蜂毒素对大鼠血小板内钙浓度的影响

应用Ｆｕｒａ－２作为荧光试剂，测定大鼠血小板细胞内Ｃａ＾２＋浓度变化，蜂毒素１．５ｍｇ／Ｌ使血小板细胞内Ｃａ＾２＋浓度增加，悬液中加入ＣａＣｌ２１ｍｍｏｌ／Ｌ，血小板细胞内Ｃａ＾２＋继续增加，维拉帕米３．１２５ｍｇ／Ｌ作用５ｍｉｎ后，蜂毒素仍可使血小板Ｃａ＾２＋增加，但加入ＣａＣｌ２血小板Ｃａ＾２＋的浓度不再增加。提示蜂毒素促进大鼠血小板细胞内Ｃａ＾２＋的释放和细胞外Ｃａ＾２＋进入细胞内。     

花椒油素对A23187和钙调节血小板及细胞内游离钙作用的研究

目的 研究花椒油素对CaCl2和钙离子载体A23187调节血小板及其中Ca2+浓度的作用。方法 比浊法测定血小板聚集，用Fura-2/AM荧光法测定细胞内游离钙的水平。结果 花椒油素显著地抑制CaCl2和A23187诱导的血小板聚集，前者的抑制率为9.0%(67.1%，后者的抑制率为18.1%(72.5%。明显降低A23187诱导的血小板胞质游离Ca2+浓度，降低率为12.8%(63.4%。结论 花椒油素抑制聚集作用与降低细胞内游离Ca2+水平之间呈线性正相关（P<0.01）。     

海风藤醇B对PAF诱导的兔血小板钙内流和胞内游离钙浓度升…

应用＾４５Ｃａ＾２＋和钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２／ＡＭ进行实验，发现海风藤醇Ｂ（１０，１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１）无论对血小板激活因子（ＰＡＦ）引起的兔洗涤血小板Ｃａ＾２＋内流还是胞内游离钙浓度（Ｃａ＾２＋）升高均有抑制作用，且呈良好的剂量相关，最大抑制率分别为３７．２％和５０．８％，但对Ａ２３１８７引起的胞内（Ｃａ＾２＋）升高无显著抑制作用。结果表明，海风藤醇Ｂ能选择性拮抗ＰＡＦ诱导的钙内流的Ｃａ＾     

降钙素基因相关肽对人主动脉平滑肌增殖的影响

以人主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）为模型，用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量测定法观察了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）对细胞增殖的影响，并对细胞内Ｃａ＾２＋浓度进行了测定，结果表明，ＣＧＲＰ对人主动脉ＳＭＣ有明显抑制作用，呈浓度依赖性，最佳浓度为１０ｎｍｏｌ／Ｌ，抑制率达４７．４４％，胞浆内游离Ｃａ＾２＋浓度明显降低，提示ＣＧＲＰ降低细胞内Ｃａ＾２＋浓度可能是其抑制ＳＭＣ增殖的作用机制之一。     

aFGF和Genistein对AGZY—83A细胞内PKC活性及[Ca^2＋]i的影响

目的：探讨ａＦＧＦ及ＴＰＫ抑制剂Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ对ＡＧＺＹ－８３Ａ细胞内ＰＫＣ活性游离Ｃａ＾２＋浓度的影响。方法：用不同浓度的ａＦＧＦ和Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ诱导ＡＧＺＹ－８３Ａ细胞,（γ－Ｐ＾３２）－ＡＴＰ标记的Ｈｉｓｔｏｎｅ Ⅰ为底物,液体闪烁测定ＰＫＣ活性;Ｆｕｒａ－２／ＡＭ负载荧光光度法测定细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度。结果：ａＦＧＦ诱导后,细胞内ＰＫＣ活性及Ｃａ＾２＋浓度升高,且与ａＦＧＦ呈剂     

蜂毒素对大鼠血小板内钙浓度的影响

应用Ｆｕｒａ－２作为荧光试剂，测定大鼠血小板细胞内Ｃａ~（２＋）浓度变化。蜂毒素１．５ｍｇ／Ｌ使血小板细胞内Ｃａ~（２＋）浓度增加；悬液中加入ＣａＣｌ＿２１ｍｍｏｌ／Ｌ，血小板细胞内Ｃａ~（２＋）继续增加。维拉帕米３．１２５ｍｇ／Ｌ作用５ｍｉｎ后，蜂毒素仍可使血小板内Ｃａ~（２＋）增加．但加入ＣａＣｌ２血小板Ｃａ~（２＋）的浓度不再增加。提示蜂毒素促进大鼠血小板细胞内Ｃａ~（２＋）的释放和细胞外Ｃａ~（２＋）进入细胞内。     

镉对人体外周血淋巴细胞内游离Ca^2＋及钙调素影响的研究

本文采用体外实验方法，观察ＣｄＣｌ２对培养２４ｈ的人外周血淋巴细胞内游离Ｃａ＾２浓度及ＣａＭ活性的影响。结果表明：细胞内游离Ｃａ＾２浓度与镉浓度及染毒时间存在明显的剂量及时相相关，在≤５０μｍｏｌ／ＬＣｄＣｌ２作用下，ＣａＭ活性随染毒剂量增加而升高，５０μｍｏｌ／ＬｄＣｌ２使ＣａＭ活性增至０μｍｏｌ／Ｌ组的１９０．２２％，但１００μｍｏｌ／ＬＣａＣｌ则对ＣａＭ无激活作用，在一定镉浓度（０－５０μｍ     

海风藤醇B对PAF诱导的兔血小板钙内流和胞内游离钙浓度升高的抑制作用

应用４５Ｃａ２＋和钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２／ＡＭ进行实验，发现海风藤醇Ｂ（１０、１００μｍｏｌ·Ｌ－１）无论对血小板激活因子（ＰＡＦ）引起的兔洗涤血小板Ｃａ２＋内流还是胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）升高均有抑制作用，且呈良好的剂量相关，最大抑制率分别为３７．２％和５０．８％；但对Ａ２３１８７引起的胞内［Ｃａ２＋］ｉ升高无显著抑制作用。结果表明：海风藤醇Ｂ能选择性拮抗ＰＡＦ诱导的钙内流和［Ｃａ２＋］ｉ的升高。     

冠心病血小板活化与血小板〔Ca^2＋〕i的关系

目的 探讨冠心病血小板活化的生化机制。 方法 ３６例冠心病患者和２０名健康对照者，分别用玻璃球法、比浊法、放免法测定血小板粘附、聚集功能及血浆ＧＭＰ－１４０浓度，荧光指示剂Ｆｕｒａ－２Ａｍ测定血小板〔Ｃａ＾２＋〕ｉ。结果 冠心病患者血小板粘附、聚集率和血浆ＧＭＰ－１４０浓度均高于健康对照者，静息和ＡＤＰ激发后血小板〔Ｃａ＾２＋〕ｉ也高于健康对照者，血小板〔Ｃａ＾２＋。橛胙“逭掣健⒕奂屎脱牵     

健康人红细胞Na^＋—D^＋ATP酶,Ca^2＋—Mg^2—ATP酶活性与胞浆游…

用生物化学法及荧光法测定了成年人、老年人的红细胞Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋ＡＴＰ酶、Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋ＡＴＰ酶活性及胞浆游离Ｃａ＾２＋。结果显示：老年前期组Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋ＡＴＰ酶及Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋ＡＴＰ酶活性均显著低于成年人组（Ｐ＜０．０５），而胞浆游离Ｃａ＾２＋深度明显高于成年人组（Ｐ＜０．０５）。老年组的两个ＡＴＰ酶活性均较老年前期组低，胞浆游离Ｃａ＾２＋浓度高于老年前期组。上述三个指标的随     

八肽胆囊收缩素对谷氨酸诱导神经元死亡的拮抗作用及机制研究

以谷氨酸、ＮＭＤＡ作用原代培养的大鼠大脑皮层神经元，随药物浓度递增，作用时间延长，细胞存活率逐渐下降。八肽胆囊收缩素对谷氨酸、ＮＭＤＡ诱导的神经元死亡具有明显的拮抗作用，在其浓度为１×１０－７ｍｏｌ／Ｌ时其拮抗率为７７８±４４％和７５４±６７％。ＣＣＫＢ受体拮抗剂Ｌ－３６５２６０可完全阻断八肽胆囊收缩素的保护作用，而ＣＣＫＡ受体拮抗剂Ｌ－３６４７１８无此作用。应用Ｆｕｒａ－２荧光技术测定新生大鼠大脑皮层神经元细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ），八肽胆囊收缩素可明显抑制ＮＭＤＡ诱导的神经元［Ｃａ２＋］ｉ升高，在浓度为１×１０－７ｍｏｌ／Ｌ时其抑制率为９５７％。结果显示：八肽胆囊收缩素可能通过其Ｂ受体产生拮抗谷氨酸神经兴奋毒性作用，抑制Ｃａ２＋内流是其产生拮抗作用的机制之一。     

糖尿病患者血小板游离钙变化与血栓素B2生成的关系

为了探讨糖尿病患者血小板胞浆内游离Ｃａ￣（２＋）浓度（［Ｃａ￣（２＋）］ｉ）与血栓素Ｂ＿２（ＴＸＢ＿２）生成的关系，及其在糖尿病微血管病变发病中的作用，作者用Ｃａ￣（２＋）荧光指示剂ｆｕｒａ－２直接测定２７例糖尿病患者（合并微血管病变苔１３例，无微血管病变者１４例）血小板［Ｃａ￣（２＋）］ｉ，并且同步测定ＴＸＢ＿２。结果：以钙载体Ａ＿（２３１８７）诱导，糖尿病组血小板［（Ｃａ￣（２＋）］ｉ峰值为１１４７±５２ｎｍｏｌ／Ｌ，高于对照组（８９７±４９ｎｍｏｌ／ＬＰ＜０．０１），且与ＴＸＢ，生成呈正相关：而用花生四烯酸诱导，糖尿病组血小板［Ｃａ￣（２＋）］ｉ峰值为３５３±１４ｎｍｏｌ／Ｌ，虽高于对照组（３１２±１６ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０５），但与ＴＸＢ＿２生成未呈显著相关。上述改变在糖尿病有或无微血管病变两组之间比较无显著性差异，提示糖尿病患者血小板［Ｃａ￣（２＋）］ｉ变化可能通过膜磷脂酶环节致使ＴＸＢ＿２生成增多，参与微血管病变的发病。     

1,6—二磷酸果糖对心肌细胞胞质游离Ca^2＋和pH的影响

考察外源性的１，６－二磷酸果糖（ＦＤＰ）对心肌细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度和ｐＨ值的影响，用荧光探针（Ｆｕｒａ－２，ＢＣＥＣＦ）技术同时测定成年大鼠心肌细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度和ｐＨ值，并观察其在缺氧／复氧条件下的变化，结果：在缺氧／复氧过程中，胞质游离Ｃａ＾２＋胞质游离Ｃａ＾２＋浓度缓慢升高，从基础值１３０±２９．５ｎｍｏｌ／Ｌ上升至７４２±１５４ｎｍｏｌ／Ｌ，胞质ｐＨ值则从７．１２±０．０８降至６     

钙指示剂Fura－2／AM对血小板功能及细胞内游离钙测定结果的影响

本实验结果表明，以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ负载家兔洗脱血小板，当Ｆｕｒａ－２／ＡＭ的浓度低于２μｍｏｌ／Ｌ时，３μｍｏｌ／Ｌ和１０μｍｏｌ／Ｌ花生四稀酸（ＡＡ）诱导的血小板聚集（透光度增加：７２．５±７．８４％）及释放反应（ＡＴＰ释放：１．１２±０．２１μｍｏｌ／４×１０５血小板）不受影响，但随Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度增加，ＡＡ的聚集和释放反应明显减弱（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度对单一血小板内钙（［Ｃａ２＋］ｉ）的静息水平无影响，但Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为２μｍｏｌ／Ｌ时，ＡＡ诱导的［Ｃａ２＋］ｉ动员最明显。另外，标本中血小板的数量也明显影响［Ｃａ２＋］ｉ的测定结果（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。提示，Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度过高，很可能导致过多的钙离子被螯合，降低了血小板的功能，同时，细胞内游离钙与Ｆｕｒａ－２／ＡＭ的结合过程存在着饱和性。     

NIDDM患者血小板Ca_(2+)转运及其与聚集功能的关系

３２例ＮＩＤＤＭ患者，分血小板聚集功能亢进组（ｎ＝１７）和无亢进组（ｎ＝１５），探讨Ｃａ２＋转运影响血小板胞浆游离Ｃａ２＋（［Ｃａ２＋］ｉ）变化与最大聚集（ＭＡＲ）的关系。结果：亢进组血小板静息［Ｃａ２＋］ｉ高于对照组（１３４．４±２６．４对１０１．５±１３．３ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１）。［Ｃａ２＋］ｉ与ＭＡＲ呈正相关（ｒ＝０．３２１９，Ｐ＜０．０５）以凝血酶刺激，有胞外Ｃａ２＋内流及胞内Ｃａ２＋释放时，亢进组［Ｃａ２＋］ｉ高于对照组（９１８．９±２０７．６对７９１．２±１１９．６ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１），并与ＭＡＲ呈正相关（ｒ＝０．３３７１，Ｐ＜０．０１）；以ＴＭＢ８阻滞胞内Ｃａ２＋释放，组间差异仍然显著（Ｐ＜０．０５）；当缺乏胞外Ｃａ２＋内流时，则组间不呈显著差异（Ｐ＞０．０５）。以钙载体Ａ２３１８７刺激，在有或无胞外Ｃａ２＋时，亢进组［Ｃａ２＋］ｉ均高于对照组（Ｐ均＜０．０５）然而，无亢进组上述各指标与对照组间均未呈显著差异。提示ＮＩＤＤＭ患者血小板聚集功能亢进与［Ｃａ２＋］ｉ变化有关，可能涉及胞浆内Ｃａ２＋稳态异常，凝血酶刺激胞外Ｃａ２＋内流及Ａ２３１８７作用胞内Ｃａ２＋释放增强等环节     

硝苯地平和SK＆F96365对cyclopiazonic acid触发的大鼠主…

探讨介导Ｃａ＾２＋池操纵性Ｃａ＾２＋内流的Ｃａ＾２＋通道特性。方法取大鼠胸主动脉环,每个动脉环长约２．５ｍｍ。用张力换能器记录主动脉环收缩反应。结果（１）ｃｙｃｌｏｐｉａｚｏｎｉｃ ａｃｉｄ（ＣＰＡ,１－１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１）以浓度依赖性触发大鼠主动脉环的双相收缩反应（收缩峰和平台）,１０μｍｏｌ．Ｌ＾－１Ｏ阻断电电压依赖性Ｃａ＾２＋通道６０μｍｏｌ．Ｌ＾－１）以浓度依赖性抑制ＣＰＡ触发血管环     

荧光试剂法测定小鼠受精卵胞质游离Ca^2＋

目的 通过测定小鼠卵细胞受精过程中胞质游离Ｃａ＾２＋浓度的变化，研究其变化规律及在胚胎早期发育中的作用。 方法 采用Ｃａ＾２＋特导荧光试剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ和ＡＲ／ＣＭ／ＭＩＣ型单细胞阳离子测定系统，测定了休止于第二次成熟分裂中期（ＭⅡ）的小鼠卵母细胞受精过程中的胞质游离Ｃａ＾２＋浓度。 结果 小鼠卵受精过程中胞质游离Ｃａ＾２＋浓度发生波动或振荡。 结论 这对胚胎发育的早期研究有一定意义。     

丙咪嗪抗血小板聚集作用与细胞外Ca_(2+)浓度的关系

目的：观察丙咪嗪抗血小板聚集作用与细胞外Ｃａ２＋浓度的关系。方法：以比浊度法进行血小板聚集实验。结果：丙咪嗪００１～１ｍｍｏｌ／Ｌ浓度明显对抗凝血酶及二磷酸腺苷诱导的人血小板聚集，且其抗血小板聚集作用随着细胞外Ｃａ２＋增加（加入ＣａＣｌ２１ｍｍｏｌ／Ｌ）与降低（加入乙二醇二乙醚二氨四乙酸１ｍｍｏｌ／Ｌ）而呈现减弱和增强现象，与维拉帕米作用相似。结论：丙咪嗪的抗血小板聚集作用可能与抗钙作用有关。     

急性胰腺炎时胰腺细胞内钙离子变化的初步观察报告

近来的研究提示在急性胰腺炎（ＡＰ）病理生理过程中可能有钙离子内流的参与。使用ＳＤ大白鼠胆胰管逆行加压注射牛磺胆酸制成ＡＰ模型，用荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／Ａｍ测定游离胰腺腺泡活细胞内游离钙离子浓度（〔Ｃａ＾２＋〕ｉ）。结果显示ＡＰ后的２和３小时胰腺呈急性出血坏死性胰腺炎早期改变，ＡＰ组〔Ｃａ＾２＋〕ｉ较对照组明显增高（Ｐ〈０．００１）。本实验结果提示ＡＰ发生发展过程中存在着明显的钙离子内流。     

花椒油素对血小板粘附和丙二醛生成的影响

目的 观察花椒油素（Ｘａｎｔｈｏｘｙｌｉｎ，ＸＴ）对血小板粘附和丙二醛产生的影响。方法 用转动圆瓶法和２－硫代巴比妥酸（ＴＢＡ）荧光微测定法研究花椒油素对大鼠血小板粘附和丙二醛（ＭＤＡ）生成的影响。结果 体外实验：ＸＴ０．０３７，０．１８５，０．９２４，９．２４０μｍｏｌ／Ｌ显著抑制血小板粘附和ＭＤＡ的产生，血小板粘附的抑制率为４９．９％～８７．１％，ＭＤＡ产生的抑制率为２３．２～４６．４％；体内