微波-EDTA脱钙技术在免疫组织化学染色中的应用研究

目的探讨微波(MW)—乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法根据实验条件将待脱钙组织分为4组，即MW—EDTA(15℃)，Jenkins脱钙-固定液(20℃)，10％EDTA(20℃)和10％硝酸(20℃)，其中Mw—EDTA方法中EDTA的浓度分别是4％、7％、10％、13％和16％。应用免疫组织化学路AB染色，光镜观察免疫组织化学染色结果。结果MW—EDTA脱钙的免疫组织化学染色阳性细胞显著高于Jenkins脱钙—固定液(20℃)、10％ED—TA(20℃)及10％硝酸脱钙(20℃)3种脱钙方法，其时间明显缩短。其中用10％和13％浓度的EDTA脱钙的组织，其免疫组织化学染色阳性细胞又明显多于EDTA浓度为4％、7％和16％者。结论以Mw—10％EDTA技术进行组织脱钙，其脱钙时间短、免疫组织化学染色效果好。     

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用

目的比较不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异,探讨其对HE染色的影响。方法选取50例手术切除的新鲜骨标本,运用4种常用的脱钙液(14%硝酸、10%盐酸、20%甲盐酸和EDTA脱钙液)进行脱钙,比较其脱钙效果和对HE染色的影响。结果不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别。结论 14%硝酸脱钙能力最强,用时间最短,染色的效果最差;10%盐酸对骨组织的损伤小,HE染色的效果最好,但用时较长;20%甲盐酸脱钙能力和HE染色效果都介于10%盐酸和EDTA脱钙液之间;EDTA脱钙液脱钙用时最长,对骨组织的损伤最小。     

EDTA抗原修复液用于促蓝液的应用和体会

目的探讨EDTA抗原修复液是否可用做HE染色和免疫组织化学染色的促蓝液。方法分别采用HE染色法及免疫组织化学染色对脱钙后骨组织(10例)、冰冻脂肪组织(10例)、平滑肌组织(10例)、甲状腺组织(10例)及肠癌组织进行染色(10例)。分别采用流水冲洗、43℃温水、即用型PBS、pH=9.0 EDTA修复液作为促蓝液进行蓝化。结果在HE染色组的5种蓝化方式中,以EDTA抗原修复液蓝化2min(实验时间为夏天)蓝化最充分、效果最佳、不易脱片、层次分明、细胞核蓝色鲜艳、核膜及染色质形态结构特点清楚、核浆对比度明显;在免疫组织化学染色组,复染苏木精后,经EDTA抗原修复液蓝化2min,各组组织细胞核结构显示清晰,能很好的衬托组化阳性信号。结论 HE染色和免疫组织化学染色均可以将EDTA抗原修复液用于促蓝液,且在免疫组织化学染色中,EDTA抗原修复液的效果与流水冲洗效果相当,而且节省了蓝化的时间。     

吸入类药物临床前研究中鼻组织脱钙技术优化：用于大鼠鼻黏膜组织病理学检查

目的 研究不同脱钙液对大鼠鼻组织的脱钙作用及其病理切片染色效果。方法 选择10%乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）、10%甲酸、5%硝酸脱钙液3种不同脱钙液，在室温静置及微波条件下，对大鼠鼻组织的脱钙时间和脱钙效果进行比较分析，综合评估骨组织经不同脱钙方法后制成病理切片质量。结果 常温条件下鼻组织经过EDTA脱钙液所需脱钙时间最长，微波条件下鼻组织经硝酸脱钙液所需脱钙时间最短，经EDTA脱钙液的鼻组织切片质量、HE染色、MASSON染色和免疫组化染色中质量最佳，硝酸脱钙液的鼻组织的切片质量最差，甲酸脱钙液的鼻组织HE染色效果较佳，MASSON和免疫组化染色质量略差。结论 EDTA脱钙液配合微波进行的鼻组织脱钙，脱钙效率明显提升，且切片和染色效果俱佳。     

微波低温改良脱钙在钙化软组织免疫组化染色中的应用

目的 探讨运用微波低温改良脱钙法对提高钙化软组织在免疫组织化学染色中的效果.方法 选取本院送检伴有钙化灶状的甲状腺组织标本62例,每例采用室温和微波低温进行脱钙,免疫组化染色光镜观察效果.结果 运用微波低温改良脱钙在免疫组化染色中明显比室温下的10％硝酸脱钙定位准、染色阳性细胞显示多、假阴性减少,背景清晰.结论 微波低温改良脱钙法能更好的运用于钙化软组织的免疫组化染色.     

光波-微波-硝酸快速脱钙技术对骨组织免疫组织化学染色的影响

目的:探讨光波-微波-硝酸快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响.方法:用8%硝酸分别在单纯微波、单纯光波、光波-微波组合Ⅰ和光波-微波组合Ⅱ条件下脱钙,同时以室温脱钙作为对照;应用标记的链霉菌素卵白素-生物素(LSAB)免疫组织化学(免疫组化)染色技术检测不同脱钙条件下心钠素(ANP)、5-羟色胺(5-HT)、S-100、神经微丝蛋白(NF)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)和波形蛋白(Vimentin)的表达,并对其染色结果进行图像分析和统计学处理.结果:8%硝酸室温脱钙时间最长,光波-微波组合脱钙时间最短;微波组、光波组、光波-微波组合Ⅰ组、Ⅱ组的免疫组化染色均明显比对照组好(P＜0.01);光波-微波组合Ⅰ组、Ⅱ组均明显好于单纯微波组(P＜0.01)或单纯光波组(P＜0.01);光波-微波组合Ⅰ组与Ⅱ组,单纯光波组与单纯微波组之间的免疫组化染色无显著差异(P＞0.05).结论:光波-微波-硝酸脱钙所用时间比室温常规脱钙、单纯光波、微波脱钙时间明显缩短,免疫组化染色效果最好.     

胰腺冰冻切片免疫组化中组织的固定方法比较

目的 寻找一种胰腺冰冻切片免疫组化过程中的最佳组织固定方式.方法 将20例冰冻组织OCT包埋后置于冰冻机切片8-10μm,每例组织各切5张片,各分成5组,接着分别采用以下5种不同的方法进行固定10min,即丙酮4℃固定法(A组)、丙酮室温固定法(B组)、4%多聚甲醛室温固定法(C组)、10%甲醛室温固定法(D组)、Bouin液室温固定法(E组),然后0.01M PBS冲洗5minx3次,枸橼酸电炉热修复后进行免疫组化染色.结果 A组的冰冻切片免疫组化染色结果其他组好.结论 丙酮4℃固定比4%多聚甲醛、10%甲醛、Bouin液固定较好保存胰腺中PKCa抗原的活性.     

光波-微波-硝酸快速脱钙技术对骨组织免疫组织化学染色的影响

目的:探讨光波微波硝酸快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法:用8%硝酸分别在单纯微波、单纯光波、光波微波组合Ⅰ和光波微波组合Ⅱ条件下脱钙,同时以室温脱钙作为对照;应用标记的链霉菌素卵白素生物素(LSAB)免疫组织化学(免疫组化)染色技术检测不同脱钙条件下心钠素(ANP)、5羟色胺(5HT)、S100、神经微丝蛋白(NF)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)和波形蛋白(Vimentin)的表达,并对其染色结果进行图像分析和统计学处理。结果:8%硝酸室温脱钙时间最长,光波微波组合脱钙时间最短;微波组、光波组、光波微波组合Ⅰ组、Ⅱ组的免疫组化染色均明显比对照组好(P<0.01);光波微波组合Ⅰ组、Ⅱ组均明显好于单纯微波组(P<0.01)或单纯光波组(P<0.01);光波微波组合Ⅰ组与Ⅱ组,单纯光波组与单纯微波组之间的免疫组化染色无显著差异(P>0.05)。结论:光波微波硝酸脱钙所用时间比室温常规脱钙、单纯光波、微波脱钙时间明显缩短,免疫组化染色效果最好。     

甲酸脱钙液的浓度对骨组织脱钙后切片染色效果的研究

目的探讨骨组织经不同浓度的甲酸脱钙液24小时脱钙后切片染色效果,选择最佳甲酸脱钙工作液。方法350例骨组织标本每例取材3份,分别用40％、30％、20％的甲酸脱钙液常温下脱钙24小时,观察三种不同浓度的甲酸脱钙液脱钙后骨组织的切片和HE染色情况。结果骨组织经40％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,但HE染色核质偏浅,胞浆偏红;30％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,HE染色核质清晰,胞浆鲜艳;20％甲酸脱钙液脱钙后,切片不够完整,HE染色核质偏浅,胞浆偏浅。结论脱钙液脱钙后应保持组织切片完整,染色效果良好,且30％的甲酸脱钙液是较理想的工作液。     

3种不同脱钙液对牙齿标本切片免疫组化染色效果的研究

在口腔组织病理的研究中,常常需要通过切片对牙齿组织相关细胞进行观察和对比分析,由于牙釉质是体内硬度最高的组织,如果不能很好地进行脱钙处理,就很难制得优良的切片并获得满意的染色结果.目前尚无公认的用于牙齿组织的理想方法,因此进行了两种配方的酸类脱钙液和EDTA螫合剂脱钙液的脱钙时间和染色效果的研究.