缺氧诱导因子-1α在乳腺癌组织中的表达及其与肿瘤血管形成的关系

目的探讨乳腺癌组织中缺氧诱导因子1α(hypoxiainduciblefactor1alpha,HIF1α)的表达及其与血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF),微血管密度(microvesseldensity,MVD)等生物学指标及临床病理因素的关系。方法采用免疫组化SP法检测乳腺纤维腺瘤、普通乳腺增生组织和乳腺癌中HIF1α、VEGF蛋白的表达,用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞并记数MVD。结果HIF1α蛋白在乳腺纤维腺瘤、普通乳腺增生组织中不表达;乳腺导管内原位癌中阳性率55%,浸润性乳腺癌中阴性率85%;乳腺癌中VEGF阳性率81.3%。乳腺癌中HIF1α表达与VEGF显著正相关(r=0.762,P<0.01),HIF1α表达与原位癌中MVD呈正相关(r=0.682,P<0.05),与浸润性癌中MVD无相关关系。结论HIF1α及其靶基因VEGF在乳腺癌组织中明显上调,与肿瘤新生血管密切相关;HIF1α表达与淋巴结转移、雌激素受体状态及组织学分级相关,提示HIF1α对乳腺癌的发生发展起重要作用。     

缺氧诱导因子-1α在胃腺癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖、凋亡的关系

目的 探讨缺氧诱导因子(HIF)-1α在胃腺癌中的表达及其对肿瘤细胞增殖、凋亡的影响和临床意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测100例胃腺癌组织中HIF-1α、Cyclin D1和bcl-2的表达.结果 随着胃腺癌分化程度的降低、浸润深度的增加及发生淋巴结转移,HIF-1α、Cycfin D1阳性表达率也增加(X2值分别为4.99、7.20、11.65、5.36、4.55、4.58;P<0.05或P<0.01);随着浸润深度的增加及发生淋巴结转移,bcl-2的表达也明显升高(值分别为6.21、7.66;P<0.05或P<0.01).胃腺癌中Cyclin D1与bcl-2表达呈显著正相关(,值为5.96,P<0.05).HIF一1α阳性表达者中Cyclin D1、bel-2的阳性表达率均明显高于其阴性表达者,HIF-1α表达与CyclinD1、bcl-2的表达明显相关(X2值分别为5.94、6.14;P均<0.05).结论 三者的检测对判断胃腺癌的浸润转移能力及预后具有重要的临床意义;胃腺癌的浸润转移在一定程度上是肿瘤细胞不断增殖和凋亡抑制的结果 ;HIF-1α在一定程度上能够诱导肿瘤细胞的增殖、抑制其凋亡而促进胃腺癌的发生发展.     

CD105和缺氧诱导因子-1α在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨CD105与缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在胃癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法对50例胃癌组织和15例正常胃黏膜组织进行染色和血管标记。结果胃癌组织中CD105标染的MVD与HIF-1α的表达均显著高于正常胃黏膜组织（P〈0.01）;两者均与浆膜浸润、淋巴结转移、淋巴结癌栓及静脉癌栓显著相关（P〈0．01）。HIF-1α蛋白高表达组与低表达组生存率的差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论CD105标染的MVD与HIR-1α的表达是与胃癌发生发展及预后密切相关的重要指标。     

125I对乳腺肿瘤组织缺氧诱导因子-1α的作用及其机制

目的 探讨125I粒子对乳腺肿瘤组织缺氧诱导因子(HIF)-1α表达水平的影响及其分子生物学机制.方法 建立人类乳腺癌MCF-7细胞株的裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤鼠随机分两组(每组10只):对照组:植入空载粒子和实验组:125I粒子植入组(0.4 mCi),瘤体长径8～10 mm时植入125I粒子,粒子植入后当对照组瘤体平均长径15～20 mm时,处死荷瘤小鼠,标本分别冻存和固定,用半定量逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印记及免疫组织化学染色方法检测HIF-1α的mRNA及其蛋白表达水平.结果 实验组中肿瘤组织及癌旁组织的HIF-1α的mRNA及其蛋白表达明显降低,与对照组比较差异有统计学意义[mRNA:q(肿瘤组织)=22.63,q(边缘组织)=19.53,P《0.01;蛋白:q(肿瘤组织)=87.54,q(边缘组织)=80.39,P《0.02;阳性细胞:q(肿瘤组织)=20.68,q(边缘组织)=16.47,P《0.01].两组正常组织中HIF-1α的表达变化不明显,差异无统计学意义(t=1.73,P》0.05).结论 125I粒子抑制乳腺肿瘤组织促肿瘤血管生长因子HIF-1α mRNA及其蛋白水平的表达.     

缺氧诱导因子-1α与前列腺癌

新血管的形成和葡萄糖转运、糖酵解的增加是实体肿瘤的两个普遍特性,肿瘤的新血管形成及肿瘤对缺氧微环境的适应与肿瘤的浸润、转移及毁坏性密切相关.     

血管瘤中缺氧诱导因子-1α的表达和血管生成的研究

目的　探讨缺氧诱导因子- 1α(HIF-1α)在血管瘤中的表达以及其和血管内皮细胞生长因子 (VEGF)、新生微血管密度 (MVD)的关系。方法　采用免疫组化SP法检测 2 8例婴幼儿血管瘤中HIF 1α、VEGF的蛋白表达和MVD。结果　 2 8例血管瘤中HIF-1α、VEGF的蛋白表达阳性率分别是6 4 % ,71.4 %。其中增生期和消退期HIF 1α阳性率分别为 87.5 %、33.3% (P <0.0 1) ,VEGF阳性率分别为 93.7%、4 1.7% (P <0.0 1) ;MVD分别为 73 4± 14 6 3、30 2± 9 1(P <0.0 1)。HIF 1α蛋白表达与VEGF成正相关 (P <0.0 1) ,HIF 1α和VEGF与MVD都成正相关 (P <0.0 1)。结论　血管瘤增生期血管内皮细胞存在着特殊的缺氧微环境 ,并通过HIF-1α表达水平提高调节VEGF等血管生成相关因子表达水平升高 ,促进了新生微血管生成     

人直肠癌组织中微血管定量分析和增殖细胞核抗原的测定

目的:本实验通过对直肠癌预后影响因素的回顾性研究,探索肿瘤预后参数与它们间关系的依据。方法:通过免疫组化技术检测43例直肠癌病人的增殖细胞核抗原(PCNA)的表达和微血管定量分析(MVC)。结果:研究发现MVC和PCNA的表达与肿瘤不同的分化程度、浸润深度、临床分期和生存时间以及是否有淋巴结转移和远处转移之间均有显著性相关(P<0.05)。应用Cox比率风险模型进行分析,浸润深度、淋巴结转移和MVC的表达均是独立的预后因素。结论:MVC、PCNA的表达与直肠癌浸润、淋巴结转移、远处转移有关,其中MVC的表达、浸润深度和淋巴结转移均是独立的有意义的预后因子,可作为预期直肠癌总体生存率的重要参数。     

乳腺癌中缺氧诱导因子-2α，微血管密度与细胞凋亡的关系

应用免疫组织化学技术和末端脱氧核苷酸转移酶介导的X-dUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测66例乳腺癌中缺氧诱导因子-2α（HIF-2α）的表达，检测微血管密度（MVD）和细胞凋亡。 结果示 66例乳腺癌HIF-2α阳性率为42.4%，其表达随病理分期的升高而增加(P<0.01)。HIF-2α的表达与乳腺癌病理分级无关（P>0.05），而与MVD呈正相关（r=0.685, P<0.01）,与肿瘤调亡指数（AI）呈负相关（r=-0.561,P<0.01）。乳腺癌MVD与AI呈负相关（r=-0.581, P<0.01）。提示在乳腺癌发展过程中，HIF-2α对肿瘤的能量代谢和新血管生成有促进作用;微血管的形成可抑制肿瘤细胞的凋亡，从而促进肿瘤的恶性进展。     

瘢痕中缺氧诱导因子-1α的表达及其与凋亡的关系

目的 探讨瘢痕内缺氧环境减轻的机制。方法 采用免疫组化法检测烧伤后肉芽、不同时期瘢痕和正常皮肤中缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α）、p53的表达，采用权重方法分别对各组瘢痕的HIF-1α、p53表达结果进行量化，分析各自规律及相互间关系。结果 随着瘢痕的成熟，HIF-1α表达强度逐渐减弱，p53表达强度在1年内逐渐增强，相互间具有负相关性（P〈0．01）。结论 p53在瘢痕成熟过程中起重要作用，HIF-1α可能通过协同p53诱导细胞凋亡，减少耗氧来减轻缺氧环境。     

血管内皮细胞生长因子与增殖细胞核抗原联合检测用于大肠癌临床预后判定

目的　探讨大肠癌血管内皮细胞生长因子 (VEGF)及增殖细胞核抗原 (PCNA)与大肠癌术后有无潜在性转移及复发的关系。方法　对 5 9例已获确诊的大肠癌石蜡标本作免疫组化SP法染色 ,检测其VEGF及PCNA的表达 ,并与 12例正常大肠组织和 16例大肠腺瘤进行比较。结果　大肠癌VEGF的表达明显高于大肠腺瘤 (P<0 .0 5 ) ;DukesA +B期大肠癌VEGF的表达与DukesC +D期比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;术后复发组VEGF的表达明显高于无复发组 (P<0 .0 5 )。增殖活性表达提示 ,大肠癌分化程度越低 ,有淋巴结或肝转移时 ,其PCNA指数增高 ;术后有、无复发者之间 ,其PCNA指数差异有显著性 (P<0 .0 5 )。结论　大肠癌VEGF与PCNA的表达与肿瘤的浸润、转移密切相关。手术时虽然无明显转移灶 ,VEGF阳性及PCNA活性增强时仍可能有潜在的转移存在。     

大鼠肝癌发生发展过程中肝组织增殖细胞核抗原动态演变规律

目的研究原发性肝细胞癌发生、发展过程中肝组织增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearanti-gen,PCNA)的动态演变规律。方法将60只SD大鼠按随机数字表法随机分为对照组(20只)和实验组(40只)。用化学致癌剂3,3′-二氨基联苯胺(3,3′-diaminobenzidine,DAB)诱发SD大鼠肝癌,采用免疫组织化学方法连续监测各时相肝组织中PCNA的表达,光镜下观察肝组织的病理变化。结果本实验的诱癌过程可分为炎性变期、增生纤维化期和癌变期3个阶段;PCNA的表达最早出现于炎性变早期汇管区的卵圆细胞中,并在汇管区呈区域性过表达分布;炎性变中期,PCNA表达阳性率达高峰,随后下降,在癌变期又升高,在整个病理演变过程中其表达具波动性。结论在致癌因素的存在下,PCNA首先表达于卵圆细胞;PCNA表达的动态演变对肝癌的发生有一定的预警作用。     

Relationship Between Microvessel Density and Thermographic Hot Areas in Breast Cancer

Purpose: This study was conducted to evaluate the validity of thermography in breast examination. Methods: We performed contact thermography and measured the direct temperature by inserting a needle-type thermometer into the tissue. The core temperature of the tumor (dTt) and the temperature of the tissue surrounding the tumor (dTs) were compared with normal tissue. The microvessel density (MVD) and the MIB-1 labeling index (MIB-1 LI) of the tumor were examined immunohistochemically. The subjects were 48 women with primary invasive ductal carcinoma. The area of the tumor was diagnosed pathologically, and the hot area was measured using thermography. Results: The dTt was significantly higher than the dTs. Both the dTt and dTs were significantly higher when the thermographical hot area was positive, or when more than four lymph node metastases were found. The dTs was correlated with MVD. A correlation between MVD and tumor temperature measured directly was also confirmed. A higher dTs was related to the dissociated wide area of the thermogram. Conclusion: These findings suggested a relationship between dTs and the high-risk group of breast cancer. We also found that abnormalities in temperature were reflected in thermography and that a higher dTs was related to the dissociated wide area of the thermogram. Received: September 13, 2001 / Accepted: July 2, 2002 Acknowledgment. We thank Dr. Junji Machi for his valuable advice in preparing this paper. Reprint requests to: T. Yahara Presented at the 101st Annual Meeting of the Japan Surgical Society, Tokyo, Japan, April 2000     

Expression of CD44, Vascular Endothelial Growth Factor, and Proliferating Cell Nuclear Antigen in Severe Venous Invasional Colorectal Cancer and Its Relationship to Liver Metastasis

(Received for publication on Jan. 5, 1999; accepted on Nov. 11, 1999)     

胸腺瘤表皮生长因子受体、增殖细胞核抗原、Bcl-2和Bax表达及临床意义

目的　探讨胸腺瘤表皮生长因子受体 ( EGFR)、增殖细胞核抗原 ( PCNA)、Bcl- 2和 Bax的表达与胸腺瘤临床病理特征的关系及临床意义。　方法　应用免疫组织化学链霉素亲生物蛋白 -过氧化酶 ( S- P)法检测 4 6例胸腺瘤患者EGFR、PCNA、Bcl- 2和 Bax的表达。　结果　胸腺瘤 EGFR阳性表达率为 71.7% ,PCNA标记指数为 4 .0 0 %± 1.87% ,Bcl- 2、Bax阳性率分别为 4 1.3 %、15 .2 %。EGFR表达与胸腺瘤 Masaoka分期、肿瘤性质有明显关系 ,EGFR阴性者术后生存率显著高于阳性者 ( P=0 .0 0 5 )。 PCNA标记指数和 Bcl- 2与胸腺瘤肿瘤性质有明显关系 ,Bcl- 2阴性者术后生存率显著高于阳性者 ( P=0 .0 0 2 )。EGFR、PCNA、Bcl- 2和 Bax表达均与胸腺瘤组织学类型、是否合并重症肌无力无明显关系。　结论　EGFR与胸腺瘤的发生、发展有关 ,可作为 Masaoka分期的补充推测预后。Bcl- 2与胸腺癌发生有关 ,可作为胸腺癌的标记物用于鉴别诊断。     

基质细胞衍化因子-1的表达及其与乳腺癌患者预后的关系

目的探讨基质细胞衍化因子-1(SDF-1)在不同细胞系及乳腺癌组织和正常乳腺组织中的表达,并分析SDF-1的表达水平与乳腺癌患者预后的关系。方法选择乳腺癌细胞系、成纤维细胞系、血管内皮细胞系,利用RT-PCR方法分析SDF-1mRNA的表达。采用免疫组织化学染色和实时定量PCR测定120例乳腺癌组织和32例正常乳腺组织中SDF-1的表达。通过SPSS统计软件对所得结果行统计学分析。结果SDF-1的表达见于人胚胎肺成纤维细胞系、某些乳腺癌细胞系(MDA-MB435s、MDA-MB436、MCF7)及乳腺癌和正常乳腺组织。淋巴结有转移者SDF-1mRNA的表达水平为399.00±210.00,淋巴结无转移者为0.89±0.47(P=0.048)。预后不良者(出现肿瘤局部复发、远处转移和因乳腺癌死亡者)较无疾病存活者SDF-1mRNA水平明显增高,为670.00±346.00vs0.83±0.35(P=0.01)。SDF-1mRNA的表达水平与患者的总存活率和无瘤存活率有关,P值分别为0.01和0.035。结论SDF-1mRNA的表达既可见于基质细胞也可见于乳腺癌细胞。SDF-1的表达水平与乳腺癌患者有无淋巴结转移、预后和存活密切相关。SDF-1可作为乳腺癌患者预后判断的一项指标。     

胃癌细胞增殖与腹腔灌洗液中端粒酶活性及腹膜转移的相关性研究

目的 研究胃癌增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）表达与腹腔灌洗液端粒酶活性及腹膜转移的相关性，并比较腹腔灌洗液中端粒酶活性和细胞学检测游离癌细胞预测腹膜转移的应用价值。方法 应用免疫组化SP法检测60例胃癌患者胃癌组织中PCNA表达，PCR—TRAP-ELISA法检测腹腔灌洗液中端粒酶活性，同时行腹腔灌洗液脱落细胞学（peritoneal lavage cytology．PLC）检测；并分析其与相关临床病理因素的关系。结果 胃癌患者腹腔灌洗液中端粒酶活性的阳性率为41．7％；与浆膜侵犯、组织学类型、浸润深度、浆膜受累面积及腹膜转移密切相关，并随着浸润深度及浆膜受累面积的增加而升高（P〈0．05）。PLC检测阳性率为25．0％；在伴肉眼可见腹膜转移灶（P1-3）者明显增高，也随着浸润深度及浆膜受累面积的增加而升高。两种方法检测的阳性率总体上差异无统计学意义。但在未分化型癌、pT1、伴肉眼可见腹膜转移灶（P1-3）者端粒酶活性阳性率明显高于PLC。PCNA增殖指数（PI）在腹腔灌洗液端粒酶活性表达阳性者明显高于表达阴性者，伴肉眼可见腹膜转移灶（P1-3）者明显高于无肉眼可见腹膜转移灶（P0）者，浆膜受侵者明显高于浆膜未受侵者（P均〈0．05）。结论 两种方法均适用于胃癌腹腔脱落癌细胞的诊断或腹膜转移的预测，端粒酶活性检测微量癌细胞的灵敏度优于PLC法检测；胃癌端粒酶活性与恶性增殖活性密切相关；胃癌高增殖活性是浆膜受侵及腹膜转移的重要原因。     

肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体受体-4在人胰腺癌组织中的表达

目的：通过检测肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体受体-4(TRAIL-R4)在胰腺癌组织中的表达，探讨胰腺癌细胞抵抗细胞凋亡的机理。方法：应用mRNA印迹法(Northern blotting)、蛋白质印迹法(Western blotting)和免疫组织化学技术，定性、定位分析TRAIL-R4在正常胰腺组织和胰腺癌组织中的表达。结果：TRAIL-R4 mRNA和蛋白在正常胰腺组织中呈弱表达或不表达，而在胰腺癌组织中呈高表达；免疫组织化学检测显示，在胰腺癌细胞中TRAIL-R4蛋白呈强染色。结论：TRAIL-R4表达水平在正常胰腺组织与胰腺癌组织中存在显著差异，提示胰腺癌细胞中可能存在对TRAIL介导的细胞凋亡抵抗新机理。     

Tiam 1与PCNA在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)和增殖细胞核抗原(PCNA)在胃癌中的表达及其与临床病理参数的关系。方法采用免疫组织化学法对60例胃癌组织及其相应正常胃黏膜组织标本进行检测。结果①Tiam1蛋白在正常胃黏膜组织中为阴性染色,但在胃癌组织中则呈阳性染色(47/60,78·33%),两者差异有统计学意义(P<0·05);②胃癌组织中PCNA蛋白标记指数(PCNALI)(57·49±14·82)显著高于正常胃黏膜组织中的PCNALI(20·74±6·13)(P<0·05);③Tiam1、PCNA蛋白表达均与胃癌组织分化程度、浸润深度、TNM分期及淋巴结转移显著相关(P<0·05),但与胃癌患者的性别、年龄及癌灶原发部位、大小无关(P>0·05);④Tiam1阳性表达胃癌组织中的PCNALI值显著高于Tiam1阴性表达者(P<0·05)。结论Tiam1和PCNA表达上调均与胃癌侵袭转移密切相关,对其进行联合检测有助于判断胃癌的生物学特性。