胸水军团菌抗体检测的探讨—附军团菌肺炎合并胸水一例报告

我们应用试管凝集法及酶联免疫吸附试验方法检测了５０例非军团菌感染病人胸水中嗜肺军团菌１、６型抗体及病人血清中相应抗体。发现在这些普通病人胸水中也存在一定的嗜肺军团菌抗体滴度，并计算出这些抗体的９９％上限滴度（Ｘ＋２．３２６Ｓ）。为今后检测嗜肺军团菌感染病人的胸水提供了一个参比对照指标。实验后期，我们检测了一例军团菌肺炎病人，其胸水中Ｌｐ１型抗体滴度远远超过了该上限值，并高于其自身血清中相应抗体。     

应用聚合酶链反应（PCR）快速检测痰中嗜肺军团菌（Lp）

1989年国外研究者首次报道了应用PCR检测Lp。因PCR技术具有简便、快速、敏感和特异的特点,所以人们非常看重这一新的生物学技术在检测军团菌方面的应用。此后,一些研究者应用PCR技术分别检测和鉴定了不同标本中的军团菌。本实验室所做的是应用PCR直接检测痰中的Lp,同时把痰标本做常规培养。现把结果报告如下。     

上海奉贤区公共场所嗜肺军团菌污染状况调查

目的 应用PCR技术对奉贤地区部分公共场所空调冷却塔水及其他环境(淋浴设施等)进行军团菌污染状况调查.方法 于2010-05和2010-10,分别采集中央空调冷却塔水样品及环境样品用聚合酶链(PCR)对其进行嗜肺军团菌检测,同时用常规法进行分型鉴定.结果 采集的125份样品中,PCR法检出嗜肺军团菌45份,阳性检出率为36％,水样检出率远高于环境(分别为67.19％和3.28％).在检出的59株军团菌中共鉴定出6种不同菌型,其中LP1为重点菌型,占50.85％.且在同一样品中检出不同菌型有2株以上的占35.29％.结论 奉贤地区中央空调冷却塔及环境中存在军团菌污染.     

军团菌的流行病学及检测技术研究进展

军团菌是一种常见的革兰氏阴性致病菌,广泛存在于天然淡水和人工水环境中,可导致非典型肺炎。世界多个国家和地区均有军团菌病（LD）的报道,培养分离获得军团菌菌株是确定军团菌感染的金标准。人感染军团菌主要是通过吸入被军团菌污染的气溶胶和污染水导致。目前检测方法多采用聚合酶链式反应（PCR技术）辅以尿抗原检测来确定是否感染军团菌。随着我国经济的快速发展,各种排水管道、空调、加湿器等大量使用,为军团菌的滋生创造了良好环境,增大了LD的发病率。加强饮水系统和室内空调系统的卫生管理,对有效地控制军团菌的传播途径十分必要。本文就军团菌病的流行病学、检测技术和预防控制等方面的进展作一综述。     

小儿军团菌病的快速检验及临床特征

目的:探索快速准确的诊断军团菌感染的方法,了解儿童军团菌感染的临床特点。方法:根据嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强子(m ip)基因建立一种检测嗜肺军团菌(LP)PCR方法,用该方法对65例呼吸系统炎症患儿的痰及咽拭子进行PCR检测,用传统血清学TAT方法检测嗜肺军团菌各型抗体。结果:嗜肺军团菌1~14型均扩增出628 bp的特异性片段,而非嗜肺军团菌LM及肺炎球菌均未见扩增片段;敏感性为2.1 pg/μl的嗜肺军团菌DNA。65例临床标本中6例扩增出628 bp的基因片段,阳性率为9.23%,其中4例应用TAT方法检测Lp抗体也为阳性。此6例患儿临床均为肺炎。结论:①利用嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强子(m ip)基因建立的检测嗜肺军团菌PCR方法特异性高,敏感性强,适用标本范围广,在嗜肺军团菌早期诊断中有一定价值。②在儿科呼吸系统感染性疾病中,存在嗜肺军团菌感染,在本资料中,65例呼吸道感染患儿,PCR方法检出6例,嗜肺军团菌感染阳性率为9.23%,而TAT方法检出4例,阳性率为6.15%。说明PCR方法敏感性高于TAT方法。③嗜肺军团菌感染在临床常表现为以重症肺炎、难治性肺炎为主的全身性感染,临床表现不典型,易误诊、漏诊,应引起儿科医师的警惕与重视。     

南京市部分公共场所军团菌污染状况的研究

目的军团菌是一种广泛存在于自然界中的机会性致病菌,公共场所是该病的易发场所。为了解和分析南京市公共场所环境中军团菌的污染情况,对南京市部分酒店、医院及商场中环境样品中军团菌的检出率进行调查。方法从医院、商场及酒店分别采集水、土壤和积尘样品,同时用培养法和PCR法检测军团菌。采集公共场所工作的从业人员以及医院肺炎患者的尿样和血清样本,分别进行抗原或抗体检测。用血清凝集法进行血清型的鉴定。结果冷却水中军团菌的检出率为100%,淋浴水和自来水军团菌的检出率较低,为10%。土壤样品中用PCR法在酒店背景土、酒店风管积尘土以及商场风管积尘土各检出军团菌,检出率为10%。气溶胶样品中只有在医院冷却塔内采集的样品中培养出军团菌,但PCR法均检测到军团菌。军团菌的血清型包括LP1、LP6和Lb。结论在公共场所的水、土壤、尘土和空气中均能检测到军团菌,提示我国公共场所中存在军团菌的感染风险,建议加强公共场所军团菌的监测和消毒。     

南京市部分公共场所军团菌污染状况的研究

目的军团菌是一种广泛存在于自然界中的机会性致病菌,公共场所是该病的易发场所。为了解和分析南京市公共场所环境中军团菌的污染情况,对南京市部分酒店、医院及商场中环境样品中军团菌的检出率进行调查。方法从医院、商场及酒店分别采集水、土壤和积尘样品,同时用培养法和PCR法检测军团菌。采集公共场所工作的从业人员以及医院肺炎患者的尿样和血清样本,分别进行抗原或抗体检测。用血清凝集法进行血清型的鉴定。结果冷却水中军团菌的检出率为100%,淋浴水和自来水军团菌的检出率较低,为10%。土壤样品中用PCR法在酒店背景土、酒店风管积尘土以及商场风管积尘土各检出军团菌,检出率为10%。气溶胶样品中只有在医院冷却塔内采集的样品中培养出军团菌,但PCR法均检测到军团菌。军团菌的血清型包括LP1、LP6和Lb。结论在公共场所的水、土壤、尘土和空气中均能检测到军团菌,提示我国公共场所中存在军团菌的感染风险,建议加强公共场所军团菌的监测和消毒。     

酒店浴室花洒头上检出嗜肺军团菌的报告

目的 了解上海市奉贤区部分公共场所环境中军团菌的污染状况,为军团菌病的预防控制提供依据.方法 采集该区使用集中式空调系统的大型酒店及超市的环境样品共80份进行军团菌检测,将聚合酶链反应(PCR)技术和常规方法结合,样品先进行PCR检测,阳性样品再进行常规分离和鉴定.结果 从某酒店的浴室花洒环节标本中检出2株嗜肺军团菌.结论 环境中有嗜肺军团菌存在,易受到感染,存在隐患.     

194例糖尿病病人军团菌感染情况调查

军团病 (Ｌｅｇｉｏｎｎａｉｒｅｓ＇Ｄｉｓｅａｓｅ，ＬＤ)是由军团菌引起的以呼吸症状为主 ,伴发全身中毒症状的细菌性疾病。目前已命名的３９种６１个血清型军团菌中 ,以嗜肺军团菌(ＬｅｇｉｏｎｅｌｌａＰｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ，ＬＰ)报道最多。针对糖尿病病人抗感染能力降低 ,常易并发化脓性感染、尿路感染、肺结核等［１］ ,我们对１９４例糖尿病病人军团菌感染情况进行调查 ,现报告如下。１调查及检测方法１．１调查对象南宁市各医院抽检的１９４份糖尿病病人血清 ,其中男性病人１０５人 ,女性病人８９人。１ .２检测方法采用试管凝…     

淋浴热水军团菌传统培养与实时荧光PCR技术的应用

目的利用传统的检验方法与实时荧光PCR技术相结合检测军团菌。方法按照卫生部《公共场所集中空调通风系统卫生规范附录A》(2006)的要求,于2010年10月—2011年12月,对深圳市6家宾馆酒店86件淋浴热水进行军团菌检测。采用传统细菌分离培养法进行分离鉴定,采用实时荧光PCR法加以验证。结果在86件淋浴热水中,20件检出嗜肺军团菌,嗜肺军团菌阳性率为23.3%,其中,Lp1、Lp3、Lp6血清型分别占65%,10%,25%;实时荧光PCR法鉴定出1件淋浴热水为非嗜肺的军团菌属。结论深圳市宾馆酒店淋浴热水存在军团菌的污染;传统的检验方法与荧光PCR技术的检测结果具有较高的一致性。     

嗜肺军团菌的银加强滴金免疫法测定

嗜肺军团菌（Legionella pneumophilla，Lp）是军团菌属（Legionella）的代表种。该菌为兼性细胞内致病菌，主要感染肺组织。由于发病症状和体征没有特异性，很难与普通肺炎相鉴别，而难以诊断。分离培养是军团菌检测的金标准，但培养条件苛刻。因此，建立军团菌的快速检测方法具有重要的现实意义。目前，嗜肺军团菌的快速检测主要是基于PCR的方法和血清学方法。PCR方法特异性强，快速，但需要昂贵的仪器（PCR仪），影响在基层的应用普及；血清学方法如ELISA、RIA等多为操作繁琐，费时费力。针对以上不足。本实验室建立一套嗜肺军团菌的滴金免疫测定法（dot immunogold filtration assay，DIGFA）。现报告如下。     

太原市健康人群军团菌感染菌型分布特征的研究

为了解太原地区军团菌感染的菌型分布特点及优势种型，作者用ＥＬＩＳＡ法分别对太原市三城区、一郊区的部分人群进行了９种１５型军团菌ＩｇＧ抗体的检测，结果军团菌各种型均有阳性出现，所调查的人群以嗜肺军团菌感染为主，Ｌｐ１尤著，非嗜肺军团菌抗体阳性率较低，其中Ｌａ感染者较多。优势种型城区与城区间及城区与郊区间有所不同，嗜肺军团菌在城区的感染菌型主要是Ｌｐ１，郊区则是Ｌｐ４；非嗜肺军团菌在南城、北城及河西区分别以Ｌｊ、Ｌｇ及Ｌａ抗体阳性率为高，而郊区Ｌａ、Ｌｂ抗体阳性率稍高，未见Ｌｊ感染者     

中央空调系统军团菌污染状况的实验研究

[目的]了解安徽省马鞍山市商场、宾馆、办公楼、医院4类场所中央空调系统军团菌污染状况。[方法]随机采集冷却塔水、管道水、冷凝水、涂抹样并进行细菌培养和鉴定,再以PCR方法加以验证。[结果]135份样品中分离出75株军团菌,49株为嗜肺军团菌血清1型Lp1,26株为嗜肺军团菌血清10型Lp10。[结论]安徽省马鞍山市中央空调系统军团菌污染情况较为严重,需要引起重视以防军团菌病的暴发流行。     

荧光定量PCR在军团菌监测中的应用

目的发展一种敏感、快速、特异的检测军团菌的方法,并与运用常规的细菌培养方法所检测结果相比较。方法分别用传统的细菌培养法和以鉴定嗜肺军团菌种水平的mip设计引物的荧光定量PCR方法对68份公共场所中央空调的冷却塔水、客房热水、冷凝水进行检测,通过检测结果比较,评价该方法在实际工作中的应用。结果传统的细菌分离培养共有20份军团菌培养阳性,阳性检出率为29.4%,而以Mip基因为引物,对68份浓缩后的水样进行荧光定量PCR扩增共检出32份为嗜肺军团菌阳性,阳性检出率为47.1%,且细菌分离培养阳性的标本荧光定量PCR均阳性。结论荧光定量PCR法检测阳性率明显高于细菌培养法,且快速、敏感、特异;值得在疾病监测筛查检验中推广应用。     

大连地区不同人群军团菌感染的比较研究

笔者采用微量凝集试验对３００名健康献血员、１２０名非肺炎免疫功能低下的住院病人及１５８名（７４名双份血清）肺炎病人血清三种（１０型）军团菌抗体进行了检测。结果表明，大连地区存在所测三种（１０型）军团菌感染。三组人群各型之间抗体阳性率及ＧＭＴ均有显著性差异，均以Ｌｐ６最高，Ｌｐ１、Ｌｐ８次之。Ｌｐ１、Ｌｐ２、Ｌｐ６、Ｌｐ８抗体阳性率及ＧＭＴ在三组人群之间有显著性差异，肺炎组最高，非肺炎免疫功能低下组次之。提示大连地区军团菌感染以Ｌｐ６、Ｌｐ１、Ｌｐ８为优势种型，人群中隐性感染、亚临床感染和军团菌肺炎同时存在。     

山西省部分健康人群血清军团菌抗体检查

目的：了解山西地区军团菌感染的菌型分布特点和优势种型，为扩大军团菌监测范围和加强军团菌病防治提供新依据。方法：采用微量凝集试验对336名健康献血员和门诊体检者进行了9种血清型军团菌抗体测定。结果：所测军团菌各型均有阳性出现，呈出现感染多型性特征，Lp1阳率最高（9．68％），非嗜肺军团菌抗体以Lc(7.43%),Lmic(6.79％）和Lmic-T(5.21%)为我省感染流行的的优势种型。结论：山西健康人群普遍存在不同程度和不同种型的军团菌感染，临床诊断时应以超过当地正常滴度上限为标准。     

呼吸道感染病人军团菌抗体水平调查

军团菌病是近20年来新发现的传染病之一，主要由嗜肺型军团菌引起。据世界卫生组织报道，军团菌是肺部感染的重要病原体之一，其引发的肺炎占9．5％～29％。军团菌病主要有两种不同的综合征表现：一是可能致命的全身多系统的疾病，又称军团病，包括肺炎；二是自限性的类流感症状，又称Pontiac热。由于缺乏军团菌感染的临床警惕性，常常导致误诊。2002～2003年笔者对上海地区进行了军团菌血清学调查，以期了解各种人群军团菌感染状况及其主要血清型别。     

多重PCR快速检测空调冷却塔水中军团菌

目的 传统的方法分离培养军团菌，时间长，价格贵，培养较困难，本文建立多重PCR方法，快速检测空调冷却塔水中军团菌属和嗜肺军团菌种。方法 利用军团菌属保守基因片段16SrRNA和嗜肺军团型菌巨噬细胞感染增强因子（mip）基因序列的特异性引物，对空调冷却塔水样中分离的疑似军团菌株进行特异性扩增，并且为了增强敏感性，运用递减温度PCR扩增。结果：PCR扩增的阳性结果与生化培养和血清学鉴定为军团菌的菌株结果—致。结论：与传统的分离培养方法相比，多重PCR方法检测军团菌，快速敏感，成本低，具有较好的特异性。     

广东新会地区公共环境冷却塔水系军团菌污染状况调查

目的查明广东新会地区公共环境冷却塔水系军团菌分布状况,为预防和控制军团菌病暴发流行提供依据。方法自2004-2006年8～10月,在新会区各大宾馆、饭店、学校、医院和公共娱乐场所共采集中央空调冷却塔水样112份,进行军团菌分离培养和PCR快速鉴定。结果在新会区采集的112份公共环境中央空调冷却塔水样中分离培养检出嗜肺军团菌26株,检出率23.2%;PCR直接检测嗜肺军团菌(LP-DNA)阳性57份,阳性率50.9%。结论在广东新会地区环境水源中嗜肺军团菌污染具有普遍性,PCR检测嗜肺军团菌是一种快速、敏感、特异性良好的检测法。     

肝硬化患者军团菌感染的调查研究

目的 调查肝硬化合并军团菌的感染情况，引起临床医师的高度重视。方法 对5种10型军团菌用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IgM抗体。结果 肝硬化合并军团菌感染率最高，为43．04％，与其他组比较差异显著，肝硬化合并军团菌感染者与非感染者临床特征比较，相对缓脉、发热、腹泻、血钠、血磷差异显著。结论 肝硬化患者是军团菌感染的高危人群，应将军团菌IgM抗体检测作为肝硬化患者的常规检查，以便指导临床治疗。