改进型左侧精索静脉曲张对大鼠睾丸酶及增殖细胞核抗原的影响

目的 观察改进型左侧精索静脉曲张(ELV)对大鼠睾丸酶及增殖细胞核抗原(PCNA)的影响.方法 利用改进的方法建立青春期SD大鼠左精索静脉曲张的模型21只;假手术组SD大鼠15只作对照组.术后3个月,取部分睾丸组织匀浆提取上清液,比色法定量检测乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)活性,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定PCNA的浓度.结果 实验组左睾丸内的LDH、G6PDH活性分别为(8.17±3.47)、(34.00±16.29)U/mg,与对照组同侧(11.98±2.26)、(54.88±20.87)U/mg比较下降,与实验组右睾丸(12.69±3.97)、(78.03±25.28)U/mg比较也下降,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组左睾丸内的SDH活性(1.22±0.41)U/mg与对照组同侧(1.74±0.43)U/mg比较下降,差异有统计学意义(P<0.05),与实验组右睾丸(1.62±0.56)U/mg比较下降,差异无统计学意义(P>0.05);实验组左睾丸内PCNA(669.10±205.39)mU/ml与对照组同侧(776.81±231.72)mU/ml比较下降,和实验组右睾丸(800.81±172.02)mU/ml比较也下降.差异均无统计学意义(P>0.05).结论 改进型ELV致睾丸酶活性降底和PCNA的变化,这些变化可能是影响生育能力的因素之一.     

改进型左侧精索静脉曲张对大鼠睾丸酶及增殖细胞核抗原的影响

Objective To evaluate the effects of improved left varicocele (ELV) on testis enzymes and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in rats. Methods ELV models of SD rats were established by the improved method in 21 SD rats, and another 15 were included in a sham operation group as controls. At the 3rd month, the activity of LDH, SDH and G6PDH was measured by colorimetry. The concentration of the PCNA was determined by enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA). Results The activity of LDH and G6PDH (8. 17 ± 3. 47), (34. 00 ± 16. 29) U/mg in left testes of experimental group was reduced remarkably as compared with that in right testes (12.69 ±3.97), (78.03 ± 25. 28) U/mg and control group (11. 98 ± 2. 26) , (54. 88 ± 20. 87) U/mg (P < 0. 05). The activity of SDH was reducd remarkably in left testes of experimental group ( 1. 22 ±0. 41 ) U/mg as compared with that in control group (1.74 ± 0.43) U/mg (P < 0.05), but there was no significant difference between the left and right testes ( 1.62 ±0. 56) U/mg in experimental group. The concentration of PCNA was reduced in left testes of experimental group (669. 10 ±205. 39) mU/ml as compared with that in right testes (800. 81 ± 172. 02) mU/ml and control group (776. 81 ± 231. 72) mU/ml, but there was no significant difference (P > 0. 05). Conclusion The reduction of LDH, SDH and G6PDH and the changes of PCNA in improved ELV may play an important role in the development of subfertility.     

不育男性双侧Ⅰ度精索静脉曲张对睾丸体积和生殖激素水平的影响

目的 评价不育男性双侧I度精索静脉曲张对睾丸体积和生殖激素水平的影响.方法 185例不育男性双侧I度精索静脉曲张(A组)和149例正常生育男性(B组),比较其睾丸体积、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和睾酮(T)水平.结果 A组患者两侧睾丸体积均小于B组,但睾丸体积绝对差异和睾丸体积相对差异与B组比较,无统计学意义.A组患者血清FSH水平高于B组,而LH、T与B组相比,差异无统计学意义.结论 不育男性双侧I度精索静脉曲张可导致患者双侧睾丸体积减小,血清FSH水平升高.     

大鼠精索静脉曲张睾丸组织的蛋白质组学研究

目的精索静脉曲张是男性不育的首要病因,本课题利用蛋白组学技术筛选精索静脉曲张大鼠睾丸中表达变化显著蛋白,探索精索静脉曲张引起不育的可能分子机制。方法雄性Wistar大鼠16只,随机分为对照组和精索静脉曲张实验组。实验组大鼠施行左肾静脉部分结扎术来诱导产生精索静脉曲张,对照组行假手术作为阴性对照。30d后,收集全部大鼠的左侧睾丸。采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（Tunel）法检测两组大鼠生精细胞凋亡情况,进而比较两组生精细胞的凋亡指数。利用双向凝胶电泳技术（2-DE）寻找两组大鼠睾丸中表达有显著性差异的蛋白质点,然后进行基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱鉴定（MALDI-TOFMS）。结果双向凝胶电泳结果显示21个蛋白质点在两组间存在显著性差异。在精索静脉曲张大鼠睾丸中有8个蛋白质点表达上升、13个下降,这些蛋白功能涉及蛋白质合成、加工、降解,基因表达调控,信号转导,能量代谢,凋亡,自由基代谢等。Tunel证实实验组大鼠睾丸中生精细胞凋亡指数显著高于对照组,且本实验筛选出14—3—3e、hnRNPF以及LZTFL1三种蛋白与凋亡相关。结论蛋白组学筛选出精索静脉曲张大鼠睾丸差异表达蛋白,并进一步证实精索静脉曲张促进睾丸生精细胞凋亡,其中相关凋亡蛋白对揭示精索静脉曲张引起男性不育的分子机制提供了可能。     

精索静脉曲张大鼠干细胞因子的变化及其意义

目的 探讨精索静脉曲张大鼠干细胞因子(SCF)的变化和意义.方法 将清洁级雄性SD大鼠20只喂养1周后,随机取10只应用左肾静脉部分结扎法进行造模,设为模型组;另外10只行左肾静脉分离后不结扎,设为假手术组.两组均于60d后处死大鼠,检测血清SCF、睾丸组织SCF及附睾精子的密度和活率.结果 模型组睾丸组织SCF为(654.6±30.5)ng/L,与假手术组(382.8±25.6) ng/L比较明显升高(P＜0.05);两组血清SCF比较差异无统计学意义(P＞0.05).模型组大鼠附睾精子密度为(2.36±1.58),与假手术组(4.07±1.40)比较明显降低(P＜0.05),两组大鼠精子活率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 检测睾丸组织SCF有助于判断生精细胞损伤.     

精索静脉曲张大鼠睾丸病理及前列腺素变化的研究

将大鼠左肾静脉部分结扎以建立精索静脉曲张动物模型，对双侧睾丸的形态学及睾丸内前列腺素Ｆ２α的变化进行研究。结果：睾丸组织学变化是生殖阻滞，阻滞在精子细胞和精母细胞为最常见，并有间质小血管的病变。精索静脉曲张可导致睾丸内ＰＧＦ２α逍度明显增高，高浓度的ＰＧＦ２α能引起曲细精管病变，最终导致不育。     

改进型实验性左侧精索静脉曲张的建立及其对大鼠卵泡刺激素及抑制素B的影响

目的:探讨改进型实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对大鼠血清卵泡刺激素(FSH)及抑制素B(InhB)的影响。方法:利用改进的方法建立青春期SD大鼠左精索静脉曲张的模型30只;假手术组SD大鼠30只作对照组。术后3个月,取大鼠血清,ELISA法分别检测FSH、InhB的浓度。结果:实验组大鼠血清中FSH浓度[(37.56±9.72)ng/ml]与对照组[(26.69±5.33)ng/ml]相比升高,具有统计学意义(P<0.05);而实验组大鼠血清中InhB的浓度[(349.93±99.48)pg/ml]与对照组[(768.83±146.96)pg/ml]相比下降,具有统计学意义(P<0.05)。结论:改进型ELV致FSH升高及InhB下降,这些变化可能是影响生育能力的机制之一。     

生精冲剂对精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能保护作用的研究

目的探讨生精冲剂对精索静脉曲张睾丸损伤的保护作用。方法观察生精冲剂对实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织结构、超微结构的影响。测定各组实验大鼠睾丸超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、乙酰胆碱脂酶(ACE)活性和脂质过氧化物(LPO)、一氧化氮(NO)含量。结果治疗组鼠睾丸组织结构与超微结构的损害程度明显低于模型组,SOD、CAT、ACE活性测定值明显高于模型组,LPO、NO含量明显低于模型组(P<0.01)。结论生精冲剂对精索静脉曲张造成的睾丸损害有保护作用,其提高精子质量和生育率的机制可能与抗脂质过氧化和增强抗氧化酶活性有关。     

增殖细胞核抗原

有关细胞增殖周期与细胞增生的研究是目前细胞基础研究的一个重要内容，其中以与细胞增殖周期相关的周期蛋白（ｃｙｃｌｉｎ），周期蛋白依赖激酶（ｃｙｃｌｉｎｄｅｐｅｎ ｄｅｎｔｋｉｎａｓｅ，Ｃｄｋｓ）、ｐ１６蛋白、ｐ５３蛋白等的研究发展较快。其中，增殖细胞核...     

蜂胶对糖尿病大鼠创面愈合的影响

目的：观察蜂胶对四氧嘧啶造成的糖尿病大鼠伤口愈合的影响。方法：健康Wistar大鼠80只,随机分为对照组（n=36）和模型组（n=44）。2组又各随机分为生理盐水处理组和蜂胶处理组。模型组大鼠尾静脉注射四氧嘧啶制成糖尿病模型。4周后所有动物背部两侧制备直径为1.8cm的圆形全皮层伤口。生理盐水处理大鼠用生理盐水冲洗伤口,蜂胶处理大鼠在伤口表面滴加4滴蜂胶。伤口均用无菌纱布固定包扎,每日换药1次。观察各组的创面愈合时间,3、7、14、21d的伤口愈合率,于伤后3、7、14d进行组织病理学观察及免疫组化法检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果：与盐水处理相比,对照大鼠和蜂胶大鼠经蜂胶处理能明显提高创面愈合率（P〈0.01）,缩短创面愈合时间（P〈0.05）.促进PCNA表达（P〈0.01）。结论：蜂胶可以促进糖尿病大鼠创面细胞增殖,加速伤口愈合。     

增殖细胞核抗原在脑胶质瘤中的表达

目的　探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)在不同类型胶质瘤细胞中的表达 ,以及与复发、预后的关系。方法　应用抗 PCNA单克隆抗体 (小鼠IgGza型 ) ,对 61例脑胶质瘤患者病理切片行免疫组织化学染色 ,不同类型胶质瘤PCNA标记指数进行差异分析。结果　不同类型胶质瘤的PCNA标记指数 (LI)不同 ,随着胶质瘤恶性程度增高而增大 ,两者呈显著正相关 (r =0 .895 ,P <0 .0 1) ,各级别间LI的差异非常有显著性 (P <0 .0 1) ;死亡组与存活组间LI差异有显著性 ;肿瘤首发与否、性别、年龄组间差异无显著性 ;恶性程度、PCNA标记指数和放疗与否与预后相关 (P <0 .0 5 )。结论　PCNA可以作为提示胶质瘤预后的指标 ,对确定胶质瘤的生物学特性和肿瘤的分级有指导作用。不同恶性程度胶质瘤间LI差异有显著性 ,与恶性程度正相关 ,与胶质瘤的预后关系密切 ,PCNA的过度表达提示肿瘤恶性程度高 ,预后差。     

增殖细胞核抗原在血管瘤及血管畸形组织中的表达

目的了解血管瘤的不同形态学类型和同一类型不同时期的内皮细胞增殖情况。方法采用免疫组织化学方法对41例不同形态学类型的血管瘤标本进行了增殖细咆核抗原(PCNA)的检测和比较,其中包括婴幼儿期血管瘤标本29例及成人期际本12例。结果增生期草霉状血管瘤、增生期混合血管瘤以及部分婴幼儿海绵状血管瘤检测结果为阳性,提示其内皮细胞处于增殖状态,其余均为阴性,经统计学处理,不同类型的婴幼儿增生期血管瘤间的 PCNA 标记指数无显著差异,与消退期婴幼儿血管瘤及各类成人血管瘤有显著差别。结论 PCNA 的表达对血管瘤的分类、诊断及治疗选择都有意义。     

阴囊升温对大鼠睾丸生精细胞凋亡及增殖细胞核抗原表达的影响

目的　研究阴囊升温对大鼠睾丸生精细胞凋亡及增殖细胞核抗原 ( PCNA)表达的影响 ,探讨其在升温引起生精细胞变化中的意义。　方法　应用原位末端标记( TUNEL )法和免疫组化法 ,检测大鼠睾丸局部升温至 43℃、3 0 min后 ,经 0 .5、1、3、6、1 0和 50 d观察生精细胞凋亡和 PCNA表达情况。　结果　大鼠睾丸局部升温至 43℃、3 0min后生精上皮受到损伤 ,生精细胞凋亡增加 ( P<0 .0 1 ) ,生精细胞 PCNA表达下降( 0 .5～ 1 0 d组 P<0 .0 1 ,50 d组 P<0 .0 5)。　结论　 43℃、3 0 min作用后生精细胞 PCNA表达与细胞凋亡呈负相关 ,联合检测两者对评估热作用后生精功能的变化有重要意义     

Evaluation of germ-cell kinetics in infertile patients with proliferating cell nuclear antigen proliferating index

Aim: To explore the usefulness of proliferating cell nuclear antigen proliferating index (PCNA PI) in the pathological diagnosis and treatment of male infertility. Methods: Testicular biopsy specimen obtained from 48 cases of male infertility and 2 normal controls were fixed and embedded. The sections were stained with anti-PCNA monoclonal antibodies or haematoxylin/eosin. Proliferating index (PI), expressed as the percentage of germ-cell nuclei positively stained with PCNA antibody, was assessed from more than 20 seminiferous tubules or 600 germ-cells. Results: The infertile patients were divided into 4 groups: Group 1, normal spermatogenesis (14 cases); Group 2, hypospermatogenesis (16 cases) ; Group 3, germinal arrest (10 cases) ; Group 4, Sertoli cell only syndrome (8 cases). The PCNA PI of normal control testis was 86.5% (mean value). Group 3 had a significantly lower PCNA PI (29.8%) than normal testis; Group 1 and 2 had similar PIs (82.3% and 82.3%, respectively) as the control testis. PI of the negative control (Group 4) was 0 as no germ-cells were found. Conclusion: PCNA PI is useful for assessing germ-cell kinetics, especially for pathological diagnosis of germinal arrest which is difficult to differentiate by routine HE staining technique. In germinal arrest, there is a significantly lowered PCNA PI, which is an indication of DNA synthesis deterioration, suggesting the use of therapies be different from those for hypospermatogenesis.     

增殖细胞核抗原在血管瘤及血管畸形组织中的表达

目的了解血管瘤的不同形态学类型和同一类型不同时期的内皮细胞增殖情况。方法采用免疫组织化学方法对４１例不同形态学类型的血管瘤标本进行了增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的检测和比较，其中包括婴幼儿期血管瘤标本２９例及成人期标本１２例。结果增生期草莓状血管瘤、增生期混合血管瘤以及部分婴幼儿海绵状血管瘤检测结果为阳性，提示其内皮细胞处于增殖状态，其余均为阴性，经统计学处理，不同类型的婴幼儿增生期血管瘤间的ＰＣＮＡ标记指数无显著差异，与消退期婴幼儿血管瘤及各类成人血管瘤有显著差别。结论ＰＣＮＡ的表达对血管瘤的分类、诊断及治疗选择都有意义。     

Expression of the proliferating cell nuclear antigen and protein products of tumour suppressor genes in the human foetal testis

Tumour suppressor genes retinoblastoma (Rb1) and adenomatous polyposis coli (Apc) as well as the proliferating cell nuclear antigen (PCNA) are involved in embryonic development. The purpose of the present study was to investigate the expression of Rb1 protein, APC protein and PCNA during development of the human foetal testis. Qualitative analysis of their expression at the single-cell level was performed using immunohistochemistry on archive samples of the foetal testis (18-37 gestation week). Stereological parameters (volume density, absolute volume, numerical density, absolute number) were calculated for quantification of the overall expression of those proteins that were expressed frequently enough for such an analysis. PCNA was frequently expressed in nuclei of immature Sertoli cells and prospermatogonia and less frequently in surrounding peritubular (myoid) and interstitial cells. The pRb1 protein was present in nuclei of prospermatogonia and Sertoli cells but was absent from the interstitial tissue. APC protein was expressed in the cytoplasm of a very small number of prospermatogonia and interstitial (Leydig) cells. The overall expression of PCNA in all stages of development was higher than pRb1 expression.