他克莫司对原发性膜性肾病患者B淋巴细胞及T淋巴细胞亚群的影响研究

目的：探究他克莫司对原发性膜性肾病患者B淋巴细胞及T淋巴细胞亚群的影响。方法：将2020年7月—2021年12月清远市人民医院的80例原发性膜性肾病患者根据随机数字表法分为对照组40例和观察组40例。对照组采用环磷酰胺联合泼尼松进行治疗,观察组则采用他克莫司联合泼尼松进行治疗。比较两组总缓解率、治疗前后血清白蛋白、24 h尿蛋白定量、血脂、B淋巴细胞亚群(CD19⁺及CD20⁺)及T淋巴细胞亚群(CD4⁺、CD8⁺及CD4⁺/CD8⁺)指标。结果：观察组的总缓解率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组血清白蛋白、24 h尿蛋白定量、血脂、B淋巴细胞亚群及T淋巴细胞亚群指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05),治疗1、3个月后两组血清白蛋白及CD8⁺指标均较治疗前升高,且观察组上述指标均显著高于对照组,两组24 h尿蛋白定量、血脂、B淋巴细胞亚群、CD4⁺及CD4^+<...     

CBCT下热塑膜联合乳腺托架固定对乳腺癌保乳术后调强放疗中摆位误差的影响

目的：探究锥形束CT(CBCT)下热塑膜联合乳腺托架固定在乳腺癌保乳术后调强放疗(IMRT)中的应用价值。方法：选取2019年1月—2020年6月本院放疗科收治的96例乳腺癌保乳术后拟行IMRT患者，以随机数字表法分为两组，各48例。热塑组CBCT下采用热塑膜联合乳腺托架固定，真空组采用真空垫联合乳腺托架固定。对比两组摆位方向偏差(X轴、Y轴、Z轴)、平移旋转偏差[俯仰反向RX(PITCH)、左右旋转方向(YAW)、滚动方向(ROLL)]、放疗前后细胞免疫功能指标[淋巴细胞(CD3⁺、CD4⁺)、CD4⁺/CD8⁺]水平及不良反应发生情况。结果：热塑组X轴、Y轴、Z轴方向偏差小于真空组，差异具有统计学意义(P<0.05);热塑组PITCH、YAW均小于真空组，差异具有统计学意义(P<0.05);放疗后热塑组CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺高于真空组，差异具有统计学意义(P<0.05);热塑...     

环孢素联合醋酸泼尼松治疗抗M型磷脂A受体阳性膜性肾病的效果

目的：探讨环孢素(CsA)联合醋酸泼尼松治疗抗M型磷脂A受体(PLA2R)阳性膜性肾病(MN)的效果。方法：选取106例PLA2R阳性的MN患者作为研究对象,按随机数字表法分为对照组和观察组,各53例。对照组给予醋酸泼尼松片联合环磷酰胺(CTX)治疗,观察组给予醋酸泼尼松片联合CsA治疗。比较两组临床疗效、肾功能、T淋巴细胞亚群功能、不良反应。结果：观察组的总有效率为92.45%,高于对照组的77.36%(P<0.05)。治疗前,两组的肾小球滤过率(eGFR)、血清肌酐、24 h尿蛋白定量、白蛋白(ALB)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗6个月后,观察组的血清肌酐、24 h尿蛋白定量、NGAL低于对照组,eGFR、ALB高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组的CD3⁺、CD4⁺/CD8⁺、白介素(IL)-17、肿瘤细胞因子(TNF)-α比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗6个月后,观察组的CD3⁺     

内界膜翻转填塞与内界膜剥除在高度近视黄斑裂孔性视网膜脱离中的应用

目的 探讨高度近视MHRD患者的治疗方法。方法 将80例高度近视MHRD患者以手术方式的不同分成两组,各40例。两组均行玻璃体切除术,A组联合内界膜翻转填塞术,B组联合内界膜剥除术。对比两组黄斑裂孔闭合率、视网膜复位率、视力恢复及眼压变化情况。结果 A组黄斑裂孔闭合率高于B组(χ²=5.17,P=0.023);两组视网膜复位率、logMAR BCVA下降幅度及高眼压发生率比较无统计学意义(P>0.05)。结论 在高度近视MHRD患者治疗中,采用玻璃体切除+内界膜翻转填塞手术、玻璃体切除+内界膜剥除术均可有效促进视网膜复位以及视力恢复,但前者可有效提升黄斑裂孔闭合率,可预防视网膜再脱离。     

弥漫大B细胞淋巴瘤患者化疗前后免疫功能变化的临床意义

目的 探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者化疗前后免疫功能水平变化情况。方法 选择60例初治DLBCL患者为研究组,另选择60名同期健康体检者为对照组,采用流式细胞仪检测研究组及对照组的T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞群、NK细胞的水平,对比分析两组化疗前后上述各指标的临床意义。结果 (1)研究组化疗前T淋巴细胞亚群中CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺及NK细胞水平明显低于对照组,CD8⁺水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而化疗后CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺及NK细胞水平较化疗前明显改善(P<0.05)。(2)化疗前,化疗有效组CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺及NK细胞水平明显高于化疗无效组,CD8⁺水平低...     

低能量激光对衰老牙周膜干细胞增殖和成骨分化功能的影响

目的 探究不同照射强度的低能量激光(low-level laser therapy, LLLT)对衰老牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells, PDLSCs)增殖和成骨分化功能的影响。方法 将PDLSCs分为yPDLSCs组(年轻组,15～25岁,男3例,女3例,共10颗牙)和aPDLSCs组(老年组,40～55岁,男3例,女3例,共8颗牙)。待上述两组PDLSCs长至80%左右融合率时将细胞分为5组：yPDLSCs组(年轻组)、aPDLSCs对照组(老年对照组)、aPDLSCs 4 J/cm²组、aPDLSCs 8 J/cm²组和aPDLSCs 16 J/cm²组,yPDLSCs组和aPDLSCs对照组不予以激光照射,其余3个实验组分别以4,8,16 J/cm² LLLT处理aPDLSCs细胞,隔天照射1次,每次照射20 s,共照射3次。克隆形成实验检测各组细胞的增殖能力。茜素红染色检测各组细胞成骨结节形成量,碱性磷酸酶(ALP)活性检测细胞ALP活性。RT-...     

反复肺炎患儿肠道菌群与免疫功能指标变化及相关性研究

目的:探讨反复肺炎(RP)患儿肠道菌群与免疫功能指标变化及两者的相关性。方法:选取RP患儿52例为RP组，选取急性肺炎(AP)患儿52例为AP组，选取体检健康儿童52例为对照组。比较三组肠道菌群数量、双歧杆菌和大肠杆菌比值(B/E)、T细胞亚群(CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺)、免疫球蛋白A(IgA)、IgG以及IgM水平。采用Spearman法分析RP患儿肠道菌群、B/E值与T细胞亚群、IgA、IgG、IgM水平的相关性。结果:RP组双歧杆菌数量、乳杆菌数量和外周血CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺、IgA、IgG以及IgM水平低于AP组及对照组，且AP组低于对照组(均P<0.05)。RP组大肠杆菌数量和外周血CD8⁺水平高于AP组及对照组，且AP组高于对照组(均P<0.05)。大肠杆菌数量与CD4⁺/CD8     

改良猪小肠黏膜下层可吸收膜在兔下颌骨缺损早期愈合中的作用

目的:建立两种尺寸兔下颌骨骨缺损模型,研究改良猪小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)可吸收膜在骨缺损早期愈合中的屏障作用。方法:将12只新西兰大白兔随机分组,于双侧下颌骨各制备一个深度均为2 mm、直径为5 mm或8 mm的A、B两种圆形骨缺损,并分别给予以下处理:覆盖SIS膜(简称S)、覆盖Bio-Gide膜(简称G)和不做任何处理(简称O), 得到AS、AG、AO、BS、BG和BO共6组(n=4)24个样本。术后4周取材,进行大体、微型CT(Micro-CT)和组织学观察,采用单因素方差分析法对数据进行统计学分析,评估各组骨缺损早期愈合的情况。结果:大体标本观察显示术后4周SIS膜完整,未见明显降解,Bio-Gide不完整,与周围组织融合;AS、BS和AG三组中屏障膜均平整覆盖于骨面,下方骨质较硬,BG组Bio-Gide向中央凹陷,下方骨质相对松软;AO、BO两组骨面明显凹陷,有大量纤维结缔组织。Micro-CT三维重建图显示,AS、BS、AG和BG四组均可见大量新生骨小梁,BG组中央凹陷区新生骨小梁稀疏,AO、BO组仅在缺损底部有少量新生骨小梁。Micro-CT定量结果显示,AS组骨体积分数(new bone percentage,BV/TV)(39.10%±0.79%)和骨密度(bone mineralized density,BMD)[(517.73±11.22) mg/cm ³]显著高于AO组[26.67%±1.12%,(319.81±8.00) mg/cm ³,P<0.05],但与AG组[38.15%±0.91%,(518.65±7.48) mg/cm ³]差异无统计学意义(P>0.05)。BS组BV/TV(34.90%±1.35%)和BMD[(409.09±8.14) mg/cm ³]显著高于BO组[23.63%±2.07%,(171.00±16.24) mg/cm ³,P<0.05],但与BG组[33.40%±1.06%,(412.70±8.6) mg/cm ³]差异无统计学意义(P>0.05)。组织学观察显示,AO和BO组有大量脂肪空泡,仅有少许散在新生骨组织,相对稀疏,未形成岛状,与天然骨组织界限清楚。AS和AG两组可见大量新生骨组织形成,骨小梁呈岛状,表面衬有成排的成骨细胞,可见血管形成,与周围自体骨组织界限不清。BS和BG组也可见大量新生骨组织,但较AS、AG组稀疏,与周围自体骨组织界限清晰。结论:在下颌骨骨缺损早期愈合中,SIS可吸收膜和Bio-Gide可吸收膜均发挥良好的屏障作用,其效果无明显差异,但本实验中SIS膜在一定程度上对于下颌骨缺损修复空间的维持能力更好。     

IL-15与NK细胞在不明原因复发性流产中的临床意义

目的:探讨外周血白细胞介素(IL)-15与自然杀伤(NK)细胞亚群水平的表达和不明原因复发性流产(URSA)的关系,及其诊断URSA的价值。方法:以57例URSA患者为观察组,同期入院体检无不良孕产史的57例健康早孕者为对照组;酶联免疫法检测两组血清孕酮、绒毛膜促性腺激素β(HCG-β)、IL-15、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)及趋化因子配体5(CCL5)水平,流式细胞仪检测两组NK细胞水平;分析IL-15与NK细胞亚群的相关性及诊断URSA效能。结果:观察组血清孕酮及HCG-β水平低于对照组(P<0.05),观察组IL-15水平高于对照组(P<0.05)。观察组NK细胞CD56⁺CD16⁺型高于对照组(P<0.05),NK细胞CD56⁺ CD16^-与CD56^- CD16⁺型观察组低于对照组(P<0.05)。外周血IL-15水平和NK细胞CD56⁺CD16⁺...     

腹腔注射鸡卵白蛋白对小鼠呼吸道致敏模型的影响

目的 探讨腹腔注射鸡卵白蛋白(ovalbumin, OVA)及OVA联合免疫佐剂对小鼠呼吸道接触OVA引起的致敏作用的影响。方法 将BALB/c小鼠分为空白对照组、阴性对照组(腹腔注射生理盐水)、OVA组(腹腔注射OVA)、OVA+Al(OH)₃组[腹腔注射OVA和Al(OH)₃],每组8只。腹腔注射后第12天，除空白对照组，其余3组小鼠气管滴下OVA,连续3 d,第15天用流式细胞仪测定肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage, BAL)和肺纵膈淋巴结(mediastinal lymph node, MLN)中的免疫细胞(CD45⁺细胞)数目，中性粒细胞(Gr1⁺细胞)、T细胞(CD3⁺细胞)、B细胞(CD19⁺细胞)以及CD4⁺T细胞中调节性T细胞(CD25⁺Foxp3⁺细胞)的百分比。结果 与空白对照组相比，气管滴下OVA后，阴性对照组、OVA组和OVA+Al(OH)<...     

异体恒河猴视网膜色素上皮细胞移植探讨

目的 观察供体视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)在视网膜下腔生长情况,为视网膜色素上皮细胞移植的临床应用提供实验基础.方法 体外获取恒河猴视网膜色素上皮细胞经传代培养至第3代,用5-溴脱氧尿嘧啶标记后经外路将供体色素上皮细胞移植到受体恒河猴视网膜下腔,用光镜和电镜观察移植细胞的存活情况.结果 供体细胞在受体视网膜下腔形成有极性的单细胞层,贴附于Brueh膜上,并形成微绒毛和基底内褶,细胞内可见吞噬体.结论 外路法是一种切实可行的视网膜色素上皮移植方法,移植后的细胞可存活并恢复正常的结构和功能.     

胎兔视网膜色素上皮移植的初步研究

目的:观察受体Bruch膜和视网膜色素上皮(retrial pigment epithelial,RPE)受损情况下供体RPE细胞的增殖、分化和凋亡状况。方法:制备有色素胎兔RPE细胞悬液,移植至破坏了Bruch膜和RPE细胞的12只成年新西兰大白兔的视网膜下腔。左眼作为实验组,右眼作为对照,于术后3、7和14d, 采用Ki-67免疫组化和TUNEL染色,并提取RPE细胞DNA作琼脂糖凝胶电泳,观察Ki-67阳性RPE细胞及移植的RPE细胞和受体ONL细胞的凋亡百分率,行统计学分析。结果:术后随着时间的延长,实验组或对照组Ki-67阳性RPE细胞数显著增加(P<0.05);术后14 d实验组或对照组的TUNEL染色ONL核阳性百分率较术后3 d显著减少(P<0.05);术后实验组TUNEL染色阳性和细胞核深染的RPE细胞无显著增加(P>0.05);细胞核深染的RPE细胞百分率明显高于TUNEL阳性的细胞(P<0.01)。对照组未见TUNEL阳性的RPE细胞。术后14d,移植的RPE细胞DNA电泳出现典型的凋亡带。结论:在受体Bruch 膜、RPE受损状态下,供体的RPE细胞具有良好的增殖和分化能力。     

神经干细胞与大鼠RPE细胞间的线粒体转运及对RPE细胞凋亡的影响

目的 研究小鼠神经干细胞(neural stem cells, NSCs)C17.2细胞系与从RCS大鼠变性视网膜中原代分离视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial,RPE)的线粒体交换方式及其对RPE细胞特性的影响.方法 分离RCS大鼠RPE细胞并进行培养和鉴定.分别用线粒体特异性标记物Mitotracker-red和Mitotracker-green标记RPE细胞和小鼠NSCs细胞的线粒体,将两种细胞共培养,激光共聚焦显微镜下观察两种细胞之间隧道纳米管(tunneling nanotubes,TNT)的形成及线粒体转运方式.采用流式细胞仪检测与NSCs共培养后RPE细胞的反应性活性氧类(reactive oxygen species,ROS)水平、细胞周期和细胞凋亡水平的变化.结果 来源于RCS大鼠视网膜的第3代RPE细胞生长状态良好,RPE65及Bestrophin蛋白阳性率细胞均大于95%.与NSCs共培养24 h后,可见RPE细胞与NSCs间TNT的形成,NSCs中的线粒体向RPE细胞方向单向运动,接受NSCs转运的线粒体后,RPE细胞的ROS水平降低(P<0.01);RPE细胞的增殖能力增加,处于S期的细胞比例明显增加(P<0.01),细胞增殖指数(PI)显著增加(P<0.05);RPE细胞早期凋亡细胞比例显著降低(P<0.05).结论 NSCs可通过与相邻的变性RPE细胞之间形成TNT并向其转运线粒体而改善变性RPE细胞的存活.     

单个shRNA质粒同时抑制LNCaP细胞人端粒酶催化亚单位和雄激素受体的表达

目的 探讨单个shRNA质粒联合抑制LNCaP细胞人端粒酶催化亚单位(hTERT)和雄激素受体(AR)基因表达的可行性.方法 使用RNAi-DNA载体技术,将hTERT和AR siRNA的DNA模板同时插入到载体Pgenesil,构建成重组质粒Pgenesil-hTERT-AR-shRNA,转染至LNCaP细胞,与空白对照、Pgenesil-HK-shRNA(通用阴性质粒)、Pgenesil-hTERT-shRNA和Pgenesil-AR-shRNA比较,利用实时荧光定量PCR技术观察其对LNCaP细胞hTERT和AR基因mRNA表达的影响.采用Annexin V方法检测细胞凋亡,MTF比色分析法测定细胞增殖活性.结果 空白对照组、Pgenesil-HK-shRNA组、Pgenesil-hTERT-shRNA组、Pgenesil-AR-shRNA组和Pgenesil-hTERT-AR-shRNA组细胞的hTERT基因mRNA分别为(1.51±0.08)×108、(7.32±0.43)×107、(2.94±0.15)×106、(4.45±0.25)×107、(3.17±0.18)×106 (copies/ml),各组AR基因mRNA分别为(1.92±0.11)×105、(6.47±0.32)×105、(3.70±0.24)×104、(1.22±0.06)×104、(7.21±0.41)×103 (copies/ml),提示Pgenesil-hTERT-shRNA对hTERT基因mRNA有抑制作用,Pgenesil-AR-shRNA对AR基因mRNA有抑制作用,Pgenesil-hTERT-AR-shRNA对hTERT和AR基因mRNA都有抑制作用(P＜0.05).Pgenesil-hTERT-AR.shRNA与Pgenesil-hTERT-shRNA、Pgenesil-AR-shRNA比较,引起的细胞凋亡、细胞生长抑制更加明显(P＜0.05).结论 含有hTERT-shRNA和AR-shRNA DNA模板的重组表达质粒Pgenesil-hTERT-AR-shRNA能够明显抑制hTERT和AR基因的表达和前列腺癌细胞的生长.     

兔胚胎全层视网膜移植到大鼠视网膜下腔的研究

目的观察兔胚胎全层视网膜移植物,包括神经上皮和视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE),在正常Wistar大白鼠和视网膜变性(Royal college of surgeons,RCS)大鼠视网膜下腔的发育状况,从而探讨异种胚胎全层视网膜移植方法的可行性.方法采用17只孕3周兔胚胎作为移植供体,酶法分离得到全层视网膜片(包括神经上皮和RPE),将其移植到20只Wistar大鼠和14只RCS大鼠的右眼视网膜下腔;分别于术后3 d、1、2、4周处死宿主,应用视网膜组织切片进行HE染色和免疫组化染色,观察供体视网膜的生长发育状况.结果兔胚胎视网膜能在两种大鼠视网膜下腔发育为典型的"玫瑰花结"及视网膜各层结构.结论兔胚胎视网膜在大鼠视网膜下腔能进行分化和发育.异种胚胎全层视网膜移植是可行的,但移植方法还需进一步探索和完善.     

黄芪注射液拮抗高糖腹膜透析液对腹膜间皮细胞紧密连接的影响

目的：观察高糖腹膜透析液和添加不同剂量黄芪注射液的腹膜透析液对腹膜间皮细胞紧密连接（TJ）形态结构和紧密连接相关蛋白封闭蛋白-1（ZO-1）表达的影响。方法：SD大鼠随机分为4组,腹腔注射生理盐水、高糖腹透液和添加黄芪注射液的腹透液,造模8周后,检测对照组（0.9%生理盐水）、腹透组（含糖4.25%腹透液）、低黄芪组（含糖4.25%、黄芪1%的腹透液）、高黄芪组（含糖4.25%、黄芪2%的腹透液）SD大鼠的腹膜透析超滤量、腹膜对尿素氮和肌酐清除率。并应用光镜、透射电镜和免疫组织化学染色法观察各组的腹膜标本紧密连接结构的改变和ZO-1蛋白水平表达的变化。结果：腹透组和高黄芪组腹膜透析8周腹透液超滤量与对照组相比较明显减少（P〈0.05）;腹透组和高黄芪组腹膜透析8周尿素氮清除率与对照组相比较明显降低（P〈0.05）;各组腹膜间皮细胞均有ZO-1表达,腹透组、高、低黄芪组与对照组相比,ZO-1表达明显减少（P〈0.05）。结论：高糖腹膜透析液对腹膜间皮细胞的紧密连接和ZO-1的表达有负影响,黄芪对腹膜间皮细胞的紧密连接等结构有一定的保护作用,但对ZO-1的表达干预作用不显著。     

视网膜下液促使视网膜色素上皮细胞膜上蛋白激酶C变化的机制分析

目的：研究视网膜下液（SRF）能否引起体外培养的视网膜色素上皮（RPE）细胞浆内蛋白激酶C（PKC）的激活和转位，探讨SRF与RPE细胞中PKC信号系统变化的关系。方法：实验对象为体外培养的RPE细胞；不同的刺激因素分别在不同的时间刺激RPE细胞，通过细胞裂解和离心获取细胞浆和细胞膜蛋白粗提液，用同位素^32P标记和液体闪烁计数法检测细胞浆和细胞膜PKC活性水平。结果：SRF和佛波酯（PMA）都可以激活RPE细胞浆中的PKC（c-PKC），并使其由胞浆向胞膜转位，但胞膜上PKC（m-PKC）活性峰值水平和出现的时间不同。结论：SRF可引起RPE细胞膜上PKC的活性发生变化，变化的幅度与增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）的分级呈正相关。     

转录因子诱导人脐带间充质干细胞转分化为视网膜色素上皮样细胞的研究

目的 探讨采用关键转录因子将人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUC-MSCs)转分化为视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE)样细胞的方法。方法 通过流式细胞技术鉴定hUC-MSCs的表面标记分子;通过诱导hUC-MSCs分化成为脂肪、骨和软骨细胞确定其多系分化能力;采用慢病毒包装系统获得分别含有11个转录因子Sox2、Pax6、Rax、Six6、Nr2e1、Otx2、Lhx2、Crx、Mitf-A、Klf4和c-Myc的病毒,并通过感染hUC-MSCs来诱导hUC-MSCs向RPE样细胞分化。结果 hUC-MSCs表达CD29、CD44、CD73、CD90和CD105,但不表达CD11b、CD34, CD45和HLA-DR等分子标记,在成脂、成骨、成软骨分化培养基中可分化为脂肪、骨和软骨细胞。视网膜及RPE发育相关的关键转录因子能够将hUC-MSCs直接转分化为RPE样的细胞,并表达ZO-1、RPE65、Bestrophin-1(Best-1)、CK8/18、Cralbp、Mertk、Tyrosinase(Tyr)、PEDF等RPE细胞的特征分子。结论 视网膜及RPE发育相关的关键转录因子可直接将hUC-MSCs分化为RPE样细胞。     

腺病毒介导神经生长因子对遗传性视网膜变性RCS大鼠视细胞的营救

目的 :探讨先天性视网膜变性病因以及对其进行基因治疗的可行性。方法 :TUNEL法对RCS大鼠视细胞的丧失进行研究 ;构建分泌表达型重组腺病毒穿梭质粒 pAdE1CMV NGF ,经与 pJM17在 2 93细胞中同源重组 ,获得复制缺陷型重组腺病毒AdE1CMV NGF。琼脂糖覆盖法测定滴度。AdE1CMV NGF和AdE1CMV LacZ转导培养视网膜色素上皮 (retinalpigmentepithelium ,RPE)细胞。将AdE1CMV LacZ转导组进行x gal染色估计转导效率 ,取AdE1CMV NGF转导组RPE细胞及其条件培养液 ,用RT PCR和WesternBlot进行表达检测 ,用条件培养液刺激PC12细胞 ,证实表达活性。直接进行RCS大鼠视网膜下腔转导 ,一眼注射AdE1CMV NGF ,则另一眼注射AdE1CMV LacZ ,左右眼随机进行。光镜下观察视细胞存活情况。结果 :TUNEL法显示 2 5、35、45、5 5及 6 5dRCS大鼠视网膜视细胞层存在广泛凋亡 ;AdE1CMV NGF的滴度可达 5× 10 10 pfu/ml;4.6× 10 6pfu/ml滴度AdE1CMV LacZ可使RPE细胞发生 10 0 %转导 ;PC12细胞受AdE1CMV NGF转导RPE细胞条件培养液刺激长出突触 ;AdE1CMV NGF视网膜下腔注射使RCS鼠视细胞存活时间明显延长 ,达 15d以上。结论 :视网膜变性模型RCS大鼠视细胞的丧失是以凋亡方式进行 ,腺病毒介导神经生长因子可延长其存活时间     

视细胞移植术后视网膜色素上皮的结构变化

获得纯化的由大肠杆菌表达的小鼠 Ｆａｓ配体（Ｆａｓ ｌｉｇａｎｄ,ＦａｓＬ）。方法：以质粒 ｐＥＴ－１５ｂ为载体,在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中表达小鼠的ＦａｓＬ,用金属螫合亲和层析法纯化。结果：转化菌中,重组质粒是稳定的,异丙基－β－Ｄ硫代半乳糖苷可诱导小鼠ＦａｓＬ的表达 ,金属螫合亲和层析法可以初步纯化此蛋白。结论：在大肠杆菌中表达出小鼠的ＦａｓＬ,并得到初步纯化。