SSTF上调miR-495表达减缓高糖诱导的视网膜神经节细胞氧化损伤和凋亡

目的 探讨黄岑茎叶总黄酮(SSTF)对高糖诱导的视网膜神经节细胞(RGC-5)损伤的保护机制。方法 根据处理方法不同将RGC-5细胞分成高糖(HG)组、对照(Con)组、HG+SSTF-低剂量(L)组、HG+SSTF-中剂量(M)组、HG+SSTF-高剂量(H)组、HG+miR-NC组、HG+miR-495组、HG+SSTF+anti-miR-NC组、HG+SSTF+anti-miR-495组，每组设置9复孔。检测MDA含量以及CAT、SOD活性。流式细胞术检测细胞凋亡。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-495表达。结果 HG组RGC-5细胞凋亡率、MDA含量高于Con组(P<0.05),CAT、SOD的活性、miR-495表达低于Con组(P<0.05)。HG+SSTF-L组、HG+SSTF-M组、HG+SSTF-H组RGC-5细胞凋亡率、MDA含量低于HG组(P<0.05),CAT和SOD的活性、miR-495表达高于HG组(P<0.05)。HG+miR-495组RGC-5细胞凋亡率[(14.96±1.26)%]、MDA含量[(4.62±0.4...     

艾塞那肽对高糖诱导INS-1细胞内质网应激及JNK信号通路的影响

目的 探讨艾塞那肽对高糖诱导INS-1细胞的内质网应激(ERS)及对JNK信号通路的影响。方法 小鼠INS-1细胞按不同的处理方式分为4组:对照组(A组,完全培养基)、高糖组(B组,30mmol/L糖培养基)、高糖+100nmol/L艾塞那肽组(C组)、高糖+100nmol/L艾塞那肽+JNK激动剂组(D组)。每天换液前观察各组细胞生存状态,培养7天后,MTT法检测细胞活性;提取细胞总蛋白,Western blot法检测Bip、CHOP、P-SAPK/JNK、caspase-3蛋白的表达水平。结果 培养至第4天B组细胞出现死亡,培养至第6、7天B组及D组细胞出现大量死亡;与A组比较,B组和D组的活性(A值)下降(P<0.05);与A组比较,B组高糖刺激后导致内质网应激上调Bip、CHOP、P-SAPK/JNK、caspase-3的表达量(P<0.05);与B组比较,C组艾塞那肽可通过抑制内质网应激下调Bip、CHOP、P-SAPK/JNK、caspase-3表达量(P<0.05);与C组比较,D组JNK激动剂促进JNK信号通路上调P-SAPK/JNK、caspase-3表达量(P<0.05)。结论 艾塞那肽可以缓解或阻断高糖刺激诱发的INS-1细胞内质网应激(ERS),抑制JNK信号通路,减少细胞凋亡。     

色素上皮衍生因子对高糖刺激下大鼠视网膜Müller细胞形态及活性的影响

目的检测色素上皮衍生因子(PEDF)对高糖刺激下体外培养SD大鼠视网膜Müller细胞形态及活性的影响,探讨PEDF对Müller细胞的保护作用。方法实验分为对照组、高糖模型(HG)组、PEDF干预高糖模型(HG+PEDF)组。采用反复胰蛋白酶消化法培养纯化SD大鼠视网膜Müller细胞,免疫荧光双标鉴定纯度,应用倒置相差显微镜、透射电子显微镜、CCK-8试剂盒、SOD试剂盒及MDA试剂盒检测各组Müller细胞形态与活性的改变及超氧化物歧化酶(SOD)活力与丙二醛(MDA)含量的变化。结果对照组、HG组、PEDF+HG组细胞吸光度分别为0.67±0.03、0.54±0.03、0.63±0.03,SOD活力分别为(196.69±22.15)、(153.42±15.54)、(180.32±16.47)U/mg prot,M DA含量分别为(2.11±0.43)、(2.86±0.33)、(2.40±0.28)nmol/mg prot。与对照组相比,HG组Müller细胞形态发生明显改变,细胞活性及SOD活力降低(P<0.01),M DA含量升高(P<0.01);与HG组相比,PEDF+HG组Müller细胞形态改变较小,细胞活性升高(P<0.01),SOD活力升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05)。结论外源给予PEDF可显著减轻高糖所致的Müller细胞形态、活性的改变及细胞损伤,对Müller细胞具有显著的保护作用。     

生物钟基因Bmal1对高糖高脂H9C2细胞缺氧/复氧损伤的影响及分子机制探讨

目的：探讨生物钟基因Bmal1对高糖高脂H9C2细胞缺氧/复氧损伤的影响及分子机制。方法：采用随机数字表法将36个H9C2细胞分为低糖+常氧组(LG+N组)、低糖+缺氧/复氧组(LG+H/R组)、高糖高脂+常氧组(HG/HP+N组)、高糖高脂+缺氧/复氧组(HG/HP+H/R组)、高糖高脂+缺氧/复氧+Bmal1过表达组(HG/HP+H/R+Ad-Bmal1组)、高糖高脂+缺氧/复氧+Bmal1过表达+PI3K抑制剂Wortmannin组(HG/HP+H/R+Ad-Bmal1+Wort组)，每组6个。比较各组H9C2细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性、细胞凋亡率、细胞存活率，Bmal1、磷酸化AKT蛋白/AKT蛋白(p-Akt/Akt)、Bax的表达水平。结果：LG+H/R组、HG/HP+N组的Bmal1表达量低于LG+N组，细胞损伤程度高于LG+N组，差异有统计学意义(P<0.05);HG/HP+H/R组Bmal1表达量低于LG+H/R组，细胞损伤程度高于LG+H/R组，差异有统计学意义(P<0.05);HG/HP+H/R+Ad-Bmal1组细胞损伤程度低于HG/HP+H/R组...     

抑制细胞周期素依赖性蛋白激酶5对小鼠足细胞凋亡的影响

目的探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶5(Cdk5)在高糖刺激体外培养小鼠足细胞中的表达及抑制Cdk5表达对高糖诱导足细胞凋亡的影响。方法 (1)体外培养条件性小鼠足细胞,分为正常糖组、甘露醇组、高糖组,高糖组按不同刺激时间分为0、6、12、24、48h5组,应用蛋白质印迹(Western blot)法检测足细胞中Cdk5蛋白表达水平。(2)应用Cdk5miRNA干扰质粒抑制足细胞中Cdk5基因的表达水平。分别设立:NG组(正常糖);HG组(高糖);HG+S组(高糖+Scrambled阴性质粒);HG+C组(高糖+Cdk5miRNA质粒)。以上各组细胞培养48h后,应用流式细胞术和末端脱氧核苷酰基转移酶介导性dUTP切口末端标记(TUNEL)法检测足细胞凋亡水平,Western blot法检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和分裂型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)的蛋白表达水平。结果与正常糖组相比,高糖刺激后,足细胞中Cdk5的蛋白表达水平明显增加(P<0.05)。Cdk5miRNA干扰质粒能显著抑制足细胞中Cdk5的表达水平。与HG组和HG+S组相比,HG+C组足细胞凋亡率显著降低(P<0.05),凋亡相关蛋白cleaved caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2蛋白表达比率也有明显降低(P<0.05)。结论高糖刺激可以增加足细胞中Cdk5蛋白的表达水平;抑制Cdk5表达可以降低高糖刺激诱导的足细胞凋亡。     

高糖诱导人脐静脉内皮细胞fractalkine表达及其凋亡的研究

目的探讨高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVECs)fractalkine(FKN)表达与细胞凋亡的可能机制。方法对数生长期的HUVECs,分为正常组(N)、高糖组(HG)、氯化锂(lithium chloride,LiCl)组(LiCl)、高糖+LiCl组(HG+LiCl)。5.5 mmol/L的低糖DMEM培养的HUVECs种板10 h后按以上分组加入10 mmol/L的LiCl预处理2 h,再用33.3 mmol/L的高糖干预48 h后,用TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化SABC法检测β-catenin及p-GSK-3β(Ser9),免疫荧光FITC法检测FKN蛋白水平变化,RT-PCR检测GSK-3β和FKN mRNA水平变化。结果①与正常组比较,高糖诱导的HUVECs凋亡率明显增加(P<0.05)。与高糖组比较,LiCl可明显降低高糖环境下HUVECs的凋亡率(P<0.05),但仍高于正常组(P<0.05)。②与正常组比较,高糖组HUVECsβ-catenin及p-GSK-3β(Ser9)蛋白表达降低(P<0.05);GSK-3βmRNA水平及FKN蛋白和mRNA水平升高(P<0.05)。③与高糖组比较,LiCl+高糖组HUVECsβ-catenin及p-GSK-3β(Ser9)蛋白表达升高(P<0.05),GSK-3βmRNA水平(P<0.05)及FKN蛋白和mRNA(P<0.05)水平降低。结论高糖诱导的HUVECs凋亡可能与Wnt信号通路抑制和抑制FKN表达上调有关。     

红枣色素通过调控miR-29b-3p/MST1表达对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响及机制

目的探讨红枣色素对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响及其机制。方法设正常对照组(NG)(5 mmol/L D-葡萄糖),高糖处理(HG)组(30 mmol/L D-葡萄糖),HG+红枣色素-低组(30 mmol/L D-葡萄糖+50 mg/L红枣色素)、HG+红枣色素-中组(30 mmol/L D-葡萄糖+150 mg/L红枣色素)、HG+红枣色素-高组(30 mmol/L D-葡萄糖+250 mg/L红枣色素);将miR-NC、miR-29b-3p、anti-miR-NC、anti-miR-29b-3p分别转染至未经任何处理的MPC5细胞中,记为miR-NC组,miR-29b-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-29b-3p组;将miR-NC、miR-29b-3p、si-NC、si-蛋白激酶1(MST1)染至单纯30 mmol/L的D-葡萄糖处理的MPC5细胞中,记为HG+miR-NC组,HG+miR-29b-3p组、HG+si-NC组、HG+si-MST1组。将anti-miR-NC、anti-miR-29b-3p转染至30 mmol/L的D-葡萄糖和250 mg/L红枣色素处理的MPC5细胞中,记为HG+红枣色素+anti-miR-NC组、HG+红枣色素+anti-miR-29b-3p组,均采用脂质体法。qRT-PCR检测miR-29b-3p和MST1 mRNA的表达水平;Western Blot检测蛋白表达;超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒检测SOD活性和MDA含量;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果与NG组比较,HG组小鼠足细胞中miR-29b-3p的表达水平显著降低,MST1 mRNA的表达水平显著升高,SOD活性显著降低,MDA含量显著升高,Bcl-2、Nephrin、Podocin表达水平显著降低,Bax、MST1表达水平显著升高,细胞凋亡率显著升高,差异有统计学意义(P0.05);与HG组比较,不同浓度红枣色素的高糖处理组小鼠足细胞中miR-29b-3p的表达水平逐渐显著升高,MST1 mRNA的表达水平显著降低,SOD活性显著升高,MDA含量显著降低,Bcl-2、Nephrin、Podocin表达水平显著升高,Bax、MST1表达水平显著降低,细胞凋亡率显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。Western Blot结果显示,miR-29b-3p组小鼠足细胞中MST1蛋白的表达水平(0.21±0.03)显著低于miR-NC组(0.42±0.04);anti-miR-29b-3p组小鼠足细胞中MST1蛋白的表达水平(0.87±0.08)显著高于anti-miR-NC组(0.40±0.04),差异均有统计学意义(P0.05)。与HG+miR-NC组比较,HG+miR-29b-3p组小鼠足细胞中miR-29b-3p的表达水平显著升高,SOD活性显著升高,MDA含量显著降低,Bcl-2、Nephrin、Podocin表达水平显著升高,Bax表达水平显著降低,细胞凋亡率显著降低,差异有统计学意义(P0.05);与HG+miR-NC组比较,HG+si-MST1组小鼠足细胞SOD活性显著升高,MDA含量显著降低,Bcl-2、Nephrin、Podocin表达水平显著升高,Bax、MST1表达水平显著降低,凋亡率显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。与HG+红枣色素+anti-miR-NC组比较,HG+红枣色素+anti-miR-29b-3p组小鼠足细胞中miR-29b-3p的表达水平显著降低,SOD活性显著降低,MDA含量显著升高,Bcl-2、Nephrin、Podocin表达水平显著降低,Bax、MST1表达水平显著升高,凋亡率显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论红枣色素对高糖诱导的小鼠足细胞凋亡有保护作用,其机制可能与调控miR-29b-3p/MST1及SOD和MDA活性有关。红枣色素可作为治疗肾损伤的药物,miR-29b-3p、MST1可成为肾损伤治疗的靶点。     

Vaspin通过Nrf2/ARE信号通路对高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激的影响

目的：探讨Vaspin对高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激的影响。方法：培养INS-1细胞,分为正常对照组（NC组）、高糖高脂组（HG+PA组）、高糖高脂+80ng/mLVaspin组（HG+PA+V1组）、高糖高脂+160ng/mLVaspin组（HG+PA+V2组）、高糖高脂+320ng/mLVaspin组（HG+PA+V3组）、高糖高脂+640ng/mLVaspin组（HG+PA+V4组）。通过DCFH-DA荧光探针染色法检测细胞内活性氧（reactiveoxygenspecies,ROS）水平;比色法、酶联免疫吸附试验（enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA）检测氧化应激相关指标;葡萄糖（3.3mmol/L和16.7mmol/L）刺激胰岛素分泌实验检测各组胰岛素分泌水平;流式细胞仪检测细胞凋亡水平;Westernblot检测核因子E2相关因子2（nuclearfactorerythroid2-relatedfactor2,Nrf2）蛋白表达水平。结果：①与HG+PA组相比,HG+PA+V4组中低糖和高糖刺激后的胰岛素分泌水平均有明显升高（均P<0.05）;②与HG+PA组相比,HG+PA+V4组中高糖高脂诱导INS-1细胞中ROS、丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷水平明显降低,总抗氧化能力、超氧化物歧化酶水平、谷胱甘肽过氧化物酶水平明显升高（均P<0.05）;③流式细胞实验发现,与HG+PA组相比,随着Vaspin浓度增加,高糖高脂干预后INS-1细胞的凋亡水平明显下降（均P<0.05）;④Westernblot结果表明,胞浆中Nrf2表达水平随着Vaspin浓度的增加呈上升趋势,胞核Nrf2表达水平仅在HG+PA+V4组较HG+PA组升高（0.798±0.080vs.0.579±0.065,P=0.039）。结论：Vaspin可以通过激活Nrf2/抗氧化反应原件（antioxidantresponseelement,ARE）信号通路,改善高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激损伤,减少细胞凋亡,增加胰岛素分泌水平。     

lncRNA TUG1靶向调控miR-199a-3p对高糖诱导的足细胞损伤的作用与机制研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)是否通过靶向miR-199a-3p调控高糖诱导的足细胞损伤.方法:将MPC5细胞分为NG 组(正常对照)、HG 组(高糖)、HG+pcDNA-NC 组、HG+pcDNA-lncRNA TUG1组、HG+anti-miR-NC组、HG+anti-miR-199a-3p组、HG+pcDNA-lncRNA TUG1+miR-NC组、HG+pcDNA-lncRNA TUG1+miR-199a-3p组.RT-qPCR检测TUG1、miR-199a-3p表达,CCK-8法测定细胞增殖,Western blotting分析Podocin、Nephrin表达,流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒测定IL-1β、TNF-α、MDA、LDH水平.结果:与HG+pcDNA-NC组或HG+anti-miR-NC组比较,HG+pcDNA-lncRNATUG1 组或HG+anti-miR-199a-3p组MPC5细胞增殖率、Podocin、Nephrin表达量升高,凋亡率、IL-1β、TNF-α、MDA、LDH 水平降低(P＜0.05).TUG1 靶向调控miR-199a-3p 的表达.与 HG+pcDNA-lncRNA TUG1+miR-NC组相比,HG+pcDNA-lncRNA TUG1+miR-199a-3p组减少MPC5细胞增殖率、Podocin、Nephrin 表达量,增加 miR-199a-3p、凋亡率、IL-1β、TNF-α、MDA、LDH水平(P＜0.05).结论:TUG1通过靶向miR-199a-3p,促进高糖诱导的足细胞的增殖,减轻细胞凋亡、炎症和氧化应激.     

白藜芦醇对高糖诱导足细胞损伤的改善作用及机制探讨

[目的]观察白藜芦醇（RSV）对高糖诱导足细胞凋亡的影响及作用机制。[方法]采用体外高糖诱导作为足细胞损伤模型,细胞分为3组：对照组为5 mmol/L低糖培养液（LG）;模型组为30 mmol/L高糖培养液（HG）;RSV干预组：HG+5 μmol/L RSV;HG+10 μmol/L RSV,培养48 h后采用流式细胞术检测足细胞的凋亡情况;DHE探针观察细胞内活性氧自由基（ROS）生成;激光共聚焦检测线粒体膜电位及线粒体内ROS合成;Western blot检测线粒体凋亡途径相关蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（caspase）3、caspase 9的表达情况。[结果]与HG组相比,RSV可呈剂量依赖性的抑制高糖诱导的足细胞凋亡;荧光探针结果显示,RSV干预后细胞内及线粒体ROS生成明显低于HG组;JC-1染色显示,与HG组相比,RSV干预可显著提高线粒体膜电位;Western blot结果显示,随RSV干预浓度的提高,caspase 3、caspase 9表达水平明显下调,差异具有统计学意义（P<0.05）。[结论]RSV呈浓度依赖性的抑制高糖诱导的足细胞凋亡,其保护作用可能与抑制氧化应激,改善线粒体功能障碍相关。     

黄芪注射液对高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响

[目的] 研究黄芪注射液对高糖环境下肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡的影响。[方法] 传代培养人近曲肾小管上皮细胞,细胞用无血清培养基同步化24 h后,将细胞分为5组:低糖对照组、高糖组、高糖+不同浓度黄芪注射液组(2、20、200 μg/mL),每组设3个复孔。将细胞置于37 ℃恒温培养箱中培养至24、48、72 h,收集细胞及细胞上清液。用流式细胞仪测定细胞凋亡率。[结果] 24、48、72 h,低糖对照组细胞凋亡率明显低于高糖组(P<0.05)。细胞培养24 h,黄芪干预组200和20 μg/mL细胞凋亡率明显低于高糖组(P<0.05)。细胞培养48和72 h,黄芪注射液干预组细胞凋亡率明显低于高糖组(P<0.05)。黄芪注射液干预组各组之间凋亡率比较差异也都有显著性(P<0.05),其干预作用呈剂量依赖性。[结论] 黄芪注射液能抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞的凋亡,有助于糖尿病肾病的治疗。     

Resveratrol对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞氧化应激和p27蛋白表达的影响

目的:探讨Resveratrol对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞氧化应激和p27蛋白表达的影响?方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分为正常对照组(NC组,葡萄糖浓度5.6 mmol/L)?Resveratrol组(Res组,葡萄糖浓度5.6 mmol/L+ Resveratrol 20 μmol/L)?高糖组(HG组,葡萄糖浓度30mmol/L)和高糖+Resveratrol组(HG+Res组,葡萄糖浓度30 mmol/L+ Resveratrol 20 μmol/L),各组细胞分别培养72 h,用比色法测定细胞上清液丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,流式细胞仪检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,蛋白含量/细胞数比值评估系膜细胞大小,Western blot法检测细胞内p27蛋白表达的变化?结果:①与NC组相比,HG刺激后大鼠肾小球系膜细胞内MDA?ROS含量均明显上调(P < 0.01);与HG组相比,HG+Resveratrol干预后大鼠肾小球系膜细胞内MDA?ROS含量均降低(P < 0.05)?②与NC组相比,HG刺激72 h后,大鼠肾小球系膜细胞肥大?p27蛋白表达明显增加(P < 0.01);与HG组相比,HG+Resveratrol干预后大鼠肾小球系膜细胞细胞肥大减轻?p27蛋白表达减少(P < 0.05)?Res组和NC组之间p27蛋白表达无统计学意义(P > 0.05)?结论:Resveratrol可能通过缓解高糖诱导系膜细胞的氧化应激?抑制p27蛋白高表达,减轻糖尿病肾脏疾病早期的肾脏肥大?     

α-生育酚对链脲菌素诱导乳鼠胰岛细胞凋亡的影响

目的 探讨α-生育酚(α-T)对链脲菌素(STZ)所致胰岛细胞凋亡、氧化的影响.方法 用体外单层细胞培养方法培养存活1～3 d Wistar大鼠胰岛细胞,并随机分为4组,即对照组、α-T组、STZ组、不同浓度α-T干预组.分组处理后荧光染色观察细胞形态,检测胰岛细胞凋亡率、胰岛素分泌、超氧化物歧化酶(SOD)及一氧化氮合酶(NOS)活性、丙二醛(MDA)及NO2-/NO3-含量变化等.结果 STZ组基础及高糖刺激下胰岛素分泌量明显降低(P<0.05),SOD活性明显减弱(P<0.05);胰岛细胞凋亡率、MDA及NO2-/NO3-水平明显上升(P<0.05),而NOS活性变化不明显;荧光染色见发强荧光的凋亡细胞数明显增多.不同浓度(0.01～0.12 mmol/L)α-T能有效抑制STZ所致胰岛素分泌量的下降,其抑制程度随α-T浓度增大而增强,呈剂量依赖趋势.终浓度为0.08 mmol/L α-T能有效抑制STZ所致胰岛细胞凋亡、SOD活性、MDA及NO2-/NO3-水平的变化(P<0.05),而对NOS活性无明显影响.结论 α-T能够改善STZ诱导的胰岛细胞凋亡,其机制可能与增强胰岛细胞抗氧化能力有关.     

氯胺酮、异丙酚对谷氨酸诱导大鼠海马星形胶质细胞损伤的影响

目的:观察氯胺酮和异丙酚对谷氨酸诱导体外培养大鼠海马星形胶质细胞损伤的影响。方法:取出生1~3 d Wistar大鼠海马星形胶质细胞,原代纯化培养3周。将细胞随机分为5组(n=9):C组为对照组,加入Hanks液;G组加入谷氨酸;GK组先加入谷氨酸,10 min后加入氯胺酮;GP组先加入谷氨酸,10 min后加入异丙酚;GPK组先加入谷氨酸,10 min后同时加入异丙酚和氯胺酮。培养24 h后分别检测各组上清液IL-1β、TNF-α和IL-10浓度、细胞凋亡率及胞内SOD活性和MDA含量,并观察细胞形态学改变。结果:与C组比较,G组星形胶质细胞凋亡增加(P<0.01),未凋亡的细胞被激活增生肥大,IL-1β和TNF-α浓度升高(P<0.01),IL-10浓度无明显变化(P>0.05),SOD活性显著降低(P<0.01),MDA含量明显增加(P<0.01)。与G组比较,GK、GP和GPK组凋亡细胞减少(P<0.05,P<0.01),IL-1β和TNF-α降低(P<0.05,P<0.01),IL-10升高(P<0.01),SOD活性增加而MDA含量低(P<0.05,P<0.01),细胞无明显增生肥大。GK组和GP组间比较差异无统计学意义(P>0.05),GP组和GK组分别与GPK组比较差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:氯胺酮和异丙酚均可抑制谷氨酸引起的大鼠海马星形胶质细胞的凋亡和激活,通过抑制脂质过氧化反应,清除自由基,同时抑制炎性细胞因子分泌而发挥神经保护作用,且两者有协同作用。     

2型糖尿病大鼠心肌血红素氧合酶-1表达水平与氧化应激水平的关系

目的探讨2型糖尿病大鼠心肌血红素氧合酶-1(HO-1)不同表达水平与心肌氧化应激水平的关系。方法健康SD大鼠64只随机分为8组:空白6周(NC1)组、糖尿病6周(DM1)组、糖尿病加血红素6周(HE1)组、糖尿病加原卟啉锌(ZnPP)6周(ZN1)组;空白9周(NC2)组、糖尿病9周(DM2)组、糖尿病加血红素9周(HE2)组、糖尿病加原卟啉锌9周(ZN2)组,每组8只;分别在第6、9周处死大鼠,免疫组织化学法检测心肌HO-1表达水平,比色法检测心肌氧化应激水平,电子显微镜显示心脏超微结构改变。结果 (1)HE1、HE2组心肌HO-1的表达水平分别高于DM1、DM2组(P<0.05、P<0.05),显著高于NC1、NC2组(P<0.01、P<0.01)和ZN1、ZN2组(P<0.01、P<0.01)。(2)ZN1、ZN2心肌HO-1的表达水平低于NC1、NC2组(P<0.05、P<0.05);(3)HE1、HE2心肌纤维化程度和心肌线粒体超微结构损害明显低于DM1、DM2组和ZN1、ZN2组;(4)HE1、HE2组血清SOD和GSH-PX水平高于DM1、DM2组和ZN1、ZN2组(P<0.05,P<0.05;P<0.05,P<0.0 1)和(P<0.05,P<0.05;P<0.01,P<0.01),MDA水平低于DM1、DM2组和ZN1、ZN2组(P<0.01)而与NC1、NC2组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 (1)血红素可以提高心肌HO-1表达水平;(2)提高HO-1表达水平可增强2型糖尿病大鼠心肌抗氧化应激能力,减轻心肌损害。     

利拉鲁肽和艾塞那肽对2型糖尿病患者血糖及胃肠道反应的影响

目的探讨利拉鲁肽和艾塞那肽对2型糖尿病(T2DM)患者血糖及胃肠道反应的影响。 方法选取T2DM患者93例,根据治疗方式分为利拉鲁肽组和艾塞那肽组。比较两组患者血糖、血脂、肾功能、胰岛功能、炎症因子水平,以及胃肠道反应发生情况。 结果与治疗前比较,治疗后两组空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 hPBG)、糖化血红蛋白(HbA1C)、总胆固醇、甘油三酯、血尿素氮、血肌酐(SCr)降低,利拉鲁肽组高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)升高、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)降低；治疗后利拉鲁肽组FBG、2 hPBG、HbA1c、LDLC、SCr低于艾塞那肽组,HDLC高于艾塞那肽组(P＜0.05)。与治疗前比较,治疗后两组空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、空腹C肽、餐后2 h C肽、肿瘤坏死因子-α、C-反应蛋白、白细胞介素-6降低,且利拉鲁肽组低于艾塞那肽组;治疗后两组胰岛β细胞功能指数升高,且利拉鲁肽组高于艾塞那肽组(P＜0.05)。利拉鲁肽组和艾塞那肽组胃肠道反应发生率间差异无显著性(P＞0.05)。 结论利拉鲁肽较艾塞那肽具有更佳降糖效果,胃肠道反应相当,更利于胰岛β细胞功能恢复和预后改善。     

甘草酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞氧化应激损伤的影响

目的 探讨甘草酸(GA)对高糖诱导的肾小球系膜细胞氧化应激损伤的影响.方法 将HBZY-1细胞分为:正常对照组(NG组)、高糖组(HG组)、高糖+GA组(HG+GA组).采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性.用紫外分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,用激光共聚焦检测活性氧(ROS)变化.采用免疫组织化学和Westernblot检测锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)蛋白的表达,用Q-PCR检测Mn-SOD mRNA.结果 (1)各组HBZY-1细胞形态变化:HBZY-1细胞为菱形,NG组细胞形态正常,结构清晰可辨;HG+GA组细胞数量略增多,个别细胞胞体略肥大;HG组细胞结构不甚清晰,细胞扁平,数量明显增多,胞体略肥大.(2)各组HBZY-1细胞的增殖效应:与NG组相比,HG组OD值明显升高(P＜0.05),HG+ GA组与HG组相比OD值降低(P＜0.05).(3)RDS含量:HG组RDS相对含量较NG组有所上升,HG+GA组ROS相对含量下降(P＜0.05).(4)各组细胞中Mn-SOD的表达:与NG组相比,HG组Mn-SOD相对表达减少(P＜0.05),HG+GA组与HG组相比Mn-SOD表达升高(P＜0.05).结论 GA对高糖诱导的HBZY-1细胞异常增殖有一定的抑制作用,GA可通过氧化应激保护高糖诱导肾小球系膜细胞所致的细胞肥大和细胞损伤,GA能调节高糖诱导下Mn-SOD的表达.     

京尼平对高糖氧化损伤的H9c2细胞的保护作用

目的 研究植物提取的京尼平(Genipin,GEN)对高浓度糖氧化损伤的大鼠心肌细胞系H9c2的影响作用。方法体外培养H9c2细胞4组,各组H9c2细胞存活率利用CCK-8 法检测;AnnexinⅤ/PI双标记流式分析法检测细胞凋亡率;酶标法测定细胞上清液肌酸激酶(CK-MB)的水平,比色法和WST-1法分别测定细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果 CCK-8法分析结果显示,33.3mmol/L高浓度糖条件下细胞存活率显著低于正常糖对照组,10μmol/L京尼平保护组细胞存活率高于高糖组(P<0.05)。AnnexinⅤ/PI双标记法检测高糖组细胞早期凋亡率显著高于正常糖组(P<0.05),而高糖加京尼平组比高糖组早期凋亡率显著降低(P<0.05)。京尼平保护组与高糖损伤组比较,上清液中CK-MB活性下降,细胞内MDA含量下降,SOD活力升高(P<0.05)。结论 一定浓度的京尼平具有抗氧化保护高浓度糖损伤的H9c2心肌细胞的作用。     

糖尿病视网膜病变患者血清炎症因子、脂肪因子及氧化应激指标的变化

目的:探讨糖尿病视网膜病变患者血清炎症因子、脂肪因子及氧化应激指标的水平变化。方法:选取我院收治的2型糖尿病患者130例,分为糖尿病无视网膜病变组(NDR)41例、非增殖期视网膜病变组(NPDR)44例和增殖期视网膜病变组(PDR)45例,另选取同期于我院体检的健康志愿者40名作为对照组(NC),检测各组的血清IL-6、TNF-α、hs-CRP、瘦素、脂联素、MDA和SOD水平。结果:各组IL-6、TNF-α、hs-CRP水平比较差异有统计学意义(P<0.05);PDR组均显著高于NC组、NDR组、NPDR组,NPDR组均显著高于NC组、NDR组,NDR组均显著高于NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组瘦素、脂联素水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),PDR组瘦素高于NC组、NDR组、NPDR组,脂联素低于NC组、NDR组、NPDR组,NPDR组瘦素高于NC组、NDR组,脂联素低于NC组、NDR组,NDR组瘦素高于,脂联素低于NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组MDA、SOD水平比较差异有统计学意义(P<0.05),PDR组MDA高于NC组、NDR组、NPDR组,SOD低于NC组、NDR组、NPDR组,NPDR组MDA高于NC组、NDR组,SOD低于NC组、NDR组,NDR组MDA高于NC组,SOD低于NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:糖尿病视网膜病变与炎症因子、脂肪因子及氧化应激指标具有密切关联。     

促红细胞生成素对单侧输尿管梗阻小鼠氧化应激诱导细胞凋亡的机制

[目的]探讨促红细胞生成素(EPO)对单侧输尿管梗阻小鼠Caspase-3、α-SMA、Bcl-2蛋白表达的影响,为临床应用EPO治疗肾损伤提供实验依据.[方法]取90只2～4周龄清洁级雄性昆明小鼠,随机分为假手术组(Sham组)、肾损伤模型组(UUO组)和EPO治疗组(EPO组,每日500 U/kg).术后第3、7、14天时每组分别随机选择10只小鼠检测血清中的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,采用HE染色法观察各组肾组织病理学变化,利用蛋白免疫印迹法测定肾组织中Caspase-3、α-SMA及Bcl-2蛋白表达水平.[结果]与Sham组比较,UUO组SOD水平显著降低,MDA水平显著升高,肾组织中Caspase-3、α-SMA蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著降低,相比较差异均有统计学意义(P<0.05);与UUO组比较,EPO组SOD水平显著升高,MDA水平显著降低,肾组织中Caspase-3、α-SMA蛋白表达水平显著降低,Bcl-2蛋白表达水平显著升高,相比较差异亦均有统计学意义(P<0.05).TUNEL染色结果显示,UUO组凋亡细胞...