缺失PRD的人FOXP3单克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备抗脯氨酸富含区缺失的人FOXP3(△PRD-hFOXP3)的单克隆抗体(mAb),为进一步研究人FOXP3各片段功能奠定基础。方法:以纯化的△PRD-hFOXP3重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,经筛选及克隆化建立2株分泌抗△PRD-hFOXP3的mAb杂交瘤细胞株;利用核型分析、间接ELISA及Western blot分别鉴定了杂交瘤的细胞核型、抗体的效价与特异性。结果:筛选到2株可稳定分泌抗△PRD-hFOXP3的mAb的细胞株,分别命名为1A2和3A11;2株抗体均为IgG1,腹水经ELISA方法测定效价均可达1∶105;Western blot显示这2株杂交瘤分泌的mAb均可与△PRD-hFOXP3蛋白特异性地结合。结论:成功获得2株能稳定分泌特异性抗△PRD-hFOXP3的mAb的杂交瘤细胞株,可用于人FOXP3的进一步研究及相关试剂的研发等。     

孪生兄弟同患Helveston综合征

例 1　男 ,6岁 ,出生后 8个月发现眼外斜 (左右眼不定 ) ,双眼上漂。有脑瘫病史。查体 :映光法 :左眼外斜 35°;眼球运动 :双眼下直肌功能不足 ,双眼上斜肌功能亢进 ( 级 )。同视机检查 :右眼注视 - 2 8L / R4°,左眼注视 - 2 7R/ L 5°;AV检查 :上转2 5°外斜 5 0 △ (△为斜视度的单位 ) ,下转 2 5°外斜 6 2 △ ;AC/ A=1.33;三棱镜加遮盖法 :5 m视标右眼注视 - 110△ L/ R8△ ,左眼注视 - 90△ R/ L9△ ,33cm视标右眼注视 - 95△ L/ R8△ ,左眼注视 - 90 △ R/ L 9△ ;线状镜检查 :双眼交替注视 ;Titmus立体视检查阴性。手术 :双…     

羞怯对网络交往的影响:自我意识的中介作用

目的:考察自我意识在大学生羞怯与网络交往关系中的中介作用。方法:采用大学生羞怯量表、自我意识量表和大学生网络交往问卷对781名大学生进行考察。结果:1羞怯与自我意识、网络交往总分显著正相关(r=0.483,0.260;P0.01);自我意识与网络交往总分显著正相关(r=0.261,P0.01);2羞怯通过自我意识的完全中介效应(△χ~2=5.43,△df=1,△χ~2/△df=5.436.63)对大学生网络交往产生影响,羞怯对大学生网络交往没有直接效应。结论:自我意识在大学生羞怯与网络交往关系中起到中介作用。     

心电图运动试验非S—T段参数

现将心电图运动试验非——段参数简介如下,供参考。1、Q—Tc:运动后Q—Tc<运动前Q—Tc为阴性,≥运动前Q—Tc为阳性。2、△R<0为阴性,≥0为阳性。△R为V_5R波运动后与运动前平均振幅之差,单位为mm。3、△RST<0为阴性,≥0为阳性。     

PCT、CRP动力学评估脓毒血症预后及诊断意义的研究

目的 观察血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)及其动力学变化,评估其在严重脓毒症/感染性休克患者的诊断及预后价值.方法 本研究采用回顾性分析方法,2014年9月1日至2016年4月30日选择184例ICU中被诊断为严重脓毒症/感染性休克疾病患者,检测入院时血清PCT、CRP水平和治疗后第2,第3和第5天的PCT、CRP水平.结果 通过△PCT、△CRP评估PCT、CRP的动力学在存活者与死亡组中有显著性统计学意(△PCT2/0,P=0.0001;△PCT3/0,P=0.0001;△PCT5/0,P=0.0001;△CRP2/0,P=0.0069;△CRP3/0,P=0.0001;△CRP5/0,P=0.0001),在严重脓毒症和感染性休克组中也存在显著差异(PCT5,P=0.007;△PCT5/0,P=0.007).受试者工作特征曲线(ROC)模型显示,△PCT3/0(AUC=0.721)、△PCT5/0(AUC=0.77)、△CRP5/0(AUC=0.766)水平判断严重脓毒症/感染性休克患者预后有较好的临床意义.△PCT5/0 (0.619)对严重脓毒症或感染性休克有一定的辅助诊断效果,其在ROC曲线上灵敏度、特异性均较高的临界点为0.624,所以,以第5天的血清△PCT5/0水平＞0.624可作为预测感染性休克的临界点.结论 血清中PCT、CRP对严重脓毒症/感染性休克早期有较好的临床诊断及预后价值,其动力学研究可以提高对严重脓毒症/感染性休克诊断及预后评估的敏感性及准确性.     

论文作者单位更正

<正>发表在《细胞与分子免疫学杂志》2012年第29卷第8期842~845页的"多发性骨髓瘤患者外周血单个核细胞c-Cbl和Cbl-b基因表达下调"一文原排名及作者单位为:"方苏1,郭翔宇2,冷秀秀2,李萡1*,牛宇哲1,3,陈少华1,杨力建1,李扬秋1,3(1暨南大学血液病研究所,广东广州510632;2第四军医大学学员七队,陕西西安710032;3既南大学再生医学教育部重点实验室,广东广州510632)";现更正为:方苏1,     

论文作者单位更正

<正>发表在《细胞与分子免疫学杂志》2014年第30卷第8期806~809页的"激活TLR2通过促进神经细胞死亡诱导假激酶表达诱导肺上皮细胞凋亡"一文原排名及作者单位为:"刘虹1,谢琼2,李勇枝2,王佳平2*(1中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所,北京100050;2中国航天员科研训练中心,北京     

应用酵母双杂交系统筛选Foxp3△2相互作用蛋白

目的:应用酵母双杂交系统从人外周血白细胞cD-NA文库中筛选与转录因子Foxp3相互作用的蛋白,为进一步研究Foxp3的转录调控机制奠定基础。方法:首先构建pG-BKT7-Foxp3△2酵母双杂交诱饵载体,转化AH109酵母细胞,检测其毒性及自激活作用;然后将诱饵质粒与人外周血白细胞cDNA文库共转AH109酵母细胞,筛选了与Foxp3△2存在相互作用的蛋白。结果:成功构建了pGBKT7-Foxp3△2酵母表达载体,经转染AH109酵母细胞,无有毒性,无自激活作用。获得了40个阳性克隆,经生物信息学分析,其中9个具有开放读框。结论:应用酵母双杂交技术筛选出一组可与Foxp3△2相互作用的候选蛋白,为进一步研究Foxp3△2功能奠定了基础。     

牙本质比色对铸瓷修复体临床精确选色的意义

背景：VITA 3D Master比色板是近年来新推出的新型比色系统,具有广泛的应用前景。 目的：评价牙本质比色对铸瓷修复体临床精确比色的意义。 方法：分别使用常规比色法和常规比色法联合牙本质比色法(联合比色法)为30例患者的患牙颈1/3 、中1/3、 切1/3进行比色。在CIE1976L*a*b*色度系统下,用单反数码相机(Canon D50)对2种比色方法制作的铸瓷修复体与同名牙进行色度值测定和分析。并对各种新型比色方法进行举例分析。 结果与结论：常规比色法制作的修复体△L*为1.22±0.16,△C*为1.19±0.20,△H*为0.31±0.05,△E*为1.32±0.13;联合比色法制作的修复体△L*为1.03±0.11,△C*为1.12±0.19,△H*为0.29±0.03,△E*为1.23±0.11。常规比色法制作的修复体满意22例,联合比色法制作的修复体满意23例。患者对2组修复体色彩还原效果满意度差异无显著性学意义(P > 0.05),2组修复体色差分析有统计学意义(P < 0.05)。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

内生致冷原个体差异的初步探讨

本文对内生致冷原的个体差异和不同保存时间的降温效果进行了观察。结果表明:不同个体尿液的降温效果存在显著差别(n=13),最低降温值(-△T)变化范围为-0.12±0.08～-0.66±0.24℃,1小时体温反应指数(TRI_1)变化范围为-0.04±0.04～-0.37±0.22。13名被试者中有5人的尿液的-△T低于-0.3℃,TRI_1与生理盐水对照组比较有显著差异(P<0.05)。将此5人尿液混合后于-20℃保存,观察到贮藏后第3周的尿液-△T为-0.12℃,TRI_1与生理盐水对照组比较没有显著性差别(P>0.05)。此外,本文对降温效果的判定参考值进行了讨论。     

ImmunoAIF△1-480融合蛋白对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤作用

目的:观察免疫促凋亡分子ImmunoAIF△1-480对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤作用.方法:利用PCR的方法将九聚精氨酸编码序列(R9)与AIF C-末端结构域编码区重组, 然后将R9-AIF△1-480基因与pCMV-e23sFv载体重组, 构建免疫促凋亡分子ImmunoAIF△1-480真核表达载体.用脂质体法转染CHO细胞, 经G418筛选, 建立稳定转染的细胞株, 通过RT-PCR、Western blot、流式细胞术(FCM)等方法检测重组基因在转染细胞中的表达及其对HER2阳性肿瘤细胞的特异性杀伤活性.结果:经过酶切鉴定与测序证实, 带有ImmunoAIF△1-480基因的真核表达载体构建成功, 经RT-PCR、Western blot可检测到培养上清中免疫促凋亡基因的表达, 用FCM检测发现融合蛋白ImmunoAIF△1-480对HER2阳性肿瘤细胞SGC-7901和SKBR-3有明显的促凋亡活性, 而对不表达HER2分子的ECV-304细胞几乎没有影响.结论:ImmunoAIF△1-480可以特异性杀伤HER2阳性肿瘤细胞.     

血红素加氧酶在大肠杆菌中稳定表达的氨基酸范围的研究

目的　确定在原核细胞中呈可溶性稳定表达但不改变活性的血红素加氧酶氨基酸范围。方法　应用PCR技术构建了鼠血红素加氧酶 1(RHO 1)和人血红素加氧酶 2 (HHO 2 )的N端和C端部分氨基酸缺失的变异型RHO 1和HHO 2 ,将它们在大肠杆菌中表达并纯化后通过光谱扫描法测定变异型酶与野生型酶的催化活性 ,确定RHO 1和HHO 2中的N端和C端缺失不影响其可溶性表达及催化活性的氨基酸范围。结果　△N8RHO 1(N端缺失 8个氨基酸的RHO 1)和△C70RHO 1在大肠杆菌中表达为可溶性蛋白且催化活性与RHO 1野生型相同 ,△N2 0HHO 2和△C77HHO 2在大肠杆菌中也表达为可溶性蛋白且催化活性与HHO 2野生型相同 ,而△N9RHO 1和△C75RHO 1在大肠杆菌中表达为包涵体。结论　RHO 1和HHO 2的N端和C端部分氨基酸缺失的突变型酶对其催化功能没有影响 ,并可在大肠杆菌中稳定可溶性表达。     

人TRAF2新剪切体的鉴定与表达分析

目的:对TRAF2的新剪切体进行鉴定与表达分析.方法:以人脑库为模板,利用PCR扩增,电泳确定新剪切体的存在.再提取不同细胞与组织的总RNA,逆转录得到cD-NA后作为模板对两种不同剪切体的表达进行比较分析.结果:利用P1与P2引物对从人脑库扩增出1条约1 500 bp的条带,而利用P3与P4引物对则得到2条明显电泳带,通过测序表明其中1条包含TRAF2的第6外显子,另1条缺失了TRAF2的第6外显子.通过对新剪切体TRAF2Δ6与全长剪切体TRAF2的表达量比较表明在T47D中全长剪切体表达占优势;而在Hep3B、GC-1与MCF7中TRAT△6剪切体表达占优势;在HepG2、HBL100、A549与HeLa细胞中未发现两种剪切体的明显表达;在PANCI与SW480中两种剪切体表达量相近.在胎大脑与一级神经胶质瘤中TRAF2Δ6表达占优,而二级与三级神经胶质瘤中则全长剪切体TRAF2表达占优势.结论:人体TRAF2基因除可表达全长TRAF2 mRNA外,还可通过可变剪切表达缺失第6外显子的TRAF2Δ6 mRNA.而且这两种剪切体的表达存在细胞与组织特异性.     

黄连注射液对家兔白细胞致热原性发热和脑脊液中cAMP含量变化的影响

本研究用兔78只,分两部分进行实验。第一部分,观察黄连注射液对家兔白细胞致热原(1eucocytic pyrogen;LP)性发热的降热效应;39只兔分成四组;Ⅰ为LP组;Ⅱ为黄连 LP组;Ⅲ为黄连组,Ⅳ为对照组。Ⅰ组9只兔,Ⅱ～Ⅳ组各10只兔。第二部分,观察黄连注射液对发热家兔脑脊液中cAMP含量变化的影响。动物数与分组同第一部分。结果表明,LP 黄连组60分钟△T℃(0.70±0.12),TRI_4(3.37±0.07)明显低于LP组△T℃(1.11 0.11)、TRI_4(5.56±0.10),分别比较两组△T℃、TRI_4,其差异性均非常显著(P<0.01)。上述两组动物60分钟脑脊液中cAMP含量分别为0.76±0.08和1.29±0.13,统计学处理后差异性非常显著(P<0.01)。黄连组动物60分钟△T℃(0.04±0.10)与对照组△T℃(0.03±0.06)相比较,无统计学意义(P>0.05)。作者推论:黄连注射液降热作用的机制,很可能与抑制POAH区神经元cAMP的生成有关。     

编撰交流：表中P值的表示

为比较表中数据有无显著差异 ,常需计算t值、P值、F值等等。为了节省表的版面 ,这些值的具体数据 ,切勿用专项列入表中 ,而应用一定符号标在相应的数据上 ,如 :“2 5 .64 ”。在表的下方 ,用脚注说明该符号的含义 ,如 :“ 与对照组相比P <0 .0 5”。目前各作者所用的标注符号五花八门 ,为此本刊建议将使用频率最高的标注符号统一如下 :( 1 )数据间相比P <0 .0 5者 ,不予标注 ;( 2 ) 与对照组相比P <0 .0 5 ;( 3 ) 与对照组相比P <0 .0 1。其他数据间相比较 ,可使用“△”、“☆”、“▲”等符号。同样内容用一种符号 ,如“△△”表过…     

IPS-1基因缺失突变体对IFN-β诱生作用及抗HSV-1病毒作用的影响

目的:初步研究缺失300-444位氨基酸突变体△IPS-1对IFN-β诱生作用及抗HSV-1病毒作用的影响,进而确定该部位对IPS-1发挥正常功能的作用.方法:通过重叠延伸PCR法获得缺失300～444位氨基酸的△IPS-1,构建突变重组质粒pEF-BOS-FLAG-△IPS-1,并经酶切及测序鉴定.采用磷酸钙体外转染HEK293T真核细胞.经Western blot检测蛋白的表达;ELISA检测细胞上清中IFN-β分泌量;HSV-1病毒感染分别转染了pEF-BOS-FLAG/IPS-1、pEF-BOS-FLAG/△IPS-1质粒的HEK293T细胞,空斑检测各转染细胞组不同时间段细胞上清的病毒滴度.结果:成功构建了缺失300～444位氨基酸的IPS-1基因重组真核表达载体pEF-BOS-FLAG/△IPS-1;与转染pEF-BOS-FLAG/IPS-1质粒组相比转染了pEF-BOS-FLAG/△IPS-1的细胞在不同时间段其上清中IFN-β分泌量有一定量的减少;空斑测定结果表明转染了pEF-BOS-FLAG/△IPS-1质粒组细胞中病毒滴度明显高于pEF-BOS-FLAG/IPS-1质粒组.结论:△IPS-1与IPS-1相比能使HEK293T细胞IFN-β分泌量明显减少,△IPS-1不能完全抑制HSV-1感染细胞产生的细胞病变效应,该突变体抗HSV-1病毒作用有一定程度的减弱.     

运用推导法讲述影响动脉血压的因素

每博输出量的变化主要影响收缩压,外周阻力的变化主要影响舒张压历来是讲述影响动脉血压的因素中的重点和难点。本文依据中等卫生学校的教学情况,运用简单推导,得出|±(△V-△V_1)|>|±(△V-△V_1-△V_2)|和|±△V_1|<|±(△V_1十△V_2)|两个关系式,比较通俗地帮助学生理解了上述问题。     

更正

<正>更正:本刊2014年第22卷第7期1009-1011页刊登的"农村教师教学效能感现状与学校组织氛围的关系"一文,基金项目为:教育部哲学社会科学研究重大课题攻关项目(编号:11JZD044),特此更正。更正:发表在本刊2014年第22卷第10期1524页文章《某部新兵新训期间的心理健康和适应与其家庭教养方式、心理弹性和应对方式的关系》作者信息:石磊123刘波涛3李敏3彭李3于永菊3陈珑3尹霞2吕雪1通讯单位为:1第三军医大学第三附属     

更正

<正>发表于《中国临床心理学杂志》2013年第21卷第1期153-157页的"接受与承诺疗法干预抑郁的效果追踪"一文(作者:赵文、周雅、刘翔平、冉俐雯),第155页的"表2 ACT组与CBT组的干预方案对比"中存在一些错误,属于ACT的"认知去融合"等具体技术写在了CBT栏目下。特更正如下:     

不确定性忍受力在神经质和强迫间的中介效应和调节效应

目的:考察不确定性忍受力在神经质和强迫间的中介作用和调节作用。方法:采用强迫量表修订版、不确定性忍受力量表和艾森克人格问卷对546名大学生进行测评。结果:不确定性忍受力在神经质和强迫间的部分中介效应显著,中介效应与总效应之比为42.25%,中介效应与直接效应之比为73.16%。交互作用项"神经质×不确定性忍受力"的回归系数在以强迫为因变量的回归方程中显著(β=0.08,t=2.17,P=0.03),且引入交互作用项后新增解释量△R2达到显著水平(△R2=0.01,P=0.03)。结论:不确定性忍受力在神经质和强迫间起中介效应和调节效应。