水瘤小鼠的生命延长率;免疫组化法检测实体瘤中Bcl-2和Bax蛋白表达,流式细胞仪分析腹水瘤小鼠U14细胞周期。结果 应用Art后U14细胞增殖显著抑制,其IC50为62．77μg／ml;实体瘤最大抑瘤率为52．59％,腹水瘤生命延长率为76．7％;实体瘤组织标本中Bax蛋白阳性率明显升高,Bcl-2蛋白阳性率明显降低;细胞周期分析示S期细胞数明显减少,G0、G1期的细胞数增加。结论 Art可抑制U14细胞体内及体外的增殖;其机制可能为上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2表达,将肿瘤细胞生长抑制在G0、G1期。     

皂刺粗黄酮对小鼠移植U14宫颈癌细胞生长的影响及机制

目的观察皂刺粗黄酮对小鼠移植U14宫颈癌细胞的影响,并探讨其可能机制。方法制备皂刺粗黄酮浸膏,建立小鼠宫颈癌模型,将小鼠分为观察组1(皂刺粗黄酮低剂量)、观察组2(皂刺粗黄酮中剂量)、观察组3(皂刺粗黄酮高剂量)、环磷酰胺组和对照组(生理盐水组),称取小鼠始体重、终体重、瘤重,计算抑瘤率和生命延长率,放射免疫法测定血清白细胞介素(IL)-2和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;免疫组化SP法测定肿瘤组织中p53和增殖细胞核抗原(PCNA)表达。结果观察组1、观察组2、观察组3小鼠的瘤重低于对照组(P<0.05),但高于环磷酰胺组(P<0.05);观察组1、观察组2、观察组3小鼠的抑瘤率和生命延长率低于环磷酰胺组(P<0.05)。观察组1、观察组2、观察组3小鼠的存活天数高于对照组(P<0.05),但低于环磷酰胺组(P<0.05)。观察组1、观察组2、观察组3小鼠血清IL-2和TNF-α高于环磷酰胺组和对照组(P<0.05)。观察组1、观察组2、观察组3小鼠的p53和PCNA表达低于对照组(P<0.05),但高于环磷酰胺组(P<0.05);环磷酰胺组小鼠的p53和PCNA表达低于对照组(P<0.05)。结论皂刺粗黄酮可升高血清IL-2和TNF-α水平、促进宫颈癌组织中p53和PCNA表达,抑制小鼠移植U14宫颈癌的生长。     

三氧化二砷对人宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对人宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用及其机制。方法MTT法观察生长抑制情况;双参数流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡及测定Hela细胞增殖细胞核抗原（PCNA）、凋亡相关蛋白Bcl-2表达。结果As2O3可显著抑制Hela细胞生长增殖,且剂量—效应关系显著（P〈0.01）。Hela细胞经As2O3处理后可发生凋亡,As2O3能显著下调PCNA表达（P〈0.01）,但对Bcl-2表达无影响。结论As2O3在体外可显著抑制人宫颈癌Hela细胞生长,其机制可能与诱导细胞凋亡、降低PCNA蛋白表达有关。     

大黄酸对TNF-α和TG诱导L-02肝细胞凋亡的影响

目的观察大黄酸对TNF-α和TG诱导的肝细胞凋亡的影响，并探讨其抑制肝细胞凋亡的可能机制。方法体外培养人L-02肝细胞，用TNF-α（500U／ml）＋TG（20ug／ml）诱导肝细胞凋亡模型；采用M1Tr法测定RH、TNF-α和TG对肝细胞的增殖的影响；流式细胞仪技术法测定肝细胞凋亡率；免疫组织化学法测定肝细胞Bcl-2、Bax基因表达水平。结果一定浓度的大黄酸对于TNF-α和TG引起的L-02肝细胞的增殖抑制有部分阻断作用。大黄酸还可通过上调Bcl-2，下调Bax表达，从而抑制细胞凋亡的发生。结论大黄酸具有抑制肝细胞凋亡作用，机理可能与增强Bcl-2表达及抑制Bax表达有关。     

DEPDC1B结合p65在肝癌细胞和荷瘤小鼠肿瘤生长中的作用及机制研究

目的 研究DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)在肝癌细胞和荷瘤小鼠肿瘤生长中的作用及相关机制。方法 分别将过表达DEPDC1B的质粒（oe-flagDEPDC1B）与对照质粒（oe-NC）转染至H22肝癌细胞系中,采用蛋白质印迹法检测flag和DEPDC1B蛋白表达水平,采用CCK-8法检测细胞增殖能力。通过flag抗体富集flag-DEPDC1B结合蛋白,通过质谱进行鉴定,并对免疫共沉淀物进行关键蛋白验证。在oe-flag-DEPDC1B转染细胞中加入p65抑制剂Helenalin,采用实时荧光定量PCR法检测IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA表达水平,采用CCK-8法检测细胞增殖能力。分别将oe-flag-DEPDC1B和oe-NC转染细胞注射至C57/B6小鼠皮下,注射后2周开始监测小鼠肿瘤体积,注射后5周处死小鼠。分别采用实时荧光定量PCR法、蛋白质印迹法和ELISA法检测肿瘤组织中DEPDC1B、p65、IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平。结果 与oe-NC组细胞比较,oe-flag-DEPDC1B组细胞中DEPDC1B蛋白表达水平显著升高,细胞增殖能力显...     

TIMP1基因对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞HEPApiC凋亡的影响及机制研究

目的探讨基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)基因对肺炎链球菌诱导的人肺泡上皮细胞HEPApiC凋亡的影响及其可能的机制。方法体外培养人肺泡上皮细胞HEPApiC,采用肺炎链球菌感染HEPApiC细胞,实时荧光定量PCR(QPCR)和Western blot检测细胞中TIMP1的表达水平。将HEPApiC细胞分为4组,空白对照组(未做任何处理的细胞)、感染组(肺炎链球菌感染的细胞)、阴性对照组(转染siRNA control+肺炎链球菌感染的细胞)和干扰组(转染TIMP1 siRNA+肺炎链球菌感染的细胞)。CCK-8法检测各组HEPApiC细胞活力,流式细胞术检测各组HEPApiC细胞凋亡情况,Western blot检测细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平,ELISA检测上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的含量。结果肺炎链球菌感染后HEPApiC细胞中TIMP1 mRNA和蛋白表达水平均明显上调。转染TIMP1 siRNA后HEPApiC细胞中TIMP1 mRNA和蛋白表达水平均明显下调。感染组细胞凋亡率、Bax表达水平、TNF-α、IL-1β和IL-6含量均明显高于空白对照组(P0.05),而细胞活力和Bcl-2表达水平低于空白对照组(P0.05);干扰组细胞凋亡率、Bax表达水平、TNF-α、IL-1β和IL-6含量均明显低于感染组和阴性对照组(P0.05),而细胞活力和Bcl-2表达水平高于感染组和阴性对照组(P0.05)。结论敲低TIMP1基因表达能够抑制肺炎链球菌诱导的HEPApiC细胞凋亡,其作用机制可能与抑制炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达有关。     

PPARα、PPARy在左卡尼汀改善结肠癌小鼠恶病质中的作用

左卡尼汀（Lc）改善恶病质的作用已日渐受到关注。目的：探讨PPARα、PPARy在Lc改善结肠癌小鼠恶病质中的作用。方法：建立结肠癌小鼠恶病质模型，并分为Lc组、左卡尼汀棕榈酸酰基转移酶（CPT）抑制剂（ILC）组、阴性对照组（NST），另设立正常对照组（NTB）。实验第19d处死所有小鼠。测定小鼠体质量、去瘤体质量、摄食量，以全自动生化仪检测血清白蛋白、血糖、胆固醇含量，ELISA法检测血清TNF-α、IL-6含量，实时定量PCR和蛋白质印迹法分别检测肝组织PPARa、PPARy,／mRNA和蛋白表达。结果：与NST组、ILC组相比，LC组小鼠体质量、去瘤体质量、摄食量、血清白蛋白、血糖均显著升高（P〈0．05），血清胆固醇、TNF-α、IL-6含量均显著降低（P〈0．05），PPARα、PPAR7mRNA和蛋白表达均显著升高（P〈0．05）。结论：PPARα、PPARy可能参与结肠癌小鼠恶病质的发生；LC可能通过PPARα、PPARy相关肝脏脂质代谢信号通路来改善肿瘤恶病质。     

左旋卡尼汀联合CrkL降低缺氧复氧诱导的心肌细胞损伤

目的研究左旋卡尼汀联合CT10激酶调节子样蛋白(CrkL)降低缺氧复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的作用。方法利用H/R损伤心肌细胞H9c2,使用左旋卡尼汀处理。细胞计数试剂盒8(CCK-8)、流式细胞术、Western blot分别检测细胞的增殖、凋亡和细胞核相关抗原Ki-67(Ki-67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、核因子κB(NF-κB)、CrkL水平。在细胞H9c2中转染pcDNA-CrkL,使用H/R处理或H/R+左旋卡尼汀处理。采用上述方法检测细胞增殖、凋亡等。结果与对照组比较,H/R组H9c2细胞的活力、Ki-67、PCNA、Bcl-2、CrkL蛋白表达量明显降低,细胞凋亡率、Bax蛋白水平及炎症因子TNF-α、IL-1β、NF-κB的蛋白水平显著升高(P0.05)。与H/R组比较,左旋卡尼汀明显增加H/R诱导的H9c2细胞活力及Ki-67、PCNA、Bcl-2、CrkL蛋白表达量,显著降低细胞凋亡率、Bax蛋白水平及TNF-α、IL-1β、NF-κB蛋白水平(P0.05)。CrkL过表达明显提高H/R诱导的H9c2细胞活力和Ki-67、PCNA、Bcl-2蛋白表达量,显著降低细胞凋亡率、Bax蛋白水平及TNF-α、IL-1β、NF-κB蛋白水平(P0.05)。与单独使用左旋卡尼汀或CrkL过表达比较,左旋卡尼汀联合CrkL过表达明显提高H9c2细胞的活力和Ki-67、PCNA、Bcl-2蛋白表达量,显著降低细胞凋亡率、Bax蛋白水平及TNF-α、IL-1β、NF-κB蛋白水平(P0.05)。结论左旋卡尼汀联合CrkL可以促进缺氧复氧诱导的心肌细胞增殖,降低细胞凋亡和炎症反应,从而保护心肌细胞。     

淫羊藿苷提高SIRT6酶活性及抑制小鼠NF-kB炎症信号通路的实验研究

目的观察淫羊藿苷（Icrrin,ICA）对组蛋白去乙酰化酶SIRT6的激活作用及对老年小鼠体内NF-kB（p65）、SIRT6蛋白表达及NF—kB信号通路下游炎症细胞因子表达的影响。方法以体外酶学实验观察ICA对SIRT6的激活作用并绘制不同剂量浓度激活效率曲线。选取24月龄老年组（N=11）、24月龄＋ICA干预组（N=12）和3月龄青年组小鼠（N=10）的心、肝、肌肉组织,用Westernblot检测NF-kB（p65）和SIRT6蛋白表达水平;采用ELISA法柃测小鼠血清中肿瘤坏死网子α（TNF—α）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、白细胞介素-2（IL-2）和白细胞介素-6（IL-6）的含量。结果体外酶学实验显尔ICA随着药物浓度的下降,对SIRT6逐渐呈现激活效应,在10。mol／L浓度时达到最大激活效应为142％。小鼠实验显示ICA干预后,心脏、肝脏与肌肉组织中NF—kB（p65）蛋白表达与老年小鼠比较呈现下调趋势,而SIRT6蛋白表达较老年小鼠则呈现上调趋势;与青年小鼠比较,老年小鼠血清中炎症细胞TNF-α、ICAM-1、IL-2、IL-6的含量均明显上调（P〈0．05、P〈0．01）;与老年小鼠比较,ICA干预后小鼠血清中炎症因子TNF-α、ICAM-1、IL-2、IL-6的含量均明显下降（P〈0．05、P〈0．01）。结论ICA对SIRT6的酶活性具有显著的激活效应,且在极低的药物浓度下仍对SIRT6有激活作用;ICA能上调老年小鼠组织中SIRT6蛋白表达,抑制NF—kB（p65）蛋白表达及下调下游炎症细胞因子的产生,提示ICA延缓炎性衰老的作用机制及干预新靶点与NF—kB信号通路和组蛋白去乙酰化酶SIRT6密切相关。     

TNF-α诱导脑胶质瘤细胞凋亡过程中NF-κB、IκB活性的研究

目的探讨核转录因子-κB（NF-κB）及其抑制因子（ⅠκB）在肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导人脑胶质瘤细胞株U251细胞凋亡过程中生物活性的变化。方法应用流式细胞仪检测TNF-α对U-251细胞生长的抑制和诱导凋亡作用。用免疫组化方法检测肿瘤细胞p65的表达，用Western blot检测IκB蛋白的变化。结果TNF-α可诱导U251细胞凋亡，激活细胞中p65并诱导ⅠκB降解；抗氧化剂二硫碳吡咯烷醇（PDTC）可抑制TNF-α诱导的ⅠκB的降解及NF—κB的激活，增强TNF-α诱导U251细胞的凋亡。结论TNF-α在诱导U251细胞凋亡的过程中可激活NF—κB。抑制NF—κB活性。可增强TNF-α诱导细胞凋亡的作用。     

罗格列酮对大鼠血管损伤后再狭窄及血浆肿瘤坏死因子的影响

目的 观察罗格列酮对大鼠胸主动脉损伤后管腔狭窄、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及血浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等的影响。探讨罗格列酮减轻血管再狭窄的分子生物学机制。方法 用球囊损伤大鼠胸主动脉方法建立损伤模型。雄性SD大鼠随机分成假手术组，罗格列酮组和损伤组。光镜和HE染色观察血管管腔面积和内膜面积变化，原位杂交法检测MMP-9 mRNA表达，免疫组化法检测MMP-9及磷酸化细胞外信号调节激酶1／2（phosphate extracellular signal-regulated kinasel／2，pERK1／2）蛋白表达，放射免疫法检测血浆TNF-α浓度变化。结果 罗格列酮可明显减少内膜面积及增加管腔面积（均P〈0．05）；抑制MMP-9 mRNA和蛋白表达，抑制pERK1／2蛋白表达（均P〈0．05）；降低血浆中TNF-α浓度（P〈0．05）。结论 罗格列酮可以显著抑制大鼠主动脉损伤后管腔再狭窄，其机制可能与通过影响信号转导通路pERK1／2而抑制大鼠胸主动脉损伤后MMP-9 mRNA及蛋白表达，同时与降低血浆中TNF-α浓度有关。     

脂联素对脓毒症小鼠急性肾损伤的治疗作用及机制

目的 探究脂联素（APN）对脓毒症小鼠急性肾损伤的治疗作用及相关机制。方法 选取雄性C57BL/6小鼠24只,采用随机数字表法将小鼠分为空白对照组（CON组）、模型组（LPS组）、实验组（LPS+APN组）。按10 mg/kg腹腔注射脂多糖（LPS）制备脓毒症模型,CON组腹腔注射等量0.9%氯化钠注射液,实验组在造模前8 h按0.1 mg/kg尾静脉注射APN进行干预。造模后24 h处死小鼠,取静脉血检测肾损伤指标肌酐、尿素氮;HE染色观察和评估小鼠肾组织病理变化;超氧化物阴离子荧光探针（DHE）检测活性氧含量;实时定量PCR法检测肾组织中NLRP3、IL-1β和TNF-α的mRNA表达,Western blotting法检测NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达。结果 与模型组比较,经APN预处理后,小鼠肾功能及组织病理学损伤减轻,肾组织活性氧含量明显减少,NLRP3、IL-1β和TNF-α的mRNA表达降低,NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达下降（P均<0.05）。结论 APN对小鼠脓毒症急性肾损伤具有治疗作用,其机制可能与NLRP3炎症小体及细...     

润肺口服液对慢性支气管炎大鼠支气管TNF-α、ICAM-1蛋白及IL-8表达的影响

目的研究中药复方润肺口服液对慢性支气管炎（CB，CB）支气管肿瘤坏死因子（TNF-α）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及白介素-8（IL-8）表达的影响，探讨其治疗CB的疗效机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、慢性支气管炎组、慢性支气管炎氢化可的松治疗组及慢性支气管炎润肺口服液治疗组，每组8只。大鼠慢性支气管炎模型通过熏香烟加气管内注入低剂量脂多糖制成，利用免疫组织化学观察各组大鼠支气管TNF-α、ICAM-1蛋白及IL-8的表达情况。结果熏香烟加气管内低剂量脂多糖注射可复制出较理想的慢性支气管炎模型，假手术组支气管上皮内可见TNF-α、ICAM-1蛋白及IL-8弱阳性表达；慢性支气管炎组支气管TNF-α、ICAM-1蛋白及IL-8在支气管上皮细胞、支气管周围的淋巴滤泡炎性细胞和肺泡间质细胞中可见强阳性表达；半定量图像分析显示，慢性支气管炎组TNF-α、ICAM-1蛋白及IL-8的表达明显强于假手术组（P〈0．05），慢性支气管炎润肺口服液治疗组的表达则明显弱于支气管炎组（P〈0．05）。结论润肺口服液通过下调支气管上皮细胞中TNF-α、ICAM-1蛋白及IL-8的表达，从而减轻气道炎症反应是其治疗慢性支气管炎的机制之一。     

脂欣康胶囊对载脂蛋白E基因敲除小鼠TNF-α、IL-1β干预作用

目的观察脂欣康胶囊对载脂蛋白E（ApoE）基因敲除小鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素1β（IL-1β）的影响。方法将6周龄ApoE基因敲除小鼠随机分为模型组与脂欣康组，相同遗传背景的同龄正常C57BL／6J小鼠为正常对照组。脂欣康组灌服脂欣康胶囊内之药粉，模型组、正常对照组均灌服生理盐水。连续灌胃2周后（8周龄），各组随机取出半数小鼠，雌雄各半。麻醉后由腹腔静脉抽血。另一部分继续灌胃4周后（12周龄）由腹腔静脉抽血。离心分离血清，ELISA法检测TNF-α和IL-1β结果灌服2周后，脂欣康组小鼠血清TNF-α和IL-1β显著低于模型组（P〈0．05），模型组显著高于正常对照组（P〈0．05）；继续用药4周后，TNF-α和IL-1β无明显增高，脂欣康组显著低于模型组（P〈0.05），模型组显著高于正常对照组（P〈0．05）。结论脂欣康胶囊具有显著抑制ApoE基因敲除小鼠血清TNF-α与IL-1β增高的作用。     

细胞因子和脂多糖对人结肠癌细胞系HT-29 Toll样受体4表达和调控的影响

背景：正常肠上皮作为物理屏障能限制肠道微生物的入侵。肠上皮细胞极低表达Toll样受体（TLR）4和髓样分化蛋白（MD）-2，不与脂多糖（LPS）反应。目的：探讨以细胞因子肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β、干扰素（IFN）-γ和LPS刺激人结肠癌细胞系HT-29后，TLR4和MD-2的表达及其对LPS反应性的变化。方法：将FIT-29细胞分为8组，分别加入RPMI1640、TNF-α、IL-1β、IFN-γ、LPS、TNF-α＋LPS、IL-1β＋LPS、IFN-γ＋LPS干预；酶联免疫吸附测定（ELISA）检测各组细胞上清液内IL-8水平；逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测各组细胞TLR4和MD-2 mRNA的表达。结果：TNF-α、IL-1β和IFN-γ能显著上调HT-29细胞TLR4、MD-2 mRNA和IL-8的表达（P〈0．01）；HT-29细胞与，TNF-α、IL-β、IFN-γ预孵育后再以LPS刺激，IL-8的表达进一步上调（P〈0．01）。结论：细胞因子（TNF-α，IL-1β，IFN-γ）可增加肠上皮细胞TLR4和MD-2的表达，促进其对LPS的反应，引起肠上皮细胞对常驻菌的过度反应．从而启动或加重肠道炎症。     

AdIL-10对肝星状细胞α-SMA、TGF-β1及TNF-α表达的影响

目的应用携带大鼠白介素-10（IL-10）基因的重组缺陷型腺病毒（AdIL-10）感染原代培养的大鼠肝星状细胞（HSC），通过体外实验观察外源性大鼠IL-10基因对HSC中α-SMA、TGF-β1和TNF-α表达的影响。方法以胶原酶原位灌注、密度梯度离心法分离大鼠原代HSC，并用AdIL-10感染HSC（同时设AdGFP对照组及正常对照组），分别采用RT-PCR法和Western Blot法检测感染后HSC中IL-10 mRNA及蛋白水平的表达；Westem Blot法检测HSC中转化生长因子-β1（TGF-β1）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达；免疫组织化学法检测α-SMA在HSC中的表达。运用图像处理系统对结果加以分析。结果感染AdIL-10的HSC中IL-10的mRNA及蛋白水平均较对照组上调（P〈0．001）；而其表达的TGF-β1、TNF-α及α-SMA与对照组相比明显降低（P均〈0．001）；正常对照组和AdGFP对照组中上述指标的表达均无明显差异（P均〉0．05）。结论外源性大鼠IL-10基因导人大鼠HSC后可能通过影响TGF-β1及TNF-α的表达而抑制HSC的活化。     

重组大鼠IL-18对大鼠肺成纤维细胞的作用及机制研究

目的研究重组大鼠IL-18对大鼠肺成纤维细胞的作用及机制。方法体外分离培养新生大鼠肺成纤维细胞，RT-PCR法检测IL-18基因表达；MTr法检测IL-18对成纤维细胞增殖反应的影响；半定量RT-PCR法检测IL-18干预前后成纤维细胞中Ⅲ型胶原蛋白、TNF-α、MMp9、IL-13的表达。结果①正常细胞未检测到IL-18mRNA表达，IL-18能促进肺成纤维细胞增殖，与对照组比较有统计学差异（P〈0．05）；②IL-18干预早期显著增强成纤维细胞表达Ⅲ型胶原蛋白、TNF-αmRNA，与对照组比较有统计学差异（P〈0．01）；③IL-18不能诱导成纤维细胞表达MMp9和IL-13mRNA。结论IL-18能促进肺成纤维细胞增殖，其机制可能是通过促进成纤维细胞分泌TNF-α产生作用。     

TIPE2在慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中表达的研究

目的 探讨肿瘤坏死因子α诱导的蛋白8-2(tumor necrosis factor-induced protein 8 like 2,TIPE2)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其在COPD发病中的作用.方法 选择42例符合标准的COPD患者及37名健康对照者,用荧光定量PCR法检测其TIPE2的表达水平,用ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)的含量,由定量数据分析其直线相关关系.结果 COPD组TIPE2表达水平明显低于正常组(11.25±1.37比4.50±1.04,P＜0.01),而炎性细胞因子TNF-α、IL-6的含量明显高于正常组；COPD组TIPE2的表达水平与血清中TNF-α、IL-6的水平均呈负相关,而正常组二者之间无明显相关性.结论 COPD患者PBMC中TIPE2表达下降,且其表达水平与炎性细胞因子TNF-α、IL-6呈负相关,TIPE2可能在COPD的发病中发挥重要作用.