检测金属硫蛋白夹心法ELISA的建立和初步应用

采用两种能识别兔杆金属硫蛋白Ⅱ分子上不同抗原决定簇的单克隆抗体建立了夹心法ＥＬＩＳＡ。鉴定表明，该法测定兔ＭＴ的灵敏度为２０ｎｇ／ｍｌ批内和批间变异系数分别为１２．２％和９．３％，用于测定人体ＭＴ也有较好的灵敏性和可靠性。     

金属硫蛋白与人类疾病

金属硫蛋白(MT)是一种低分子量,富含半胱氨酸可结合重金属的蛋白质。从微生物到脊椎动物由Cd、Zn、Cu、Ag、激素及各种应急诱导产生金属硫蛋白。金属硫蛋白主要参与重金属解毒及氧化损伤解毒,储存金属,调节Zn及Cu的代谢,清除自由基。金属硫蛋白基因的表达调控是在转录水平上进行的,通过与金属,糖皮质激素及血反应元素顺式作用,及与DNA-结合蛋白,金属调节蛋白的反式作用达到调节的作用。众所周知,MT与一些疾病的发病过程密切相关。科学研究广泛地探索了心脏MT的抗氧化功能。最近采用心脏定位的MT-表达过量的转基因小鼠模型研究结果强力支持MT的这一生理作用。在急性及慢性刺激下如用阿霉素处理、局部缺血-再灌注损伤、食物中铜的限制,MT-表达过量的转基因小鼠心脏显示了对损伤的显著抗性。实验结果表明MT调节免疫系统,但MT的主要功能还不清楚。     

中华绒螯蟹重组金属硫蛋白的原核表达与分离纯化

金属硫蛋白(MT)由于其独特的结构和性质,而成为潜在的医用蛋白资源。本研究将重组中华绒螯蟹金属硫蛋白基因cDNA克隆入原核表达载体pET-GST,转化大肠杆菌BL21。重组蛋白以可溶和包涵体两种形式表达。根据金属硫蛋白的特性,优化了表达条件。Western blot证实了表达产物的正确性,用锌柱亲合层析得到高纯度的重组金属硫蛋白。为以后金属硫蛋白的生物学功能研究奠定了良好的基础。     

金属硫蛋白与肿瘤的关系研究

金属硫蛋白广泛存在于自然界及生物界中,目前认为金属硫蛋白是一类低分子量、富含半胱氨酸的内源性小分子蛋白物质,其具有较为独特的结构特征、理化性质及生物学特性。研究发现其在多种疾病的发生发展、发病机制、诊疗及药物耐药性等方面发挥着重要的作用,目前尤其是对于金属硫蛋白与各种肿瘤的发病机制、发生发展、诊断治疗、预后评估及抗肿瘤药物耐药性等关系的研究方面,逐渐受到愈来愈多的关注。本文主要对金属硫蛋白的结构与功能、主要生物学功能及其与肿瘤的关系进行综述。     

一种新型单克隆抗体导向血栓显像剂的基因工程制备

目的 为简化抗血小板Ｐ－选择素鼠／人嵌合单克隆抗体ＳＺ－５１／Ｈｕ的＾９９ｍＴｃ标记过程,并提高其＾９９ｍＴｃ标记效率,利用金属硫蛋白（ＭＴ）可与金属稳定结合的特点,通过基因工程的手段制备融合蛋白ＳＺ－５１／Ｈｕ－ＭＴ。方法 构建了ＳＺ－５１／Ｈｕ与ＭＴ的重组表达载体,并在小鼠骨髓瘤细胞Ｓｐ２／０中进行了目的融合蛋白的表达。结果 该融合蛋白在Ｓｐ２／０细胞中的表达量为３ｍｇ／Ｌ。对融合蛋白的各项性     

抗人F蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

Ｆ蛋白是存在于哺乳动物肝细胞质中的一种水溶性不稳定的单链蛋白质,相对分子质量（Ｍｒ）为４４０００。正常人肝组织中大约含Ｆ蛋白２７４ｍｇ／ｇ〔１，２〕,而血清中仅含０．２ｍｇ／Ｌ,提示血清Ｆ蛋白作为判断肝损伤程度的可能性。为对Ｆ蛋白进行深入研究,并提高对其检测的灵敏度,１９９５年以来,我们先后制备了３株抗人Ｆ蛋白的单克隆抗体（ｍＡｂ）,并进行了初步鉴定。１材料和方法１．１材料人Ｆ蛋白抗原的制备〔３〕：取肝外伤手术切除的新鲜肝组织５０ｇ,剪成约５ｍｍ３的组织碎块后,置于含有１ｇ／ＬＩＶ型胶原酶（Ｓｉｇｍａ）…     

小鼠抗天花粉蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

<正> 天花粉蛋白Tian Hua Fen,THF或Trichosanthin Protein是从葫芦科植物栝楼根Trichosanthes Kirilowii Maxim中提取的有效引产成份,对所有滋养叶细胞来源的疾病也有治疗作用。近年来还发现该蛋白     

金属硫蛋白的抗休克作用及其与内皮素的关系

为探讨金属硫蛋白(MT)的细胞保护机制及与内皮素(ET)的关系,在大鼠止血带休克模型上观察到MT明显改善动物休克状态的同时显著抑制其血浆ET含量的增加。离体实验发现MT呈剂量依赖地抑制ET的缩血管作用和抑制血管紧张素Ⅱ刺激ET的释放。提示MT可以通过抑制ET的释放和拮抗ET的缩血管效应,发挥其内源性抗损伤物质的作用。     

金属硫蛋白与线粒体功能调节

 金属硫蛋白（MTs）是一种富含半胱氨酸可结合金属离子的小分子蛋白,广泛分布于哺乳动物的各个器官。大量研究发现MTs具有调节金属离子稳态、重金属解毒、清除氧自由基、抑制炎症因子、防止机体衰老、贮存锌元素、防止细胞癌变、抗击电离辐射和抗细胞凋亡等多种生物学功能。近年来研究提示,MTs作为多功能蛋白可能直接或间接参与线粒体功能调节。特别是在氧化应激等条件下,MTs对于维持线粒体功能、促进线粒体损伤修复具有重要的意义。本文重点综述了金属硫蛋白对线粒体功能的调节作用及其可能机制。     

金属硫蛋白与儿童健康相关因素

金属硫蛋白（metallothionein,简称MT）是一类低分子量（分子量约为7000Da）、富含半胱氨酸的金属结合蛋白。自1957年由Margoshes和Vallee首次在马肾中分离出以来,     

抗金属硫蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

抗金属硫蛋白单克隆抗体的制备与鉴定张亨山②赵金垣张振龙③王春荣③刘采云③陈晓龙③刘宏马东星史德林③倪道明③黄文萱③（北京医科大学第三附属医院职业病研究中心，北京１０００８３）金属硫蛋白（Ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，ＭＴ）是一种广泛分布、富含巯基的金...     

PC-1蛋白单克隆抗体制备和鉴定

为获得高效价PC-1蛋白的鼠单克隆抗体(mAb),用于PC-1功能的实验,采用纯化的PC-1蛋白与GST的融合蛋白(GST-PC-1)为抗原,免疫小鼠和骨髓瘤细胞进行细胞融合,用直接ELISA法进行克隆化筛选,mAb的染色体分析及亚类鉴定及初步应用.结果表明细胞融合和ELISA筛选后,获得2株抗鼠PC.1蛋白mAb,两株PC-1 mAb效价分别为1:25600,1:13600,抗体亚型为IgG1,Western blot证实其特异性识别PC-1蛋白.该mAb可以用于测定PC-1蛋白.     

男性不育与金属硫蛋白制剂临床干预的研究

目的探讨男性不育患者血液和精浆中微量元素含量和精子质量以及用金属硫蛋白制剂干预治疗前后患者改善状况。方法对男性不育症患者进行血液、精液微量元素、血清激素及精液常规检查,并进行金属硫蛋白干预治疗两个月,每日2支,空腹口服。结果就诊130名患者中有84.68%血铅〉70μg/L（102.41±43.77）,40.54%精浆铅〉70μg/L（69.13±41.19）,70.29%血镉〉1.0μg/L（2.74±2.29）,41.82%精浆镉〉1.0μg/L（1.69±2.17）。对52例患者进行了含金属硫蛋白制剂干预,血铅、镉与干预后精浆铅、镉下降值呈极显著的正相关（r=0.727、r=0.692）。干预前、后患者血铅、血镉、精浆铅、精浆镉有极显著性差异P〈0.01,干预前、后精子密度、A级精子、A＋B级精子之间有极显著差异P〈0.01。干预显效率（至少三项精液指标改善）70.90%。结论金属硫蛋白对重金属（铅、镉）损伤引起的男性不育有显著的治疗效果。     

小鼠肝炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

[目的]制备并鉴定小鼠肝炎病毒(MHV)N蛋白的单克隆抗体(mAb).[方法]以Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达的重组N蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,应用常规杂交瘤技术将免疫小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤进行融合,用间接ELISA方法筛选分泌N蛋白mAb的杂交瘤细胞系.并用Western blot和IFA方法对所获得的mAb进行鉴定.[结果]共获得4株稳定分泌抗N蛋白mAb的杂交瘤细胞系,其亚类鉴定2株为IgG2a,1株为IgG2b,1株为IgG1,轻链均为k型.经鉴定4株mAb均能与重组N蛋白发生特异性反应.[结论]成功获得了特异性抗MHV N蛋白的mAb,为进一步研究N蛋白的结构功能及建立诊断学方法奠定了基础.     

镉与人金属硫蛋白基因表达的诱导

过渡金属元素镉 (Cd)是一种有毒的重金属环境和工业污染物 ,可通过呼吸道、消化道等不同途径进入人体 ,对肝、肾、骨骼、血液、免疫系统等产生广泛的损害作用 ,大量实验证明 ,Cd具有致癌、致畸、致突变的三致作用 ,并已被国际癌症研究中心 (IARC)确定为第一类致癌物〔1 ,2〕。近年来 ,有关 Cd的分子毒理学研究 (如 Cd与细胞凋亡、 DNA损伤、基因调控等 )取得了重要进展。金属硫蛋白 (MT)是由 MT基因家族编码的一种低分子蛋白 ,其分子量在 60 0 0 -70 0 0 Da之间 ,其分子中富含半胱氨酸 ,广泛分布于体内 ,是唯一的在金属代谢中作用肯…     

金属硫蛋白在代谢性疾病中的研究进展

金属硫蛋白(MT)是一类富含半胱氨酸的低分子金属结合蛋白,主要通过抗氧化应激、抗感染、抑制细胞凋亡机制,对肥胖症、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)和糖尿病(DM)及并发症起到保护作用.