固定抗原基质球系统在血吸虫病诊断中的应用

在血吸虫病诊断方面曾用过并在继续应用许多血清学试验方法。近年来,有一些学者应用固定抗原基质球系统(DASS)进行免疫荧光和免疫酶等反应来诊断血吸虫病。1973年,Van Dalen介绍过使用琼脂糖珠作为基质,应用微量荧光测定法检测与结合在琼脂糖珠上的抗原发生反应的荧光素结合抗体。此后,Deelder和Ploem(1974)将曼氏血吸虫抗原共价地结合到琼脂糖珠上,用于间接免疫荧光试验来检测抗曼氏血吸虫的抗体。Deelder和Streefkerk(1975)用酶标记     

斑点酶免疫法的技术关键

<正> 斑点酶免疫法(Dot-ELISA)是70年代末由Western-blot演变而来的,它是以微孔滤膜为载体的酶联免疫吸附试验。又称斑点免疫吸附试验,抗原斑点试验(Antigen-spot test),斑点免疫结合试验(Dot-Immunobinding assay)及斑点免疫测定(spot Immuno detection)等。该法具有操作简便,不需特殊仪器,敏感性与RIA及E1A相当,包被抗原或抗体用量少,一条膜可同时检测几种不同的抗原抗体系统,便于携带     

ABC—ELISA法检测鼠疫F_1抗体的研究

酶联免疫吸附试验(ELISA)在检测微量抗原或抗体方面已广为应用,其技术方法不断完善,取得很大进步。为进一步提高其敏感性,某些学者于80年代初将抗生物蛋白—生物素—过氧化物酶的复合物     

免疫酶试验在寄生虫病方面的应用

免疫酶试验是60年代才开始应用的新技术。于1966年最早应用酶标记抗体和细胞抗原起反应,并曾用细胞化学方法显示酶活力的部位。随后,进行了很多的研究,不断改进和发展了免疫酶试验。目前,免疫酶试验已被应用于内分泌学、免疫病理学、血液学和微生物学。从1974年开始,该法才被应用于寄生虫病方面。     

免疫组织化学技术在我国寄生虫学研究中的应用

免疫组织化学 ( Immunohistochemistry)又称免疫细胞化学( Immunocytochemistry) ,是组织化学的分支。它是用标记的特异性抗体 (或抗原 )对组织内抗原 (或抗体 )的分布进行细胞和组织原位的检测技术。194 1年首次用荧光素标记抗体检测肺组织内肺炎双球菌获得成功 ,开创了细胞化学中“免疫细胞化学”的新篇章。近年来免疫细胞化学迅猛发展 ,继酶标记抗体技术后 ,建立了辣根过氧化物酶 -抗过氧化物酶 ( PAP)技术。使免疫细胞化学得到了日益广泛的应用。 80年代 ,抗生物素 -生物素 ( ABC)法建立后 ,免疫金 -银染色法、半抗原标记法、免疫电…     

固相抗原在国内寄生虫病免疫学诊断中的应用

石蜡切片和冰冻切片技术已广泛用于寄生虫病免疫诊断.目前国内外常用此技术,将寄生虫虫卵、成虫制成切片,作为间接荧光抗体试验(IFAT)及免疫酶染色法(IEST)等试验的固相抗原;具有取材容易、制备简便、抗原丰富,高效快速和适用于现场等优点.本文拟对固相抗原在我国寄生虫病免疫诊断中的应用作一介绍.1 吸虫病1.1 血吸虫病1.1.1 间接荧光抗体试验(IFAT)陈碧珍等报道,自1983年以来,应用血吸虫肝卵石蜡切片抗原做IFAT,共检测粪检孵化阳性血吸虫病人338例,健康人275例,其阳性及阴性符合率     

用酶联免疫吸附试验检测肯尼亚和大不列颠棘球蚴病人的特异循环抗原、免疫复合物和抗体

作者用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测棘球蚴病人血清中的循环抗原(CAg)、特异循环免疫复合物(CIC_s)和特异抗体,评价这些参数与存有棘球蚴感染、假阳性的关系及监测外科或化疗效果的价值,通过免疫印渍技术分析循环抗原的特性。     

旋毛虫病免疫学诊断研究进展

旋毛虫病（trichinellosis）是一种危害严重的人畜共患寄生虫病,人因食入生的或不熟的含活幼虫囊包的肉类及其制品而感染.肌肉活检是该病确诊的依据,但是受摘取组织局限性的影响,不易检出幼虫,容易漏诊.免疫学诊断技术常常作为检测重要的辅助手段.该文概述了酶联免疫吸附试验、凝集试验、免疫酶染色试验、间接荧光抗体技术、快速免疫层析法、斑点免疫金渗滤法酶联免疫电转移印记技术等7种旋毛虫病免疫学诊断的抗体检测方法和1种抗原检测方法,并对早期、快速、准确诊断旋毛虫病的检测方法进行分析评价.     

抗丙型肝炎病毒非结构蛋白NS_3单链抗体的制备及免疫组织化学研究

研制抗丙型肝炎病毒非结构蛋白ＮＳ3的人源噬菌体单链抗体 ,并探讨其在临床诊断中的应用价值。以重组的丙型肝炎病毒非结构蛋白ＮＳ3为固相抗原 ,利用亲和层析的原理 ,从噬菌体抗体库中经过 5轮“吸附—洗脱—扩增”的筛选过程及酶联免疫吸附试验、斑点免疫杂交试验和ＤＮＡ序列分析 ,获得ＨＣＶＮＳ3的人源单链抗体 ;用该抗体与不同来源的ＨＣＶＮＳ3抗原进行反应 ;对 10例石蜡包埋的丙型肝炎患者肝组织进行免疫织组化学鉴定。ＥＬＩＳＡ结果表明 ,制备的ＨＣＶＮＳ3人源单链抗体能与不同来源的ＨＣＶＮＳ3抗原特异性结合。免疫组织化学结…     

曼氏血吸虫成虫抗原的分离和用DASS、ELISA法作对比性免疫检测

本文选择DASS和ELISA二种免疫测定法对血吸虫抗原性进行研究。两法均以抗原结合于固相载体(琼脂糖珠或聚苯乙烯)上,与病人血清中的特异性免疫球蛋白起反应,然后用荧光标记或酶结合的抗免疫球蛋白抗体检测载体上与抗原结合的免疫球蛋白。采用对宿主的抗原性刺激为时最长的虫卵和成虫抗原,本文限于分析按抗原分子量     

日本血吸虫各期虫体的酶联免疫电转移印迹分析及抗原定位研究

本文采用酶联免疫电转移印迹技术（EITB）分析、比较日本血吸虫不同发育时期虫体特定的组分蛋白分子、雌虫、雄虫和虫卵抗原分别与相应的雌、雄虫和虫卵免疫血清反应呈现17、20和8条蛋白带,这三种抗原与其它不同时期虫体免疫血清反应,三者间及彼此间均出现交叉反应,而雌、雄虫和虫卵抗原与其它寄生虫感染血清作用没发现有叉及反应。应用间接荧光抗体试验（IFA）和免疫酶染色试验（IES）对日本血吸虫抗原进行定位研究,其结果相似。血吸虫主要抗原物质来源于成虫表皮、肠上皮和卵内的毛蚴.     

免疫酶技术在非传染性疾病上的应用

近年来,在医学科学研究中,免疫学的飞速发展是令人注目的,无论在理论研究和技术应用方面都取得了重要的进展。免疫酶技术就是在这个基础上产生的一个新领域。它是将抗原-抗体免疫反应和酶的高效催化作用原理有机地结合起来而形成的一种新的血清学方法;是继免疫荧光和放射免疫测定法之后发展起来     

检测疟疾抗体的新的血清学试验

本文作者对酶标免疫吸附试验(ELISA)能否用以检测疟疾抗体进行了试验。该试验的原理是:可溶性抗原能固定在塑料管壁或塑料板面上成为一层牢固的基底。加入血清后,血清中含有的特异抗体与抗原发生反应。而后洗去试管中游离的免疫     

免疫复合物对猪囊尾蚴抗原,抗体定性定量检测的影响探讨

本文应用抗猪囊尾蚴囊糊单克隆抗体和猪运尾蚴液抗原按不同比例混合孵育，实验观察了抗原、抗体和免疫复合物三者的关系。结果表明：免疫复合物可结合消耗一定量的抗原和抗体。依抗体与抗原蛋白浓度比值不同，免疫复合物可结合消耗75％～100％的抗原和35．7％～94.3％的抗体，致使游离抗原和抗体检出率降低。因此免疫复合物对抗原、抗体检测的影响作用不容忽视。     

艾滋病实验室诊断新进展

艾滋病实验室诊断技术主要包括HIV抗体检测、P24抗原测定、病毒分离、HIV病毒载量测定和HIV核酸检测等。HIV抗体检测是常规使用的HIV实验室诊断检测方法。其他检测方法或作为抗体检测方法的补充用作辅助诊断,或作为判断预后和指导治疗用药的依据,主要用于一些特殊情况(窗口期、婴儿诊断、HIV抗体检测结果不确定等),一般不用作常规诊断。HIV病毒载量测定和CD4细胞计数是判断预后的2项重要指标。 1 HIV抗体检测 HIV抗体检测是HIV感染诊断的常规方法。检测步骤包括筛查试验和确认试验。 1.1 HIV抗体筛查试验 1.1.1 酶联免疫试验(ELA)目前国内外主要使用第3代(双抗原夹心法)检测试剂,少数使用第2代试剂。血源     

日本因吸虫各期虫体的酶联免疫电转移印迹分析及抗原定位研究

本文采用酶联免疫电转移印迹技术（ＥＩＴＢ）分析、比较日本血吸虫不同发育时期虫体特定的组分蛋白分子、雌虫、雄虫和虫卵抗原分别与相应的雌、雄虫和虫卵免疫血清反应呈现１７、２０和８条蛋白带，这三种抗原与其它不同时期虫体免疫血清反应，三者间及彼此间均出现交叉反应，而雌、雄虫和虫卵抗原与其它寄生虫感染血清作用没发现有叉及反应。应用间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）和免疫酶染色试验（ＩＥＳ）对日本血吸虫抗的进行定位研     

班氏丝虫病人血清中虫体抗原的鉴定及其特性

班氏丝虫病免疫诊断的靶抗原、免疫病理以及抗原特异免疫抑制都与血中的循环抗原有关。本文报道了用单克隆抗体及多克隆抗体研究班氏丝虫病人血清中循环抗原的特性。以犬恶丝虫成虫作抗原,用杂交瘤技术,通过酶免疫试验及对流免疫电泳抑制试验筛选出两株抗犬恶丝虫成虫的单克隆抗体AD     

双向对流免疫电泳对酶解后血吸虫循环免疫复合物的检测

应用双向对流免疫电泳(TD-CIEP)、双向酶标对流免疫电泳(TD-ELACIEP)检测感染兔和晚期血吸虫病患者血清中的血吸虫性循环免疫复合物(SCIC)经酶解后的特异性抗原和抗体。结果表明,SCIC酶解后的检出效果显著提高,特异性抗原和抗体检出的水平与感染期和感染程度有关;检出的抗原为成虫源性;TD-ELACIEP的敏感性高于TD-CIEP。54例晚期血吸虫病人血清酶解和不酶解的抗原和抗体检出率分别为50和25.9％:其中COP仅9例(16.7％),环沉率≥5％;25名健康人均为阴性。认为TD-ELACIEP结合酶解,对晚期血吸虫病检测具有一定的实用价值。     

同种和异种丝虫成虫抗原免疫动物后血清特异性抗体动态的研究

应用马来丝虫和牛丝虫成虫冰冻切片抗原作间接免疫荧光抗体试验(IFAT)和免疫酶染色试验(IEST)检测家兔经3种抗原免疫后不同时期血清抗体IgG水平,均能显示免疫动物特异性抗体水平的动态变化。IgG水平高峰(GMRT为76.11～861.08)均在动物免疫后第4wk,在第8wk时,均下降至低水平(GMRT为4.00～32.00);加强免疫后1wk时,又上升至高水平(GMRT为20.11～181.02)。     

夹心免疫-PCR检测旋毛虫循环抗原的研究(英文)

目的建立以多抗为捕获抗体和单抗为检测抗体的夹心免疫-PCR检测旋毛虫循环抗原。方法利用杂交瘤技术制备抗旋毛虫单抗;旋毛虫抗原免疫家兔,分离纯化兔血清,制备兔抗旋毛虫多抗。多抗作为捕获抗体包被酶标板,单抗为检测抗体,选择适宜多抗和单抗浓度,建立夹心ELISA方法,再利用亲和素和生物素的高结合力连接起标记了生物素的抗体和DNA片段,将抗原抗体特异反应的免疫技术同无限扩增DNA片段的基因检测技术结合,利用PCR反应对DNA片段的扩增能力,提高检测灵敏度。结果制备了兔抗旋毛虫多抗,间接ELISA法筛选出与多种寄生虫抗原无交叉反应的单抗F4C6,夹心ELISA检测旋毛虫抗原最低浓度为0.05μg/ml,免疫PCR方法检测最低浓度为0.1ng/ml。结论首次建立夹心免疫-PCR检测旋毛虫抗原的方法,检测旋毛虫抗原的灵敏度高于传统ELISA方法104倍。