运动对糖尿病大鼠骨骼肌葡萄糖运载体基因表达的影响

目的研究运动对链脲佐菌素引起的糖尿病大鼠骨骼肌细胞内葡萄糖运载体４（ｇｌｕｃｏｓｅｔｒａｎｓ－ｐｏｒｔｅｒ，ＧＬＵＴ４）基因表达的作用。方法实验大鼠分为３组：（１）糖尿病非运动组；（２）糖尿病运动组；（３）正常对照组。每组６只大鼠。糖尿病运动组大鼠进行６周游泳训练。用斑点杂交法检测３组大鼠骨骼肌细胞内ＧＬＵＴ４ｍＲＮＡ含量。结果糖尿病大鼠骨骼肌细胞内ＧＬＵＴ４基因表达明显降低，ＧＬＵＴ４ｍＲＮＡ含量与正常对照组相比减少５４．９％。糖尿病运动组大鼠经过６周运动训练，血糖由１８．５±１．９ｍｍｏｌ／Ｌ降至１４．０±３．３ｍｍｏｌ／Ｌ（ｔ＝４．６４，Ｐ＜０．０１），骨骼肌细胞内ＧＬＵＴ４ｍＲＮＡ含量与糖尿病大鼠相比增加５６％（ｔ＝１５．５６，Ｐ＜０．０１）。结论在糖尿病高血糖状态下，大鼠骨骼肌细胞内的ＧＬＵＴ４基因表达受到抑制，这可能是胰岛素抵抗受体后缺陷的重要原因。运动训练能够促进糖尿病大鼠受抑的ＧＬＵＴ４基因表达的部分恢复，这可能是运动增加外周组织对胰岛素的敏感性，降低血糖的机制之一。     

二甲双胍对糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4基因表达的影响

观察二甲双胍对ＳＴＺ糖尿病大鼠血糖和骨骼肌中葡萄糖转运体Ⅳ（ＧＬＵＴ４）基因表达的影响。方法ＳＴＺ糖尿病大鼠每公斤体重１００ｍｇ／ｄ二甲双胍灌胃治疗３周后，斑点杂交测定骨骼肌中的ＧＬＵＴ４ｍＲＮＡ含量。结果糖尿病治疗组的血糖降低３０．３％，较非治疗组低２８．６％，而骨骼肌中ＧＬＵＴ４ｍＲＮＡ含量较非治疗组高６５．６％。结论二甲双胍促进骨骼肌中ＧＬＵＴ４基因表达可能是其降低ＳＴＺ糖尿病大鼠血糖的机制之一。     

二甲双胍对糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4基因表达的影响

目的 观察二甲双胍对ＳＴＺ糖尿病大鼠血糖和骨骼肌中葡萄糖转运体ＩＶ（ＧＬＵＴ４）基因表达的影响。方法 ＳＴＺ糖尿病大鼠每公斤体重１００ｍｇ／ｄ二甲双胍灌胃治疗３周后，斑点杂交测定骨骼肌中的ＧＬＵＴ４ｍＲＮＡ含量。结果 糖尿病治疗组的血糖降低３０．３％，较非治疗组低２８．６％，而骨骼中ＧＬＵＴ４ｍＲＮＡ含量较非治疗组高６５．６％，结论 二甲双胍促进骨骼肌中的ＧＬＵＴ４基因表达可能是其降低ＳＴＺ糖尿病     

NIDDM发病前后中国地鼠胰岛和肝脏细胞GLUT的变化研究

用胶原酶法分离胰岛细胞、超速离心法提取中国地鼠胰岛和肝脏细胞膜蛋白，ＳＤＳ电泳、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ分离ＧＬＵＴ后，应用ＧＬＵＴ２抗体免疫结合法测定ＧＬＵＴ的含量与分子量，同时测定了动物血糖、尿糖和血浆胰岛素的含量、显微镜下直接计数了胰岛细胞总数。结果表明：ＮＩＤＤＭ发病后，自发ＮＩＤＤＭ中国地鼠胰岛细胞ＧＬＵＴ含量减少，与ＧＬＵＴ２抗体反应明显减弱，但肝脏ＧＬＵＴ无明显变化。胰岛细胞总数发病前后大体一致。而血糖、尿精及血浆胰岛素浓度明显升高。     

实验性癫痫大鼠脑内Bcl—2蛋白折表达及意义

为探讨Ｂｃｌ－２蛋白在神经元死亡中的作用，以戊四氮为致痫剂，诱导大鼠ＧＣＳＥ（Ｇｅｎｅｒａｌ ｃｏｎｖｕｌｓｉｖｅ ｓｔａｔｕｓ ｅｐｉｌｅｐｔｉｃｕｓ，ＧＣＳＥ），腹腔注射戊四氮后不同点，用末端标记ＴＵＮＥＬ法检测脑内海马凋亡细胞，并用免疫组织化学法检测Ｂｃｌ－２蛋白的表达，并对其意义进行探讨。结果发现海马神经元凋亡发生较迟，戊四氮腹腔注射后４８ｈ达高峰，而Ｂｃｌ－２表达高峰为戊四氮腹腔注射后４     

葡萄糖转运蛋白1基因多态性对成纤维细胞糖代谢的影响

高血糖和遗传体质因素是糖尿病肾病 (ＤＮ)的主要发病因素。研究表明 ,葡萄糖转运蛋白 1基因 (ｇｌｕｃｏｓｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ1,ＧＬＵＴ1)ＸｂａＩ(- )等位基因与 2型ＤＮ的发生相关[1] 。ＧＬＵＴ1是肾小球系膜细胞的主要葡萄糖转运蛋白[2 ] ,负责细胞的基础代谢 ,其表达与活性可能在ＤＮ细胞糖代谢异常中起了重要作用[3] 。为了进一步揭示ＧＬＵＴ1基因多态性与其功能之间的联系 ,我们对ＧＬＵＴ1不同基因型ＤＮ和正常人皮肤成纤维细胞葡萄糖摄入率和动力学 ,ＧＬＵＴ1的表达及细胞表型进行了研究。一、对象分别对 5 4名汉族健康…     

乐胃煎对大鼠胃粘膜上皮异型增生细胞凋亡及调控基因（Bcl—2,F …

目的 研究乐胃煎对胃粘膜上皮产生大鼠胃粘膜上皮细胞凋亡及调控基因（Ｂｃｌ－２、Ｆａｓ、ＩＣＥ）蛋白表达的影响,探讨乐胃煎治疗胃粘膜癌前病变的机制。方法 用Ｎ－甲基－Ｎ－亚硝基胍（ＭＮＮＧ）建立大鼠胃粘膜上皮异型增生模型,设立空白组、造模组、乐胃煎治疗组和维甲酸对照组,对大鼠胃粘膜用ＴＵＮＥＬ法检测细胞凋亡,用免疫组织化学法检测Ｂｃｌ－２、Ｆａｓ、ＩＣＥ蛋白表达水平。结果 空白组、对照组、治疗组和造     

心肌细胞缺氧通过激活AMPK促进GLUT4移位和葡萄糖摄取

目的：探讨心肌缺氧时ＡＭＰ激活的蛋白激酶（ＡＭＰＫ）激活对葡萄糖转运子４（ＧＬＵＴ４）移位和葡萄糖摄取的作用。方法：大鼠心室肌经５００μｍｏｌ／Ｌ腺嘌呤－９－β－Ｄ－阿糖呋喃腺苷（ａｒａＡ）处理后,分别与胰岛素、氰化钾、５－氨基咪唑－４－氨基甲酰－１－β－Ｄ核糖呋喃腺苷（ＡＩＣＡＲ）孵育,用放射性核素分析技术测定其葡萄糖摄取量和ＡＭＰＫ活力,应用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法分析心肌细胞ＧＬＵＴ４含量。结果：ＡＭＰＫ特异性激活剂ＡＩＣＡＲ和氰化钾可使心肌葡萄糖摄取增加（１倍和１．５倍）,但均受ａｒａＡ抑制。ＡＩＣＡＲ增加心肌ＡＭＰＫ活力和葡萄糖摄取,而ａｒａＡ则有抑制作用。心肌细胞质膜ＧＬＵＴ４分布明显增加而细胞器膜ＧＬＵＴ４分布相应减少。结论：氰化钾所致的心肌缺氧与ＡＩＣＡＲ一样可通过ＡＭＰＫ激活途径,促进ＧＬＵＴ４移     

大鼠卵巢颗粒细胞IGF-Ⅰ、TGFβ、Fas-L表达与卵泡闭锁发生的研究

为研究ＩＧＦ－Ⅰ,ＴＧＦβ和Ｆａｓ－Ｌ在维持卵泡颗粒细胞存活和介导颗粒细胞凋亡中的作用,探讨卵泡闭锁的局部分子机理,将ＳＤ大鼠卵巢石蜡切片,用ＴＵＮＥＬ法和ＰＣＮＡ免疫组化法区别闭锁和生长卵泡,用免疫组化法标记这三种因子以及它们的膜受体在卵泡内的表达。结果显示：无腔和有腔生长卵泡内大多数颗粒细胞为ＰＣＮＡ阳性;早期有腔闭锁卵泡有５个以上颗粒细胞被ＴＵＮＥＬ法标记,部分颗粒细胞为ＰＣＮＡ阳性;晚期有腔闭锁卵泡剩余颗粒细胞多数被ＴＵＮＥＬ法所标记,但为ＰＣＮＡ阴性。有腔生长卵泡颗粒细胞ＩＧＦ－Ⅰ、ＩＧＦ－ＩＲ、ＴＧＦβ、ＴＧＦβＲ、Ｆａｓ、Ｆａｓ－Ｌ均为阳性。早晚期有腔闭锁卵泡的颗粒细胞为Ｆａｓ、ＴＧＦβ和ＴＧＦβＲ阳性。结果提示：ＴＵＮＥＬ法和ＰＣＮＡ免疫组化联合运用有利于区分闭锁卵泡和生长卵泡。ＩＧＦ－Ⅰ仅对有腔生长卵泡颗粒细胞有促进增殖和维持存活的作用,其表达的下降和消失为有腔卵泡闭锁的重要诱因。ＴＧＦβ、Ｆａｓ－Ｌ和Ｆａｓ可能介导有腔卵泡颗粒细胞的凋亡,参与闭锁过程,但在有ＩＧＦ－Ⅰ存在的条件下,其介导作用可能受到抑制     

肾皮质细胞膜TGFβ受体在大鼠糖尿病发病中的作用

目的研究肾皮质细胞膜转化生长因子β（ＴＧＦβ）受体（ＴβＲ）在大鼠糖尿病发病中的作用。方法观察单侧肾切除后建立的糖尿病大鼠４周后血糖、血胰岛素、血肌酐水平、体重、肾重、肾组织蛋白含量及血浆、肾皮质、髓质ＡＣＥ活性的变化;利用ＲＴ－ＰＣＲ检测肾皮质中ＴβＲⅠ、ⅡｍＲＮＡ表达,Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交检测肾皮质细胞膜ＴβＲⅠ蛋白表达。结果同对照组相比,糖尿病大鼠尽管体重进行性下降,肾重和肾组织蛋白含量却明显增加,肾皮质中ＡＣＥ活性也明显增加。ＲＴ－ＰＣＲ检测肾皮质内ＴβＲⅠ、ⅡｍＲＮＡ表达分别增加１．１２和４．０倍;Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交显示肾皮质细胞膜ＴβＲⅠ蛋白表达增加１．１０倍。结论糖尿病大鼠肾皮质中ＴＧＦβＲ表达明显上调,可能是高糖和局部ＲＡＳ活性增加共同作用的结果。     

游离脂肪酸对大鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运蛋白4和胰岛素信号传导蛋白的影响

目的：观察游离脂肪酸对大鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）和胰岛素信号传导蛋白Grb2及ERK2的影响。方法：分离、培养新生Sprague-Dawley大鼠骨骼肌细胞,分别与软脂酸（0．25mmol/L)或油酸（0．125mmol/L)孵育12、24、36h,提取蛋白后用Western印迹法检测GLUT4、Grb2和ERK2的蛋白水平;用斑点印迹杂交法检测骨骼肌细胞内GLUT4 RNA含量的变化。结果：经软脂酸和油酸孵育12、24、36h后,大鼠骨骼肌细胞GLUT4的蛋白和RNA水平均显著降低（P＜0．05）;同时,Grb2和ERK2的蛋白水平也明显下降（P＜0．05）。结论：游离脂肪酸可抑制GLUT4的基因及蛋白表达和降低胰岛素信号传导蛋白Grb2和ERK2的蛋白表达水平,这可能会影响胰岛素的信号传导作用和骨骼肌的葡萄糖摄取,引起骨骼肌的胰岛素抑抗。     

Effect of exercise on the expression of adiponectin mRNA and GLUT4 mRNA in type 2 diabetic rats

Insulin resistance is a critical pathophysiologi cal event in the development of type 2 diabetes.Adiponectin, which is a cytokine, has until nowbeen considered to be synthesized and secreted ex clusively by the adipose tissue. Adiponectin pos sesses anti hyperglycemic, anti insulin resistanceproperties. Glucose transporter 4 (GLUT 4) is therate limiting factor in glucose transport and insu lin stimulated GLUT4 translocation is impaired inpeople with type 2 di…     

钒酸钠治疗增加实验性糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4表达的研究

目的探讨钒酸钠类胰岛素作用及骨骼肌GLUT4(葡萄糖转运蛋白4)在其作用中机制.方法 Wistar大鼠40只,体质量180～250 g,随机分为2组,一组应用链脲佐菌素(55 mg/kg)腹腔内注射,5 d后血糖大于13.5 mmol/L定为糖尿病大鼠,另一组为正常对照鼠,然后将正常对照组与糖尿病组大鼠各随机分为2组.加钒组隔日管饲0.4%钒酸钠水稀释液,对照组饮用0.9%生理盐水,观察基本指标变化,持续2周后在麻醉情况下迅速分离提取骨骼肌及血液标本,应用Western blot 和RT-PCR技术测定GLUT4的蛋白和基因表达.结果钒酸钠治疗糖尿病大鼠PG、TG、INS降低,糖尿病大鼠GLUT4蛋白和GLUT4mRNA表达与正常对照组比较降低明显,钒酸钠治疗糖尿病大鼠GLUT4蛋白和GLUT4mRNA表达增加接近正常对照组水平.结论钒酸钠治疗糖尿病大鼠在不增加胰岛素释放的情况下具有明显改善糖脂代谢的效果,使降低GLUT4水平恢复接近正常,说明钒酸钠增加糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4表达使周围组织葡萄糖摄取利用紊乱增加可能是降低血糖机制之一.     

运动对2型糖尿病大鼠脂联素和 GLUT4基因表达的影响

目的 观察游泳运动对2型糖尿病大鼠肾周脂肪脂联素和骨骼肌GLUT4基因表达的影响。方法 采用小剂量链脲佐菌素加高脂高热量饲料喂养的方法建立Wistar大鼠2型糖尿病模型，给予游泳运动训练8周，检测大鼠肾周脂肪脂联素mRNA和骨骼肌GLUT4mRNA表达的变化以及血糖、胰岛素、血脂等代谢指标。结果 糖尿病模型组肾周脂肪脂联素mRNA和骨骼肌GLUT4 mRNA表达显著降低，分别较正常对照组降低了45％（P〈0．01）和43％（P〈0．01），空腹血清胰岛素，甘油三酯、总胆固醇和游离脂肪酸水平较对照组显著升高：游泳运动组脂联素和骨骼肌GLUT4mRNA的表达较模型组显著升高，分别为模型组的1．39倍（P〈0．05）和1，62倍（P〈0．01），接近对照水平，空腹胰岛素较模型组显著降低（P〈0．01），甘油三酯、总胆固醇和游离脂肪酸水平均显著低于模型组（P〈0.05或P〈0．01）。结论 游泳运动可能通过提高脂肪脂联素和骨骼肌GLUT4 mRNA的表达，改善胰岛素抵抗。     

GLUT4mRNA在非胰岛素依赖型糖尿病大鼠心肌组织中的表达

目的：研究非胰岛依赖型糖尿病（NIDDM）大鼠心肌组织葡萄糖转运体4（glucose transporter4,GLUT4)mRNA表达变化。方法：制备NIDDM大鼠模型,用Northern blotting方法测定心肌组织中GLUT4mRNA表达量。结果：NIDDM大鼠心肌组织GLUT4mRNA表达显著低下,仅为对照组的54％（P＜0．01）。结论：NIDDM大鼠心肌GLUT4mRNA表达量低下,该反应与NIDDM大鼠体内胰岛素分泌总体水平低下有关。     

胰岛素降低STZ诱导的短期糖尿病大鼠心肌原癌基因c-myc的表达

目的观察原癌基因c-myc在糖尿病大鼠心肌肥大中的表达及胰岛素对其干预作用.方法腹腔注射链脲菌素60 mg·kg-1诱导大鼠糖尿病模型,1、3及7天时分别测定其血糖及体重情况.第3天时提取左心室总RNA,采用PT-PCR法测定原癌基因c-myc的表达.结果正常组大鼠的平均血糖水平为5.55±1.23 mmol·L-1,糖尿病组大鼠在腹腔注射链脲菌素后1、3、7天其血糖水平分别为21.92±6.94 mmol·L-1、26.42±1.82 mmol·L-1、28.98±7.27 mmol·L-1,胰岛素预处理组大鼠在腹腔注射链脲菌素后1、3、7天其血糖水平分别为16.59±1.13 mmol·L-1、18.34±1.82 mmol·L-1、17.77±1.22 mmol·L-1.3天时糖尿病组大鼠原癌基因c-myc的表达量是对照组的4倍,胰岛素预处理可以显著抑制c-myc原癌基因的表达.结论糖尿病大鼠的心肌肥大与c-myc原癌基因的过多表达有关,胰岛素预处理可抑制c-myc原癌基因的表达.     

缺氧习服大鼠骨骼肌葡萄糖转运体特点的研究

目的探讨缺氧习服后组织葡萄糖转运体的变化特点及葡萄糖摄取变化机制.方法将缺氧组大鼠置模拟海拔5 000 m低压舱内,30 d后取双后肢骨骼肌测定组织葡萄糖水平、葡萄糖摄取率,并分离细胞膜、细胞内质膜,用同位素标记的葡萄糖进行Scatchard分析测定葡萄糖转运体密度及其亲和力,通过免疫印迹测定葡萄糖转运体1、4的表达.对照组大鼠在平原进行,其它操作及条件与缺氧组相同.结果缺氧组大鼠骨骼肌葡萄糖含量增加、葡萄糖摄取率增强,骨骼肌细胞膜、细胞内质膜上葡萄糖转运体密度均非常显著地高于对照组.葡萄糖转运体1、4在细胞膜、细胞内质膜上的表达量较对照组显著增加.缺氧组葡萄糖转运体4 mRNA显著高于对照组,葡萄糖转运体1 mRNA水平变化不显著.结论表达增强,细胞膜与细胞内质膜上转运体密度均增加是缺氧习服后大鼠骨骼肌葡萄糖转运体的变化特点,是缺氧习服后骨骼肌葡萄糖摄取能力增强的重要原因之一.     

钒酸钠对STZ-糖尿病大鼠心肌细胞膜GLUT4易位的影响

目的探讨钒酸钠类胰岛素作用及对实验性糖尿病大鼠心肌组织葡萄糖转运蛋白4 (glucose transpoter type 4, GLUT4)与胰岛素刺激GLUT4易位的影响.方法 40只Wistar大鼠随机分为2组,1组应用链脲佐菌素(55 mg/kg)腹腔内注射,5 d后血糖大于13.5 mmol/L定为实验性糖尿病大鼠(STZ-D大鼠),然后将STZ-D大鼠组及正常组再分为2组,加钒组隔日管饲0.4% 钒酸钠稀释液,持续4周后在麻醉情况下每组各一半大鼠在尾静脉注射5U /kg诺和正规胰岛素治疗,5 min后心脏抽取血液标本并提取心脏,应用Western blot 技术测定GLUT4蛋白表达.结果钒酸钠治疗使STZ-D大鼠血糖、甘油三酯、胰岛素降低,STZ-D大鼠心肌细胞膜GLUT4蛋白含量与正常对照组比较明显降低(53%),而钒酸钠与胰岛素合用治疗STZ-D大鼠可使心肌细胞膜GLUT4增加2.7倍.结论钒酸钠治疗STZ-糖尿病大鼠在不增加胰岛素释放的情况下具有明显改善糖脂代谢的效果,糖尿病大鼠心肌细胞膜GLUT4含量减少可能是引起心肌葡萄糖转运障碍及心功能下降的因素,钒酸钠治疗使胰岛素调节GLUT4转运易位增加致心肌组织对葡萄糖摄取利用加强可能是某些降低血糖的机制以及改善心功能原因.     

早期胰岛素治疗对糖尿病大鼠骨骼肌核因子κB炎症通路的影响

目的 探讨早期胰岛素治疗对2型糖尿病大鼠骨骼核因子(NF)-κB炎症信弓通路的影响.方法 建立高脂喂养联合小剂馈链脲佐菌素诱导的2型糖尿病SD大鼠模型.糖尿病大鼠随机分为早期和晚期治疗组:早期治疗在血糖升高后3 d 开始,给予中效胰岛素或格列奇特治疗3周;晚期治疗在血糖升高后4周开始,给予中效胰岛素治疗3周.血糖控制目标足随机血糖<8 mmol/L.通过实时定量PCR和Western印迹检测骨骼肌葡萄糖转运子4(Glut4)基因和蛋白表达,胞质IkBα蛋白表达,肿瘤坏死因子(TNF)-αoL、白细胞介素(IL)-6、IL-1β基因表达,ELISA测定NF-κB P65 DNA结合活性.结果 糖尿病大鼠骨骼肌Glut4 mRNA表达水平比正常对照下降59%,膜上Glut4蛋白水平下降69%.与未治疗组比较胰岛素和格列奇特治疗使Glut4 mRNA表达增加了17%和13%,膜上蛋白表达增加23%和10%(0.12±0.02 vs 0.21±O.07和0.16±0.03,P<0.05),并且使胞质内Glut4蛋白水平降低.糖尿病大鼠骨骼肌IκBα蛋白比正常对照降低(0.28±0.02 vs 0.36±0.06,P<0.05);NF-κB P65 DNA结合活性增加,TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达上调.早期胰岛素和格列奇特治疗使IκBα蛋白比未治疗组表达增加(0.41±0.06和0.39±0.05 vs 0.28±0.02,P<0.05),NF-κBP65 DNA结合活性下降,骨骼肌TNF-α.基因表达下降.结论 早期胰岛素治疗可抑制2型糖尿病大鼠骨骼肌细胞活化的NF-κB信号通路和炎症因子,其机制和早期代谢控制改善糖脂毒性有关.