骨肉瘤细胞凋亡相关基因的表达及其临床意义

目的 探讨反映骨肉瘤预后的蛋白标记物。方法 对骨肉瘤石蜡组织作免疫组化和Tunel染色,研究p53 c-myc和bcl-2基因的表达与肿瘤细胞凋亡指数(Al)的关系,及其与病理类型和患者颅后的关系。结果 p53、c-myc和bcl-2的表达水平与细胞凋亡指数呈负相关,与病理类型无相关关性。p53、c-myc、bcl-2和细胞凋亡指数与患者远期生存密切相关。结论 p53、c-myc和bcl-2的表达水平以及细胞凋亡指数可作为判断骨肉瘤恶性程度和预后的指标,可指导临床进行治疗。     

Survivin在胃癌中的表达及其与细胞凋亡、p53的关系

目的研究Survivin在胃癌及不典型增生组织中的表达情况以及与细胞凋亡和p53的关系.方法采用免疫组织化学方法及TUNEL技术对胃癌及不典型组织分别进行检测.结果Survivin、p53在胃癌中的表达明显高于不典型组织和正常胃粘膜,其中p53蛋白表达阳性91例中Survivin的阳性表达为56(61.5%)例,p53蛋白表达阴性的59例中Survivin阳性表达为17(28.8%)例,两者阳性表达率有显著性差异(P＜0.05).Survivin蛋白阳性表达标本中的凋亡指数(0.60%)与其阴性组(0.94%)之间有显著性差异(P＜0.05).结论Survivin可抑制细胞凋亡;在胃癌中的表达与p53有显著相关性.     

P33ING1、p53在膀胱移行细胞癌中的表达及与细胞凋亡的相关性

目的:探讨抑癌基因P33ING1在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及其与p53蛋白表达及细胞凋亡的相关性.方法:利用免疫组化S-P法和TUNEL.法检测83例BTCC及11例正常膀胱黏膜组织P33ING1、p53的表达及细胞凋亡指数(AI).结果:83例膀胱移行细胞癌组织中,P33ING1蛋白的阳性表达率为59.03%,而正常膀胱黏膜组织中P33ING1蛋白阳性表达率为90.9%.P33ING1蛋白表达与膀胱移行细胞癌的WHO肿瘤分级有相关性.spearman相关分析表明P33ING1蛋白表达与p53蛋白表达正相关(P<0.05).AI与P33ING1及p53蛋白表达无相关性.结论:P33ING1在膀胱移行细胞癌中表达下降可能在膀胱移行细胞癌的发生、发展过程中起重要作用,P33ING1与p53基因具有协同作用,同时检测p53的状态和P33ING1表达水平,对于膀胱癌的诊断、治疗和预后判断可能具有积极意义.     

膀胱移行细胞癌中MDR、p53表达及细胞凋亡的意义

目的:探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)中P-gP、p53基因及细胞凋亡表达的意义.方法:利用免疫组化S-P法和TUNEL法检测83例BTCC的P-gP、p53的表达及细胞凋亡指数(AI).结果:在83例膀胱移行细胞癌中P-gp阳性表达率为71.08%,p53阳性表达率为50.60%,AI为1.4335±0.3863;P-gp阳性表达在不同病理分级、临床分期及预后中无显著性差异(P＞0.05),p53及AI随着病理分级和临床分期而增高,均有显著性(P＜0.05),p53阳性表达复发组高于无复发组(P＜0.01),AJ复发组高于无复发组(P＜0.05).结论:检测P-gp可指导BTCC的化疗药物选择,p53高表达、细胞凋亡指数增高与BTCC的进展有关,P-gp、p53及AI高表达者预后及疗效差,p53可作为BTCC独立的预后因素.     

Survivin p53蛋白在鼻NK/T淋巴瘤中的表达及其与细胞凋亡和预后的关系

目的:探讨Survivin、p53蛋白在鼻NK/T淋巴瘤中的表达及其与细胞凋亡和预后的关系。方法:应用TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术和免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(SP法),检测24例鼻NK/T淋巴瘤和17例良性淋巴结病变中细胞凋亡和Survivin、p53蛋白的表达水平。结果:Survivin、p53蛋白在鼻NK/T淋巴瘤表达的阳性率分别为45.8%(11/24)和62.5%(15/24);Survivin表达上调与p53高表达密切相关(P<0.05);凋亡指数与Survivin、p53蛋白明显呈负相关(P<0.005)。Survivin过表达者的平均生存时间明显短于阴性者(P=0.03),但p53表达和细胞凋亡指数与患者的预后无相关性(P>0.05)。结论:Survivin基因异常表达引起的凋亡抑制可能在鼻NK/T淋巴瘤的发生进展中有一定的作用,且与p53异常表达显著相关。Survivin表达可能是鼻NK/T淋巴瘤的一个新的预后不良因子。     

TRAIL、Ki-67蛋白在人骨肉瘤中表达及其与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系

目的:通过观察TRAIL、Ki-67在人骨肉瘤组织中的表达规律及其相互关系,探讨二者与骨肉瘤细胞增殖、凋亡的相关性.方法:用免疫组织化学方化法检测TRAIL、Ki-67蛋白在骨肉瘤及骨软骨瘤中的表达,用TUNEL方法通过激光扫描共聚焦显微镜检测骨肉瘤及骨软骨瘤组织中的细胞凋亡分布情况并计算增殖和凋亡指数.结果:骨肉瘤组织TRAIL蛋白表达强度低于骨软骨瘤(t=-5.51,P＜0.05);而Ki-67蛋白表达高于骨软骨瘤(t=17.69,P＜0.05).TRAIL和Ki-67在骨肉瘤中的表达呈负相关(r=-0.8444,P＜0.01).骨肉瘤中细胞凋亡指数(AI)显著低于骨软骨瘤(P＜0.01);而增殖指数(PI)显著高于骨软骨瘤(P＜0.01).骨肉瘤中Ki-67蛋白表达与细胞凋亡指数之间呈负相关(r=-0.562 2,P＜0.01);而TRAIL蛋白表达与细胞凋亡指数呈正相关(r=0.6350,19<0.01),而与增殖指数呈负相关(r=-0.553 0,19<0.01).结论:TRAIL参与细胞凋亡的调控,可能是诱导骨肉瘤细胞凋亡的分子基础之一;Ki-67在肿瘤细胞的增殖与凋亡中具有重要作用,骨肉瘤组织中Ki-67明显过表达,而TRAIL蛋白表达明显下调,表明两者在骨肉瘤的发生、发展中起拮抗作用.如能抑制Ki-67的表达,促进TRAIL的表达,有可能提高骨肉瘤细胞的凋亡敏感性.     

TRAIL、Caspase-8和NF-кB蛋白在人骨肉瘤中的表达及其与细胞凋亡的相关性研究

目的 探讨TRAIL、Caspase-8和NF-кB在人骨肉瘤组织及骨软骨瘤组织中的表达规律及其与骨肉瘤细胞凋亡的相互关系.方法 应用免疫组化方法,检测TRAIL、Caspase-8和NF-кB蛋白在43例骨肉瘤及15例骨软骨瘤中的表达,并经图像分析系统测量TRAIL、caspase-8和NF-кB蛋白的平均光密度(OD)值;用TUNEL方法检测骨肉瘤及骨软骨瘤中细胞凋亡.结果 TRAIL、Cuspase-8蛋白在骨肉瘤中的阳性表达均低于骨软骨瘤组织(P<0.05);而NF-кB蛋白在骨肉瘤中的表达高于骨软骨瘤(P<0.05).TRATL与Caspase-8蛋白在骨肉瘤中表达呈正相关(P<0.01);而TRATL与NF-кB蛋白在骨肉瘤中表达呈负相关(P<0.01).骨肉瘤组细胞凋亡指数(AI)显著低于骨软骨瘤组(P<0.05);TRAIL、Caspase-8蛋白表达与细胞凋亡均呈正相关(P<0.01);而NF-кB蛋白表达与骨肉瘤细胞凋亡呈负相关(P<0.01).结论 TRAIL基因可能是诱导骨肉瘤细胞凋亡的分子基础,参与了其发生发展过程中细胞凋亡的调控.Caspuse-8作为影响细胞凋亡过程的因子,在骨肉瘤发生、发展中发挥作用.NF-кB在骨肉瘤细胞增殖与凋亡中具有重要作用.TRAIL、Caspase-8蛋白呈低表达,可能受NF-кB高表达的调控而不能诱导细胞凋亡.提示三者在骨肉瘤的发生、发展中起协同作用.     

p53/bcl-2与放疗诱导的宫颈癌细胞凋亡关系的研究

目的探讨宫颈癌放疗过程中,放疗诱导的细胞凋亡与p53、bcl-2的相关性.方法选择未经治疗的宫颈癌病人20例为实验对象,搜集分割放疗前后宫颈癌组织标本,用TDT-mediated dUTP-biotin nick end labeling(TUNEL)方法检测凋亡细胞;采用单克隆抗体免疫组化ABC法检测细胞凋亡相关基因p53、bcl-2的蛋白表达水平.结果(1)在宫颈癌放疗前后,细胞凋亡阳性率和平均凋亡指数分别为25%和0.11%、75%和2.8%,放疗前后有显著差异(P＜0.001);(2)放疗后p53蛋白表达显著减少,bcl-2蛋白无显著变化;(3)放疗前后,p53基因的表达与细胞凋亡呈有意义的相关性变化.结论放射治疗诱导了宫颈癌细胞凋亡的发生,并与凋亡调节基因p53及其表达呈间接有关.     

p33ING1b增强骨肉瘤细胞U2OS对足叶乙甙的敏感性

背景与目的作为一个新的抑癌基因,ING1与p53有许多相似的生物学功能,如细胞生长抑制、DNA修复、凋亡和化疗敏感性等.本实验目的在于研究p33ING1b对骨肉瘤细胞药物敏感性的影响并探讨其作用机制.方法瞬时转染p33ING1b进入骨肉瘤细胞株U2OS后,用足叶乙甙(etoposide,VP-16)处理24 h,然后采用台盼蓝拒染法计数活细胞数并计算细胞生长抑制率,流式细胞仪、DAPI染色等方法检测细胞凋亡率,Western blot技术检测p53、p21WAF1、MDM2和Bax蛋白的表达.结果台盼蓝染色结果表明,瞬时转染p33ING1b进入骨肉瘤细胞株U2OS后,再用VP-16处理24 h,细胞生长抑制率明显增加[(63.1±5.1)%].流式细胞计数和DAPI染色检测结果表明,细胞凋亡率明显增加(62.7%).Western blot检测结果显示,外源性p33 ING1b高表达明显提高了p53及其下游基因p21WAF1和Bax蛋白的表达水平,转染p33ING1b进入骨肉瘤细胞株U2OS后,再用VP-16处理24 h,p53、p21和Bax蛋白表达增加.在各实验组中,MDM2的蛋白表达没有明显变化.结论p33ING1b能够上调p53蛋白,并上调p53下游因子--p21WAF1和Bax的表达水平,通过p53依赖性凋亡信号通路,提高骨肉瘤细胞U2OS对VP-16的敏感性.     

p57kip2蛋白:晚期肝癌的预后因素

目的:检测细胞周期抑制因子p57kip2在肝癌(HCC)中的表达水平,探讨它与各种临床病理因素、增殖凋亡的关系及其预后价值.方法:用免疫组织化学方法检测40例肝癌组织、40例癌旁组织和15例正常肝脏组织中p57kip2的表达水平;用DNA缺口末端标记技术检测肝癌组织中细胞凋亡水平.结果:p57kip2在肝癌组织中的阳性率42.5%,显著低于癌旁肝组织(72.5%)和正常肝脏组织(93.3%)(P＜0.05),p57kip2的缺失表达与晚期肝癌和肝外转移有关(P＜0.05).HCC组织中存在增殖凋亡异常(P＜0.05).p57kip2的阳性表达与HCC组织低增殖有关(P＜0.05),与细胞凋亡无关(P＞0.05).TNM分期、肝外转移,AFP水平与p57kip2蛋白表达与HCC预后有关(P＜0.05),且p57kip2和临床分期是HCC的独立预后因素(P＜0.05).结论:p57kip2参与了肝癌的发生发展,可用于预测晚期肝癌预后.