JNK通路介导帕金森病小鼠黑质神经元丢失及人参皂甙Rg1的保护作用

[目的]研究c-Jun氨基端激酶(e-Jun N-terminal protein kinase, JNK)在1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(Parkinson's disease, PD)模型中对PD黑质多巴胺(Dopamine, DA)能神经元丢失的可能机制以及人参皂甙Rg1的神经保护作用.[方法]采用神经毒素MPTP制备PD小鼠模型.免疫组织化学法与蛋白印迹法观察各组小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)和磷酸化c-Jun (p-c-jun)表达变化;原位末端标记法(TUNEL)观察黑质细胞凋亡数量变化.[结果]与对照组相比,模型组小鼠黑质致密带TH阳性神经元显著减少约55%(P<0.01),p-c-jun表达水平亦明显升高,黑质神经元TUNEL阳性细胞数量增高;人参皂甙Rg1干预组黑质TH阳性神经元细胞丢失明显减轻31%(P<0.01),p-e-jun表达水平明显下降,黑质神经元TUNEL阳性细胞数量显著减少.[结论]JNK通路可能通过凋亡途径参与模型小鼠黑质多巴胺能神经元丢失过程;人参皂甙Rg1可在一定程度上阻抑黑质区JNK信号通路,减轻MPTP诱导的PD小鼠黑质DA能神经元凋亡;人参皂甙Rg1对帕金森病小鼠具有一定的神经保护作用.     

盐酸多奈哌齐治疗帕金森病的实验研究

目的观察盐酸多奈哌齐对帕金森病的治疗效果。方法通过建立帕金森病小鼠模型,采用爬杆实验、悬挂实验和免疫组织化学检查的方法,观察模型成功后,盐酸多奈哌齐对行为学和中脑黑质酪氨酸羟化酶表达的影响。结果模型组小鼠运动明显减少,爬杆实验和悬挂实验评分明显降低,盐酸多奈哌齐低剂量组上述症状减轻,评分显著增加（P〈0.01和P〈0.05）;模型组小鼠中脑黑质TH阳性细胞明显减少,药物组小鼠TH阳性细胞增多（P〈0.01）。药物组高低剂量间,上述结果无差异。结论动物实验表明盐酸多奈哌齐对帕金森病具有治疗作用。     

菊花提取物对帕金森病小鼠的保护作用及机制研究

目的探讨菊花提取物(Chrysanthemum morifoliuin Ramat extract,CRE)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致帕金森病(PD)小鼠的保护作用及机制。方法 C57BL/6小鼠40只随机分为4组,每组10只,分别为正常组(NC)、模型组(MC)、CRE低剂量组(LC)和CRE高剂量组(HC)。LG和HC每日以CRE溶液灌胃,剂量分别为100、200mg/kg qd,NC和MC每日以等量蒸馏水灌胃,连续19 d。在第11d,除NC组外,其余组小鼠腹腔注射MPTP溶液,NC组注射等体积的生理盐水,1/d,连续5d。以爬杆法、转轴法和拉力法评价PD小鼠的行为学能力,免疫组化法(IHC)观察酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数,ESI-QTOF-MS法检测纹状体多巴胺含量,采用分光光度法测定小鼠脑黑质中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)水平的变化。结果 MPTP诱导小鼠大脑发生病变,MG组行为学评分、黑质TH阳性细胞表达量、纹状体多巴胺水平及大脑黑质SOD、GSH-Px活性均显著下降,脑黑质MDA含量显著升高。与MG比较,LG、HG组行为学障碍显著改善,小鼠黑质TH阳性神经元表达、纹状体内多巴胺含量及小鼠脑黑质内SOD、GSH-Px水平均显著提高,MDA含量显著下降。结论 CRE对MPTP诱发的PD小鼠有良好的治疗作用,可能通过抑制氧化损伤起到对PD小鼠起保护作用。     

依达拉奉对帕金森病小鼠黑质多巴胺能神经元的形态学影响

[目的]探讨依达拉奉对帕金森病（Parkinson’s disease,PD）小鼠黑质多巴胺神经元的作用,为依达拉奉临床PD治疗提供实验依据。[方法]将30只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。模型组和治疗组给予腹腔注射百草枯（paraquat）和代森锰（maneb）建立PD模型,完成建模后,治疗组给予依达拉奉治疗。观察3组小鼠行为学的改变、并用免疫组织化学和体视学方法对黑质酪氨酸羟化酶阳性神经元进行计数和形态计量分析。[结果]模型组与治疗组比较,自主运动活性明显减少,差异有统计学意义（P〈0.05）;与治疗组相比,模型组黑质酪氨酸羟化酶阳性神经元数量明显降低,细胞胞体肿胀,平均截面积、平均周长和平均体积明显增大,差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;胞浆内染色极为浅淡,轴突减少或消失,细胞轮廓不清。[结论]依达拉奉对PD小鼠黑质多巴胺能神经元有明显的神经保护作用。     

黄连解毒汤对MPTP帕金森小鼠的防治作用

目的观察黄连解毒汤(HJD)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病(PD)小鼠的防治作用。方法将45只C57BL小鼠随机分为3组:正常组、模型组和HJD组。模型组小鼠每天腹腔注射MPTP 30 mg/kg,连续5 d,制备PD模型;HJD组小鼠每天灌胃HJD 17.55 g/kg(生药量),连续15 d。应用爬杆、悬挂和游泳实验检测小鼠肢体运动功能;高效液相色谱-电化学法(HPLC-ECD)法检测小鼠脑纹状体多巴胺(DA)及其代谢产物二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)含量;分光光度法测定小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量。结果 HJD对小鼠肢体运动功能的减退和脑神经组织的代谢异常有不同程度的调节和改善作用。结论 HJD对MPTP所致帕金森小鼠有一定的防治作用。     

隔日禁食对MPTP诱导帕金森病小鼠的保护作用研究

目的探究隔日禁食(ADF)对MPTP诱导的帕金森病(PD)小鼠的保护作用;方法 44只C57BL/6雄性小鼠随机均分为:生理盐水+自由饮食(NS+AL)、生理盐水+隔日禁食(NS+ADF)、MPTP+自由饮食(MPTP+AL)、MPTP+隔日禁食(MPTP+ADF)4组。隔日禁食方案以2d为一周期,D1完全禁食,D2自由摄食,共17个周期,期间记录小鼠体质量。自第12个周期始,小鼠接受每日1次、连续5 d的MPTP腹腔注射,建立亚急性PD小鼠模型。实验结束后收集小鼠粪便,用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)检测粪便中短链脂肪酸(SCFAs)含量;收集小鼠新鲜纹状体组织,用高效液相色谱法(HPLC)检测神经递质及其代谢物,通过WB检测酪氨酸羟化酶(TH);收集小鼠全脑组织制备冰冻切片,用免疫荧光染色检测黑质区多巴胺能神经元及神经胶质细胞的数量;结果 ADF限制小鼠体质量的增加。ADF能提升PD小鼠纹状体内多巴胺(DA)与5-羟色胺(5-HT)的含量,降低其代谢,并提升TH表达。ADF可增加黑质区多巴胺能神经元数量,并抑制神经胶质细胞的增生与激活。此外,ADF还抑制PD小鼠粪便内SCFAs...     

裙带菜多糖对大鼠黑质内多巴胺能神经元6-羟基多巴胺致损伤的保护作用

目的探讨裙带菜多糖(UPPS)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)制备的大鼠帕金森(PD)模型动物的多巴胺(DA)能神经元的保护作用。方法将36只Wistar大鼠随机分为对照组、UPPS+6-OHDA组、6-OHDA组。对照组连续生理盐水灌胃30d;UPPS+6-OHDA组,裙带菜多糖(400mg/kg)灌胃3d后,内侧前脑束(MFB)注射6-OHDA(3.6mg/ml),随后连续裙带菜多糖(400mg/kg)灌胃26d;6-OHDA组,以生理盐水代替裙带菜多糖,其他处理同UPPS+6-OHDA组。检测各组大鼠纹状体(Str)内多巴胺、3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)的含量,6-OHDA损毁侧大鼠黑质(SN)酪氨酸氢化酶(TH)阳性细胞数和铁染色阳性细胞数,大鼠黑质SOD/β-actin灰度值。结果 UPPS+6-OHDA组DA、DOPAC的含量低于对照组(P相似文献   

拟除虫菊酯对大鼠黑质纹状体系统内酪氨酸羟化酶的影响

目的　探讨拟除虫菊酯对大鼠黑质纹状体多巴胺能系统中酪氨酸羟化酶 (TH)的影响。方法　采用不同剂量的溴氰菊酯 (DM)、氯菊酯 (PM)对雄性SD大鼠经口灌胃给药后 ,高效液相色谱 -荧光检测法(HPLC FD)分别检测其黑质、纹状体内多巴胺 (DA)及其主要代谢产物多巴克 (DOPAC)和高香草酸 (HVA)含量 ;HPLC FD方法检测TH活性 ;免疫组化以及RT PCR技术分别检测各组黑质、纹状体内的TH蛋白量及mRNA量。结果　给药各组大鼠纹状体中DA含量都有不同程度的下降 ,且 1 1 0LD50 DM组与对照组相比差异有显著性 ,DOPAC和DA更新率与对照组相比变化不大 ,差异无显著性 ;DM组黑质和纹状体中TH酶活性与mRNA水平与对照组相比 ,均有不同程度的下降 ,且差异有显著性 (P <0 0 5 ,P <0 0 1 ) ;1 1 0LD50 DM组纹状体内的TH蛋白水平与对照组相比差异有显著性 (P <0 0 1 )。结论　DM暴露可以引起大鼠黑质纹状体系统中TH活性、mRNA水平以及蛋白量下降     

依达拉奉对帕金森病小鼠黑质多巴胺能神经元的形态学影响

[目的]探讨依达拉奉对帕金森病( Parkinson's disease,PD)小鼠黑质多巴胺神经元的作用,为依达拉奉临床PD治疗提供实验依据. [方法]将30只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只.模型组和治疗组给予腹腔注射百草枯(paraquat)和代森锰(maneb)建立PD模型,完成建模后,治疗组给予依达拉奉治疗.观察3组小鼠行为学的改变、并用免疫组织化学和体视学方法对黑质酪氨酸羟化酶阳性神经元进行计数和形态计量分析.[结果]模型组与治疗组比较,自主运动活性明显减少,差异有统计学意义(P＜ 0.05);与治疗组相比,模型组黑质酪氨酸羟化酶阳性神经元数量明显降低,细胞胞体肿胀,平均截面积、平均周长和平均体积明显增大,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);胞浆内染色极为浅淡,轴突减少或消失,细胞轮廓不清. [结论]依达拉奉对PD小鼠黑质多巴胺能神经元有明显的神经保护作用.     

3-硝基丙酸预处理对黑质纹状体THmRNA基因表达的影响

目的：探讨3-硝基丙酸（3NP）预处理对黑质、纹状体部位酪氨酸羟化酶（TH）基因表达的影响。方法：20只雄性SD大鼠随机分为对照组、3NP组、帕金森病（PD）组及化学预处理（CPC）组。建立6-OHDA损毁PD大鼠模型。造模前24h给予3NP（20mg／kg，腹腔注射），采用RT-PCR技术检测术后2周黑质、纹状体THmRNA基因表达水平。结果：对照组、3NP组及PD组黑质THmRNA基因表达较纹状体部位明显增强（P〈0.01）；纹状体THmRNA表达，CPC组较其他各组显著增强（P〈0．01），对照组、3NP组及PD组组间同部位比较，THmRNA基因表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：3NP预处理能够促进纹状体THmRNA基因转录，并可能通过转录后水平调节促进黑质THmRNA蛋白表达。     

丁苯酞对帕金森病大鼠脑组织Bax、TH表达的影响

目的研究丁苯酞(3-n-butyl phthalide,NBP)对帕金森病(parkinson disease,PD)动物模型黑质Bax、TH表达的影响,以探讨NBP对帕金森病的脑保护作用。方法 2012年4—10月90只SD大鼠随机分为三组,PD组立体定向注入6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA),NBP组立体定向注入6-OHDA,NBP溶液灌胃4周,直至处死;对照组立体定向注入抗坏血酸生理盐水。处死后制作快速冷冻切片用免疫组化分别检测Bax、TH阳性细胞数,用原位杂交法分别检测Bax mRNA、TH mRNA的阳性细胞数。计量资料采用t检验,计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果三组大鼠中正常组未见旋转大鼠,>6 r/min PD组18只,NBP组7只,NBP组比PD组显著减少(P<0.05)。免疫组化法各组都检测到了Bax、TH的阳性细胞表达,结果示NBP组术侧黑质Bax阳性神经元数量(35.1±6.4)较PD组明显下降(99.5±13.1),比较差异有统计学意义(P<0.05);NBP组术侧黑质TH阳性神经元数量(95.8±9.4)较PD组(53.6±9.5)明显升高,比较差异有统计学意义(P<0.05)。原位杂交ISH法各组都检测到了Bax mRNA、TH mRNA的阳性细胞表达,结果示NBP组术侧黑质Bax mRNA阳性神经元数量(23.7±6.3)较PD组(54.5±7.8)明显下降,比较差异有统计学意义(P<0.05);NBP组术侧黑质TH mRNA阳性神经元数量(48.8±7.5)较PD组(29.4±5.2)明显升高,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NBP能够降低Bax的表达,增加TH的表达,对PD有脑保护作用。     

一次力竭运动小鼠中枢单胺类神经递质的代谢特点

目的：探讨力竭运动中枢单胺类神经递质的代谢变化特点,以期为运动疲劳的中枢机制提供一定实验室依据。方法：4月龄C57/BL小鼠,随机分为安静对照组（SC组）和一次性游泳力竭组（SE组）。力竭游泳即刻取材（皮层、下丘脑、纹状体、海马、脑干和小脑）六个脑区,高功率微波灭活脑组织相关酶类;HPLC测定去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）及其代谢产物多巴克（DOPAC）、5羟色胺（5-HT）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）含量。结果：力竭时皮层、海马和脑干NE含量较安静时明显增加（P〈0.05）,而下丘脑、纹状体和小脑NE含量有降低趋势。海马、脑干组织DA含量力竭时极显著增加（P〈0.01）,皮层、纹状体区仅有增加趋势,而下丘脑DA含量较安静时有降低趋势;DA的代谢产物DOPAC仅在脑干有明显增加。各脑区力竭时5-HT均较安静时明显增加（P〈0.05）,其代谢产物5-HIAA在皮层、下丘脑及小脑也增加显著（P〈0.05）。结论：运动至力竭过程中各脑区单胺类神经元激活程度不相同,其中5-HT和NE可以作为中枢皮层疲劳的一个标志。     

Short-term supplementation with plant extracts rich in flavonoids protect nigrostriatal dopaminergic neurons in a rat model of Parkinson's disease

OBJECTIVE: Antioxidants from plants were known to reduce the oxidative stress by scavenging free radicals, chelating metal ions and reducing inflammation. As increased oxidative stress was implicated in the nigrostriatal dopaminergic neuronal loss in Parkinson's disease (PD), we have assessed whether the plant extracts protects the nigrostriatal dopaminergic neurons in the animal model of PD. METHODS: Male adult Sprague-Dawley rats were treated orally between 10 am-11 am each day with the extracts from tangerine peel, grape seeds, cocoa and red clover for four days. One hour after the final dosing, the left medial forebrain bundle was lesioned by infusing the dopaminergic neurotoxin 6-hydroxydopamine (6-OHDA; 12 microg) under anaesthesia. Seven days post-lesion, the number of dopaminergic cells in the substantia nigra pars compacta and the levels of dopamine and its metabolites 3, 4-dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC) and homovanillic acid (HVA) in the striata were quantified and compared with the vehicle-treated groups. RESULTS: Compared to the unlesioned side, 6-OHDA lesions significantly reduced the number of dopaminergic cells and the levels of dopamine and its metabolites DOPAC and HVA in the vehicle-treated animals. Pretreatment of animals with extracts of tangerine peel (rich in polymethoxylated flavones; 35 mg/kg/day), cocoa-2 (rich in procyanidins; 100 mg/kg/day) and red clover (rich in isoflavones; 200 mg/kg/day) significantly attenuated the 6-OHDA-induced dopaminergic loss. However, no significant protection was seen in animals supplemented with red and white grape seeds (rich in catechins; 100 mg/kg/day), and cocoa-1 (rich in catechins; 100 mg/kg/day). CONCLUSIONS: Pre-treatment of plant extracts rich in polymethoxylated flavones, procyanidins and isoflavones but not catechins protected the nigrostriatal dopaminergic neurons in the rat model of PD.     

rTMS对帕金森鼠黑质抗酪氨酸羟化酶抗体阳性标记的影响

目的 探讨0.2Hz最大的刺激强度为2T磁刺激器0.2Hz 55%刺激强度下,连续刺激14 d后,观察帕金森大鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞和纤维的变化.方法 利用6-OHDA制备帕金森大鼠模型,给予..2Hz 55%刺激强度下rTMS连续14 d,然后用免疫组化ABC法检测黑质TH免疫阳性产物的变化.结果 rTM...     

拟除虫菊酯对大鼠脑黑质纹状体系统多巴胺及其代谢产物的影响

目的 初步探讨拟除虫菊酯类农药对雄性SD大鼠脑黑质纹状体多巴胺(DA)系统的毒性作用及其可能机制。方法 采用不同剂量的溴氰菊酯(DM,6.25、12.50 mg/kg)、氯菊酯(PM,200、400mg/kg)给雄性SD大鼠连续10 d经口灌胃给药后,HPLC荧光检测法分别检测其脑黑质、纹状体内DA及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、3-甲氧基-4-羟基苯乙酸(HVA)的含量。结果 给药各组大鼠纹状体内DA含量都有不同程度的下降,且12.50 mg/kg DM组(6.14±0.57μg/g湿重)与对照组(9.46±1.95 μg/g湿重)的差异有统计学意义(P<0.05);200、400 mg/kg PM组和6.25、12.50 mg/kgDM 4个组的DA更新率[(DOPAC HVA)/DA]与对照组相比,分别增加了133.33％、166.67％、166.67％和266.67％,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);而黑质内DA及其代谢产物水平均无明显变化。结论 DM可能抑制酪氨酸羟化酶合成DA,使其在纹状体内的含量下降,PM和DM都可以加强DA的代谢。     

锰对大鼠子代新生鼠黑质酪氨酸羟化酶的影响

为了研究锰对子代新生鼠黑质中酪氨酸羟化酶（ｔｙｒｏｓｉｎｅｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ,ＴＨ）的影响,对雌性大鼠腹腔注射氯化锰（ＭｎＣｌ２·４Ｈ２Ｏ）,然后采用原位杂交组织化学技术检测其子代新生鼠黑质中ＴＨ．ｍＲＮＡ神经元。结果：对照组新生鼠黑质中观察到ＴＨ．ｍＲＮＡ神经元,各实验组均未观察到ＴＨ．ｍＲＮＡ神经元。提示：锰在基因水平上抑制了染锰者子代新生鼠黑质中ＴＨ活性,进而干扰和抑制了胺能神经递质的正常代谢