Heat shock protein 27 expression in human proximal tubule cells exposed to lethal and sublethal concentrations of CdCl2.

The expression of hsp 27 mRNA and protein was determined in cultured human proximal tubule (HPT) cells exposed to lethal and sublethal concentrations of Cd2+ under both acute and extended conditions. Initial procedures demonstrated that HPT cells display the classic stress response following physical and chemical stress. Heat stress (42.5 degrees C for 1 hr) caused an increase in both hsp 27 mRNA and protein as well as a shift in the protein to a more phosphorylated state. Results were similar when the cells were subjected to chemical stress (exposure to 100 microM sodium arsenite for 4 hr). Acute exposure to 53 microM CdCl2 for 4 hr also resulted in an increase in hsp 27 mRNA and protein and a shift to the more phosphorylated protein isoform. Extended Cd2+ exposure involved continuous treatment with Cd2+ at both lethal and sublethal levels over a 16-day time course. The results of this treatment showed that chronic exposure to Cd2+ failed to increase either hsp 27 mRNA or protein expression in HPT cells, even at lethal Cd2+ concentrations. In fact, hsp 27 protein levels decreased as compared to controls at both lethal and sub-lethal exposure to Cd2+. These findings imply that hsp 27 expression in human proximal tubule cells may have two distinct modes depending on the nature (acute vs. chronic) of the stress.     

c-jun末端激酶在亚砷酸钠致人胚胎肝细胞损伤中的表达

目的探讨亚砷酸钠染毒对人胚胎肝(L-02)细胞中c-jun末端激酶(JNK)的变化。方法将处于对数生长期的L-02细胞分别暴露于终浓度为0(对照)、50、100、150μmol/L的亚砷酸钠溶液中培养24 h,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞生长情况,采用流式细胞术检测染毒24 h时的细胞周期及细胞凋亡率;采用蛋白杂交(Western-blot)法检测JNK及p-JNK的蛋白表达水平。结果与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组L-02细胞的存活率及G0-G1期构成比均较低,JNK、p-JNK的蛋白表达水平和S期构成比及凋亡率均较高;而G2-M期构成比在50μmol/L亚砷酸钠染毒组较低,在100、150μmol/L亚砷酸钠染毒组均较高,差异均有统计学意义(P0.05)。且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,L-02细胞凋亡率及JNK和p-JNK蛋白的表达水平均呈上升趋势,细胞存活率呈下降趋势。结论亚砷酸钠诱导L-02细胞凋亡可能与JNK及p-JNK表达的增加有关。     

铅作业工人热应激蛋白70水平的分析

目的 研究职业铅接触人群热应激蛋白70（HSP70）水平的变化与空气中铅浓度和血铅等因素的关系,探讨HSP70作为职业铅接触生物标志物的可能性.方法 以72名铅接触工人为暴露组,41名不接触铅等职业有害因素的工人为对照组,对两组人群进行职业接触、体检及健康调查;按照GB/T 16010-1995标准对车间空气中铅烟、铅尘浓度进行监测;用ELISA方法检测暴露组工人血清中HSP70水平,用原子吸收光谱法检测血铅水平;用多元线性回归对HSP70水平及血铅水平进行多因素分析.结果 空气中铅浓度及铅接触量均对机体内HSP70水平及血铅水平有影响,血清中HSP70的水平与血铅水平呈正相关关系（r=0.501,P＜0.01）.结论 血清中HSP的水平对职业铅接触的相关因素敏感,有可能作为职业铅接触人群的敏感性健康检测指标.     

钢铁作业工人热应激蛋白70抗体水平的血清流行病学调查

目的：探讨血清热应激蛋白70（HSP70）抗体作为工人长期接触某些环境应激后健康监测指标的可行性。方法：采用Western blot免疫印迹检测接触不同有害作业环境因素和相对无有害接触的某钢铁企业764名职工的血清HSP70抗体水平。结果：在排除年龄,工龄以及性别的影响后,多种有害接触均可使工人血清HSP70抗体水平升高。暴露于有害环境,如高温和粉尘和联合暴露,以及粉尘（石灰）暴露和噪声暴露工人血清HSP70抗体水平均明显高于对照组（OR值为2．3563－3．1526,P＜0．01）,而且噪声组工龄与HSP70抗体的产生具有相关性,且差异有显著性（OR＝2．040,P＝0．0103）。结论：血清HSP70抗体水平有可能作为评价工人经历某些环境应激（如粉尘,噪声）的血清学标记物或环境危害监测指标。     

噪声作业工人血浆抗热休克蛋白70抗体的应用分析

目的 探讨噪声作业工人血浆中抗热休克蛋白70（HSP70）抗体水平及其与累计噪声暴露量（CNE）的关系。方法 采用蛋白电泳-酶联免疫吸附实验法对本市某机械制造公司380名工人（噪声暴露200名，对照180名）的血浆中HSP70抗体水平进行测定。用趋势Х^2检验分析HSP70抗体水平与噪声暴露量的关系。结果 噪声暴露组HSP70抗体阳性率（41.0%）明显高于对照组（6.6%）。HSP70抗体阳性率随CNE的增高而明显升高。结论 HSP70抗体阳性与CNE有密切关系。     

丝裂原活化蛋白激酶信号途径在苯并[a]芘影响内皮细胞热休克蛋白70基因表达中的作用

目的研究丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号途径在苯并[a]芘(BaP)影响内皮细胞热休克蛋白70(HSP70)基因表达中的作用.方法猪主动脉内皮细胞以不同浓度BaP(0、0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 μmol/L)染毒24 h,或以PD98059(10μmol/L)或SB203580(20μmol/L)预处理1 h后再加一定剂量的BaP共同孵育24 h.分别以Western-blot法检测各组细胞磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶(extracellularsignal regulated protein kinase,ERK)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(c-Jun amino-terminal kinase,JNK)、磷酸化p38和HSP70表达水平的改变.结果随BaP浓度的升高,MAPK途径的3种磷酸化激酶表达水平出现不同程度的改变,其中磷酸化ERK1表达改变最明显,呈剂量反应性增加.BaP抑制内皮细胞HSP70表达,在中、高剂量(≥1.0μmol/L)暴露时,HSP70表达明显低于对照组,差异有显著性(P＜0.05);尽管ERK途径抑制剂PD98059可部分减弱BaP对HSP70表达的抑制效应,但经PD98059预处理后内皮细胞HSP70表达水平仍明显低于正常状态下的表达水平,差异亦有显著性(P＜0.05).结论BaP可能通过ERK1途径而影响内皮细胞HSP70基因表达,同时可能还有其他信号途径在BaP影响HSP70基因表达过程中起作用.     

次声作用后大鼠脑皮质HSP70及超微结构的观察

目的探讨次声对鼠大脑作用的效应,观察次声不同时间作用后大鼠脑顶叶皮质热休克蛋白70及超微结构的情况。方法大鼠暴露于16Hz90dB的次声,2h/d,分组作用1d、7d、14d、21d、28d,免疫组织化学方法观察各组动物于次声暴露结束后2h、24h、48h、72h脑皮质HSP70的表达情况,透射电镜下观察各组动物于次声暴露结束后2h、72h脑皮质超微结构的变化。结果次声作用1d、7d组脑顶叶皮质未出现HSP70表达阳性神经元;14d、21d、28d组作用后2h出现表达,24h达高峰,72h消失。次声作用1d、7d、14d,脑皮质超微结构无明显变化;作用21d、28d,作用后2h超微结构出现变性改变,作用后72h逐渐恢复。结论一定次数的次声作用后大鼠脑皮质出现HSP70阳性神经元表达,且表达随时间呈动态改变,超微结构可见变性改变,随作用后时间延长可逐渐恢复。     

高温作用后大鼠视网膜热休克蛋白70的表达

目的观察高温作用后大鼠视网膜热休克蛋白70(HSP 70)的表达和分布.方法SD大鼠在高温环境生存2 h,分别于4、18、24、48 h后摘除眼球,用免疫组织化学方法观察大鼠视网膜中HSP 70的表达和分布.结果高温后及正常对照组视网膜各层的均有HSP 70的表达,各层高温后18 h与对照组比较差异均有非常显著性(P＜0.01),随时间的延长而逐渐降低.结论高温可诱导视网膜各层组织HSP 70的表达增高.     

二硫化碳接触工人热应激蛋白70及其抗体水平的变化

目的：探讨二硫化碳诱导人体产生热应激蛋白70（HSP70）及其抗体水平情况。方法：用免疫印迹法（Western blot)和酶联免疫吸附（ELISA）法对职业性接触二硫化碳工人HSP70和HSP70抗体水平进行检测。结果：接触组工人中血浆HSP70抗体阳性率明显高于对照组（P＜0．05），而HSP70蛋白含量在两组间比较差异没有显著性（P＞0．05）；但据HSP70抗体是否为阳性将工人分为阳性组和阴性组后，阳性组HSP70蛋白含量低于阴性组，差异有显著性（P＜0．05）。结论：HSP70及其抗体滴度可反映二硫化碳的接触状况，对接触二硫化作业工人的健康监护有一定意义。     

热暴露不同时期大鼠肝与心肌细胞热休克蛋白70的表达

目的　研究热暴露不同阶段对大鼠肝与心肌细胞热休克蛋白 70 (HSP70 )表达的影响 ,为探讨HSP70在细胞水平的表达机制 ,以及HSP70对热暴露机体的意义提供实验依据。方法　采用人工热气候室 [(34± 1)℃、湿度 6 0 % ],建立热暴露动物模型。SD大鼠 80只分为对照组和热暴露组 ,每组又分为 2、7、14、2 8d 4个时段。取肝与心肌组织做免疫组化SP法染色 ,应用图像分析系统分析组织HSP70含量的变化。结果　在热暴露的 4个时段 ,热暴露组肝 (灰度值分别为 137.0± 5 .1、137.0± 5 .2、137.8± 7.1、139.2± 5 .2 )与心肌 (灰度值分别为 15 6 .1± 4 .4、15 5 .1± 6 .2、15 5 .4± 4 .5、15 6 .2±5 .1)细胞的HSP70表达均明显强于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ;适应时段对HSP70的表达强度无明显影响。热暴露 2d时HSP70在核内表达强于胞浆 ,肝枯否氏细胞HSP70阳性表达率明显高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;热暴露 2d与 2 8d时血清中肝与心肌细胞胞内酶浓度明显增高。结论　受热早期机体的重要器官会产生损伤性改变 ;HSP70高表达可作为组织细胞受损伤的标志 ;延长受热时间 ,机体产生热暴露 ,HSP70的高表达在此期热暴露的产生中起到重要作用 ;过长时间受热 ,机体将失去对热的适应 ,HSP7     

二氧化硅诱导的肺纤维化大鼠肺组织及血浆中热休克蛋白70的变化

目的 探讨热休克蛋白70( heat shock protein 70,Hsp70)在二氧化硅诱导的大鼠肺纤维化过程中的变化.方法 48只Wistar大鼠随机分成对照组和染尘组,每组24只,分别观察7、14、21、28d.染尘组经气管内灌注二氧化硅(50mg/ml),对照组予等剂量的生理盐水.HE染色观察病理学变化,蛋白免疫印迹( Western bolt)法和免疫组织化学法检测肺组织中Hsp70的表达与定位,双抗夹心ELISA检测血浆中Hsp70含量的变化.结果 染尘组染尘后7d肺组织中Hsp70含量升高,14d达到高峰,随后降低,但仍高于正常对照.染尘组14、21、28 d时血浆中Hsp70含量明显高于生理盐水对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).染尘组血浆中Hsp70含量21d达到峰值[(0.216±0.027) μg/ml].结论 在染尘组大鼠肺组织和血浆中Hsp70含量均明显升高,并随肺纤维化进程出现先升高后降低的趋势,提示肺组织中Hsp70在二氧化硅诱导的肺纤维化过程中有重要的生物学作用.     

低温作业工人热应激蛋白抗体水平与氧化性损伤关系

目的探讨冷库低温作业工人热应激蛋白70(HSP70)抗体水平及其与职业危害的关系。方法选择保鲜冷库作业工人53名(保鲜组),水产冷库作业工人53名(冷冻组)作为低温作业暴露组,同时选择当地不接触低温作业的村民58名作为对照组,采用Westernblot免疫印迹法检测其血浆HSP70抗体滴度,同时检测其超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的变化情况,并分析各指标之间的关系。结果保鲜组及冷冻组血浆HSP70抗体1∶10阳性率分别为43.4%、37.7%高于对照组的6.9%(P<0.05),1∶20阳性率均为17.0%,高于对照组的1.7%(P<0.05),暴露组HSP70抗体阳性组的SOD和GSH低于阴性组(P<0.05)。结论冷库低温作业可导致作业工人HSP70抗体阳性增高,并与机体的氧化损伤相关。     

热休克蛋白70在心脏跳动中二尖瓣置换术心房肌细胞中的表达

目的 观察心脏跳动中二尖瓣置换术患者心房肌细胞热休克蛋白70(HSP70)的表达情况.方法 将同期30例行二尖瓣置换术的风湿性心脏病患者随机分为两组,试验组(浅低温心脏跳动中施术组,16例)与对照组(传统中低温心脏停跳中施术组,14例).分别于体外循环(CPB)前,拔除上腔静脉插管时留取右心房组织标本,采用Western blot法测定心房肌细胞HSP70的表达情况.结果 对照组CPB前与CPB后心房肌细胞HSP70的表达分别为(160.23±7.12)μg/ml,(165.25±6.29)μg/ml;试验组CPB前与CPB后分别为(163.59±6.35)μg/ml、(196.34±4.23)μg/ml.与CPB前比较,试验组CPB后心房肌细胞HSP70的表达明显升高(P<0.01);而对照组CPB前后,心房肌细胞HSP70虽有所表达,但差异无统计学意义(P>0.05);两组CPB后心房肌细胞HSP70的表达,试验组要比对照组高(JP<0.05).结论 在心脏跳动中施术能较好地诱发HSP70高表达从而具有较好的心肌保护效果,此术式对心肌细胞的缺血-再灌注损伤要比传统手术小.     

接触苯工人血清热应激蛋白70抗体滴度分析

目的 了解接触苯工人血浆热应激蛋白７０滴度及其与工人健康之间的关系。方法 选择接触苯浓度≥４０ｍｇ／ｍ＾３工人４２名为高暴露组,接触苯浓度〈４０ｍｇ／ｍ＾３工人５０名为低暴露组,另选择不接触苯等职业有 ４２名为对照组采用新产酶联免疫肿附法测定其血浆热应激蛋白７０抗体滴度,并分析其他指标之间的关系。结果 高暴露组血浆热６应激蛋白７０抗体１：２０阳性率（２６．２％）明显高于对照组（９．５％）,并且高暴     

Exposure of human proximal tubule cells to cd2+, zn2+, and Cu2+ induces metallothionein protein accumulation but not metallothionein isoform 2 mRNA.

The organization of the human metallothionein (MT) gene family is more complex than the commonly used mouse and rat models. The human MTs are encoded by a family of genes consisting of 10 functional and 7 nonfunctional MT isoforms. One objective of this study was to determine if the accumulation of MT protein in cultures of human proximal tubule (HPT) cells exposed to metals is similar to that expected from the knowledge base obtained from rodent models. To accomplish this objective, HPT cells were exposed to both lethal and sublethal concentrations of Cd2+, Zn2+, Cu2+, Ag2+, Hg2+, and Pb2+ and MT protein levels were determined. The results were in general agreement with animal model studies, although there were some exceptions, mainly in areas where the animal model database was limited. In clear agreement with animal models, Cd2+, Zn2+, and Cu2+ were demonstrated to be potent inducers of MT protein accumulation. In contrast to the similarity in MT protein expression, we obtained evidence that the human renal MT-2 gene has a unique pattern of regulation compared to both animal models and human-derived cell cultures. In the present study, we determined that MT-2A mRNA was not induced by exposure of HPT cells to Cd2+ or the other metals, a finding in contrast to studies in both animal models and other human cell culture systems in which a high level of MT-2 mRNA induction occurs upon exposure to Cd2+ or Zn2+. While MT protein expression may be similar between humans and animal models, this finding provides initial evidence that regulation of the genes underlying MT protein expression may be divergent between species.