CXC趋化因子受体6在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的 研究CXC趋化因子受体6(CXCR6)在同种异体小鼠心脏移植中的表达及CXC趋化因子配体16(CXCL16)与CXCR6相互作用对移植物存活时间的影响.方法 以野生型Balb/c小鼠(H-2d)为供者(同种移植组),或以野生型C57BL/6小鼠(H-2b)为供者(同系移植组),以野生型C57BL/6小鼠为受者分别行小鼠腹腔异位心脏移植.测定同系和同种移植组小鼠移植心脏CXCR6mRNA的表达,并测定受者脾脏CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达.另制作小鼠同种异位心脏移植模型(Balb/c小鼠为供者,C57BL/6小鼠为受者),将其分为实验组和对照组,实验组受者移植当天至发生排斥反应时腹腔注射抗CXCL16抗体,对照组受者同期注射对照抗体.记录两组移植心脏存活时间.进行CD8+T淋巴细胞的细胞毒试验,即用Balb/c小鼠脾细胞免疫C57BL/6小鼠后,获取C57BL/6小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞,将Balb/c小鼠脾细胞与C57BL/6小鼠CD8+T淋巴细胞混合培养,分别加入抗CXCL16抗体、小鼠IgG(对照抗体)和抗CD40L抗体.结果 同种移植组移植心脏中CXCR6 mRNA的表达以及脾脏CD8+T淋巴细胞上CXCR6的表达均高于同系移植组和正常对照组.抗CXCL16抗体对CD8+T淋巴细胞的细胞毒活性无影响.与对照组相比较,实验组小鼠移植心脏存活时间并未明显延长.结论 小鼠心脏移植排斥反应中CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达上升,阻断CXCL16/CXCR6相互作用并不能延长移植心脏的存活时间.

Abstract：

Objective To investigate the expression of CXCR6 in allograft rejection and effect of CXCL16/CXCR6 interaction on allograft survival Methods Intra-abdominal heterotopic heart transplantation was performed using wild type (WT) Balb/c mice (H-2d) (allogeneic) as donors or WT C57BL/6 mice (B6, H-2b) (syngeneic) as donors, and using WT B6 mice as recipients. The intragraft expression of CXCR6 and expression of CXCR6 in CD8+ T cells of the spleens from syngeneic and allogeneic recipients were examined. The allogeneic recipients were further divided into the experimental group (n = 5) and control group (n = 6) randomly. The experiment group and control group were injected with anti-CXCL16 mAb or control mAb respectively until rejection occurred. The cardiac allograft survival in experimental group and control group was evaluated. Results Rejected allografts showed higher expression of CXCR6 than syngeneic cardiac grafts. More importantly,expression of CXCR6 in CD8+ T cells was also up-regulated by allograft rejection. However, injection of anti-CXCL16 mAb could not inhibit cytotoxic activity of CD8+ T cells. Moreover, experimental group could not prolong the cardiac graft survival time as compared with control group. Conclusion Expression of CXCR6 in CD8+ T cells is up-regulated in allograft rejection.     

CXC趋化因子受体6在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的 研究CXC趋化因子受体6(CXCR6)在同种异体小鼠心脏移植中的表达及CXC趋化因子配体16(CXCL16)与CXCR6相互作用对移植物存活时间的影响.方法 以野生型Balb/c小鼠(H-2d)为供者(同种移植组),或以野生型C57BL/6小鼠(H-2b)为供者(同系移植组),以野生型C57BL/6小鼠为受者分别行小鼠腹腔异位心脏移植.测定同系和同种移植组小鼠移植心脏CXCR6mRNA的表达,并测定受者脾脏CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达.另制作小鼠同种异位心脏移植模型(Balb/c小鼠为供者,C57BL/6小鼠为受者),将其分为实验组和对照组,实验组受者移植当天至发生排斥反应时腹腔注射抗CXCL16抗体,对照组受者同期注射对照抗体.记录两组移植心脏存活时间.进行CD8+T淋巴细胞的细胞毒试验,即用Balb/c小鼠脾细胞免疫C57BL/6小鼠后,获取C57BL/6小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞,将Balb/c小鼠脾细胞与C57BL/6小鼠CD8+T淋巴细胞混合培养,分别加入抗CXCL16抗体、小鼠IgG(对照抗体)和抗CD40L抗体.结果 同种移植组移植心脏中CXCR6 mRNA的表达以及脾脏CD8+T淋巴细胞上CXCR6的表达均高于同系移植组和正常对照组.抗CXCL16抗体对CD8+T淋巴细胞的细胞毒活性无影响.与对照组相比较,实验组小鼠移植心脏存活时间并未明显延长.结论 小鼠心脏移植排斥反应中CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达上升,阻断CXCL16/CXCR6相互作用并不能延长移植心脏的存活时间.     

CXC趋化因子受体6在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的 研究CXC趋化因子受体6(CXCR6)在同种异体小鼠心脏移植中的表达及CXC趋化因子配体16(CXCL16)与CXCR6相互作用对移植物存活时间的影响.方法 以野生型Balb/c小鼠(H-2d)为供者(同种移植组),或以野生型C57BL/6小鼠(H-2b)为供者(同系移植组),以野生型C57BL/6小鼠为受者分别行小鼠腹腔异位心脏移植.测定同系和同种移植组小鼠移植心脏CXCR6mRNA的表达,并测定受者脾脏CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达.另制作小鼠同种异位心脏移植模型(Balb/c小鼠为供者,C57BL/6小鼠为受者),将其分为实验组和对照组,实验组受者移植当天至发生排斥反应时腹腔注射抗CXCL16抗体,对照组受者同期注射对照抗体.记录两组移植心脏存活时间.进行CD8+T淋巴细胞的细胞毒试验,即用Balb/c小鼠脾细胞免疫C57BL/6小鼠后,获取C57BL/6小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞,将Balb/c小鼠脾细胞与C57BL/6小鼠CD8+T淋巴细胞混合培养,分别加入抗CXCL16抗体、小鼠IgG(对照抗体)和抗CD40L抗体.结果 同种移植组移植心脏中CXCR6 mRNA的表达以及脾脏CD8+T淋巴细胞上CXCR6的表达均高于同系移植组和正常对照组.抗CXCL16抗体对CD8+T淋巴细胞的细胞毒活性无影响.与对照组相比较,实验组小鼠移植心脏存活时间并未明显延长.结论 小鼠心脏移植排斥反应中CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达上升,阻断CXCL16/CXCR6相互作用并不能延长移植心脏的存活时间.     

环孢菌素A抑制大鼠同种心脏移植急性排斥反应中趋化因子受体CCR5表达的研究

目的观察大鼠同种心脏移植急性排斥反应中趋化因子受体CCID的表达及环孢菌素A（CsA）的抑制作用。方法分两组建立同种大鼠颈部心脏移植模型：对照组（n=25）和新山地明组（CsA组，n=25），各5例观察移植心脏存活时间。于移植术后第1、5、7、14天分别取移植心组织各5例，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测移植心组织内趋化因子受体CCR5mRNA不同时间点的表达水平，免疫组织化学方法检测移植心组织内趋化因子受体CCR5分子的表达差异。结果对照组移植心存活时间为（11．6±1．5）d，CsA组移植心存活时间为（22．4±5．1）d，两组问移植心存活时间差异有统计学意义（P〈0．01）。急性排斥组和CsA处理组大鼠移植心脏在术后第5、7、14天都可检测到趋化因子受体CCR5mRNA阳性表达，但CsA处理组趋化因子受体CCRSmRNA的表达明显弱于急性排斥组。同样急性排斥组和CsA处理组大鼠移植心脏在术后第5、7、14天都可检测到趋化因子受体CCR5分子的表达，CsA处理组趋化因子受体CCR5分子的表达相对较弱。结论趋化因子受体CCR5在早期移植免疫事件中具有重要的作用，CsA能部分抑制趋化因子受体CCR5的表达，并与移植物存活时间延长有一定的关系。     

急性排斥反应时移植肾组织中趋化因子及其受体的表达

目的 探讨急性排斥反应时移植肾组织中正常T淋巴细胞表达及调节因子(RANTES)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、γ干扰素诱导的单核因子(CXCL9/Mig)、γ干扰素诱导蛋白10(CXCL10/IP-10)及其受体CCR5、CCR2、CXCR3的表达及意义.方法 以52例肾移植受者为对象,移植后常规进行移植肾穿刺,所取材料一部分进行组织学观察,另一部分采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测各趋化因子及其受体的mRNA表达.结果 52例中,17例为临界改变,21例为排斥改变,其中I a级18例,I b级3例(以上38例为排斥组).另14例肾功能稳定,移植肾组织无明显病理变化(非排斥组).排斥组RANTES、CXCL10及CCR5的mRNA表达明显上调,其mRNA表达量分别是非排斥组的2.70倍(P<0.01)、3.76倍(P<0.01)和6.88倍(P<0.01);两组间CXCL9、MCP-1及CCR2 mRNA表达的差异均无统计学意义(P>0.05).结论 急性排斥反应时,移植肾组织中RANTES、CXCL10和CCR5表达升高,提示它们在肾移植急性排斥反应中可能起重要作用,它们的高表达可以作为移植肾急性排斥反应的标志之一.     

白介素10在心脏移植排斥反应中的表达及机制

目的　研究白介素10(IL-10)在大白鼠心脏移植排斥反应中心脏局部的表达变化情况，并探讨其参与排斥反应的可能机制。方法　实验动物分5组，A组(对照组)、B组(供体特异性全血输注组)、C组(Anti-IL-2Mab组)、D组(Anti-IL-4Mab组)、E组(Anti-IL-2Mab+环孢霉素A组)，处理受体。将大鼠移植心移植到受体的颈部，观察移植心存活时间、动态病理变化。并于移植术后第1、3、5、7、9、11、14d分别取移植心置于液氮中待测。应用半定量的RT-PCR法动态检测移植心IL-10的表达情况。结果　各组移植心存活时间分别为(8.3±1.7)d、(29.2±7.1)d、(26.4±5.7)d、(10.2±1.9)d、(55.0±10.6)d。其中B组、C组与A组比较差异有显著意义，E组与A组及C组比较分别有极显著意义和显著意义。IL-10在B组、C组及E组均有较强的表达，在A组及D组表达微弱，并与移植物的存活时间密切相关。结论　IL-10参与调节移植排斥反应，其机制可能为Th类细胞因子的免疫偏离。应用Th1类细胞因子单克隆抗体并联用免疫抑制剂可以有效的抑制移植排斥反应，从而延长移植物的存活期。     

CXC趋化因子受体5在胃癌中的表达与临床意义

目的 探讨CXC趋化因子受体5(CXCR5)在人胃癌细胞株及胃癌组织中的表达特点并分析其表达的临床意义.方法 采用流式细胞术检测人胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901及HGC-27中CXCR5的表达,采用组织芯片技术及免疫组织化学方法检测90例胃癌组织及癌旁组织中CXCR5的表达,并分析其临床意义.结果 流式细胞术检测结果表明,在人胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901及HGC-27中均能检测到CXCR5的表达;组织芯片及免疫组织化学结果显示胃癌组织及癌旁组织中均有CXCR5的表达,其在胃癌中高表达的比率为52.87％;肿瘤大小≤2.8 cm的胃癌患者其CXCR5高表达的比率显著低于肿瘤大小＞2.8 cm的胃癌患者,差异有统计学意义(x2=3.995,P＜0.05);胃癌组织中CXCR5的表达水平与患者其他临床病理特征无明显相关(P＞0.05).生存分析显示,CXCR5高表达的胃癌患者术后总生存率较低于CXCR5低表达的胃癌患者[风险比(HR)=1.810,95％可信区间(CI):0.980 3～3.341 0,P＞0.05].结论 CXCR5可能与胃癌发生发展有关.     

阻断CXC趋化因子受体3途径对同种异体胰岛移植急性排斥反应影响的实验研究

目的研究CXC趋化因子受体3（CXC chemokine receptor 3,CXCR3）反义肽核酸（peptide nucleic acid,PNA）对同种异体胰岛移植急性排斥反应的影响。方法实验模型为小鼠同种异体胰岛移植模型。分为生理盐水对照组,PNA CXCR3组和随机错配PNA组。体外T细胞增殖应答能力通过淋巴细胞增殖反应来评估。应用RT-PCR和Western blot检测CXCR3 mRNA和蛋白表达水平。应用流式细胞仪测定脾CD3^＋T细胞CXCR3表达水平。结果与生理盐水组[（6．72±1．48）d]和随机错配PNA组[（6．54±0．86）d]相比,PNA CXCR3组[（9．70±1．57）d]受体有功能胰岛移植物存活时间明显延长。移植后第7天,PNA CXCR3组CXCR3 mRNA水平（1．06±0．07）同生理盐水对照组（1．98±0．22）和随机PNA组（1．87±0．10）比较明显下调（P〈0．01）。PNA CXCR3组移植物CXCR3蛋白水平以及小鼠淋巴细胞增殖能力与另两组比较明显降低（P〈0．01）。结论PNA CXCR3通过降低T淋巴细胞活性来延长同种异体胰岛移植物存活时间,在抑制同种异体急性排斥反应中具有潜在的治疗效应。     

诱导体内产生一氧化碳对小鼠心脏移植排斥反应的抑制作用

目的 探讨用二氯甲烷(MC)诱导同种心脏移植受鼠体内产生CO以减轻排斥反应及延长受鼠存活时间的作用,并探讨其机制.方法 以C57BL/6小鼠为供者,Balb/c小鼠为受者,建立小鼠颈部异位心脏移植模型.实验分3组,MC 1组和MC 2组受鼠分别于术前1d至术后6d和至13 d,用含MC的橄榄油100 mg/kg灌胃,移植对照组受鼠术前1d至术后6d用等体积不含MC的橄榄油灌胃.术后监测移植心存活时间;检测受鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)及叉状头螺旋转录因子(Foxp3)mRNA及蛋白的表达;检测移植心脏细胞间黏附分子-1(ICAM 1)及胱天蛋白酶3的表达;观察移植心组织病理学变化.结果 受鼠碳氧血红蛋白(COHb)浓度在MC灌胃前为(0.85±0.28)％,灌胃后3h达到峰值(5.24±0.45)％(P＜0.01).移植对照组、MC 1组、MC2组移植心脏的平均存活时间分别为6.3、12.1和19.4d,两MC组移植心存活时间较移植对照组明显延长(P＜0.01).与移植对照组相比,两MC组TNF-a和TNF-α mRNA、ICAM-1及胱天蛋白酶3的表达均得到明显抑制(P＜0.01);移植心肌淋巴细胞和单核细胞浸润的程度得到明显减轻,尤以MC2组最为明显.各组间血清IL-10和IL-10 mRNA及Foxp3蛋白和Foxp3 mRNA表达的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 诱导同种心脏移植受鼠体内产生CO能明显减轻排斥反应,延长移植心存活时间,其主要机制可能与CO的抗炎症和抗凋亡功能密切相关,而并不依赖于Foxp3表达的上调.     

趋化因子CXC家族成员在大鼠肝移植急性排斥反应中的作用

目的探讨趋化因子Mig、IP-10、I-TAC及其受体CXCR3的表达在大鼠肝移植手术前后的动态变化,分析其与肝移植急性排斥（AR）的关系。方法改良“二袖套”法建立大鼠原位肝移植模型和AR模型,分为4组：手术创伤组,肝移植无排斥组,肝移植急性排斥组,免疫抑制剂组。EHSA法检测血清Mig、IP-10、I-TAC表达。流式细胞仪检测外周血淋巴细胞CXCR3的表达,用Cellquest软件分析阳性细胞百分率。半定量RT—PCR检测各组第7天肝脏组织CXCR3-mRNA的表达。结果（1）各组大鼠手术后外周血趋化因子Mig,IP-10,I-TAC及其受体CXCR3表达出现明显升高。（2）AR组在术后第3～5天起Mig,IP．10,I-TAC及其受体CXCR3表达均高于其他各组（P〈0．01）。（3）AR组大鼠在移植后第7天,外周血Mig、IP-10、I—TAC和CXCR3的表达随着AR组RAI积分的升高而逐步升高,相关系数分别为0．79,0．89,0．82,0．92（P〈0．05）。结论血清中趋化因子Mig、IP-10、I-TAC及其受体CXCR3的高表达与AR密切相关,有望成为诊断AR较特异、敏感的指标。     

趋化因子IP-10及其受体CXCR3在大鼠肝移植急性排斥反应中的作用

目的探讨趋化因子IP-10及其受体CXCR3的表达在大鼠肝移植手术前后的动态变化,分析其与肝移植急性排斥(acute rejection,AR)的关系。方法改良二袖套法建立大鼠原位肝移植模型和急性排斥模型,分为4组:手术创伤组,肝移植无排斥组,肝移植急性排斥组,FK506组。ELISA法检测血清IP-10表达。流式细胞仪检测外周血淋巴细胞CXCR3的表达,用Cellquest软件分析阳性细胞百分率。半定量RT-PCR检测各组第7天肝脏组织CXCR3-mRNA的表达。结果①各组大鼠手术后外周血趋化因子IP-10及其受体CXCR3表达明显升高;②AR组在术后第5天起IP-10及其受体CXCR3表达均高于各对照组(P0.01);③AR组大鼠在移植后第7天,外周血IP-10和CXCR3的表达随着AR组RAI积分的升高而逐步升高,相关系数分别为0.89和0.92(P0.05)。结论血清中趋化因子IP-10及其受体CXCR3的高表达与AR密切相关,有望成为诊断AR较特异、敏感的指标。     

细胞因子在心脏移植急性排斥反应中的表达及其作用机理

目的观察同种大鼠心脏移植急性排斥反应中,局部细胞因子网络的变化及其机理.方法健康雄性Wistar大鼠(受体)和SD大鼠各48只,将接受移植心脏的Wistar大鼠分4组,每组12只.A组对照组;B组抗白介素2单克隆抗体(IL-2Mab)组;C组环孢菌素A(CsA)组;D组IL-2Mab加CsA组.4组大鼠分别静脉给予生理盐水、抗白介素2单克隆抗体及口服CsA、静脉给予抗白介素2单克隆抗体加口服CsA,采用改良的移植术式建立移植模型.常规监测排斥反应发生情况.应用RT-PCR的方法于术后第1、3、5、7、9、11、14天动态检测移植物局部细胞因子IL-1β、IL-2、CD25、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、TNFα、IFNγ的表达水平.结果移植心脏存活时间,A组为(8.3±1.7)d;B组为(29.2±7.1)d;C组为(26.4±5.7)d;D组为(55.0±11.6)d.B、C、D组移植心脏存活时间显著延长,与A组相比,差异有极显著性意义(P＜0.01).存活时间较长的移植心脏的淋巴细胞浸润和心肌坏死的程度比存活时间较短的心脏明显减轻.IL-1β的表达在各组均较高;IL-4、IL-5、IL-6、IL-10的表达水平在移植心脏存活时间较长的组较高;而IL-2、CD25、IFN-γ、TNFα的表达则相对较低;4组相比差异有显著性意义(P＜0.05).结论细胞因子网络在心脏移植排斥反应中发生了相应的变化,并与干预的因素及移植物存活时间有密切的关系.IL-2Mab、CsA联合用药促使TH1类细胞因子向TH2类细胞因子整体偏离,这种免疫偏离使移植心脏存活时间显著延长.     

SDF-1/CXCR4在肝移植急性排斥反应中的表达

目的 通过检测基质细胞衍生因子-1(stromal-dirived factors-1,SDF-1)的受体CXCR4在移植肝脏急性排斥反应中的表达,探讨其在肝移植急性排斥反应中的作用机制.方法 根据Banff病理分级将原位肝移植术后肝穿刺活检标本分成4组,应用RT-PCR方法 半定量分析各组标本中CXCR4的mRNA水平.结果 对照组和未排斥组肝穿标本大多呈现CXCR4的轻、中度表达;排斥组肝穿标本CXCR4高度表达的例数较多,而且随着排斥程度的加重,肝穿标本CXCR4表达的相对R值呈现递增趋势.结论 CXCR4在人类肝移植急性排斥反应中起着重要作用,通过各种生物学手段抑制CXCR4在移植肝脏中的表达有可能成为防治急性排斥反应有效途径.     

High expression of CXC chemokine receptor 6 associates with poor prognosis in patients with clear cell renal cell carcinoma

Purpose

Accumulating evidence indicates that CXC chemokine receptor 6 (CXCR6) has a crucial role in cancer development and progression, however, its role in clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) remains obscure. The aim of this study is to investigate the prognostic value of CXCR6 expression in patients with ccRCC following surgery.

Asynchronous rejection of heart and lungs following cardiopulmonary transplantation

Eighteen patients have received 19 combined heart-lung allografts since March, 1982. During the maturation of our program of heart-lung transplantation, we have learned that isolated rejection of the lung can occur frequently and that exclusive dependence on the cardiac biopsy can be misleading. Of the 18 patients who received allografts, 10 are the basis for this report. The other patients were excluded because of death from excessive bleeding (1), inadequate lung preservation (2), an inability to differentiate rejection from infection (3), or an absence of rejection of either the heart or the lungs (2). Rejection of the lung was suggested, in the absence of clinical evidence of infection, by the radiographic appearance of a diffuse pulmonary infiltrate. It was confirmed by a prompt response to augmentation of maintenance immunosuppression with an intravenous pulse of methylprednisolone. The presence or absence of cardiac rejection was determined by the standard endomyocardial biopsy. Direct biopsy of the involved lung through a thoracotomy was performed in 4 patients so that a definitive histological diagnosis of rejection would reinforce the anticipated clinical diagnosis. The clinical course in 6 of the 10 patients plus the results of the open lung biopsy in 3 of them suggest that isolated rejection of the lung developed in the absence of cardiac findings. Patients responded within 12 to 24 hours to augmented immunosuppression with a dramatic improvement in the abnormal chest radiograph. In all 10 patients, either isolated lung or synchronous heart and lung rejection episodes were confined to the first six weeks after operation unless a severe alteration in the immunosuppression was made (2 patients).(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)