控制性超促排卵周期多囊卵巢综合征患者生长分化因子-9和骨形成蛋白-15的初步研究

目的:探讨控制性超促排卵(COH)周期多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞生长分化因子-9(GDF-9)、骨形成蛋白-15(BMP-15)的表达及其与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的关系。方法:选择接受IVF-ET治疗的PCOS患者45例,同期输卵管因素不孕患者103例作为对照组。应用免疫组织化学、Real-time PCR技术检测患者卵巢颗粒细胞GDF-9、BMP-15蛋白和mRNA的表达,并分析与IVF-ET的临床结局关系。结果:GDF-9、BMP-15蛋白在PCOS组和对照组患者卵巢颗粒细胞胞质均呈阳性表达,PCOS患者颗粒细胞GDF-9 mRNA、BMP-15 mRNA的表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。多元线性回归分析显示,颗粒细胞GDF-9 mRNA、BMP-15 mRNA表达水平与优质胚胎数呈正相关关系(P0.05)。临床妊娠组的颗粒细胞GDF-9mRNA、BMP-15 mRNA表达水平高于未妊娠组(P0.05)。结论:COH周期PCOS患者颗粒细胞GDF-9 mRNA、BMP-15 mRNA表达水平可能与胚胎发育潜能存在相关性。     

生长分化因子-9及生长分化因子-9B与卵巢功能调节

生长分化因子-9及生长分化因子9B是转化生长因子的新成员,为由卵母细胞分泌的糖蛋白,两者结构基本相近。本文从其结构特点、在组织中的表达、对卵巢的生物调节作用,其在体细胞中的受体和信号通路进行了综述。     

卵母细胞分泌的生长分化因子-9和骨形成蛋白-15与卵母细胞发育潜能的关系

目的:探讨卵母细胞分泌的生长分化因子-9(GDF-9)和骨形成蛋白-15(BMP-15)与卵母细胞发育潜能的关系。方法:收集因输卵管性不孕接受IVF-ET治疗患者的卵泡,每侧卵巢穿刺取卵时首先选择一个直径≥18 mm卵泡抽吸,对卵母细胞进行成熟度分型,并观察其受精、卵裂及胚胎评分情况。受精后按是否形成优质胚胎将将卵泡分为优质卵母细胞组和非优质卵母细胞组,采用Western blotting方法检测比较各组卵泡液中GDF-9和BMP-15的含量。结果:①优质卵母细胞组的GDF-9蛋白相对含量为2.498±0.133,非优质卵母细胞组为1.305±0.406,差异有统计学意义(P=0.008)。②优质卵母细胞组的BMP-15蛋白相对含量为3.379±0.482,非优质卵母细胞组为1.336±0.214,差异有统计学意义(P=0.003)。结论:在优质卵母细胞组卵泡液中GDF-9和BMP-15水平均较高,提示人卵泡液中GDF-9、BMP-15水平可以反映卵母细胞的发育潜能,GDF-9、BMP-15水平可以作为评价卵母细胞质量的指标。     

生长分化因子-9和骨形成蛋白-15对多囊卵巢综合征患者卵丘细胞凋亡的影响

目的探讨控制性超促排卵(COH)周期多囊卵巢综合征(PCOS)患者生长分化因子-9(GDF-9)、骨形成蛋白-15(BMP-15)的表达对卵丘细胞凋亡的影响。方法收集本院行卵胞质内单精子注射(ICSI)治疗的PCOS组(n=30)和对照组(n=60)患者的卵丘细胞。TUNEL法及流式细胞术检测卵丘细胞凋亡;免疫组织化学方法检测卵丘细胞GDF-9、BMP-15蛋白表达,运用Motic Med 6.0数码医学图像分析系统对染色强度定量分析;Real-time PCR技术检测卵丘细胞GDF-9、BMP-15、B细胞淋巴瘤/白血病-2(BCL)-2、BCL-2相关X蛋白(BAX)mRNA表达。结果 PCOS组穿刺卵泡数、获卵数高于对照组(P0.01);PCOS组卵丘细胞凋亡率高于对照组(P0.05);GDF-9、BMP-15蛋白在PCOS组和对照组卵丘细胞胞质中均呈阳性表达;PCOS患者卵丘细胞GDF-9、BMP-15、BCL-2、BAX mRNA的表达低于对照组(P0.05),BAX/BCL-2比值高于对照组(P0.05)。Pearson相关分析结果显示PCOS患者GDF-9、BMP-15与BCL-2 mRNA表达呈正相关,与BAX mRNA的表达呈负相关。结论 PCOS患者卵丘细胞GDF-9、BMP-15异常表达可能是卵丘细胞凋亡增加的原因之一。     

GDF-9和BMP-15在PCOS患者卵母细胞和卵冠丘细胞的表达研究

目的探讨卵源性因子生长分化因子-9(GDF-9)和骨形态发生蛋白-15(BMP-15)在行体外受精-胚胎移植PCOS患者卵母细胞和卵冠丘颗粒细胞(cumulus granulosa cell,CGC)中的表达情况.方法按1∶4比例收集因男方因素行ICSI后废弃的PCOS患者和对照组患者未成熟生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞或第一次减数分裂中期Ⅰ(metaphase Ⅰ,MⅠ)期卵母细胞.运用免疫荧光结合激光扫描共聚焦显微镜(LCSM)对GV期卵母细胞GDF-9蛋白的表达进行检测,对MI期卵母细胞进行BMP-15蛋白表达的检测;应用免疫细胞化学方法检测两种因子在MⅡ期CGC的表达.结果GDF-9和BMP-15在PCOS患者和对照组患者卵母细胞的表达差异无显著.GDF-9在PCOS患者CGC的表达强度为5.01±0.83,显著低于对照组患者的8.88±1.52,P＜0.05.BMP-15在PCOS患者CGC的表达与照组患者比较差异无显著.结论PCOS患者促排卵治疗后卵母细胞GDF-9和BMP-15表达无差异,而CGC GDF-9表达低提示促排卵治疗改善了PCOS卵泡的生长,但可能导致过早黄素化.     

骨形态发生蛋白-15基因与卵巢早衰关系的研究进展

骨形态发生蛋白-15(BMP-15)是重要的卵母细胞源性生长因子。它在卵泡发育早期以较低水平特异性地表达于卵巢,影响卵泡刺激素(FSH)对颗粒细胞甾体激素分泌水平的调控,是与颗粒细胞增生、FSH依赖性细胞分化相关的卵母细胞特异性调节因子,对卵泡的早期发育极其重要。目前研究认为其基因突变可能是卵巢早衰发生、发展的机制之一。     

卵巢早衰患者骨形态发生蛋白15基因突变的研究

目的:通过对卵巢早衰(POF)患者骨形态发生蛋白15(BMP-15)基因编码区的单核苷酸多态性(SNPs)分析,探讨BMP-15突变与POF的关系.方法:应用聚合酶链反应(PCR),对63例POF患者(POF组)和62例正常对照者(对照组)的BMP-15编码区特异扩增,PCR产物进行DNA测序,检测基因突变.结果:发现3个突变位点,位于第1外显子的rs3810682(-9C ＞G)和rs79377927 (788_789insTCT),第2外显子的rs17003221(852C＞ T).其中rs3810682(-9C＞G)和rs17003221 (852C＞ T)在POF组和对照组中均有发现,且该两个位点的基因型及等位基因频率在POF组和对照组分布比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).仅在POF组中发现2例rs79377927( 788_789insTCT),该位点基因型在POF组中为3.17％.结论:BMP-15的rs79377927 (788_789insTCT)位点基因突变与POF发病可能相关.     

生长分化因子-9与PCOS的卵泡发育异常

多囊卵巢综合征(PCOS)是一种多起因、临床特征为多态性的综合征,卵泡发育异常为其重要特征。由卵母细胞所分泌的生长分化因子-9(GDF-9)是卵泡正常生长发育所必需的细胞因子,对早期卵泡正常生长、卵母细胞的有丝分裂、颗粒细胞的增殖、卵泡膜的形成均有促进作用,但GDF-9却在PCOS患者的卵巢中表达延迟、降低,因此,GDF-9在PCOS发生机制中所起的作用令人侧目。本文将在PCOS卵泡发育异常的基础上,综述PCOS与GDF-9的相关性研究。     

卵泡生长分化因子-9(GDF-9)在高胰岛素血症大鼠卵巢中的表达与意义

目的:探讨卵泡生长分化因子-9(GDF-9)在卵泡发育异常及激素水平变化等方面的作用机制。方法:①利用改良Poretsky方法建立高胰岛素血症动物模型(模型组,n=20):hCG×9d+胰岛素×22d。采用下列方法验证模型:测定空腹血糖、空腹胰岛素(FINS)、睾酮(T)、E2、LH、FSH,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA1-IR);测定大鼠体重及卵巢重量;HE染色方法观察卵巢病理变化。②采用免疫组化和RT-PCR法检测模型动物及正常对照组(n=20)卵巢组织GDF-9 mRNA及蛋白的表达。结果:①与对照组比较,模型组FPG、FINS、HOMA1-IR、T升高(P<0.05)。②组间体重无统计学差异,但模型组卵巢重量显著大于对照组(P<0.05)。模型组各发育阶段卵泡明显减少,但囊性扩张的卵泡和闭锁卵泡增多,卵泡膜细胞增生,卵泡间质明显增厚。③模型组卵巢组织GDF-9 mRNA和蛋白的表达均显著低于对照组(P<0.05)。结论:高胰岛素血症减弱卵巢组织GDF-9 mRNA和蛋白的表达强度;表达降低的GDF-9可能与PCOS卵泡发育异常及激素水平变化有关。     

GDF-9及其受体在PCOS大鼠卵巢中的表达

目的:探讨生长分化因子-9(GDF-9)蛋白及其受体BMPR-ⅡmRNA在PCOS大鼠卵巢的表达。方法:皮下注射DHEA建立PCOS模型,用免疫组化法检测卵巢GDF-9表达;用RT-PCR法检测BMPR-ⅡmRNA的表达。结果:GDF-9主要于PCOS发育正常的初级、窦前、窦状卵泡卵母细胞胞浆中表达,表达强度与对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。BMPR-ⅡmRNA相对含量则显著高于对照组(P<0.05)。结论:GDF-9是促进P- COS卵泡发育的主要原因;受体表达上调是诱导雄激素增高的原因之一。     

GDF-9和BMP-15在子宫肌瘤中的表达

目的:了解GDF-9和BMP-15在子宫肌瘤及邻近正常平滑肌中的表达,为进一步探讨子宫肌瘤发病机制提供实验依据。方法:免疫组织化学方法检测手术切除的子宫肌瘤和邻近平滑肌组织中蛋白的表达;消化法和组织块贴壁法进行子宫肌瘤细胞和邻近平滑肌细胞原代培养,Real-time PCR(RT-PCR)检测所培养子宫肌瘤和邻近平滑肌细胞中GDF-9和BMP-15的表达。结果:GDF-9和BMP-15蛋白在子宫肌瘤和邻近平滑肌组织中的表达无统计学差异;消化法和组织块贴壁法2种细胞培养法均建立了有限细胞系,Real-time PCR检测结果显示GDF-9和BMP-15mRNA在子宫肌瘤细胞中的表达均高于邻近平滑肌细胞。结论:GDF-9和BMP-15在mRNA水平对基因信号调控方面有影响,可能促进子宫肌瘤的增殖、肥大,与子宫肌瘤的发生发展有一定的相关性。     

卵巢肿瘤患者血清CA19—9水平升高的临床意义

目的探讨血清CA19-9水平在卵巢肿瘤中的升高情况及临床意义。方法回顾性分析首都医科大学附属北京友谊医院2007年1月至2008年12月间收治的377例卵巢肿瘤患者的血清CA19-9水平及相关的临床资料。结果377例患者中,血清CA19-9水平升高者89例,阳性率23．6％0。主要见于成熟畸胎瘤、卵巢子宫内膜异位囊肿、交界性肿瘤及恶性肿瘤患者,其阳性率分别为27．3％、31．7％、42．9％和28．1％,高于良性肿瘤（19．3％）、卵巢瘤样病变（23．9％）和卵巢转移癌（12．5％）,但差异无统计学意义（P〉O．05）;双侧卵巢成熟畸胎瘤的阳性率为53．3％,高于单侧（19．6％）,差异无统计学意义（P〉O．05）。CA19-9检测卵巢恶性肿瘤的特异度为76．6％,灵敏度为25％,与CAl25联合其灵敏度和特异度分别为82．5％和59．1％。结论CA19-9对卵巢畸胎瘤和子宫内膜异位囊肿的诊断有一定的参考价值,与CA125联用可提高卵巢恶性肿瘤的检出率。     

Reduced and delayed expression of GDF9 and BMP15 in ovarian tissues from women with polycystic ovary syndrome

PurposeGrowth differentiation factor 9 (GDF9) and bone morphogenetic protein 15 (BMP15) play crucial roles in follicular development and oocyte maturation. This study aimed to investigate and compare the expression of these proteins in ovarian tissues of women with and without polycystic ovary syndrome (PCOS).MethodsOvarian tissues from 28 patients with PCOS and 26 normal ovulatory women were collected, and the expression of GDF9 and BMP15 in oocytes and granulosa cells was evaluated via immunohistochemical staining.ResultsGDF9 and BMP15 were first expressed in primordial follicles at very low levels, and their expression increased gradually with follicular development, reaching the highest levels in Graafian follicles. However, less GDF9 and BMP15 expression was observed in primordial, primary, and secondary follicles in ovarian tissues of PCOS patients compared with levels in the control tissues (P < 0.05). In Graafian follicles, GDF9 and BMP15 expression reached comparable levels in the PCOS and control groups (P > 0.05).ConclusionsThe expression of GDF9 and BMP15 in ovarian tissues varies among the developmental stages in both oocytes and granulosa cells in human ovarian tissues. The expression of these proteins is reduced and delayed in the early follicular stage in PCOS ovarian tissues, and these differences in expression may be associated with aberrant follicular development in patients with PCOS.