生长分化因子-9和骨形成蛋白-15基因的研究进展

生长分化因子-9(GDF-9)和骨形成蛋白-15(BMP-15)属于转化生长因子β超家族成员,由卵母细胞分泌,是卵泡发育过程中重要的旁分泌因子,能调控卵泡细胞间的相互作用,促进卵泡发育。近年研究发现,GDF-9和BMP-15基因的异常与雌性生育力、临床疾病如多囊卵巢综合征(PCOS)、卵巢早衰(POF)、卵巢高反应等有关。就GDF-9和BMP-15的基因结构、生物学作用及其基因多态性和基因突变方面的研究进展作一综述。     

生长分化因子-9和骨形成蛋白-15基因的研究进展

生长分化因子-9(GDF-9)和骨形成蛋白-15(BMP-15)属于转化生长因子β超家族成员,由卵母细胞分泌,是卵泡发育过程中重要的旁分泌因子,能调控卵泡细胞间的相互作用,促进卵泡发育.近年研究发现,GDF-9和BMP-15基因的异常与雌性生育力、临床疾病如多囊卵巢综合征(PCOS)、卵巢早衰(POF)、卵巢高反应等有关.就GDF-9和BMP-15的基因结构、生物学作用及其基因多态性和基因突变方面的研究进展作一综述.     

生长分化因子9、骨形态发生蛋白15信号转导机制研究进展

近年研究发现,卵母细胞来源的生长分化因子9(GDF-9)、骨形态发生蛋白15(BMP-15)是卵泡生长发育和卵巢功能的重要调节因子.两者通过自分泌和旁分泌机制,调节卵巢局部细胞的分化、增殖及其功能,调控优势卵泡的形成以及卵母细胞的成熟.GDF-9和BMP-15的下游信号通路及其调节机制亦成为近年研究的热点.着重就其基因、蛋白特点、信号转导及其调节机制作简要.     

生长分化因子9、骨形态发生蛋白15信号转导机制研究进展

近年研究发现,卵母细胞来源的生长分化因子9(GDF-9)、骨形态发生蛋白15(BMP-15)是卵泡生长发育和卵巢功能的重要调节因子。两者通过自分泌和旁分泌机制,调节卵巢局部细胞的分化、增殖及其功能,调控优势卵泡的形成以及卵母细胞的成熟。GDF-9和BMP-15的下游信号通路及其调节机制亦成为近年研究的热点。着重就其基因、蛋白特点、信号转导及其调节机制作简要综述。     

多囊卵巢综合征患者体外受精控制性超排卵方案的选择

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者进行体外受精-胚胎移植治疗时控制性超排卵方案的选择。方法回顾性分析216例PCOS患者,促排卵方案分别为长方案A组(56例)、超长方案B组(42例)、改良超长方案C组(54例)及拮抗剂方案D组(64例),分析比较各组患者资料。结果 4组患者一般情况、人绒毛膜促性腺激素注射日(HCG日)血清激素水平和获卵数类似;D组的促性腺激素(Gn)总量、Gn天数均低于B组和C组;D组的受精率、优质胚胎数及优质囊胚数均高于A组和C组。结论拮抗剂方案能缩短治疗时间、减少治疗费用,简单灵活,方便患者,可提高卵子和胚胎质量,减少并发症,安全性和有效性较好,是PCOS患者的理想选择。     

卵巢对控制性超排卵反应的回顾性研究

目的 探讨在体外受精-胚胎移植中卵巢对控制性超排卵的反应性.方法 回顾性分析57例实施体外受精-胚胎移植的治疗周期,病例组43例,均为因输卵管因素不孕者;对照组14例,因男性因素不孕或多囊卵巢综合征者.比较两组血清基础卵泡刺激素、黄体生成激素、雌二醇、人绒毛膜促性腺激素、日雌二醇水平、促性腺激素总量、促性腺激素天数及每组患者左右侧卵巢窦卵泡数、停促性腺激素日卵泡直径、获卵数、成熟卵子数.结果 两组血清基础黄体生成激素、雌二醇、人绒毛膜促性腺激素日雌二醇水平无明显差异,病例组基础卵泡刺激素水平、促性腺激素总量及促性腺激素天数均高于对照组(t值分别为1.21、1.65、2.62,均P＜0.05);两组患者左右侧卵巢停促性腺激素日8～14mm、15～19mm卵泡数无明显差异,但右侧卵巢窦卵泡数、停促性腺激素日20mm以上卵泡数、获卵数、成熟卵子数均高于左侧(病例组:t值分别为1.70、2.81、2.64、1.23,对照组:t值分别为1.25、2.17、1.82、2.98,均P＜0.05).结论 在体外受精-胚胎移植的控制性超排卵治疗周期中,右侧卵巢的反应性明显优于左侧.     

卵巢储备功能检测及控制性超排卵周期卵巢反应性预测

妇女生育潜能下降的根本原因在于卵巢内存留的可募集的卵泡数目减少及卵子质量下降。故妇女生育潜能下降又称为卵巢储备功能下降。在辅助生育技术(ART)中，卵巢储备功能下降妇女的妊娠率降低，流产率增加。在开始ART之前，对其生育潜能进行评估十分必要。对卵巢储备功能的影响因素及其检测方法、抑制素研究的新进展进行综述，并评价相关方法的预测价值。     

控制性超排卵中卵巢高反应与辅助生殖的安全运行

控制性超排卵是辅助生殖技术的重要步骤,有效的提高了助孕效果,同时也带来了卵巢高反应及卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)。卵巢高反应备受关注,对之具有一定的认识,但仍缺乏统一的判断标准及有效的临床应对策略。卵巢高反应带来了辅助生殖中最严重的并发症,其对亲代健康的影响重大,对子代的影响有待阐明。重视卵巢高反应及其导致的安全问题,是辅助生殖临床中的重要课题。     

PCOS患者GDF-9、BMP-15、BAX表达特点及其与卵巢储备功能的相关性

目的观察多囊卵巢综合征(PCOS)患者生长分化因子-9(GDF-9)、骨形态发生蛋白15(BMP-15)、BAX表达水平和卵巢储备功能,并分析PCOS患者GDF-9、BMP-15、BAX表达水平与卵巢储备功能的相关性。方法选取2017年2月至2018年3月在本院接受治疗的PCOS患者为研究对象,同时选取在本院接受治疗的卵巢囊肿患者作为对照。观察2组研究对象GDF-9、BMP-15、BAX表达水平和卵巢功能的差异,分析PCOS患者GDF-9、BMP-15、BAX表达水平与卵巢储备功能的相关性。结果 PCOS组患者的GDF-9、BMP-15和BAX表达水平均高于卵巢囊肿组(t=-30.567、-19.349、-11.412,P<0.001);PCOS组患者的AMH水平高于卵巢囊肿组(t=-9.242,P<0.001),AFC水平低于卵巢囊肿组(t=15.890,P<0.001);PCOS组患者的FSH、LH、E2和T水平高于卵巢囊肿组(t=-8.251、-18.138、-17.925、-12.761,P<0.001);PCOS患者GDF-9、BMP-15、BAX表达水平与AMH、FSH、LH、E2和T水平正相关,与AFC水平负相关(P<0.05)。结论多囊卵巢综合征患者的GDF-9、BMP-15、BAX表达水平较高,且与AMH、AFC、FSH、LH、E2和T等卵巢储备功能指标水平密切相关。     

控制性超促排卵后卵巢低反应的诊断及治疗

卵巢低反应（POR）是指在控制性超促排卵（COH）过程中卵巢对促性腺激素（Gn）反应过低甚至无反应,导致获卵数少、周期取消率高以及临床妊娠率降低的一种现象,其发生率达到9%～24%,给患者造成了巨大的经济及精神负担,是辅助生殖技术（ART）领域中最具有挑战性的难题之一。目前卵巢低反应诊断标准尚不统一,2011年ESHRE达成了对POR诊断的共识：①年龄≥40岁或存在其他引起POR的高危因素;②POR史（常规卵巢刺激方案获卵数≤3个）;③卵巢储备功能降低,如AFC＜5～7个或AMH＜0.5～1.1 ng/mL;至少符合以上三点中的两点即可诊断为POR。本文介绍卵巢低反应治疗的最新进展,如调整促排卵方案及增加促排卵药物的用量及使用时间;使用雄激素或口服避孕药作预处理;加用生长激素、阿司匹林等。     

长方案促排卵周期卵巢反应性与IVF-ET结局的关系

目的:探讨长方案促排卵周期中卵巢反应性与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的关系。方法:回顾性分析779个长方案促排卵IVF-ET周期的临床资料,将患者分为35岁和≥35岁两组,每组再根据获卵数分成为个亚组,获卵数≤5个为卵巢低反应组,6~19个为正常反应组,≥20个为高反应组,比较各组一般情况和临床结局。结果:①35岁与≥35岁患者卵巢高反应组多囊卵巢综合征(PCOS)患者的比例高于其它两组(P0.05),胚胎利用率低于其它两组(P0.05);②35岁患者低反应组的优胚率和胚胎利用率高于其他两组(P0.05),胚胎种植率与正常反应组无统计学差异(P0.05);③不同卵巢反应各组流产率和产科结局无统计学差异(P0.05)。结论:长方案周期中不同卵巢反应性不影响流产率和产科结局。卵巢高反应者高雌激素水平可能影响子宫内膜的容受性而降低胚胎种植率。35岁的卵巢低反应者仍可获得较满意的妊娠率。     

血清生长分化因子15水平与慢性淋巴细胞白血病发生风险的关联研究

目的 采用两样本孟德尔随机化研究方法探讨血清生长分化因子15(GDF15)水平与慢性淋巴细胞白血病(CLL)发生之间的关联。方法 基于欧洲人群血清GDF15和CLL的全基因组关联研究公开数据库,筛选与血清GDF15水平相关的遗传变异位点作为工具变量,采用逆方差加权法评估遗传学预测的血清GDF15浓度与CLL发生的关联,采用最大似然比法进行敏感性分析,采用MR-Egger回归探讨工具变量潜在多效性。结果 研究共纳入3个单核苷酸多态位点作为工具变量,逆方差加权法结果显示,血清GDF15水平与CLL发生风险之间存在负相关,GDF15浓度每升高一个标准差(SD),CLL发生风险降低33%(95%置信区间:2%～54%)(P=0.039)。敏感性分析得到了一致的结果。此外,MR-Egger回归未发现存在多效性。结论 本研究结果提示,在欧洲人群中,血清GDF15水平与CLL发生之间可能存在负相关,仍需大样本人群研究及体内外实验进一步阐明GDF15在CLL发生发展中的作用及其潜在生物学机制。     

自然周期与超促排卵方案在卵巢低储备低反应患者中的临床应用

目的:探讨自然周期体外受精-胚胎移植(NC-IVF-ET)和超促排卵周期体外受精-胚胎移植(COH-IVF-ET)在卵巢低储备低反应患者中的临床应用价值。方法:回顾性分析2007年6月～2010年12月接受IVF治疗的170名卵巢储备功能降低的低反应患者共249个IVF治疗周期,按治疗方案分为A组(NC-IVF-ET组)(87周期)和B组(COH-IVF-ET组)(162周期);有24名患者先后行过两种方案共66个治疗周期,同样按方案分为C组(NC-IVF组)(36周期)和D组(COH-IVF组)(30周期)。使用spss13.0统计软件分别对各分组的一般情况、治疗情况及结局行对照分析。结果:A组患者年龄较B组小,窦状卵泡数(AFC)较少,基础卵泡刺激素(FSH)较高,但两组不孕年限差异无统计学意义;A组患者的促性腺激素(Gn)用量、HCG日的雌二醇(E2)水平、内膜厚度及各径线的卵泡数均低于B组;A组较B组抽吸的卵泡数、获卵数、移植胚胎数均较少,获卵率较低,周期取消率较高,差异有统计学意义;而两组间正常受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎种植率、移植周期的临床妊娠率及早期自然流产率比较差异均无统计学意义。C组年龄和窦状卵泡数较D组低,基础FSH水平较高,两组间不孕年限无统计学差别;C组的Gn用量、HCG日E2水平、内膜厚度及各径线卵泡数均低于D组,差异有统计学意义;两组相比,C组抽吸的卵泡数、获卵数、移植胚胎数均较少,获卵率较低,周期取消率较高,差异有统计学意义;但C、D两组间正常受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎种植率、移植周期的临床妊娠率比较差异均无统计学意义。结论:对于卵巢储备降低的卵巢低反应患者,自然周期IVF与超促排卵IVF各有利弊,可综合患者各方面条件,灵活选择治疗方案。     

IVF-ET中卵巢低反应临床资料分析及再次治疗策略

目的:探讨在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期控制性超排卵(COH)中出现临床卵巢低反应患者的临床特征及其再治疗策略。方法:回顾性分析接受IVF-ET治疗,表现为临床卵巢低反应的189例患者临床资料(以获卵≤4枚为诊断标准),并按照患者年龄分为≤30岁、>30～35岁、>35岁3组;未妊娠接受第2次IVF-ET治疗共71个周期的临床资料进行自身对照分析。结果:第1周期治疗中,≤30岁组、>30～35岁组优质胚胎率和妊娠率均高于>35岁组,周期取消率低于>35岁组;第2周期调整COH方案可以获得正常的卵巢反应;对于卵巢低反应的高龄患者,小剂量的生长激素可以增加其优质胚胎率。结论:在COH方案中,部分卵巢低反应患者存在卵巢反应的不一致性,应结合既往超排经历重新评估卵巢储备。     

生长分化因子-9在高雄激素多囊卵巢综合征大鼠模型中的表达

目的:探讨生长分化因子-9(GDF-9)及其mRNA在高雄激素多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型中的表达。方法:43只雌性SD大鼠随机分组,实验组大鼠皮下注射脱氢表雄酮建立PCOS动物模型;采用放射免疫法测定血清性激素水平,结合大鼠模型卵巢组织HE染色的病理结构改变进行模型验证;采用免疫组织化学法检测大鼠卵巢组织GDF-9表达及定位,蛋白印迹法进一步观察GDF-9表达变化;逆转录PCR法检测GDF-9mRNA表达。结果:血清性激素水平及HE染色病理结果均提示模型建立成功。免疫组织化学结果显示实验组卵泡中GDF-9表达增强,卵巢间质GDF-9表达下降,实验组和对照组间卵泡和间质灰度值差异均有统计学意义(P<0.05)。蛋白印迹检测及PCR结果提示实验组GDF-9蛋白表达下降,而GDF-9mRNA表达与对照组比较无差异。结论:GDF-9表达及分布改变可能是PCOS发生发展的重要原因。     

控制性超促排卵中垂体激素与卵巢激素的变化分析

目的探讨体外授精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)在控制性超促排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)过程中垂体激素与卵巢激素的变化规律及其意义。方法动态监测38例行IVF-ET的患者基础和COH过程中促卵泡生成素(follicle-stimulating hormone,FSH)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、催乳素(prolactin,PRL)、雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,P)、睾酮(testosterone,T)血清水平。结果 COH过程中,垂体激素FSH水平主要受外源性FSH的影响,LH一直低于基础LH水平,而PRL变化与月经生理的改变基本相似;卵巢激素E2值随卵泡生长显著升高,P变化趋势与月经生理相似,T于卵泡成熟时显著增高。结论 COH中PRL水平与月经生理周期的变化相似,而T可能与卵泡发育有关。     

寿胎丸对控制性超排卵小鼠子宫内膜血管内皮生长因子及其受体的影响研究

目的探讨寿胎丸提高控制性超排卵(Controlled Ovarian Hyperstimulation,COH)小鼠子宫内膜容受性的作用机制。方法采用促性腺激素释放激素激动剂+血清促性腺激素+人绒毛膜促性腺激素建立COH小鼠模型,将其分为模型组、寿胎丸高、中、低剂量组、阿司匹林对照组、同时设正常对照组,在造模的同时,寿胎丸高、中、低剂量组分别按6、3、1 g/kg寿胎丸灌胃;阿司匹林对照组按0.2 g/kg阿司匹林灌胃;模型组、正常对照组以等体积生理盐水灌胃,1次/d,连用11 d。采用HE染色、免疫组化法对子宫进行病理切片制作,通过Mias-2000图像分析系统检测子宫内膜血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、血管内皮细胞生长因子受体-1(Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-1,VEGFR-1)蛋白表达水平,并测量子宫内膜厚度及其血管数。结果与正常对照组比较,模型组、寿胎丸高、中、低剂量组、阿司匹林对照组子宫内膜厚度无明显变化;模型组子宫血管数、内膜VEGF、VEGFR-1明显减少(P0.05)。与模型组比较,寿胎丸高、中、低剂量组、阿司匹林对照组子宫血管数、内膜VEGF明显增多(P0.05),寿胎丸高剂量组、阿司匹林对照组子宫内膜VEGFR-1明显增多(P0.05)。结论寿胎丸可能通过促进COH小鼠子宫内膜VEGF及受体表达、增加子宫血管数量,进而提高COH小鼠子宫内膜容受性。     

血清生长分化因子-15、心脏型脂肪酸结合蛋白及脑利钠肽水平与肺炎合并心力衰竭患儿预后的关系

目的探讨血清生长分化因子(GDF)-15、心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)及脑利钠肽(BNP)水平与肺炎合并心力衰竭(HF)患儿预后的关系。 方法选择2016年5月至2018年5月,于河北省儿童医院诊断的80例肺炎合并HF患儿为研究对象,纳入研究组。选择同期于本院进行儿童保健的80例健康儿童为对照,纳入对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA),检测2组受试儿血清GDF-15、H-FABP、BNP水平和HF标志蛋白心肌肌钙蛋白(cTnI)、肌酸激酶(CK)-MB水平。2组受试儿血清GDF-15、H-FABP、BNP、cTnI、CK-MB水平比较,采用成组t检验。研究组患儿血清GDF-15、H-FABP及BNP水平与HF标志蛋白cTnI、CK-MB的相关性分析,采用Pearson相关性分析。采用Cox比例风险回归模型,分析血清GDF-15、H-FABP、BNP水平与肺炎合并HF患儿预后的关系。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求,2组受试儿监护人均签署临床研究知情同意书。2组受试儿性别构成比、出生胎龄、出生体重、年龄等一般临床资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。 结果①研究组患儿血清GDF-15、H-FABP、BNP、cTnI、CK-MB水平,分别为(5.01±0.73) ng/mL、(36.2±6.2) ng/mL、(899.8±300.3) pg/mL、(0.31±0.10) μg/L、(36.2±5.3) U/L,均显著高于对照组的(0.59±0.10) ng/mL、(1.2±0.3) ng/mL、(21.4±4.3) pg/mL、(0.06±0.02) μg/L、(18.4±2.6) U/L,并且2组比较,差异均有统计学意义(t＝53.652、50.432、26.164、21.931、26.973,P均<0.001)。②肺炎合并HF患儿血清GDF-15、BNP水平与血清cTnI水平,均呈正相关关系(r＝0.340、P＝0.002,r＝0.285、P＝0.010);血清GDF-15、H-FABP水平与血清CK-MB水平,均呈正相关关系(r＝0.765、P<0.001,r＝0.302、P＝0.006)。③Cox比例风险回归模型分析结果显示,血清GDF-15、H-FABP、BNP高表达患儿的不良预后风险,分别是血清GDF-15、H-FABP、BNP低表达患儿的2.319倍(HR＝2.319,95%CI：1.306～4.118,P＝0.004),1.737倍(HR＝1.737,95%CI：1.027～2.937,P＝0.039)及1.904倍(HR＝1.904,95%CI：1.135～3.195,P＝0.015)。 结论血清GDF-15、H-FABP、BNP在肺炎合并HF患儿中表达增高,并且与患儿不良预后密切相关。由于本研究纳入样本量相对较小,这3个指标与肺炎合并HF患儿预后的关系,以及对于该病患儿预后的判断价值,仍然有待大样本、多中心、随机对照试验进一步研究、证实。     

骨形态发生蛋白15基因多态性与复发性葡萄胎和习惯性流产的相关性研究

目的探讨骨形态发生蛋白15(BMP15)基因多态性与复发性葡萄胎(RHMs)和习惯性流产(RSAs)的相关性。方法收集2012年10月-2013年9月在加拿大麦吉尔大学人类健康中心妇产科治疗的77例不同种族的RHMs和习惯性流产妇女的血液标本,采用基因外显子测序分析患者BMP15基因的多态性,并采用蛋白功能预测软件预测各SNPs对BMP15蛋白功能的影响。结果在BMP15基因2个外显子中共检测到5个错义突变和1个插入突变。其中在外显子1中检测到2个错义突变(p.S5R和p.N103S);在外显子2中检测到3个错义突变(p.L148P,p.A180T,p.H200Y)和1个插入突变,(p.Leu263dup)。通过预测,p.L148P突变可能会严重影响BMP15蛋白的活性进而影响卵巢功能,而p.S5R突变的影响相对较小,其余SNPs对BMP15蛋白功能基本无影响。结论 BMP15基因突变除了可能与RHMs和习惯性流产妇女的卵泡生成障碍及卵巢功能早衰相关,还可能导致葡萄胎恶变。     

白细胞介素-18及血管内皮生长因子对卵巢过度刺激综合征的预测价值

目的探讨白细胞介素-18（IL-18）及血管内皮生长因子（VEGF）对卵巢过度刺激综合征（OHSS）的预测价值。方法体外受精．胚胎移植（IVF—ET）患者66例,按采卵日是否发生OHSS及高危因素分为正常组、高危组和OHSS组。采卵日收集3组患者血清和卵泡液标本,酶联免疫吸附法（ELISA）测定IL—18和VEGF水平,分析其对卵巢过度刺激综合征（OHSS）的预测价值。结果OHSS组血清和卵泡液IL—18水平分别为（646±203）ng／L和（885±345）ng／L,明显高于高危组和正常组（P〈0．01）;OHSS组血清和卵泡液VEGF水平分别为（286±108）ng／L和（985±214）ng／L,明显高于高危组和正常组（P〈0．01）。结论OHSS患者血清和卵泡液IL-18及VEGF水平明显升高,说明IL—18和VEGF在OHSS的发生、发展中具有一定作用,测定采卵日血清和卵泡液IL-18及VEGF水平,对预测OHSS的发生有一定作用。