青蒿素对体外培养的HeLa细胞生长的影响

目的：研究青蒿素对体外培养的HeLa细胞生长的抑制作用。方法：用台盼蓝染色观察药物对细胞的增殖抑制率；MTT法测定药物的抗肿瘤活性；透射电镜观察药物对肿瘤细胞形态学的影响；流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：台分蓝染色法证实青蒿素对HeLa细胞有抑制作用，抑制率与药物浓度正相关；细胞经药物作用48h后的IC50为55．58μmol/L；电镜观察细胞有典型的凋亡形态特征（凋亡小体）；流芪细胞仪检测细胞凋亡率在一定范围内与药物浓度正相关。结论：青蒿素可抑制HeLa细胞的生长，诱导HeLa细胞凋亡。     

青蒿琥酯对人子宫内膜癌细胞RL95-2的生长抑制作用

目的 研究青蒿琥酯在体外对人子宫内膜癌RL95-2细胞的生长抑制作用及其可能机制.方法 通过MTT法实验观察青蒿琥酯在体外对RL95-2细胞的抑制作用;透射电镜观察癌细胞的形态学改变;免疫组化检测细胞浆Caspase3活性;流式细胞术观察青蒿琥酯对细胞周期的影响及检测细胞线粒体膜电位△ψm和细胞内ROS水平.结果 青蒿琥酯对RL95-2细胞具有增殖抑制作用,其半数细胞抑制浓度(IC50)为26.29 μg/ml.透射电镜见:细胞呈早期凋亡改变:核染色质聚集于核膜周围,呈团块状;免疫组化检测细胞浆Caspase3表达阳性;流式细胞仪检测:细胞周期阻滞发生在G0/G1期;细胞内ROS升高(P<0.05);细胞线粒体膜电位△ψm降低(P<0.05).结论 青蒿琥酯在体外作用于人子宫颈癌RL95-2细胞,可能通过诱导细胞凋亡抑制癌细胞增殖.     

青蒿琥酯对人子宫颈癌细胞株HeLa凋亡与增殖的影响

目的研究青蒿琥酯（artesunate,ART）对人子宫颈癌细胞HeLa凋亡与增殖的影响。方法通过MTT法观察ART对HeLa细胞的生长抑制作用;荧光染色观察ART作用前后细胞形态的改变;免疫组化检测HeLa细胞caspase-3表达;流式细胞术观察ART对细胞周期的影响,并检测细胞线粒体膜电位△ψm。和细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）的改变。结果ART对HeLa细胞的生长抑制作用呈时间、剂量依赖关系;荧光染色观察见凋亡小体形成;透射电镜见细胞染色质凝聚,边集呈新月形;免疫组化检测细胞质caspase-3呈阳性表达;流式细胞术检测ART可引起HeLa细胞周期S期阻滞;细胞内ROS明显升高（P〈0．01）,△ψm显著降低（P〈0．05）。结论ART作用于人子宫颈癌HeLa细胞,可能通过线粒体途径诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖。     

青蒿琥酯诱导人白血病细胞K562胀亡和凋亡作用的研究

目的:探讨青蒿琥酯(Artesunate,ART)对人慢性粒细胞性白血病细胞株K562增殖抑制的影响.方法:采用MTT比色法检测青蒿琥酯对体外培养的K562细胞的生长抑制作用,光、电镜下观察青蒿琥酯作用后的K562细胞形态学变化特征,流式细胞仪检测在不同浓度、不同时间作用下青蒿琥酯诱导K562细胞的细胞胀亡率和凋亡率.结果:青蒿琥酯对K562细胞有明显的增殖抑制作用,24h、48h、72h的半数抑瘤浓度IC50(μg/ml)分别为65.17、31.63、10.51.青蒿琥酯主要引起K562细胞的胀亡和凋亡变化,但胀亡率与凋亡率尤明显差别.结论:青蒿琥酯主要通过胀亡和凋亡2种方式抑制K562细胞增殖,并呈明显量效时效关系.     

青蒿琥酯对乳腺癌细胞株MDA-MB-231生长的影响

目的探讨青蒿琥蒿酯对乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖的影响及可能机制。方法以不同浓度（0、25、50、100μg/m l）的青蒿琥酯处理MDA-MB-231细胞,然后用MTT（四甲基偶氮唑盐）法检测各组细胞生长情况,用显微镜计数各组分裂期细胞所占比例,用流式细胞仪分析细胞周期（主要为G2/M期细胞和凋亡细胞比例）。结果 MTT显示青蒿琥酯对MDA-MB-231细胞增殖有抑制作用,且随着药物浓度的增加和药物处理时间的延长,抑制作用增加,各实验组与对照组比较,经统计分析差异有统计学意义（P〈0.05）;细胞分裂指数结果、流式细胞仪分析结果显示青蒿琥酯可明显增加MDA-MB-231细胞的分裂期细胞或G2/M比例和凋亡细胞比例,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论青蒿琥酯可通过抑制MDA-MB-231细胞分裂而阻碍其增殖,同时还具有诱导细胞凋亡的作用,青蒿琥酯可作为治疗乳腺的一个潜在药物。     

青蒿琥酯对口腔鳞癌Tca8113细胞及其移植瘤小鼠的抗肿瘤作用研究

目的 观察青蒿琥酯对口腔鳞癌Tca8113细胞增殖和凋亡的影响,以及对Tca8113细胞移植瘤小鼠肿瘤生长的影响。方法 用不同质量浓度的青蒿琥酯处理Tca8113细胞,HE染色观察细胞形态的改变;MTT法检测细胞增殖的情况;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的变化。用口腔鳞癌Tca8113细胞建立口腔鳞癌淋巴道转移模型,ip给予移植瘤小鼠青蒿琥酯200 mg/(kg?d),连续给药10 d,观察青蒿琥酯对肿瘤生长抑制作用,以5-氟尿嘧啶（5-FU）作为阳性对照。结果 青蒿琥酯作用Tca8113细胞后,形态学观察可见细胞凋亡现象,部分细胞明显肿胀、变圆、变大,溶解成碎片,甚至死亡;细胞增殖受到抑制且呈时间、剂量相关性;青蒿琥酯能有效诱导Tca8113细胞凋亡并呈时间、剂量相关性,还能将Tca8113细胞阻滞在G₀/G₁期。体内实验显示,青蒿琥酯对Tca8113细胞移植瘤具有明显的抑制作用,抑瘤率为41.18%。结论 青蒿琥酯体内及体外对口腔鳞癌Tca8113细胞均有抑制作用,其机制可能与青蒿琥酯诱导细胞凋亡或改变细胞周期的分布有关。     

青蒿素、青蒿琥酯抗皮肤瘢痕的体外实验研究

目的:检测青蒿素和青蒿琥酯对人皮肤瘢痕成纤维细胞生长的影响,探索建立抗皮肤瘢痕膏剂的有效配方.方法:原代培养建立人皮肤瘢痕成纤维细胞系,MTT法和流式细胞仪检测细胞凋亡,计算增殖抑制率和凋亡指数.结果:浓度为0.206 g/L和0.103 g/L的青蒿素对人皮肤瘢痕成纤维细胞有明显的抑制作用;青蒿琥酯对人皮肤瘢痕成纤维有明显抑制作用,且呈浓度依赖性.浓度为0.206 g/L的青蒿素和浓度为240、120 mg/L的青蒿琥酯的凋亡率和坏死率较对照组高(P<0.01).结论:青蒿素、青蒿琥酯可抑制体外培养的皮肤瘢痕成纤维细胞的生长,作为抗皮肤瘢痕外用膏剂的功效药物, 值得进一步研究.     

青蒿琥酯诱导白血病细胞凋亡及机理的实验研究

目的:研究中药青蒿提取物青蒿琥酯对诱导体外培养的U937细胞凋亡作用.方法:采用细胞体外培养,MTT显色法观察青蒿琥酯对U937细胞的生长抑制作用;通过细胞形态学、DNA凝胶电泳、DNA含量分析检测青蒿琥酯对U937细胞的凋亡诱导作用;上流式细胞仪检测经CD95标记的U937细胞在青蒿琥酯作用前后Fas表达的变化.结果:青蒿琥酯能抑制U937细胞生长,且呈时间和剂量依赖关系;经青蒿琥酯作用后的U937细胞出现凋亡细胞的特征;在青蒿琥酯作用后的U937细胞DNA凝胶电泳可见明显的梯形条带;DNA含量分析出现典型的凋亡峰.青蒿琥酯提高了U937细胞Fas的表达.结论:青蒿琥酯在体外能抑制U937细胞的增殖并诱导其发生凋亡.在一定浓度范围内,青蒿琥酯诱导U937细胞凋亡随时间和浓度增加而增加.青蒿琥酯能增加U937细胞Fas的表达.     

转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性的增效作用研究

目的 研究转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性的增效作用,观察药物作用后细胞凋亡情况.方法 采用MTT法检测青蒿琥酯单用或与转铁蛋白合用对鼻咽癌CNE2细胞的增殖抑制作用,DAPI染色观察CNE2细胞凋亡,流式细胞术分析细胞凋亡率变化.结果 青蒿琥酯对CNE2细胞的IC50值为116 μg/mL,青蒿琥酯合用转铁蛋白后IC50值降为17.4μg/mL,DAPI染色显示青蒿琥酯合用转铁蛋白作用CNE2细胞24h后,细胞出现明显凋亡现象,流式细胞分析结果显示,与对照组相比,青蒿琥酯合用转铁蛋白组作用24h后,细胞出现明显凋亡现象,而平行进行的青蒿琥酯100μg/mL,组相同作用时间没有出现凋亡.结论 转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性有较强增效作用,转铁蛋白与青蒿琥酯合用加速了青蒿酯诱导的细胞凋亡,是转铁蛋白增强青蒿琥酯作用的重要机制之一.     

干扰素对U937细胞的诱导凋亡作用及其作用机制

目的 探讨干扰素α对白血病U937细胞的生长抑制作用及其作用机制。方法 以不同浓度的干扰素α作用于体外培养的U937细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪及hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡，TRAP-PCR—ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。结果 干扰素α可显的降低U937细胞端粒酶活性，抑制细胞的生长及诱导细胞发生凋亡。并呈现出明显的量-效与时-效关系。结论 干扰素α能抑制U937细胞的生长并诱导细胞发生凋亡，降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一。     

端粒酶反义寡核苷酸对MCF-7细胞端粒酶活性及细胞生长的影响

为探讨端粒酶反义寡核苷酸对人乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性及细胞生长的影响,应用与人端粒酶RNA组分(hTR)模板区互补的硫代反义寡核苷酸处理MCF-7细胞.发现经反义hTR寡核苷酸作用后,细胞端粒酶活性明显受到抑制,至作用后72 h,端粒酶活性较对照组降低61.0%(P<0.05);细胞生长明显受到抑制;细胞周期发生显著变化,G0/G1期细胞数增多,S期及G2/M期细胞数则减少;细胞增殖指数由0.46降低至0.29;并可观察到凋亡细胞的出现,凋亡发生率为10.7%;而无义寡核苷酸处理组及空白对照组以上各指标均无明显变化.提示端粒酶反义寡核苷酸可明显抑制乳腺癌细胞端粒酶活性,抑制细胞生长和增殖,诱导细胞凋亡;表明应用反义技术抑制端粒酶活性治疗乳腺癌可能具有广阔的前景.     

异鼠李素对HeLa细胞端粒酶活性的抑制作用

目的　观察异鼠李素对 He L a细胞生长的抑制和诱导凋亡的作用 ,并探讨端粒酶在此过程中的作用。方法　培养细胞加入异鼠李素 ,通过细胞增殖动力学、流式细胞术及 TRAP- EL IAS法检测异鼠李素对 He L a细胞凋亡及端粒酶活性的影响。结果　异鼠李素处理组细胞生长受到抑制 ,抑制作用均与浓度呈梯度关系 ,其 IC50 为(4 0± 0 .0 8) μg/ m l,端粒酶活性较对照组细胞降低 (P<0 .0 5 )。结论　异鼠李素可通过抑制 He L a细胞端粒酶活性而抑制肿瘤细胞的生长     

苦参碱诱导人胃癌细胞凋亡及对端粒酶活性的影响

目的 研究苦参碱对人胃癌细胞诱导凋亡作用及端粒酶活性变化。方法苦参碱处理人胃癌细胞株SGC-7901后，用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长抑制效应，显微镜下观察胃癌细胞形态变化，应用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期和凋亡，用PCR-ELISA法对胃癌细胞端粒酶活性进行检测。结果不同浓度的苦参碱对SGC-7901有明显抑制作用，且呈时间依赖性及剂量依赖性，形态学观察也发现大量神经细胞的染色质凝聚，核碎裂，凋亡小体产生，细胞即出现明显的凋亡形态特征，FCM检测结果显示苦参碱作用后，G0／G1期细胞比例增高，S期、G2／M期细胞比例下降，苦参碱在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调，且随苦参碱浓度增大和时间延长，抑制作用逐渐增强。结论苦参碱对人胃癌细胞具有明显抑制作用，诱导细胞凋亡并抑制端粒酶活性可能是其发挥抗癌作用的机制之一。     

端粒酶活性对HeLa细胞生长及化疗敏感性的影响

目的研究抑制端粒酶活性对HeLa细胞在体内外生长和对顺铂敏感性的影响。方法将野生型端粒酶逆转录酶、端粒酶逆转录酶显性负突变体和对照质粒电转染于HeLa细胞中，绘制细胞生长曲线，四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测细胞对顺铂的敏感性，磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V）法检测细胞凋亡情况；接种裸鼠观察其致瘤性及对顺铂敏感性的影响。结果端粒酶逆转录酶显性负突变体转染于HeLa细胞后，端粒酶活性显著下降，细胞生长速度延缓，显著增强顺铂诱导的凋亡，端粒酶活性抑制后对裸鼠致瘤性丧失，而端粒酶活性增强后顺铂对肿瘤的抑制作用下降。结论端粒酶活性下降能抑制HeLa细胞生长，增强顺铂的杀伤作用，反之端粒酶活性升高将导致对顺铂耐药。     

金属铜配合物Cu（Ⅱ）吨酮冠醚的体外抗肿瘤作用

目的探讨金属铜配合物Cu（Ⅱ）吨酮冠醚（XCE-Cu）的体外抗肿瘤作用。方法采用噻唑蓝比色法测定XCE—Cu对卵巢癌细胞3AO、食管鳞癌细胞ECA109、肺癌细胞GLC-82、胃癌细胞SGC一7901增殖的抑制作用;应用流式细胞仪检测药物对3AO细胞周期和凋亡的影响。结果XCE—Cu呈浓度依赖性的抑制3AO、ECAl09、GLC-82、SGC-7901细胞生长,作用72h的半抑制浓度依次为4．1、8．2、15．9、8．7ug／mL,其中对3AO的抑制作用最强。作用24、48、72hXCE-Cu呈浓度、时间依赖性的抑制3AO细胞生长,作用明显强于卡铂。12．5—50ug／mL使3AO细胞G1期减少而S期和G2期增加,并剂量依赖性的诱导细胞凋亡。结论XCE—Cu在体外具有抗肿瘤作用,对3AO细胞的选择性高,其机理为阻止细胞于S期和诱导细胞调亡。     

顺铂对宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用

目的 观察顺铂对HeLa细胞增殖、端粒酶活性及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响，以揭示顺铂抗宫颈癌的机理。方法 运用体外细胞培养技术，以不同浓度的顺铂作用于培养的HeLa细胞72小时，采用MTT法测定细胞代谢率，用端粒酶重复序列扩增-酶联免疫吸附法(TRAP—ELISA)检测细胞端粒酶活性，以流式细胞术观察PCNA的表达。结果 顺铂能以浓度依赖方式减低细胞代谢率、下调端粒酶活性并降低PCNA的表达。细胞代谢率减低分别与端粒酶活性的下调(r=0．984)和PCNA表达的降低(r=0．996)均呈正相关，端粒酶活性的下调与PCNA表达的降低也呈正相关(r=0．993)。结论 顺铂能显著抑制HeLa细胞增殖、下调端粒酶活性并使PCNA的表达降低，这可能是顺铂抗癌作用的重要机理之一。     

青蒿琥酯对腺样囊性癌NACC细胞系抑制作用的实验研究

目的观察青蒿琥酯(ART)对人腭部小涎腺腺样囊性癌(NACC)细胞体外增殖抑制和诱导凋亡作用,并探讨其机制。方法经不同浓度ART处理体外NACC细胞株后,噻唑蓝法、克隆形成实验检测ART对细胞增殖的影响,并在倒置显微镜及电镜下观察细胞形态学的改变;细胞划痕实验检测ART对细胞迁移能力的改变;流式细胞仪检测ART对NACC细胞周期及凋亡的影响。结果 (1)ART对体外NACC细胞增殖有明显抑制作用(P<0.05),这种作用呈明显的时间、剂量依赖性(P<0.05),24 h、48 h、72 h ART半抑制浓度分别为113.09、74.80、35.61μg/ml;(2)ART处理后的NACC细胞出现形态和结构的改变;(3)ART可以明显地抑制NACC细胞的迁移(P<0.05);(4)不同浓度ART均能促进NACC细胞凋亡,随着ART浓度的增加,NACC细胞凋亡率逐渐升高(P<0.05);(5)低浓度ART可将细胞阻滞在G1期,当浓度达到50.0μg/ml时,ART可将细胞阻滞于G2期。结论 ART对人腺样囊性癌NACC细胞具有明显的抑制作用,并能调整细胞周期,诱导其凋亡。     

端粒酶反义基因对恶性胶质瘤细胞生长的作用

目的研究端粒酶RNA的反义寡核苷酸(AODN)抗恶性胶质瘤细胞系的作用。方法采用脂质体包裹AODN转染恶性胶质瘤细胞系U251-MG细胞。用四唑盐MTT法测定细胞生长曲线,用端粒重复序列扩增法(TRAP)检测细胞的端粒酶活性变化;用流式细胞术检测凋亡细胞。结果2~8μmol/L AODN转染恶性胶质瘤细胞系,培养1~4 d,恶性胶质瘤细胞系端粒酶活性下降,且有剂量依赖性和时间依赖性。AODN转染的恶性胶质瘤细胞培养后细胞增生速度减慢,发生了细胞凋亡。而无义寡核苷酸则无此效应。结论AODN能特异性抑制恶性胶质瘤细胞的端粒酶活性,诱导细胞凋亡。     

金属铜配合物Cu（Ⅱ）1-羟基-3-（2-环氧基）吨酮的体外抗肿瘤作用

摘要：目的探讨金属铜配合物Cu（Ⅱ）1-羟基-3-（2-环氧基）吨酮（Cu-HOX）的体外抗肿瘤作用。方法采用噻唑蓝比色法测定Cu—HOX对卵巢癌细胞3AO、食管鳞癌细胞ECA109、肺癌细胞GLC-82、胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用;应用流式细胞仪检测药物对3AO细胞周期和凋亡的影响。结果Cu-HOX呈浓度依赖性的抑制3AO、ECA109、GLC-82、SGC-7901细胞生长,作用72h的半抑制浓度（IC50）依次为8．0、〉50、6．7和9．0μg／mL,其中以Cu-HOX和卡铂对3AO细胞IC50的比值最小,说明Cu—HOX对3AO的敏感性明显强于卡铂。作用24、48、72hCu—HOX呈浓度、时间依赖性的抑制3AO细胞生长,作用明显强于卡铂。3．125-25μg／mL使3AO细胞S期增加而G1期减少,引起细胞凋亡。结论Cu—HOX在体外具有抗肿瘤作用,其中对3AO细胞的敏感性最高,其机理为阻止细胞于S期和诱导细胞调亡。