结核分枝杆菌调控巨噬细胞凋亡机理的研究进展

综述了结核分枝杆菌感染机体后,巨噬细胞凋亡的正、反向调控机制。在感染早期,结核分枝杆菌可以激活caspase酶系,引发一系列级联反应,在细胞因子IL1β、TNFα的作用下,激发信号转导途径。胞内线粒体发生一系列结构和功能的变化,释放凋亡诱导因子。一系列因子协同作用,最终启动巨噬细胞凋亡,并导致细菌被杀灭。同时,结核分枝杆菌某些菌体成分可被巨噬细胞表面特异性受体识别,抑制巨噬细胞中分泌细胞因子的生物学活性,从而减少凋亡。结核杆菌通过一系列调控机制,以休眠状态存活于巨噬细胞中,与宿主达成一种动态平衡。     

结核分枝杆菌调控巨噬细胞凋亡机理的研究进展

综述了结核分枝杆菌感染机体后，巨噬细胞凋亡的正、反向调控机制。在感染早期，结核分枝杆菌可以激活caspase酶系，引发一系列级联反应，在细胞因子IL-1β、TNF-α的作用下，激发信号转导途径。胞内线粒体发生一系列结构和功能的变化，释放凋亡诱导因子。一系列因子协同作用．最终启动巨噬细胞凋亡，并导致细菌被杀灭。同时，结核分枝杆菌某些菌体成分可被巨噬细胞表面特异性受体识别．抑制巨噬细胞中分泌细胞因子的生物学活性．从而减少凋亡。结核杆菌通过一系列调控机制．以休眠状态存活于巨噬细胞中，与宿主达成一种动态平衡。     

结核分枝杆菌与巨噬细胞相互作用的研究

探讨结核分枝杆菌与巨噬细胞的相互关系。从健康人全血中诱导活化的巨噬细胞和从结核病人痰液中培养出来的结核分枝杆菌以及卡介苗菌株(BCG)进行实验,利用流式细胞技术检测结核分枝杆菌感染巨噬细胞的凋亡及其时相性变化。巨噬细胞感染结核分枝杆菌后凋亡率升高,病人结核杆菌感染组和BCG感染组比较,差异具有统计学意义P<0.05。结核分枝杆菌与巨噬细胞的凋亡存在着相互作用关系,病人结核菌的毒力比BCG的毒力强。     

结核分枝杆菌相关检测试剂盒对结核分枝杆菌感染的诊断价值研究

目的对TB-IGRA试剂、QFT-GIT试剂和T-SPOT.TB试剂共3种检测特异度抗原介导的细胞免疫反应试剂盒对结核分枝杆菌(MTB)感染的诊断价值进行评估比较。方法采用TB-IGRA试剂、QFTGIT试剂和T-SPOT.TB试剂检测评估临床收集来自多中心的结核杆菌感染者样本共875例,以及非结合杆菌感染者353例。对检测结果与结核菌素(PPD)试验、细菌培养和涂片结果进行比较分析。结果 1 228例病例中,采用T-SPOT.TB试剂对其中随机的132例病例进行了追踪检测,TB-IGRA试剂诊断MTB感染的灵敏度为72.60%,特异度为45.76%;QFT-GIT试剂诊断MTB感染的灵敏度为50.68%,特异度为40.68%;TSPOT.TB试剂诊断MTB感染的灵敏度为58.90%,特异度为61.02%。PPD呈阳性病例中,TB-IGRA试剂检出率为67.47%,QFT-GIT试剂检出率为48.19%,T-SPOT.TB检出率为54.22%。3家试剂的检测灵敏度和特异度差异无统计学意义(P0.05),检测结果与PPD结果有相关性,细菌学检测阳性的对象中,TB-IGRA试剂和QFT-GIT试剂的检出率均高于细菌学阴性对象。结论较于T-SPOT.TB试剂,TB-IGRA试剂与QFT-GIT试剂具有操作相对简单、检测时长更短、结果判读简单等优势,利于医院检验科室的临床检测使用;TB-IGRA试剂在成本方面比QFT-GIT和T-SPOT.TB试剂具备更明显的优势,可为我国各级医疗卫生单位特别是基层医疗单位的MTB感染诊断提供更大的助力。     

人型结核分枝杆菌H37Rv菌株诱导小鼠巨噬细胞凋亡的实验研究

目的：探讨结核杆菌逃避宿主免疫杀伤作用的机制。方法：将人型结核杆菌H37Rv菌株配制成菌悬液，和小鼠巨噬细胞按1：1比例共同作用。用荧光染色对凋亡细胞的形态特征进行分析，流式细胞仪测定不同时期小鼠巨噬细胞凋亡率。结果：结核杆菌强毒力株H37Rv感染组的巨噬细胞凋亡率在10～60min内逐渐升高，至60min时最高，作用90min后凋亡率逐渐降低。结论：人型结核杆菌H37Rv菌株在感染的早期对宿主巨噬细胞有较强的致凋亡作用。并有可能因此逃避宿主机体的免疫杀伤作用。     

Toll样受体2在分枝杆菌诱导巨噬细胞凋亡中的作用

目的建立分枝杆菌感染巨噬细胞的模型,探讨Toll样受体2(TLR2)在分枝杆菌诱导巨噬细胞凋亡中的作用。方法使用豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)诱导U937细胞分化使之具有吞噬能力,分别用胞内分枝杆菌(M.intracellulare)、结核分枝杆菌(MTB)、脓肿分枝杆菌(M.abscessus)感染已分化的U937细胞,于感染后0、4、8、24、48和72h提取细胞,用流式细胞仪检测u937细胞凋亡率及细胞膜TLR2的表达,Western blot检测U937细胞感染后72 h时细胞内总TLR2的含量,并观察阻断TLR2后U937细胞感染分枝杆菌后的凋亡变化。结果 M.intracellulare M.abscessus感染U937细胞后的细胞凋亡率随时间的推移逐渐升高,4h后凋亡率已显著高于正常对照组,而MTB感染后的细胞凋亡率也有升高但与正常对照组差异无统计学意义;3种分枝杆菌感染U937细胞后的细胞凋亡率差异有统计学意义(P<0.05),由高到低的排列依次为M.abscessus、M.intracellulare和MTB。U937细胞的TLR2表达量在分枝杆菌感染后4 h内迅速升高,8 h后TLR2的含量稳定下来,不同分枝杆菌感染U937细胞后TLR2的表达并不相同(P<0.05),由高到低的排列依次为MTB、M.intracellulare和M.abscessus。阻断U937细胞的TLR2可以明显降低感染分枝杆菌后细胞的凋亡率。结论 TLR2并不直接引起巨噬细胞的凋亡,但TLR2在分枝杆菌诱导巨噬细胞凋亡中有重要作用。     

结核分支杆菌感染与巨噬细胞的凋亡

巨噬细胞是结核分支杆菌在体内的主要宿主细胞,发生凋亡后,可杀灭胞内感染的结核分支杆菌其在体内的扩散。不同毒力的结核分支杆菌的感染可诱导巨噬细胞产生不同水平的凋亡。与结核分支杆菌减毒株及无毒株相比,结核分支杆菌毒力株可通过一系列机制抑制巨噬细胞凋亡,以逃避巨噬细胞的杀伤。进一步了解结核分支杆菌感染与巨噬细胞凋亡之间的机制与相关分子基础,有助于人们更好地预防和控制结核病。     

HIV合并结核分枝杆菌感染的探索研究

目的 了解该地区HIV合并结核分枝杆菌(TB)感染的发展状况.方法 随机选取2008年1月至2010年12月在该院检查并接受治疗的177例HIV感染者作为调查对象,统计这些病例中感染TB的例数,分析该地区HIV感染者合并TB感染的百分率,并进行TB药敏分析.结果 在177例HIV感染患者中有29例患者合并感染TB,占16.38%,其中男21例,占72.41%(21/29),女8例,占27.59%(8/29),差异有统计学意义(P<0.01).而在29例HIV合并TB感染患者中,TB对利福平、乙胺丁醇、链霉素、异烟肼的敏感性分别为100.00%、100.00%、89.65%、75.86%.结论 HIV合并TB感染是HIV患者死亡的最重要因素,在临床中应加强检测并合理使用抗菌药物和抗病毒药物,以减少HIV感染者的病死率.     

结核分枝杆菌抗原激活核因子κB延迟中性粒细胞自发凋亡的作用

目的 探讨结核分枝杆菌抗原(Mtb-Ag)对中性粒细胞自发凋亡的影响.方法 取健康成人外周血分离中性粒细胞,加Mtb-Ag培养24 h,或用核因子κB(NF-κB)抑制剂N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮(TPCK)预处理30 min后,膜联蛋白V(AnnexinV/PI)染色,流式细胞术观察细胞凋亡情况;并用凝胶电泳迁移率变动分析(EMSA)化学发光法检测Mtb-Ag刺激0、1、2、4、6、24h后,中性粒细胞NF-κB的DNA结合活性.结果 加Mtb-Ag(1.125 mg/ml)培养的中性粒细胞凋亡率(32%±3%)与中性粒细胞体外培养24 h后自发凋亡率(55%±6%)相比,明显降低(P＜0.05).Mtb-Ag(1.125 mg/ml)作用中性粒细胞1 h后明显可见NF-κB活化,2 h NF-κB的DNA结合活性达高峰,24h回到静息水平;经TPCK(30 μmol/L)预处理后可阻断Mtb-Ag的抑制凋亡作用.结论 经激活NF-κB介导后,Mtb-Ag对中性粒细胞自发凋亡有抑制作用.     

综合医院结核分枝杆菌感染实验室检查共识

综合医院结核分枝杆菌感染（结核病）的病原学诊断一直是业界焦点。编写组专家对综合医院结核分枝杆菌感染（结核病）的微生物学检查进行了讨论,撰写了专家共识,并对一些关键问题给出了推荐。本文包括涂片、培养、药敏试验等技术内容,希望能为临床处置、实验室工作提供合理、实用的帮助。     

重组结核分枝杆菌38KDa蛋白用于军人结核分枝杆菌感染筛查

目的 评价重组结核分枝杆菌蛋白38KDa皮试注射液(rTPA38)用于军人结核分枝杆菌感染筛查的价值.方法 以结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)为对照,采用同体双臂Mantoux法(皮内注射)为1 150人同时做PPD和rTPA38皮试;皮试后24 h,48 h双盲测量皮试反应(包括红晕或硬结).PPD和rTPA38皮试阴性者接种卡介苗,3个月后同前进行皮试试验.结果 局部皮肤红晕(或硬结)横、纵平均直径≥5 mm为阳性.24.6％受试者rTPA38皮试反应阳性,阳性反应直径集中于5 mm～10 mm;53.0％受试者PPD皮试反应阳性,阳性反应直径集中于5 mm～15 mm.rTPA38皮试反应阳性率随年龄增长基本呈现上升趋势,同一年龄段,rTPA38皮试反应阳性率明显低于PPD( P＜0.01).有卡痕与无卡痕受试者rTPA38皮试反应阳性率比较、统计学分析差异有极显著性意义(x2=27.06,P＜0.01).PPD皮试阳转率与rT-PA38皮试阳转率分别为62.0％和27.2％,两者比较差异有极显著性意义(x2=52.90,P＜0.01).结论 rTPA38可作为结核分枝杆菌感染筛查的诊断试剂.     

结核分枝杆菌医源性感染及其消毒方法

结核杆菌属分枝杆菌属（Ｍｙｃｏｂａｃ－ｔｅｒｉｕｍ）,是人类结核病的主要致病菌。能够引起人类结核病的还有牛型结核分枝杆菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ Ｂｏｖｉｓ）和非洲人型结核分枝杆菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ Ａｆｒｉｃａｎｕｍ）以及能引起类结核样病变的非典型分枝杆菌（Ａｔｙｐｉｃａ　 Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）［１］。非典型分枝杆菌广泛存在于土壤、水和环境物品中,对自然界理化因子抗力强、容易产生耐药性,是现代医院内感染的重要致病菌。临床上能引起人类感染致病的常见非典型分枝杆菌见表１。 结核病…     

结核分枝杆菌mpt64基因突变研究

目的分析结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)mpt64基因突变情况。方法提取MTB标准株H37Rv和45株MTB临床株的DNA,扩增mpt64基因并进行序列分析。结果 MTB标准株H37Rv和44株MTB临床株的mpt64基因无突变,1株MTB临床分离株的mpt64基因存在63个碱基的缺失突变。结论结核分枝杆菌mpt64基因突变频率低。     

耐药结核分枝杆菌基因变异研究

目的 研究多药结核分枝杆菌ｋａｉＧ、ｉｎｈＡ基因的变异机理。方法 用ｋａｔＧ、ｉｎｈＡ基因片引物,聚合酶链反应扩增产物,克隆后制质粒、直接测定ＤＮＡ序列。结果 １５株耐异烟肼菌株均有ｋａｔＧ基因突变,主要为点突变,其中１４株有４６３位和３１５位ＡＡＰ２密码改变,在１８个耐异烟肼菌株中,全部出现基因ｉｎｈＡ 基因变异,主要为点突和人,以单个点变异主,各菌株变异不同,ｋａｔＧ、ｉｎｈＡ基因同时出现变异     

结核分枝杆菌感染与细胞因子的关系

结核病的发生和治疗转归与机体免疫状态有密切关系.细胞因子在结核感染免疫应答过程中发挥重要作用.有研究显示,细胞因子在结核分枝杆菌(MTB)感染人体时具有重要的免疫介导作用,T细胞反应性不足将导致宿主不能有效清除病原菌,从而导致MTB的持续感染[1],增强T 细胞免疫反应可提高抗分枝杆菌的免疫力. T细胞分泌的细胞因子对...     

结核分枝杆菌实验室诊断方法的研究比较

自20世纪60年代起,结核病化学治疗已取代过去消极的“卫生营养疗法”,使新发现的结核病治愈率达到95％以上。但20世纪80年代中期以来,结核病出现全球性恶化趋势,目前,全球大约1／3的人口已感染结核分枝杆菌（MTB）,有2000万活动性结核病患者,每年约有300万人死于结核病,结核病已成为威胁人类健康的一个严重的全球性公共卫生问题［1］。因此,对于结核病的早期诊断尤为重要。结核病的实验室诊断方法有细菌学、免疫学、分子生物学三个大的方面,包含了许多技术,这些技术各有优劣,应该适当地结合互补。本文对将这些实验室诊断方法的特点和优劣势进行简要阐述。     

结核分枝杆菌耐药基因突变的研究

结核病在许多国家出现回升的一个主要原因是细菌耐药性问题 ,随着联合药物治疗的使用 ,又出现了耐多药结核分枝杆菌 (结核菌 ) ,使许多结核病 ,难以治疗 ,增加了死亡率[1] 。目前对于结核菌的耐药机制的研究已有了较大的进展 ,细菌内一些酶的基因突变或缺失是导致耐药的重要原因。随着分子生物学技术的发展 ,通过聚合酶链反应 (PCR)等方法对耐药基因进行快速检测 ,大大缩短了检测时间 (2～3d) ,为耐药结核菌的治疗提供参考。本研究通过PCR -SSCP ,PCR -测序技术检测结核菌临床分离株的katG、rpoB和rpsL基因序列 ,分析济南军区结核菌…     

两种常见非结核分枝杆菌与结核分枝杆菌基因同源抗原、B细胞抗原表位和抗体交叉反应研究

目的 探讨我国常见两种非结核分枝杆菌与结核分枝杆菌蛋白抗原的交叉免疫反应状况,为以非结核分枝杆菌研制新型结核疫苗提供参考依据。方法 平均核酸一致性计算器计算胞内分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和结核分枝杆菌的基因组同源性,OrthorFinder软件分析3种菌的同源基因,与结核分枝杆菌B细胞抗原表位编码基因进行比对。分别制备3种菌的灭活菌体抗原和全菌蛋白抗原,对新西兰大白兔进行皮下注射免疫。采用间接酶联免疫吸附试验技术,分别检测3种免疫兔血清抗体Ig G水平及交叉免疫的血清抗体Ig G水平。结果 脓肿分枝杆菌、胞内分枝杆菌与结核分枝杆菌同源基因分别为2 350个和2 740个,其同源基因中分别有479个和521个富含B细胞抗原表位。结核分枝杆菌、胞内分枝杆菌和脓肿分枝杆菌的蛋白抗原均能刺激兔产生较高水平的抗体滴度,分别达到1∶320 000、1∶160 000和1∶80 000。胞内分枝杆菌和脓肿分枝杆菌免疫兔血清均可与结核分枝杆菌抗原产生高水平的交叉反应,抗体滴度分别达到1∶40 000和1∶80 000。结论 胞内分枝杆菌、脓肿分枝杆菌与结核分枝杆菌之间均存在高水平的抗体交叉免疫反应,提示上...