耐多药结核患者外周血Th17细胞变化及其意义

目的 观察耐多药结核(MDR-TB)患者外周血辅助性T(Th)17细胞的水平,探讨人体抵抗MDR-TB的免疫学机制.方法 选取MDR-TB患者25例(MDR-TB组),初治肺结核患者23例(TB组),健康正常人25例(HC组).采用流式细胞分析法检测各组人群外周血Th17细胞占CD4+T细胞比例.应用流式微球分析法检测各组人群外周血Th17相关的白细胞介素(IL)17和IL-6的表达.结果 MDR-TB组和TB组患者外周血Th17/CD4+T细胞比例分别为(2.18±0.65)%和(1.32±0.34)%,明显高于HC组的(0.41±0.10)%(P<0.05);MDR-TB组的Th17细胞比例亦高于TB组(P<0.05).MDR-TB组和TB组患者外周血IL-17水平分别为(6.45±1.88)Pg/ml和(3.53±0.38)pg/ml,明显高于HC组的(2.39±0.46)pg/ml(P<0.05);MDR-TB和TB组间差异亦有统计学意义(P<0.05).MDR-TB组患者外周血IL-6水平为(571.70±188.24)pg/ml,明显高于TB组的(18.50±5.87)pg/ml和HC组的(5.76±1.86)pg/ml(P<0.05).三组外周血IL-17水平与IL-6水平呈正相关(r=0.824,P<0.01).结论 MDR-TB患者外周血Th17细胞比例增加,IL-17、IL-6水平升高.Th17细胞可能参与MDR-TB的发病.     

卡介苗对支气管哮喘患者外周血单个核细胞Th1/Th2平衡的影响

目的:研究减毒活菌卡介苗(BCG)干预对支气管哮喘患者外周血单个核细胞Th1/Th2平衡的影响。方法:抽取哮喘患者(哮喘组)外周血样本20例,同期健康献血员(对照组)外周血样本10例。分离外周血淋巴细胞并用BCG(100mg/L)干预培养,于培养前后分别采用流式细胞仪测定外周血Th1、Th2百分率及Th1/Th2比,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定培养前后外周血淋巴细胞白细胞介素(IL)-4和干扰素(IFN)-γ表达水平。结果:哮喘组经BCG干预前Th1百分率和Th1/Th2均低于对照组,Th2细胞百分率高于对照组;干预后,Th1百分率和Th1/Th2均升高,Th2细胞百分率降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。哮喘组经BCG干预前IFN-γmRNA表达水平低于对照组,IL-4mRNA表达水平高于对照组;干预后,IFN-γmRNA表达水平升高,IL-4mRNA表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:哮喘患者中Th2型免疫应答占优势,卡介苗干预可在基因表达水平和细胞数量上纠正哮喘患者的Th1/Th2失衡。     

强直性脊柱炎患者Th淋巴细胞功能的研究

目的:探讨辅助性T细胞(Th)Th1/Th2比例失衡及Th1/Th2细胞因子网络的异常在强直性脊柱炎(AS)发病机制中的作用。方法:利用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定30例AS伴膝关节积液患者、20例正常对照血清及AS患者关节液中Th1/Th2型细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-10;应用三色流式细胞分析法(FCM)检测外周血Th细胞(CD3+CD4+)比例及其胞浆内Th1/Th2细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)和IL-4的表达;AS患者同时检测红细胞沉降率(ESR)及C-反应蛋白(CRP)。结果:(1)AS患者血清TNF-α和IL-10水平均明显高于正常对照组(P<0.01),AS患者关节液TNF-α水平高于血清水平(P<0.01),IL-10水平与血清中水平差异无统计学意义(P>0.05)。(2)AS患者外周血Th、Th2细胞(CD3+CD4+IL-4+)百分率与对照组差异无统计学意义(P>0.05),而Th1细胞(CD3+CD4+IFN-γ+)百分率及Th1/Th2比值高于对照组(P<0.01)。(3)AS患者血清中TNF-α的水平与ESR、CRP呈正相关(P<0.01或P<0.05);而IL-10水平、外周血Th1和Th2细胞百分率、Th1/Th2比值与ESR、CRP均无明显相关性(P>0.05)。结论:AS患者外周血存在Th1/Th2比例失衡,为Th1优势状态。Th1型细胞因子TNF-α在AS患者外周血及关节液中均呈现高水平表达。     

妊娠期高血压疾病患者外周血和蜕膜Th1/Th2失衡的研究

目的研究妊娠期高血压疾病患者外周血和蜕膜组织中CD4 T辅助细胞(Th1)和(Th2)细胞免疫反应的变化,探讨Th1/Th2比率失衡在妊娠期高血压疾病发生中的作用。方法选取住院分娩的子痫前期(PE)患者25例(子痫前期组,包括轻度10例和重度15例),妊娠期高血压患者10例,同期住院分娩的正常孕妇12例和自愿参与实验的年龄匹配的健康未孕妇女12例作为对照组,治疗前抽取各组实验对象空腹肘静脉抗凝血0.5m l送流式检验Thl,Th2细胞百分比及Thl/Th2比率。三组孕妇均于剖宫产术胎盘娩出后,立即搔刮子宫腔取蜕膜制成单细胞悬液,分离离心收集淋巴细胞送流式检验Thl,Th2细胞百分比及Thl/Th2比率。结果①子痫前期组外周血Thl细胞百分比(16.18±3.93)%高于其它各组(P<0.01),PE患者Th1/Th2细胞比率(16.75±3.84)均高于其余各组(P<0.05)。②子痫前期组蜕膜组织中CD4 T细胞中Thl百分比(37.83±12.04)%显著高于其它各组(P<0.001),妊娠期高血压患者蜕膜组织中Thl细胞百分比(16.30±5.36)%也高于正常妊娠妇女(11.79±4.61)%(P<0.05)。PE患者Thl/Th2比率(26.70±9.40)显著高于其余各组(P<0.001),重度PE组(30.11±10.42)高于轻度PE组(21.59±4.25)(P<0.05);妊娠期高血压患者Th1/Th2比率(13.13±5.62)也高于正常妊娠妇女(7.61±4.63)(P<0.05)。结论子痫前期患者体内存在着免疫失衡现象。Thl/Th2细胞平衡向Thl漂移,Th2受抑制可能是妊娠期高血压疾病(包括子痫前期和妊娠期高血压)发生的重要原因。     

支气管哮喘患者外周血Th1、Th2与Th17细胞表达水平及临床意义

目的 探讨外周血Th1、Th2与Th17细胞在支气管哮喘患者中的表达水平及临床意义.方法 选取2015年1月-2016年2月诊治的支气管哮喘40例,均为急性发作期,治疗1周后为缓解期,选取同期健康人40例作为对照组.检测支气管哮喘急性发作期、缓解期和对照组外周血Th1、Th2与Th17细胞水平,观察外周血中干扰素(IFN)-白介素(IL)-4及IL-17的表达情况.结果 支气管哮喘组急性发作期和缓解期Th1、Th1/Th2、IFN-γ的表达水平低于对照组,且急性发作期低于缓解期(P＜0.05);支气管哮喘组急性发作期和缓解期Th2、Th17、IL-4、IL-17表达水平高于对照组,且急性发作期高于缓解期(P＜0.05).结论 支气管哮喘患者外周血Th1、Th2与Th17细胞表达水平失衡,导致IFN-γ、IL-4及IL-17异常分泌,可能参与支气管哮喘的发病.     

急性冠状动脉综合征患者Th17和Treg细胞的变化检测

目的观察急性冠状动脉综合征患者Th17细胞和Treg细胞的变化。方法我院2010年8月至2011年8月住院患者中随机选取30例急性冠状动脉综合症患者纳入观察组,健康对照者30例纳入对照组,分别采用流式细胞术检测外周血Th17细胞和Treg细胞百分率。结果观察组患者外周血中Th17细胞百分率高于对照组,其差异具有显著的统计学意义(P<0.05);观察组患者CD4+CD25+Foxp3+Treg和CD4+Foxp3+Treg细胞百分率低于对照组,其差异具有显著的统计学意义(P<0.05)。结论 ACS患者外周血中Th17/Treg失衡,我们推测斑块的不稳定可能与Th17/Treg失衡。     

初治肺结核患者T淋巴细胞亚群和Th细胞的变化及与预后的关系

目的：探讨初治肺结核患者T淋巴细胞亚群和Th细胞的变化及与预后的关系。方法选取2011年1月～2013年6月在本院结核科门诊治疗的肺结核患者60例为肺结核组,按初治疗效进一步将肺结核组分为好转组与未好转组,选取健康未患肺结核30例为对照组。测定外周血T细胞亚群、Th细胞及IFN-γ、IL-4。结果治疗前,未好转组CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋、Th1/Th2、Th1表达较对照组与好转组显著降低,Th2表达较对照组与好转组显著升高（P〈0.05）;治疗前,好转组CD4^＋、Th1/Th2、Th1表达较对照组低,Th2表达较对照组高（P〈0.05）;治疗后,好转组CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋、Th1/Th2、Th1显著高于未好转组及治疗前,Th2显著低于未好转组及治疗前,差异有统计学意义（P〈0.05）;与治疗前比较,未好转组治疗后CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋、Th1/Th2、Th1、Th2差异无统计学意义（P〉0.05）。结论初治肺结核患者 CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋、Th1/Th2、Th1较正常人降低,Th2较正常人升高;肺结核治疗初期,CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋、Th1/Th2、Th1偏高,Th2偏低的患者预后较好;治疗有效后CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋、Th1/Th2、Th1升高,Th2下降。     

系统性红斑狼疮与外周血Th1/Th2细胞平衡的相关性研究

目的 :探讨系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血淋巴细胞中Th、Tc细胞亚型比例在SLE进展中的作用。方法 :将SLE患者外周血在细胞刺激剂和蛋白质转运抑制剂作用下培养 ,以流式细胞仪检测Th细胞和Tc细胞亚型。结果 :SLE肾炎患者Th1细胞、Tc1细胞及Th1/Th2比值高于正常对照者 (P<0.05或P<0.01) ,Th2细胞较正常对照者差别无统计学意义 ;SLE患者Th1与SLE疾病活动指数 (SLEDAI)具有相关性 (P<0.05)。结论 :SLE肾炎患者Th细胞发生Th1偏移 ,Th1细胞在系统性红斑狼疮尤其是狼疮肾炎的发生和发展中具有重要作用。     

辅助性T细胞9在类风湿关节炎发病中的作用探讨

目的 探讨Th9细胞及相关细胞因子在类风湿关节炎(RA)中表达的改变及可能的机制.方法 采集20例健康人(HC)和20例RA患者(RA组)的外周血,用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-9、IL-4、转化生长因子(TGF)-β和干扰素(IFN)-γ水平;流式细胞术检测Th9细胞数;实时定量PCR检测IL-9 mRNA、转录因子PU.1 mRNA,分析这些指标可能的相互关系.结果 RA组患者外周血中CD4+ IL-9+T细胞、CD4+ PU.1 +T细胞、CD4+ IL-9+ PU.1 +T细胞均缺如.细胞因子检测:IL-9水平在HC组为(1.24±0.44)×10-9 g/L,RA组为(1.33 ±0.53)×10-9 g/L(P =0.558);IL-4水平在HC组为(8.59±4.07) ×10-9 g/L,RA组为(5.95±5.73) ×10-9 g/L(P =0.101);TGF-β水平在HC组为(1238±329) μg/L,RA组(712±254) μg/L,(P=0.00);IFN-γ水平在HC组均低于检测水平,RA患者中5例IFN-γ水平升高.HC组IL-9 mRNA表达为(0.24±0.04),RA组为(0.24±0.02) (P =0.764);HC组PU.1 mRNA表达为(0.38 ±0.02),RA组(0.13±0.02) (P =0.000).结论 RA组患者外周血促Th9分化关键细胞因子水平降低.抑制其分化关键细胞因子平有所升高,导致PU.1 mRNA表达受抑,PU.1蛋白无法合成不能支持IL-9mRNA表达.RA患者外周血不存在Th9细胞分化条件,推测循环血Th9细胞可能不参与RA发病机制.     

结核性胸膜炎患者外周血及胸水中Th17细胞和白细胞介素-17水平变化

目的 探讨结核性胸膜炎外周血和胸水中Th17细胞和白细胞介素-17(IL-17)的表达水平及临床意义.方法 初治结核性胸膜炎(结核组)患者30例和非结核性胸膜炎(胸膜炎组)20例,另选择健康体检人员(对照组)20例.采用流式细胞术和双抗体夹心免疫酶标法(ELISA)测定血清及胸水中Th17细胞的百分率及IL-17的含量.结果 结核组外周血中Th17细胞的百分比和IL-17的含量显著高于对照组和胸膜炎组(P＜0.05).结核组胸水中Th17细胞的百分比和IL-17的含量明显高于胸膜炎组(P＜0.05).结核组患者在规则治疗1、3、7、14 d时,外周血和胸水中Th17细胞的百分比和IL-17的含量均逐渐下降,外周血中TH17细胞的百分比于治疗1d时显著低于入院时水平(P＜0.05),胸水中Th17细胞的百分比于治疗3d时显著低于入院时水平(P＜0.05),外周血中IL-17的含量于治疗3d时显著低于人院时水平(P＜0.05),胸水中IL-17的含量于治疗7d时显著低于入院时水平(P＜0.05).结论 Th17/IL-17参与了结核性胸膜炎的发病机制,且与其病程发展及治疗效果密切相关.     

结核患者外周血中辅助性T细胞17及白细胞介素-17水平的变化

目的:探讨结核患者外周血辅助性T细胞17(Th17细胞)及白细胞介素-17(IL-17)水平变化及意义。方法:以结核患者98例(初治58例,复治40例)、健康对照者98例为研究对象,抽取研究对象外周血并分离外周血单核细胞(PBMC)和血浆,采用流式细胞术(FCM)检测PBMC中Th17细胞的百分率,酶联免疫吸试验(ELISA)检测血浆中IL-17水平;用灭活的结核分枝杆菌菌株(H37Rv)分别刺激结核患者和健康对照者PBMC,ELISA法检测其上清中IL-17水平。结果:与健康对照者比较,结核患者外周血Th17细胞比例[(5.2±1.8)%vs(1.8±1.4)%,P<0.05]及IL-17水平[(68.22±10.31)vs(39.81±14.58)pg/ml,P<0.01]显著增高;与初治组比较,复治组Th17细胞比例[(6.4±1.8)%vs(3.8±1.3)%,P<0.05]及IL-17水平[(85.46±9.13)vs(51.22±12.36)pg/ml,P<0.05]显著增高;结核患者血浆IL-17水平与Th17细胞的比例呈正相关(r=0.912,P<0.05);H37RV刺激结核病人和健康对照者PBMC后上清中均有IL-17的表达,且结核病人来源的表达水平更高。结论:结核患者外周血Th17细胞比例及IL-17水平增高,Th17细胞和IL-17在结核病的发生发展中发挥了重要作用。     

幼年型类风湿关节炎患儿外周血中Th1与Th2比例失衡探讨

目的：探讨JRA患儿外周血中T辅助细胞(Thl／Th2)分布状态。方法：应用三色荧光标记法流式细胞仪检测25例JRA患儿外周血中Thl和Th2的百分率，以8位择期小手术儿童作对照。结果：显示JRA患儿外周血中Th2细胞较正常人少，但Thl数目则与正常人无异。结论：Th2细胞减少，可能是JRA致病原理之一。     

类风湿关节炎患者外周血Th1、Th2和Th17细胞亚群表达比例变化的特点

目的研究类风湿关节炎（rheumatoidarthritis,RA）患者外周血中Th1、Th2和Th17细胞亚群表达比例变化,分析RA免疫学发病机制。方法运用流式细胞术检测RA患者及对照组外周血单个核细胞（PBMCs）中Th1、Th2、Th17细胞表达比例。并用酶联免疫吸附法检测RA患者及对照组血清中IFN-γ、IL-4、IL-17的浓度。结果RA患者CD4＋T细胞明显高于健康对照组（P〈0．05）;活动期RA患者Th1、Th17及其分泌的细胞因子含量明显高于健康对照组（P〈0．05）;非活动期RA患者Th17也明显高于健康对照组（P〈0．05）。结论类风湿关节炎Th1、Th2、Th17平衡改变与其疾病的活动度有关,处于活动期Th1、Th17反应增强,非活动期Th1、Th2、Th17趋于平衡。通过调节Th1、Th2、Th17平衡,有可能为RA的治疗提供一条新思路。     

布鲁氏菌病患者外周血树突状细胞、Th1／Th2细胞因子含量的检测及意义

目的：观察布鲁氏菌病患者外周血树突状细胞表型、Th1／Th2细胞含量的检测及意义。方法选取诊治的布鲁氏菌病患者50例为病例组,另选取同期进行健康体检的正常人50例作为正常组。采用Real time-PCR测定2组Th1相关转录因子T细胞表达的T盒（T-bet）、GATA连接蛋白3（GATA-3）、维A酸相关核孤儿受体γt（RORγt）、叉头蛋白3（Foxp3）及Th1／Th2细胞因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）、白介素6（IL-6）、白介素10（IL-10）mRNA含量。酶联免疫吸附实验（ELISA）测定TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10蛋白表达及补体C3、C4含量。流式细胞术测定树突状细胞表型、Th1、Th2及T淋巴细胞亚群（ CD4＋T细胞、CD8＋T细胞、NK细胞）含量。结果病例组外周血Th1细胞相关转录因子T-bet、RORγt、Foxp3及Th1细胞、Th1／Th2、TNF-α、IFN-γ含量较对照组显著降低,Th2细胞及IL-6、IL-10含量较对照组显著升高,差异有统计学意义（ P ＜0．05）;病例组CD8＋3、CD8＋0、CD8＋6阳性的树突状细胞比例、CD4＋T细胞、NK细胞及补体C3、C4含量较对照组显著降低,CD8＋T细胞含量较对照组显著升高,差异有统计学意义（ P ＜0．05）;TNF-α、IFN-γ含量与CD4＋T细胞、NK细胞、C3、C4含量呈正相关性（ r值分别为2．879、3．214、3．255和2．978, P ＜0．05）,与CD8＋T细胞含量呈负相关性（ r值分别为－3．146和－3．011, P ＜0．05）。 IL-6、IL-10含量与CD4＋T细胞、NK细胞、C3、C4含量呈负相关性（ r值分别为－2．124、－2．343、－3．423、－2．789、－2．993、－2．566、－3．758, P ＜0．05）,与CD8＋T细胞含量呈正相关性（ r值分别为3．465、3．129, P ＜0．05）。结论布鲁氏菌病患者外周血成熟树突状细胞数目减少,同时Th1／Th2细胞及相关细胞因子失衡,且与机体天然免疫和细胞免疫功能降低有关,这可能在布鲁氏菌病发生发展过程中发挥重要作用。     

呼吸道合胞病毒(RSV)与Th1/Th2细胞因子的关系研究进展

目的对感染呼吸道合胞病毒产生的Th1、Th2型细胞因子种类及其对Th1/Th2型反应平衡的影响进行综述。方法在查阅国内外文献的基础上,介绍各种细胞因子在呼吸道合胞病毒(RSV)感染中的作用、地位。结果与结论虽然到目前为止各种细胞因子在各实验中得出的结果,甚者是对于RSV感染更倾向于发生Th1型还是Th2型反应仍有争论,但Th1/Th2反应平衡在RSV治疗和开发防治药物方面仍具有重要意义。     

Th17细胞调控哮喘患者体内炎性反应的研究

目的探讨Th17细胞调控哮喘患者体内炎性反应的机制。方法以10例哮喘患者和10例健康志愿者为研究对象,分别留取外周血标本。利用流式细胞仪检测外周血中Th17细胞的比例,ELISA法检测血浆中IL-17的水平。结果 Th17细胞在哮喘组的比例(28.53±7.20)%高于对照组(14.72±2.33)%,有统计学差异(P<0.01)。IL-17在哮喘组的浓度(102.31±11.45)pg/mL明显高于对照组(59.68±8.85)pg/mL,P<0.01。结论 Th17细胞与哮喘具有相关性,可能通过分泌以IL-17为主的细胞因子来上调炎性反应,加重哮喘病情。     

康艾注射液对人结直肠癌Lovo细胞Th1/Th2类细胞因子的影响

目的 探讨康艾注射液对人结直肠癌Lovo细胞Th1/Th2状态的影响.方法 常规培养Lovo细胞,待细胞处于指数增长期再分成4组:1组为空白对照,另外3组加入不同浓度的康艾注射液.培养72h后,采用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测各组Lovo细胞培养上清中Th1类细胞因子(IL-2,IFN-γ)和Th2类细胞因子(IL-4,IL-10)的水平.结果 Lovo细胞与康艾注射液共培养后,上清液中Th2类细胞因子的含量较对照组明显降低(P＜0.05),而Th1类细胞因子在各组中的含量变化不大.结论康艾注射液可显著下调Lovo细胞Th2类细胞因子水平,具有促进其Th2向Th1逆转的倾向.     

康艾注射液对人结直肠癌Lovo细胞Th1/Th2类细胞因子的影响

Objective To explore the effect of Kang'ai injection on Th1/Th2 cytokine in human colon carcinoma cell line Lovo.Methods Lovo cells were cultured by conventional ways until they were in exponential growth phase and then divided into 4 groups:one control group and three experimental groups with different concentration of Kang'ai injection.After 72 hours culture,Th1 type cytokines (IL-2,IFN-γ) and Th2.type cytokines (IL-4,IL-10) in the culture supernatant of Lovo cells in each group were separately detected by double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorhent assay (ELISA).Results After the coculture of Lovo cells and Kang'ai injection,Th2 type cytokine levels in the supernatants were significant lower than the control group (P＜0.05),and Th1 type cytokines in each group were of little change.Conclusions Kang'ai injection markedly downregulated Th2 type cytokines in Lovo cells,and contributed to the switching from Th2 to Th1.