Radix Salviae miltiorrhizae protects rat hippocampal neuron in culture from anoxic damage.

Radix Salviae Miltiorrhizae (RSM), a well-known traditional Chinese medicinal herb, has been used to improve blood circulation and resolve blood stasis. We have previously found that RSM has neuroprotective effect on ischemia and/or ischemia-reperfusion rats. The purpose of this study was to obtain further information on the mechanism of the RSM-induced neuroprotection and to examine the neuroprotective effect on neurons exposed to anoxia. The effect of RSM on anoxic damage in cultured hippocampal neurons of neonatal rat was investigated by using morphological changes and heat shock protein 70 kD (HSP70) expression as indicators. RSM given 0.5 h before 2 h-anoxia followed by 48 hours reoxygenation could significantly increase survival rate of hippocampal neurons and number of HSP70 positive cells. The results suggest that RSM has a direct neuroprotective effects on anoxic damage in hippocampal neurons.     

葛根素预处理对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马 CA1区神经元损伤的影响及其机制

目的：探讨葛根素预处理对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马 CA1区神经元损伤的保护作用及其机制。方法雄性 SD 大鼠30只,随机均等分为假手术组、模型组、葛根素预处理组。采用线栓法阻断大鼠大脑中动脉血供,60 min 后拔出栓线造成局部脑缺血再灌注损伤。葛根素预处理组在缺血前1 h 腹腔注射葛根素（100 mg/ kg ）。脑缺血再灌注后第5天,HE 染色法观察海马 CA1区神经元的组织形态学变化,免疫组化法检测海马 CA1区半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9（Caspase-9）的表达。结果 HE 染色结果显示,与模型组相比较,葛根素预处理明显减少脑缺血再灌注引起的海马 CA1区神经元损伤（P<0.05）;免疫组化结果显示,与模型组相比,葛根素预处理使海马 CA1区 Caspase-3、Caspase-9的表达明显降低（ P <0.05）。结论缺血前1 h 葛根素预处理对局灶性脑缺血大鼠海马 CA1区神经元损伤有保护作用,其主要机制可能与抑制凋亡相关蛋白 Caspase-3、Caspase-9的表达有关。     

巴戟素补肾健脑作用的神经活动基础

巴戟素是广州中医药大学新近从补肾中药巴戟天中提取的一种糖类单体物。为探讨巴戟素的补肾健脑的神经作用机制, 本实验以大鼠离体海马脑片为标本, 从细胞分子水平上观察巴戟素对大鼠海马脑片缺氧状态下的诱发群锋电位（ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｓｐｉｋｅ, ＰＳ） 和突触传递长时程增强（ｌｏｎｇ ｔｅｒｍ ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ , ＬＴＰ） 的影响。结果观察到巴戟素对脑缺氧损伤具有保护作用, 并能增强脑的记忆功能; 并观察到其作用机制与一氧化氮（ＮＯ） 有一定关系。实验结果从神经活动角度为中医补肾健脑理论增补了现代科学内容, 同时对开发巴戟素的临床应用提供了实验依据     

海人酸致痫大鼠海马CA3区神经元线粒体损伤及妥泰的保护作用

目的：观察海人酸（KA）诱导的癫痫持续状态（SE）大鼠海马CA3区神经元线粒体超微结构的损伤及妥泰（TPM）的保护作用。方法：用TPM干预。用KA诱导大鼠SE 2?h，并评估大鼠的行为学表现。于SE终止后3?h制作脑切片，光镜观察神经元的大体损伤，电镜进一步观察线粒体的超微结构。结果：KA组出现痫性发作的时间为注入KA后(15.3±4.6)?min，而TPM组为(26.1±5.3)?min，两组差异有统计学意义（P＜0.05）。KA组大鼠的线粒体损伤为（3.67±0.34）级，TPM组为（2.48±0.21）级，两组差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：KA诱导的SE可导致海马神经元线粒体损伤，妥泰对此具有抑制作用。     

大鼠海马神经元缺氧/复氧后caspase-3活性的变化

目的：研究caspase-3在体外培养的海马神经元缺氧／复氧损伤中的作用及其抑制剂的干预效果，为缺血性脑损伤的治疗提供实验资料。方法：诱导体外培养的大鼠海马神经元缺氧3h，再复氧12－4，并在缺氧前1h用不同剂量的caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CMK进行干预处理，应用MTT比色法测定细胞存活率，底物裂解法caspase-3活性。结果：缺氧／复氧后大鼠海马神经元存活率逐渐降低，caspase-3活性明显增强，复氧24h达高峰；用Ac-DEVD-CMK预处理的海马神经元caspase-3活性降低，细胞存活率增高，并呈剂量依赖性。结论：体外培养的大鼠海马神经元缺氧及缺氧／复氧后出现迟发性死恨，caspase-3介导的细胞凋亡机制在这种损伤过程中起一定的作用，通过抑制其活性可产生神经保护作用。     

东菱克栓酶对脑缺血再灌注损伤保护作用的形态学证据

大白鼠18只随机分为3组(每组6只):假手术组、对照组及东菱克栓酶组(8BU/kg)。用4条血管关闭的全脑缺血再灌注模型,全脑缺血30min后再灌6h,观察CA_1区海马锥体神经细胞光镜及超微结构变化,结果发现:光镜及超微结构的变化在东菱克栓酶组中显著较对照组轻,而且光镜定量分析发现东菱克栓酶组的神经细胞存活率为87.32％,而对照组仅56.42％,在受损的神经细胞中,有严重坏死变性者在东菱克栓酶组中仅7.53％,而对照组高达30.33％,为东菱克栓酶组之4低。以上从形态学上证明东菱克栓酶对脑缺血再灌注损伤确具有保护作用。     

雷公藤内酯醇对匹罗卡品致痫大鼠海马神经元的保护性研究

目的研究雷公藤内酯醇对颞叶癫痫大鼠海马神经元的保护作用及其机制。方法随机将70只生后21 d的雄性Wistar大鼠分为空白对照组10只,癫痫组及雷公藤内酯醇干预组各30只。采用Nissl、FJB染色法观察海马神经元的损伤变化;采用免疫组化法检测海马组织中星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和小胶质细胞标志物钙离子结合适配器分子1(IBa-1)的表达状况。结果与空白对照组相比,癫痫组和药物干预组海马神经元损伤明显,GFAP、IBa-1呈高表达;与癫痫组相比,药物干预组海马神经元的损伤较小,GFAP及IBa-1表达较低。结论雷公藤内酯醇对癫痫持续状态后海马神经元的损伤有保护性作用,其作用机制可能与雷公藤内酯醇抑制胶质细胞活化抵抗脑内炎症反应有关。     

组胺对抑郁症大鼠运动欲望与空间记忆能力的影响

目的以SD大鼠为研究对象,探索组胺对海马C1区神经元的效应以及对抑郁症大鼠行为学的影响。方法通过离体脑片细胞外记录的方法,观察在体外组胺对海马C1区神经元放电频率的直接影响。通过在体细胞外记录的方法,电刺激下丘脑,观察内源性组胺对海马神经元放电频率的影响。通过旷场实验和Morris水迷宫实验,观察抑郁症模型大鼠在海马C1区微量注射组胺后运动欲望以及空间记忆能力的变化。结果离体脑片细胞外记录数据显示,组胺通过H1受体对海马神经元产生浓度依赖的兴奋性效应;在体细胞外记录发现内源性组胺对海马神经元表现出先短期兴奋后长期抑制的双向效应。行为学实验中,海马C1区注射组胺,使抑郁症大鼠在旷场实验中运动欲望明显降低,在Morris水迷宫实验中空间记忆能力明显削弱,而注射组胺H3受体阻断剂clobenpropit则能明显改善抑郁症大鼠运动欲望和空间记忆能力。结论在细胞和整体水平,从体外和在体不同角度分析表明,组胺对海马C1区神经元表现出先兴奋后抑制的双向作用,综合表现出抑制效应,能够使抑郁症大鼠运动欲望和空间记忆减弱,而组胺H3受体阻断剂clobenpropit能改善抑郁症大鼠运动欲望和空间记忆。     

神经生长因子NGF对原代培养的海马神经元缺氧反应的影响

目的 :观察不同浓度NGF对大鼠海马神经元缺氧的保护作用。方法 :采用MTT比色法测定NGF对缺氧神经细胞活性的影响 ,测定LDH漏出率 ,分光光度法检测MDA ,同时进行形态学观察。结果 :各浓度NGF均对大鼠海马神经元缺氧损伤具有保护作用 ,NGF明显减少缺氧所增加的LDH漏出率和MDA含量 ,且能减轻细胞的形态学损伤。结论 :NGF可以通过减少LDH漏出率和MDA含量 ,对大鼠海马神经元缺氧损伤具有明显的保护作用     

孕酮通过NF-κB调控脑损伤后大鼠海马神经元COX-2和Caspase-3的表达

目的研究NF-κB对脑损伤大鼠海马神经元环氧合酶-2(COX-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达调控作用,探讨孕酮(progesterone,PROG)对脑损伤(TBI)后大鼠海马神经元保护作用及其可能机制。方法雄性SD大鼠45只按抛硬币法分为假手术组、损伤组和PROG组,按照改良的Feeney自由落体损伤装置制作大鼠脑损伤模型,用Nissl染色法、免疫组织化学法及免疫蛋白印记法,观察大鼠伤侧海马CA1区NF-κB、COX-2以及Caspase-3的表达变化和孕酮对上述指标变化的影响。结果损伤组大鼠海马CA1区NF-κB(24.0±2.5)、COX-2(35.9±2.7)、Caspase-3(25.1±2.7)阳性神经元的数量较假手术组NF-κB(1.9±0.9)、COX-2(1.5±0.7)、Caspase-3(1.8±0.8)显著增加(P<0.05);PROG组与损伤组比较,海马CA1区NF-κB(14.2±1.8)、COX-2(16.6±2.7)、Caspase-3(11.2±2.4)阳性神经元的数量明显减少(P<0.05)。结论NF-κB对脑损伤后大鼠海马神经元COX-2和C...     

Effect of Xingnaojing Injection (醒脑静注射液) on Hippocampal N-methyl-D-aspartic Acid Receptors of Focal Cerebral Ischemia in Rats

Objective: To observe and elucidate the neuroprotective effect of Xingnaojing (XNJ) injection on hippocampal N-methyl-D-aspartic acid (NMDA) receptors of focal cerebral ischemia in rats. Methods: Cerebral ischemia was established by occluding the middle cerebral artery with an intraluminal suture technique in rats. Neurological deficit score, infarct volume and quantity of NMDA receptors were estimated in all groups and compared. Results: After being treated with XNJ, the score decreased in the initial 6 hours and infarct volume decreased in 24 hours. And within 24 hours, the quantity of NMDA receptors obviously decreased compared with the model group (P<0. 01) It indicated that XNJ could ameliorate neurological behavior of middle cerebral artery occlusion rats and down-regulate the expression of hippocampal NMDA receptors. Conclusion: The neuroprotective effect of XNJ on focal cerebral ischemia is possibly related to down-regulating the expression of NMDA receptors in rats.     

神经节苷酯GM1对脑缺血后热休克蛋白70表达的影响

目的：探讨神经节苷酯GM1对脑缺血后的脑保护作用及其对脑缺血后热休克蛋白70表达的影响。方法：采用Koizumi‘s线栓法制作可复流大脑中动脉闭塞大鼠模型。32只雄性、健康Wistar大鼠随机分为正常组、MCAO组、生理盐水对照组、神经节苷酯GM1治疗组。MCAO后第5天处死动物，取脑组织进行Nissl染色及HSP70免疫组化检测。检测结果经CMIAS图像分析系统进行定量分析。结果：神经节苷酯GM1治疗组组海马各区神经元损伤轻，神经元脱失相对较少；MCAO后海马各区及大脑皮层均有不同程度的HSP70阳性细胞表达，GM1治疗后，海马各区及大脑皮层HSP70阳性细胞的数密度值较MCAO组减少。结论：GM1能减轻脑缺血后的神经元损伤，具有脑保护作用；抑制HSP70的表达亦可能是神经节苷酯GM1的脑保护作用机制之一。     

依达拉奉联合巴曲酶治疗急性脑梗死的临床观察

目的观察依达拉奉和巴曲酶联合治疗急性进展型脑梗死的疗效。方法将60例急性进展型脑梗死患者随机分为两组各30例。联合组使用依达拉奉和巴曲酶静脉滴注,巴曲酶组单用巴曲酶。结果治疗14 d后,联合组和巴曲酶组的血纤维蛋白原水平、神经功能缺损评分间差异均有统计学意义(P<0.05)。联合组的临床疗效优于巴曲酶组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论依达拉奉联合巴曲酶治疗急性脑梗死效果显著,无明显不良反应。     

尼莫地平抗急性铅染毒大鼠海马神经元损伤的形态学研究

目的：了解尼莫地平对急性铅染毒大鼠海马神经元损伤的干预作用。方法：48只2月龄SD大鼠随机等分为4组，即染铅组（40mg／kg PbAc）、尼莫地平组（1mg／kg Nim）、铅-尼莫地平组（40mg／kg PbAc＋1mg／kg Nim）和对照组（等量生理盐水），每日腹注1次，连续3d。用TUNEL法原位检测海马神经元凋亡情况，并用电镜观察海马神经元超微结构变化。结果：各组海马神经元凋亡指数由高到低依次为染铅组、铅-尼莫地平组、对照组和尼莫地平组，染铅能显著增高海马神经元凋亡指数（P〈0．01），尼莫地平与铅存在交互作用（P〈0．01），在铅染毒的前提下，尼莫地平能明显降低神经元凋亡指数。电镜观察显示，染铅组海马神经元有核固缩现象，而铅-尼莫地平组神经元未见明显异常。结论：急性铅染毒能引起海马神经元损伤，促进细胞凋亡；尼莫地平可能具有抗急性铅染毒海马神经元损伤的作用。     

EGb761对谷氨酸诱导海马神经元兴奋毒性损伤中p75NTR表达的影响

目的：观察谷氨酸诱导海马神经元兴奋毒性损伤中神经营养因子受体p75（p75neurotrophin receptor,p75NTR）表达水平的变化,探讨银杏叶提取物（EGb761）抗兴奋毒性神经保护作用与p75NTR的相关性.方法：建立谷氨酸诱导的新生大鼠海马神经元兴奋毒性损伤模型,观察25200mg/L剂量下EGb761的神经保护作用;RT-PCR,Western Blot及细胞免疫荧光染色方法检测p75NTR的表达变化.结果：100mg/LEGb761预处理给药的神经保护效果最明显;谷氨酸刺激后,p75NTR在mRNA和蛋白质水平的表达较对照组明显增高（P〈0.01）;EGb761本身对p75NTR表达无影响,而EGb761预处理组p75NTR在mRNA和蛋白质水平的表达较谷氨酸组均显著降低（P〈0.05）.结论：p75NTR在谷氨酸诱导兴奋毒性神经损伤中起着重要作用,EGb761抗兴奋毒性神经保护作用可能与抑制p75NTR的表达有关.     

MicroRNA-326通过靶向Klk7调控MAPK信号通路对抑郁模型大鼠的神经保护作用

目的 探究MicroRNA-326通过靶向激肽释放酶7(Kallikrein 7,Klk7)调控有丝分裂原激活的蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路对抑郁模型大鼠的作用.方法 20只SD大鼠随机分为空白对照组和慢性不可预测轻度应激(chronic unpredi...     

刺五加多糖对H202诱导海马细胞凋亡的保护作用

目的 研究刺五加多糖（Acanthopanax senticosus polysaccharide，ASPS）对大鼠海马细胞的抗凋亡作用，并探讨其机制。方法 运用海马神经细胞原代培养技术，采用H202诱导建立细胞凋亡模型。观察细胞形态学变化；MTT法测定细胞活性；免疫组化法检测细胞中Bax与Bcl-2的蛋白表达。结果形态学观察显示：与模型组比较，ASPS组细胞损伤程度明显减轻；ASPS组细胞活性（0．46）比模型组细胞活性（0．36）高（P〈0．01），ASPS组Bcl-2表达量较高而Pax表达量较低。结论ASPS能够提高海马神经细胞的抗凋亡能力，并具有一定的浓度依赖性。     

蛋白激酶B激活对脑缺血再灌注海马CA3区神经元的保护作用

目的 探讨丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶B（Protein kinase B,Akt）对脑缺血再灌注损伤后海马CA3区神经元的保护作用.方法 采用四动脉结扎法建立大鼠全脑缺血模型,再灌注0 min、30 min、3h、6h、12h、1d和3d各时间点,运用免疫印迹技术检测海马CA3区Akt1的磷酸化水平,采用免疫组化和焦油紫染色分别检测LY294002（PI3K/Akt特异性抑制剂）对缺血再灌注后磷酸化Akt1（p-Akt1）的表达及神经元存活的影响.结果 缺血再灌注后30 min,与假手术（sham）组相比,海马CA3区p-Akt1的表达显著升高（P＜0.05）,再灌后3h至峰值,一直持续至3d仍维持在较高水平（P＜0.05）;与相应的再灌注组相比,给予LY294002后,p-Akt1的蛋白表达明显降低[R6 h组和LY294002＋ R6 h组的阳性细胞数（个/mm^2）分别为（134.6±7.8）和（54.8±5.1）],海马CA3区的神经元大量死亡[R5 d组和LY294002 ＋R5 d组神经元数量（个/mm^2）分别为（152.0±17.4）和（62.7±5.1）]（P＜0.05）.结论 脑缺血再灌注后蛋白激酶Akt的持续激活,是海马CA3区神经元存活的重要因素.     

柴甘解忧汤对帕金森病抑郁大鼠海马神经元及BDNF表达的影响

【目的】观察柴甘解忧汤对帕金森抑郁(PDD)大鼠海马神经元及脑源性神经生长因子(BDNF)表达的影响。【方法】选用成年雄性SD大鼠24只,随机分为4组:正常组、模型组、柴甘解忧汤组、氟西汀组,每组6只,除正常组外,其他组大鼠均单笼饲养。帕金森抑郁模型复制成功后,模型组、柴甘解忧汤组、氟西汀组分别以蒸馏水2.0 m L、柴甘解忧汤(剂量为8 g·kg~(-1)·d~(-1))及氟西汀药液(剂量为1.8 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,连续21 d。采用尼氏染色及免疫组织化学法观察海马神经元损伤情况及BDNF表达的改变。【结果】与正常组比较,模型组大鼠海马神经元出现明显的形态学损伤;柴甘解忧汤、氟西汀均可改善PDD大鼠海马神经元的损伤,对海马神经元细胞有一定的保护作用。与正常组比较,模型组大鼠海马区BDNF阳性细胞数与阳性染色面积、积分光密度、平均光密度均显著下降(P0.01)。与模型组比较,柴甘解忧汤组、氟西汀组海马BDNF阳性细胞数与阳性染色面积、积分光密度、平均光密度均显著上升(P0.05或P0.01)。【结论】柴甘解忧汤能减轻帕金森抑郁大鼠海马神经元损伤和增加BDNF阳性表达,这可能是其抗帕金森抑郁的作用机理之一。     

电针对颅脑伤大鼠生长抑素基因表达的影响

目的:探讨电针对颅脑伤的作用机制.方法:采用原位杂交组织化学技术,观察了实验性颅脑伤大鼠脑内生长抑素mRNA变化,并观察了电针治疗颅脑伤时对生长抑素基因表达的作用.结果:电针可增加下丘脑室周核生长抑素基因表达,而在海马则降低生长抑素基因表达.结论:颅脑伤时,电针与生长抑素可能在缓解疼痛方面起协同效应,并且电针可能对海马神经元起保护作用.