大黄素抗大鼠肝移植急性排斥反应的实验研究

目的:探讨大黄素对大鼠肝移植术后急性排斥反应的抑制作用。方法:建立LEW→BN大鼠肝移植动物模型,随机分为A组(排斥反应组)、B组(CsA组)、C组(大黄素组)3组,每组15只大鼠,术后每天分别腹腔注射生理盐水0.5ml/d、环孢素A(CsA)10.0mg·kg-1·d-1、大黄素50.0mg·kg-1·d-1,连续用药8天,停药后每组处死6只大鼠取肝脏组织观察急性排斥活动指数(RAI)和肝细胞凋亡指数(AI),其余大鼠继续饲养以观察存活期。结果:A、B、C组大鼠存活期(天)分别为9.50±1.64、21.57±2.15、21.29±2.21,B、C组存活期较A组明显延长(P<0.01),B、C组间存活期无明显差别(P>0.05)。A、B、C组RAI分别是7.67±0.98、5.17±0.40、5.83±0.75,AI分别是35.83±2.32、15.83±1.33、16.50±2.35。B、C组的RAI、AI较A组均明显降低(P<0.01),B、C组间差别均无意义(P>0.05)。结论:大黄素能有效减少大鼠肝移植术后肝细胞的凋亡,抑制肝移植术后急性排斥反应。     

大黄素对大鼠原位肝移植急性排斥反应中TNF-α,IL-10水平的影响

目的:探讨大黄素对大鼠肝移植急性排斥反应的作用机制.方法:以近交系大鼠建立原位肝移植模型,分为3组,每组各16对:BN→BN同基因对照组,Lewis→BN急性排斥组,Lewis→BN大黄素干预组.各组随机选取6只受体大鼠,于术后1,3,5,7 d的取尾静脉血样,ELISA法检测TNF-α,IL-10含量,并于第7日处死,检测病理组织学改变.其余每组各10只观察其生存状况和生存期.结果:大黄素干预组术后中位生存时间为25.6 d,较排斥组10.9 d明显延长(P<0.05);与排斥组相比,大黄素干预组肝脏组织病理排斥反应明显降低(P<0.01),外周血TNF-α的含量明显下降(P<0.05),IL-10上调,自术后3 d有统计学差异(P<0.05).结论:大黄素能够有效抑制肝移植大鼠的急性排斥反应,其作用与降低外周血TNF-α的含量,上调IL-10水平有关.     

大黄素和环孢素A在抗大鼠肝移植排斥反应中的协同作用

目的 探讨大黄素与环孢素A合用对大鼠肝移植排斥反应的影响。 方法 以LEW→BN大鼠原位肝移植为模型,随机分为4组,每组12只,术后每天分别腹腔注射生理盐水0.5 mL 、环孢菌素A(CsA) 10.0 mg/kg、大黄素50.0 mg/kg和大黄素50.0 mg/kg+ CsA10.0 mg/kg。给药7天,于术后第8天每组随机取6只鼠处死,取肝脏组织观察排斥活动指数（RAI）和肝细胞凋亡指数（AI）;剩余大鼠停止用药,观察存活时间。 结果 CsA组、大黄素组、大黄素+ CsA组的存活天数、RAI及AI优于生理盐水组（P<0.01）,其中大黄素+ CsA组优于CsA组、大黄素组（P<0.05）,CsA组和大黄素组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 大鼠肝移植术后给予大黄素与环抱素A联用,对于抑制排斥反应有协同作用。     

大黄素对大鼠肝移植后肝细胞凋亡的影响

目的:探讨大黄素对大鼠肝移植后肝细胞凋亡的影响。方法:建立LEW→BN大鼠肝移植动物模型,随机分为A,B,C,D4组,每组6只动物,术后每天分别腹腔注射生理盐水0.5mL.d^-1、环孢素A(CsA)10.0mg.kg^-1.d^-1、大黄素50.0mg.kg^-1.d^-1、大黄素50.0mg.kg^-1.d^-1+CsA10.0mg.kg^-1.d^-1,连续用药8d,停药7d后处死动物取肝脏组织观察排斥活动指数(RAI)和肝细胞凋亡指数(AI)。结果:A,B,C,D组RAI分别是(7.67±0.98),(5.17±0.40),(5.83±0.75),(3.83±0.75),AI分别是(35.83±2.32),(15.83±1.33),(16.50±2.35),(11.50±1.05)。B,C,D组的RAI,AI较A组均明显降低(P<0.01),而D组较B,C组也均有明显降低(P<0.05),B,C组间差别均无意义。结论:大黄素能有效减少大鼠移植肝术后肝细胞凋亡,抑制排斥反应,且和CsA有协调作用。     

大黄素对大鼠原位肝移植急性排斥反应中 TNF-α，IL-10水平的影响

目的：探讨大黄素对大鼠肝移植急性排斥反应的作用机制。方法：以近交系大鼠建立原位肝移植模型,分为3组,每组各16对：BN→BN同基因对照组,Lewis→BN急性排斥组,Lewis→BN大黄素干预组。各组随机选取6只受体大鼠,于术后1,3,5,7 d的取尾静脉血样,ELISA法检测TNF-α,IL-10含量,并于第7日处死,检测病理组织学改变。其余每组各10只观察其生存状况和生存期。结果：大黄素干预组术后中位生存时间为25.6 d,较排斥组10.9 d明显延长(P<0.05);与排斥组相比,大黄素干预组肝脏组织病理排斥反应明显降低(P<0.01),外周血TNF-α的含量明显下降(P<0.05),IL-10上调,自术后3 d有统计学差异(P<0.05)。结论：大黄素能够有效抑制肝移植大鼠的急性排斥反应,其作用与降低外周血TNF-α的含量,上调IL-10水平有关。

     

大鼠移植肝组织中一氧化氮合酶的表达及其抑制剂的作用

目的　观察大鼠移植肝组织中一氧化氮合酶 (iNOS)的表达及iNOS抑制剂氨基胍和免疫抑制剂他克莫司 (FK50 6)对肝移植术后急性排斥反应的影响。方法　实验分为 4组 :同基因组(供、受者均为LEW大鼠 ) ;急性排斥组 (供者为BN大鼠 ,受者为LEW大鼠 ) ;氨基胍组、FK50 6组在异基因大鼠肝移植后分别应用氨基胍和FK50 6。用免疫组织化学法检测各组移植肝组织中iNOS的表达水平。结果　急性排斥组iNOS表达呈强阳性 ,与氨基胍组、FK50 6组、同基因组比较 ,差异显著。结论　在大鼠原位肝移植发生急性排斥反应时 ,iNOS增高程度与排斥反应的强度有明显关系。氨基胍和FK 50 6可以抑制iNOS的表达 ,明显减轻移植肝组织的急性排斥反应     

大黄素对大鼠肝移植排斥反应相关细胞因子的影响

目的探讨大黄素对肝移植大鼠排斥反应中相关细胞因子表达的影响。方法采用大鼠原位肝移植模型,随机分为3组:对照组、移植组、大黄素组,于术后第5天取血。用ELISA法检测血清中白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(INF-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果移植组IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α表达明显升高,IL-4、IL-10表达显著降低,与对照组相比,差异非常显著(P<0.01)。大黄素组IL-2、IL-12、INF-γ、TNF-α表达显著降低,而IL-4、IL-10表达显著升高,与移植组相比,差异非常显著(P<0.01)。结论大黄素抑制肝移植排斥反应主要与其抑制IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α等Th1型细胞因子的表达,促进Th2型细胞因子IL-4、IL-10的表达,使免疫反应由Th1型向Th2型偏移有关。     

同种异体大鼠肝移植在不同免疫状态下的实验研究

目的：观察不同免疫状态下大鼠同种异体移植肝早期的病理变化和受体生存状况的改变。方法：分三组：A组：n=36,同基因移植组（BN→BN）;B组：n=36,异基因移植＋环孢素A（CsA）组;C组：n=36,异基因移植组（Lewis→BN）,另外各设亚组观察生存期。于移植后1、3、5、7、14天检测移植肝排斥反应病理分级,并观察移植鼠存活时间。结果：①A组;同基因移植肝无明显病理急性排斥反应发生;除第1天外,B组和C组各时间段的排斥分级明显高于A组（P〈0.05或〈0.01）;而C组和B组相比亦有明显增高（P〈0.05或〈0.01）。②A组和B组的生存期平均大于100天,明显长于C组（34.3（3.56天）。结论：①同基因大鼠肝移植不发生明显的病理急性排斥反应,术后生存状况良好。②短期应用小剂量环孢素A（CsA）能明显抑制异基因同种大鼠移植肝的病理急性排斥反应,诱导免疫耐受的发生。③异基因大鼠移植肝早期出现明显的病理急性排斥反应,术后生存状况差,生存期较短。     

健脾疏肝、祛湿活血法对大鼠原位肝移植急性排斥反应的影响

目的:观察健脾疏肝、祛湿活血法对大鼠原位肝移植术后急性排斥反应(acute rejection,AR)的影响。方法:取100只SD大鼠建立原位肝移植急性排斥反应模型,按随机数字表法分为4组:模型对照组、中药组、环孢素A(CsA)组及中药+环孢素A(中药+CsA)组。每组25只。术后观察大鼠一般情况,术前及术后不同时相点采集各组大鼠外周血检测白细胞介素2(IL-2)水平,移植肝组织病理检测以确定AR诊断,对结果进行比较。结果:外周血IL-2:中药组、环孢素A(CsA)组和中药+CsA组术前含量低于术后各时相,但差别无显著性意义(P0.05);模型对照组术后IL-2的含量明显高于术前(P0.05)。各治疗组急性排斥反应的发生率明显低于模型对照组(P0.05,P0.01)。结论:IL-2水平的变化与大鼠肝移植术后急性排斥反应发生有关,健脾疏肝、祛湿活血法与现代免疫抑制剂联合应用对大鼠原位肝移植术后急性排斥反应的防治具有协同作用。     

强肌健力口服液对猪肝移植术后IL-2的影响

目的:探讨强肌健力口服液与猪肝移植术后淋巴细胞因子白介素-2(interleukin-2,IL-2)的关系。方法:建立小型猪肝移植急性排斥反应(acute rejection,AR)动物模型,并进行动物模型分组;用酶联免疫吸附(ELISA)双抗体夹心法对术前及术后不同时相点采集的各组动物外周血的IL-2的水平进行检测,并进行移植肝组织病理检测以确定AR诊断,对结果进行比较。结果:外周血IL-2水平检测显示:强肌健力口服液(QJJL)组、环孢素A(CsA)组和QJJL CsA组IL-2的术前含量低于术后各时相,但差别无显著性(P>0.05);对照组术后5天血清IL-2的含量明显高于术前(P<0.01)。治疗组急性排斥的发生率明显低于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:IL-2水平的变化与猪肝移植急性排斥反应发生有关,强肌健力口服液联合免疫抑制剂有助于猪肝移植急性排斥反应的防治。     

黑睛排斥汤防治大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的机理研究

目的探讨黒睛排斥汤在大鼠高危角膜移植免疫排斥反应中作用的机理。方法角膜缝线法诱导角膜新生血管,建立大鼠高危角膜移植模型,随机分为A组(模型对照),B组(灌服黒睛排斥汤4 g/(kg.d)),C组(灌服黒睛排斥汤4 g/(kg.d)+CsA 10 mg/(kg.d))。行封闭群大鼠SD-Wistar组间同种异体全板层角膜移植,观察植片存活状况;应用流式细胞分析,免疫荧光组织化学等方法对受体局部和全身免疫状态机制进行检测。结果 1.角膜植片存活时间:A组(10.38±1.69)d,B组(13.00±2.03)d,C组(22.50±3.07)d,3组比较差异有统计学意义(P<0.01)。2.外周血淋巴细胞CD4+和CD8+亚群:术后7 d,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+各组之间比较均无明显差别(P>0.05);术后14 d,C组CD4+、CD4+/CD8+与A组比较明显降低(P<0.05);术后21 d,B、C组CD4+、CD4+/CD8+与A组比较明显降低(P<0.05),但各组CD8+比较无明显差异(P>0.05)。3.ConA诱导的脾淋巴细胞的增殖:B组、C组脾T淋巴细胞的增殖被明显抑制,与A组比较差异有统计学意义(P<0.01),其中以C组更为明显。结论黒睛排斥汤对高危角膜移植排斥反应模型大鼠术后免疫排斥反应的抑制作用主要是通过抑制T淋巴细胞的增殖来实现的。     

茯苓素预防大鼠肾移植急性排斥反应的实验研究

目的探讨茯苓素(Poria cocos)预防大鼠肾脏移植急性排斥反应的作用和机制。方法以Wist-ar大鼠为供者,SD大鼠为受者,建立原位(腹腔)肾脏移植模型,移植前按照分组分别以生理盐水、茯苓素25mg.kg-1.d-1、茯苓素50 mg.kg-1.d-1和环孢素A(CsA)5 mg.kg-1.d-1灌胃。术后观察大鼠移植肾功能和存活时间,测定各组术后1周外周血中白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)含量以及CD4+、CD8+细胞百分比和CD4+/CD8+的比值,并观察移植肾的病理变化。结果茯苓素50 mg.kg-1.d-1组和CsA组移植肾和受者存活时间较茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组显著延长(P0.05),而且病理损害程度较茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组明显减轻,但茯苓素50 mg.kg-1.d-1组较CsA组移植肾存活时间显著减少(P0.05)。各组移植肾功能和尿量变化与存活时间和移植肾病理变化相一致,茯苓素50 mg.kg-1.d-1组和CsA组肾功能异常发生时间明显晚于茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组。茯苓素50 mg.kg-1.d-1组外周血IL-2和IFN-γ的含量较茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组显著降低(P0.01),但显著高于CsA组(P0.01);茯苓素50 mg.kg-1.d-1组外周血CD4+细胞百分比显著低于茯苓素25 mg.kg-1.d-1组(P0.05)和生理盐水组(P0.01),CD8+细胞百分比显著低于生理盐水组(P0.05)。结论茯苓素对肾脏移植急性排斥反应有较好的抑制作用且与剂量呈正相关,但效果不如CsA。     

肝移植术后发生急性排斥反应的护理体会

目的：探讨肝移植术后急性排斥反应的观察与护理。方法：14例肝移植术后的患者发生了急性排斥反应,做好病情观察、心理护理、肝穿刺活检的护理、预防感染及应用免疫抑制剂的护理。结果：14例发生急性排斥反应的患者都痊愈。结论：肝移植术后做好病情的观察及良好的护理,及时的发现急性排斥反应十分重要,可以得到及时的治疗,逆转急性排斥反应,提高移植器官的存活率。     

雷公藤多甙(T_Ⅱ)对肾移植大鼠外周血可溶性白细胞介素2受体的影响

目的:探讨雷公藤多甙(T_Ⅱ)对同种异体大鼠的免疫抑制机制。方法:将肾移植大鼠分为3组:对照组、T_Ⅱ组与环抱素 A(CsA)组。检测肾移植大鼠术后外周血可溶性白细胞介素2受体(SIL-2R)的变化及其与移植大鼠存活的关系。结果:对照组大鼠平均存活(7.3±2.2)天,sIL-2R 平均水平为(39.4±11.6)U/ml;T_Ⅱ组大鼠平均存活(18.1±3.7)天,sIL-2R 平均(27.6±10.4)U/ml;CsA 组大鼠平均存活(26.1±4.6)天,sIL-2R 平均(18.2±9.2)U/ml。T_Ⅱ组大鼠存活时间比对照组明显延长(P<0.01),但不及 CsA 组(P<0.05),sIL-2R 水平低于对照组(P<0.05),高于 CsA 组(P<0.05)。结论:T_Ⅱ可以显著抑制移植大鼠外周血 sIL-2R 水平,sIL-2R 外周血水平与移植鼠存活时间呈明显负相关     

大黄素对慢性压迫性损伤大鼠脊髓细胞因子的影响

目的观察大黄素对慢性压迫性损伤大鼠脊髓细胞因子的影响。方法 42只SD大鼠随机分假手术组、模型组、大黄素组,进行机械痛觉、热痛觉测试以评估疼痛情况,免疫组化法、Western blot法检测大鼠损伤侧L4～L6脊髓中IL-1β、IL-10表达。结果与模型组比较,大黄素组术后7 d IL-10表达显著升高(P<0.05);术后15 d大黄素组机械痛、热痛阈值较模型组显著升高(P<0.05),IL-1β表达显著降低(P<0.05)。结论大黄素具有改善慢性压迫性损伤大鼠痛觉过敏的作用,其机制可能与调控不同类型细胞因子有关。     

中药安胎养血合剂对大鼠肾移植急性排斥反应影响的初步研究

目的研究安胎养血合剂对大鼠肾移植急性排斥反应的影响,为其在器官移植免疫治疗上的应用提供实验依据。方法建立大鼠异体肾移植急性排斥反应模型(SD→Wistar),随机分为4组,每组12只。I组,生理盐水对照组(NS),NS10 ml/(kg.d)。II组,中药安胎养血合剂组,中药10 ml/(kg.d)。III组,CsA(cyclosprorine,CsA)组,CsA 10 ml/(kg.d)。IV组,中西医结合组,中药10 ml/(kg.d),CsA2.5 ml/(kg.d),两者间隔30 min。观察各组肾移植大鼠的存活时间,术后第6天取血测定血肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)的水平,并行移植肾病理学检查。结果中药安胎养血合剂可以延长受体鼠的存活时间,与CsA联合应用具有协同作用,可以明显延长受体鼠的存活时间,其方剂对移植肾的功能具有保护作用并能改善移植肾的形态和病理变化。结论中药安胎养血合剂对大鼠肾移植急性排斥反应有一定的抑制作用;与CsA具有协同作用。     

丹参及金钱草对抗豚鼠-大鼠异种心脏移植超急性排斥反应作用的初步观察

目的:研究丹参、金钱草单用或与环孢素 A(CsA)、硫唑嘌呤(Aza)、泼尼松(Pred)三联免疫抑制药物合用对异种心脏移植超急性排斥反应的作用。方法:选用豚鼠—大鼠异种心脏移植模型,分别观测 B 组(单纯豚鼠—大鼠心脏移植,对照组)、C 组(CsA、Aza、Pred 治疗组)、D 组(丹参联合 CsA、Aza、Pred 治疗组);E 组(金钱草联合 CsA、Aza、Pred 治疗组)、F组(丹参治疗组)及 G 组(金钱草治疗组)移植心脏存活时间。结果:各实验组移植心脏存活时间分别为14.7±5.6、13.6±4.9、24.5±4.4、15.4±6.4、25.8±4.1及14.3±4.1min。结论:与金钱草治疗组及 CsA、Aza、Pred 治疗组比较,丹参能够延长异种移植心脏存活时间(P<0.05),但不能阻断超急性排斥反应的发生,丹参可能对大鼠补体有抑制或清除作用。丹参、金钱草分别与 CsA、Aza、Pred 合用无抑制协同作用。     

大黄素可能对bmSNI大鼠腰膨大p-JNK3蛋白表达无影响

目的:为探讨大黄素对bmSNI模型大鼠腰膨大p-JNK3蛋白是否有影响。方法:50只150～220 g健康雄性SD大鼠随机平均分为正常组(C)、假手术组(SH)、模型组(M)、大黄素组(D)和SP600125组(SP)共5组,通过剪断大鼠双侧胫神经造成bmSNI模型,后2组在手术完毕后即分别予大黄素40 mg/(kg·d)灌胃14 d、SP600125(20μL/d,0.25 g/L)鞘内注射7 d,且于造模前1、后1、2、3、5、7、10、14 d测机械痛敏和热痛敏,每组在造模后7 d取4只取材腰膨大,对腰膨大进行p-JNK3蛋白免疫印迹检验比较各组差异。结果:M组术后第7天机械敏最敏感。D组术后第2天机械痛阈值显著低于M组,到术后3 d达最低值,此后逐渐上升,机械痛阈值均显著高于M组。结论:大黄素对于NP有明显疗效,且强于JNK抑制剂SP600125。然而术后各组腰膨大Western Blotting检测无显著差异,表明大黄素可能通过其他途径治疗神经病理性疼痛(NP)。上述结论尚待进一步开展更多大样本、高质量研究予证实。     

细辛脂素抗心脏移植急性排斥反应的作用及对黏附分子表达的影响

目的：实验筛选细辛免疫抑制作用的有效成分细辛脂素,探讨其抗心脏移植急性排斥反应作用及对黏附分子的影响。方法：提取细辛中的细辛脂素,健康雄性Wistar大鼠（供体）和SD大鼠（受体）各64只,建立大鼠异位心脏移植模型,将接受心脏移植的SD大鼠分成4组：阳性对照组,不给任何处置；环孢霉素A(CsA)组,术前1 d开始灌服CsA；细辛脂素组,术前1 d开始灌服细辛脂素；混合药物组,术前1 d开始灌服半量CsA和半量细辛脂素。每组各8只,术后第7天处死,另外8只用于观察移植物生存天数。移植心常规石蜡包埋、切片,显微镜观察并进行组织病理分级；免疫组化染色法检测移植物局部细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和血管内皮黏附分子-1（VCAM-1）含量。结果：移植心存活时间,CsA组、细辛脂素组和混合药物组均较阳性对照组显著延长（P<0.01）。与阳性对照组比较,细辛脂素可减轻心肌病理形态学的损伤。CsA组、细辛脂素组和混合药物组移植心局部ICAM-1和VCAM-1含量较阳性对照组明显减少。结论：细辛脂素可延长移植物存活时间并减轻病理形态的损伤,与CsA有相似的免疫抑制作用。ICAM-1和VCAM-1在发生排斥反应时表达增加,细辛脂素可抑制二者的表达。     

大黄素抗小鼠皮肤移植排斥反应的实验研究

目的:探讨大黄素抑制同种异体小鼠皮肤移植排斥反应的作用。方法:采用BALB/c供体鼠→C57BL/6受体鼠背-背皮肤移植法建立模型,分为假手术组、模型组、大黄素组(50 mg/kg)、环孢素A组(10 mg/kg)、大黄素+亚剂量环孢素A组(大黄素50 mg/kg+环孢素A 5 mg/kg),腹腔注射给药10 d.记录受体鼠移植皮片的存活时间;取血浆,酶联免疫吸附法检测Th1类细胞因子(IL-2,IFN-γ)和Th2类细胞因子(IL-4,IL-10)水平;取脾脏,流式细胞仪分析T淋巴细胞亚群CD4~+及CD25~+的比例。结果:与模型组比较,各给药组受体鼠移植皮片的存活时间均有明显延长,组间差异均有统计学意义(P0.01);大黄素联合环孢素A组的移植皮片存活时间比大黄素组或环孢素A组均有明显延长,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,大黄素联合环孢素A组及大黄素组均可显著降低血浆IL-2和IFN-γ的水平,差异有统计学意义(P0.01),显著升高IL-4和IL-10的水平,差异有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,大黄素联合环孢素A组及大黄素组均可显著升高脾脏CD4~+及CD25~+调节性T细胞的比例,差异有统计学意义(P0.01)。结论:大黄素可抑制同种异体小鼠的皮肤移植排斥反应,其机制或与促使Thl向Th2细胞的偏移,刺激CD4~+及CD25~+调节性T细胞的表达,诱导免疫耐受等相关。