甲基胆蒽诱发大、小鼠胃癌的实验观察

本文作者应用甲基胆蒽5mg和2mg进行诱发大、小鼠胃癌实验,并比较了大、小鼠诱发胃癌的发生率。以巨观、镜检、钡剂造影和病理检查了胃腔、胃粘膜情况。     

应用甲基胆蒽诱发小白鼠胃癌和癌前病变的免疫学及免疫形态学研究

在进行期胃癌免疫形态学研究中看到,机体的两种免疫方式(细胞免疫和体液免疫)共同对瘤细胞进行抵抗反应。然而,对于胃癌发生发展(即正常细胞出现非正常的增生分化到不典型增生以致发展为癌)不同阶段的机体免疫状态及其之间的关系尚不清楚。本文应用甲基胆蒽诱发小白鼠胃癌及癌前病变。同时应用非特异性酸性α-醋酸荼酯染色方法(鉴别末梢血和组织中的T淋巴细胞)对上述问题做了初步探讨。在本实验中,实验组50只小白鼠诱发出8例胃癌和9例不典型增生。同时看到甲基胆蒽对T淋巴细胞免疫反应有抑制作用。在肿瘤发生发展的不同阶段,机体免疫反应出现典型波浪式改变,即在上皮细胞增生阶段T淋巴细胞免疫反应低下;在不典型增生阶段T淋巴细胞免疫反应几乎恢复到“正常”水平;在癌的阶段再次下降。本文指出,对于腺上皮细胞明显增生应给予适当的重视。机体对于诱发肿瘤的反应极似清除异物的反应。     

甲基亚硝基脲诱发鼠类T细胞淋巴瘤细胞系染色体的非随机变化

用甲基亚硝基脲(MNU,N-Nitroso-N-Methylurea)诱发雌性RF/J品系小鼠胸腺淋巴瘤细胞系,在同基因小鼠体内及体外连续传代培养的染色体变化是非随机的。这不仅说明频繁出现的多余染色体复本可能是T细胞转化过程中的关键,而且说明其他染色体的特异性变化可能促进这种细胞恶性变显性,以及特异的选择性变异组合可能导致或促进T细胞恶性变。     

20—三甲基胆蒽诱发小鼠颌下腺纤维肉瘤及其超微结构的研究

应用２０—三甲基胆蒽进行小鼠颌下腺肿瘤的诱发实验。实验动物２０只，其中有５只在给药第１０周后陆续发生肿瘤，观察时间为３．５个月。诱发的肿瘤光镜下由大小不等、分化不良的细胞构成，间质成份缺乏。电子显微镜下未见到上皮肿瘤细胞结合装置的桥粒连接，提示肿瘤来源于间叶组织，为纤维肉瘤。该实验为深入研究口腔颌面部纤维肉瘤提供了理想的动物模型。     

白细胞介素-7诱发皮肤T细胞淋巴瘤细胞JAK-3的磷酸化和活化

目的：ＩＬ７可刺激一些良性和恶性淋巴细胞增生,其中包括来自皮肤样Ｔ细胞瘤（ＣＴＣＬ）病人的肿瘤细胞。Ｊａｎｕｓ激酶家族（ＪＡＫｓ）与许多细胞因子受体的信号传导系统有关。ＪＡＫ３是ＪＡＫｓ激酶家族的新成员,其在自然杀伤细胞（ＮＫ）和活化的Ｔ细胞上表达,并在这些细胞中从功能上和物理上与白细胞介素２受体（ＩＬ２Ｒ）结合起来。为此,本研究进一步探讨白细胞介素７（ＩＬ７）引起皮肤样Ｔ细胞瘤肿瘤细胞ＪＡＫ３的磷酸化和活化。方法：ＣＴＣＬ外周血中分离的肿瘤细胞,用ＩＬ７分别处理１、５、１０、２０ｍｉｎ,蛋白裂解物用抗ＪＡＫ３抗体,抗ｐ５９ｆｙｎ抗体进行免疫沉淀,用抗ＪＡＫ３和抗磷酸化酪氨酸作Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测。结果：ＩＬ７能引起ＣＴＣＬ肿瘤细胞的ＪＡＫ３酪氨酸磷酸化,抗ｐ５９ｆｙｎ抗体能结合ＪＡＫ３,未发现ＩＬ１２能诱导ＣＴＣＬ细胞的ＪＡＫ３磷酸化。结论：提示ＩＬ７可能在ＣＴＣＬ的病理生理学上起一定的作用,且证实在ＣＴＣＬ细胞中ＩＬ７受体介导了酪氨酸磷酸化的信号传导途径。     

7，12-二甲基苯蒽诱发小鼠恶性肿瘤动物模型的建立

目的:建立7,12-二甲基苯蒽诱发小鼠恶性肿瘤模型.方法:BALB/c小鼠,经口喂服7,12-二甲基苯蒽,每次1.0 mg,每周1次,连续4周,给药后连续观察11个月后处死,取胸腺、肝脏、肾脏、脾脏、胃、生殖腺、肠系膜、盲肠、大脑等组织器官,甲醛固定后进行病理学检查及裸鼠致瘤试验.结果:给药后11个月后,BALB/c小鼠出现的肿瘤类型以肺癌和白血病为主,经病理学证实肺癌为细支气管肺泡癌,白血病为淋巴细胞型白血病,白血病小鼠肿瘤移植实验已稳定连续传代.结论:本研究建立的7,12-二甲基苯蒽诱发的小鼠恶性肿瘤动物模型是成功的.     

抗肿瘤药物诱导NK/T细胞淋巴瘤细胞株凋亡的研究

目的 探讨不同化疗方案对NK/T细胞淋巴瘤细胞株(SNK6)的抑制率,并对其可能的相关机制进行研究.方法 应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞仪检测、琼脂糖凝胶电泳检测等方法,研究不同化疗药物对SNK6细胞的诱导凋亡作用;蛋白印迹法检测自噬蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ表达,流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 作用肿瘤细胞48 h的各药物的抑制率与24 h所得的抑制率相比,差异有统计学意义(P＜0.05);作用72 h的各药物抑制率与作用48 h相比,差异无统计学意义(P＞0.05).4组化疗方案抑制率由高到低为:长春瑞滨+表柔比星、多西他赛+表柔比星、多西他赛+多柔比星、长春瑞滨+多柔比星;从实验组细胞中提取的DNA经电泳,紫外灯下可见“梯状带”.进行蛋白印迹法及流式细胞仪检测,抗肿瘤药物联合自噬抑制剂使自噬蛋白下调,细胞凋亡与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 长春瑞滨联合表柔比星诱导SNK6细胞凋亡作用最佳,3-MA抑制SNK6细胞对化疗药物保护性自噬反应,增加SNK6细胞对抗肿瘤药物细胞毒杀伤作用的敏感性.     

小鼠T细胞淋巴瘤在同基因鼠内传代的遗传学分析

作者研究了甲基亚硝基脲（ＭＮＵ）诱发ＲＦ／Ｊ系小鼠Ｔ细胞淋巴瘤及肿瘤细胞在同基因小鼠体内连续传代后的染色体变化。胸腺肿瘤细胞及其传代培养细胞染色体异常，皆发生在１５、１４、Ｘ、１、５、６、３号染色体，说明这些染色体含有促进肿瘤多步发生过程的基因即癌基因及抑癌基因。ＭＮＵ不仅具有组织特异性而且累及特异染色体，结果也说明相同组织病理类型的肿瘤可产生于不同的特定位点的基因变化。     

7,12-二甲基苯蒽/巴豆油诱发小鼠皮肤乳头状瘤过程中表皮细胞凋亡的研究

接触致癌性化学物质是皮肤癌发生的重要因素 ,目前认为 ,细胞凋亡的异常是肿瘤发生的重要机制。本研究利用 7,1 2 二甲基苯蒽 (ＤＭＢＡ) /巴豆油两步法诱发小鼠皮肤乳头状瘤模型 ,研究了化学诱癌过程中细胞凋亡及其相关基因表达的变化。1　材料与方法　　动物为健康 6～ 9周龄昆明小鼠 80只 ,按时间 0、2 1、4 2、1 4 0ｄ分为 4组 ,每组动物 2 0只 ,雌雄各半 ,小鼠皮肤乳头状瘤诱发按Ｂｏｌｌａｇ[1] 法有所改进。所有动物于实验第 1、8、1 5天背部脱毛区涂ＤＭＢＡ丙酮液 2 0 0 μｌ( 1 50 μｇ) ;第 2 1天起在相同部位涂 0 .2 5%巴豆油…     

鼻腔NK/T细胞淋巴瘤的CT诊断

目的 分析鼻腔NK/T淋巴瘤的CT征象,探讨其诊断特异性.方法 回顾性分析19例病理证实的鼻腔NK/T淋巴瘤的临床、病理及CT资料.对肿瘤范围、密度、形态边缘和骨质情况进行分析.结果 19例病理均为NK/T细胞淋巴瘤,CT表现：（1）发病部位：15例为单侧发病,4例为双侧发病;17例发生于鼻腔前部外侧壁,主要累及中下鼻甲,肿块多沿鼻甲形状蔓延生长,2例肿瘤主要位于鼻腔中后部.（2）密度：16例密度均匀,3例密度不均;增强扫描轻中度强化.（3）临近结构改变：鼻前庭皮肤受累15例,无明显骨质破坏;4例表现为鼻窦粘膜增厚或鼻窦内软组织肿块影;2例向眶内生长.结论 鼻腔NK/T细胞淋巴瘤好发于鼻腔前部的中下鼻甲,密度均匀、增强扫描轻一中度强化,很少有骨质破坏,易累及鼻前庭皮肤,根据上述CT表现特征一般诊断比较容易.     

高剂量7,12-二甲基苯并[a]蒽诱发的小鼠皮肤鳞状细胞癌模型建立及评价

目的:建立使用高剂量7,12-二甲基苯并[a]蒽诱发的小鼠皮肤鳞状细胞癌(SCC)模型,为皮肤鳞状细胞癌的预防与治疗提供实验基础。方法:将36只BALB/c小鼠随机分为3组,分别为:高剂量组(A组)、低剂量组(B组)、空白对照组(C组),造模过程中记录小鼠体重及背部皮损变化,造模后取局部皮肤组织进行HE染色及PCNA免疫组织化学染色,以PCNA阳性染色的表达水平作为反映小鼠皮肤鳞状细胞癌的恶性指标,使用Image-Pro Plus计算PCNA染色的积分光密度(IOD)和阳性面积,并对结果进行统计学分析。结果:12周时A、B两组的荷瘤数目、肿瘤体积比较有统计学差异(P<0.05),且荷瘤率分别可达83.3%、66.7%,SCC发生率分别可达75%、33.3%;免疫组织化学分析结果显示3组的IOD及阳性面积比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:相较于传统二阶法建立的小鼠皮肤鳞状细胞癌模型,本模型具有实验周期更短、成瘤率更高、操作更为简便的特点,为皮肤鳞状细胞癌的研究提供了可靠的实验基础。     

3-甲基腺嘌呤诱发HeLa细胞自噬及抑制辐照细胞自噬的双重作用

目的了解PI,K抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）对电离辐射后细胞自噬的影响,初步探讨作用机制。方法细胞增殖-毒性试剂盒CCK-8检测不同浓度3-MA处理及60Coγ射线4Gy照射或联合3-MA作用的HeLa细胞细胞生长变化和毒性,Annexin V—FITC／PI双标记检测细胞凋亡,Westernblot检测自噬相关蛋白SQSTMl／p62表达,Lipofectamine2000介导转染GFP—LC3质粒,共聚焦显微镜检测自噬体形成。结果3mmol／L以上浓度3-MA作用24h对HeLa细胞增殖有明显的抑制作用,作用更长时间产生致死毒性效应。无论是5mmol／L3-MA单独作用还是单独4Gy照射,均能诱发HeLa细胞自噬。但3-MA与（射线辐照联合作用时,HeLa细胞自噬受到抑制,细胞凋亡显著增加。结论PI3K抑制剂3-MA既诱发细胞自噬又能抑制电离辐射诱发细胞自噬,以在不同的条件下两种方式影响细胞存活。     

基因扫描分析小鼠T细胞受体CDR3谱型检测T细胞克隆技术的建立

目的 建立小鼠T细胞受体(TCR)互补决定区3(CDR3)谱型的基因扫描分析术,为分析T细胞克隆提供研究方法.方法 应用RT-PCR方法分别扩增近交系小鼠C57BL/6H-2b,Balb/CH-2d和F1代小鼠[Balb/cx C57BL/6 F1H-2d/b,CB6F1)脾脏T细胞的21个TCK Va家族和18个TCK VB家族的CDR3,并用基因扫描分析扩增产物以确定T细胞的克隆性.结果 3种小鼠脾脏T细胞均表达所有的TCR Vα和Vβ CDR3基因,基因扫描显示全部TCK CDR3谱型呈高斯(钟型)分布,提示均为多克隆T细胞.各家族CDKs基因表达频率接近,但呈现不同的多态性和长度分布.结论 基因扫描分析TCR.αβ CDR3基因谱型是检测小鼠T细胞克隆性的精确敏感方法.     

n⁃3多不饱和脂肪酸对NOD小鼠T细胞的免疫调节作用

目的：探讨n?3多不饱和脂肪酸（n?3 poly unsaturated fatty acid,n?3 PUFA）对NOD小鼠T细胞免疫学功能的影响。 方法： 野生型Balb/c小鼠和已出现典型的Ⅰ型糖尿病症状的NOD小鼠脾 细胞,磁珠分选后获得小鼠CD4+ T细胞,将其分 为4组：野生型 鼠为Wild type组;NOD小鼠分为未处理组、二十二碳六烯 （docosahexaenoic acid,DHA）处理组、二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）处理组。DHA、EPA处理24h,PMA和Ionomycin刺激活化后,采用CCK?8法检测T细胞增殖 流式细胞仪检测Th1/Th2极化、ELISA法检测T细胞细胞因子的分 水平变化。结果：DHA、EPA对T细胞增殖具有显著抑制作用,促 NOD小鼠Th2细胞分化,抑制Th1细胞分化,经ELISA检测,DHA EP 能够抑制T细胞IL?6、IL?17的分泌。结论：n?3多不 饱和脂肪酸 过抑制T细胞增殖,平衡Th1/Th2比例和抑制IL?6、IL?17的分泌对NOD小鼠的T淋巴细胞起到免疫抑制作用。     

2-羟基-3-甲基蒽醌诱导结肠癌细胞凋亡机制的研究

目的 探讨2-羟基-3-甲基蒽醌(HMA)对结肠癌HCT116和HT-29细胞生长的抑制的影响及其可能的机制。方法 通过TCMSP数据库检索分析HMA的作用靶点。体外培养结肠癌细胞HCT116和HT-29,并给予不同浓度的HMA干预,通过CCK-8、台盼蓝计数、集落形成和Annexin V/PI双染法检测HMA对结肠癌细胞活力、生长、存活能力及凋亡的影响,Western blot法检测HMA对潜在靶点及凋亡调节蛋白表达的影响。结果 TCMSP检索分析得到HMA存在于白花蛇舌草、半枝莲和巴戟天中药,含有32个潜在靶点,其中包含凋亡相关基因Caspase-3。不同浓度的HMA干预结肠癌细胞可抑制细胞活力、细胞生长、集落形成数量,同时诱导细胞凋亡。Western blot结果显示,HMA可下调抗凋亡基因Bcl-2,上调促凋亡基因Bax,促进凋亡相关蛋白cleaved Caspase-9和cleaved Caspase-3蛋白的活化、剪切,从而促进细胞凋亡。结论 HMA对大肠癌细胞有抑制生长和诱导凋亡的作用,可能是通过调控Bcl-2、Bax和cleaved Caspase-9和cleaved ...     

逆转录病毒转染的小鼠IL－3基因在NIH／3T3细胞中的表达

将小鼠白细胞介素３（ＩＬ－３）ｃＤＮＡ重组到逆转录病毒载体ｐＮ２Ａ质粒上，用电穿孔法将此重组子转染包装细胞系（ＰＡ３１７），经用Ｇ４１８（ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ）选择培养基筛选，得到产病毒效价为每ｍｌ５×１０４～２×１０５ＣＦＵ（ｃｏｌｏｎｙ－ｆｏｒｍｉｎｇｕｎｉｔ）的Ｇ４１８抗性细胞克隆。然后取其培养上清液转染ＮＩＨ／３Ｔ３细胞。通过检测被病毒转染的ＮＩＨ／３Ｔ３细胞培养上清液对小鼠骨髓细胞的增殖反应（ＭＴＴ法）和促分化作用（ＣＦＵ培养法），表明转染的ＮＩＨ／３Ｔ３细胞克隆能分泌ＩＬ－３。此结果为进行ＩＬ－３转基因治疗研究奠定了实验基础。     

煤尘抽提物诱发BALB/3T3A31-1-13细胞系形态转化的研究

本文用 BALB/3T3 A31-1-13细胞系研究了煤尘抽提物的转化活性。亚硝化和未亚硝化的煤尘抽提物都能诱发细胞发生转化且有剂量反应关系.但亚硝化煤尘抽提物的转化活性比未亚硝化者高。从转化集落分离出来的细胞具有赘生转化的一些特征,如细胞生长迅速、接触抑制消失和停泊不依赖性生长等.本文结果看来支持煤矿工胃癌高发原因的煤尘假说。     

T细胞免疫球蛋白与黏蛋白结构域蛋白-3对2型糖尿病患者T细胞的影响

目的:探讨T细胞免疫球蛋白与黏蛋白结构域蛋白-3对2型糖尿病患者T细胞的影响.方法:本研究选取2017年1月至2019年12月在本院的内分泌科就诊的72例2型糖尿病患者作为糖尿病组,并选取同期进行健康体检者55例作为对照组;比较两组患者T细胞中TIM-3的表达情况,比较两组患者T细胞分泌细胞因子相对量.进一步比较通过抗...