利用组织芯片技术观察p53及其同系物p63在恶性肿瘤中的表达

目的 探讨p53和p63在部分肿瘤发生中的作用，为其人群大规模筛查、早期诊断及预后评估提供依据。方法 选取病理科档案材料中食管鳞癌、胃腺癌、大肠腺癌、膀胱移行细胞癌、肺癌、肝细胞性癌、乳腺浸润导管癌、肾透明细胞癌、卵巢腺样囊腺癌和胰腺癌石蜡包埋组织各6例及相应正常组织各3例。肿瘤标本先观察苏木精—伊红(HE)切片以确定肿瘤部位，采用组织芯片仪及手工法制作180点列阵组织芯片，进行p53和p63抗体免疫组化染色。光镜观察p53、p63阳性细胞在各组的分布，并进行对比分析。结果 p53表达类型：(1)正常组织p53阳性细胞数很少；(2)3例食管癌、3例胃癌、2例大肠癌、1例肺癌、1例乳腺癌、2例卵巢癌的绝大多数肿瘤细胞呈强阳性棱染色反应，癌旁组织细胞和间质细胞阴性，1例膀胱癌中有少量阳性肿瘤细胞散在分布于阴性肿瘤细胞中。p63表达类型：(1)正常食道复层扁平上皮基底层细胞呈棱染色，p63阳性细胞散在分布于棘细胞层；(2)6例食道癌、6例膀胱癌和4例肺鳞癌均为强阳性反应，大多数肿瘤细胞呈强棱染色，癌旁组织细胞和间质细胞p63阴性；两例肺腺癌p63阴性；(3)6例胃癌中的4例、6例大肠癌中的3例、6例乳腺浸润导管癌中的2例、6例肝细胞性癌中的1例可见较强的肿瘤细胞胞质染色。其中3例食管癌、3例胃癌、1例大肠癌、1例肺癌、1例乳腺癌的肿瘤细胞同时呈p53和p63阳性反应。结论 p53在正常组织中表达量很少，在多种肿瘤细胞中表达量升高；p63阳性细胞主要位于正常上皮组织的增殖区，而在多种癌细胞中表达增强，两者在肿瘤细胞中不同的分布情况提示其在肿瘤的发生发展中作用途径不同。     

Pirh2、p53的相互关系及其在恶性肿瘤中的作用

最新研究表明，Pirh2（for p53-induced protein with a RING-H2 domain）通过自身相互作用和泛素介导的蛋白质降解的作用负反馈调节p53。而p53作为肿瘤抑制因子在整个恶性肿瘤的发生发展过程中起到非常重要的作用，认识也是比较清楚的一个抑癌基因。本文就Pirh2和p53两者的结构基础及其相互关系等方面综述他们在恶性肿瘤的作用。     

p73、p63和p53蛋白在口腔鳞癌中的表达及其意义

目的　研究口腔鳞癌组织中p73，p63和p53蛋白表达以及与临床生物学特性和细胞增殖的关系。方法　采用免疫组化方法检测48例原发性口腔鳞癌组织及20例正常口腔黏膜组织中p73，p63和p53蛋白的表达水平。结果　p73，p63和p53蛋白在口腔鳞癌中阳性表达率显著高于正常口腔黏膜组织(P<0.05) ；p73、P63、p53蛋白在口腔鳞癌临床Ⅰ、Ⅱ期的过表达明显低于Ⅲ、Ⅳ期(P＜0.05) ；p73蛋白过表达与淋巴结转移有关(P＜0.05) ；p73蛋白与p53蛋白,p63蛋白与p53蛋白之间存在着正相关(r= 0.368,0.342,P＜0.05)。结论　在口腔鳞癌的发生发展过程中，p73，p63和p53的过表达三者可能单独或共同参与。p73和p63之间的交互作用，在口腔鳞癌的发生过程中起重要作用。     

宫颈癌组织中HPVl6.18E6蛋白的表达及其与p53蛋白表达的关系

目的观察人乳头状瘤病毒(HPV)16型和18型早期蛋白E6及p53蛋白在宫颈癌(CCa)中的表达,并分析二者的关系。方法采用LSAB免疫组化法,检测多种宫颈病变中HPVl6.18E6蛋白的表达及CCa中p53蛋白的表达。标本包括正常宫颈组织40例,宫颈湿疣44例,宫颈上皮肉瘤变(CIN)Ⅰ～Ⅱ级45例,CINⅢ级41例,CCa52例。结果上述宫颈病变组织中HPVl6、18E6总阳性率分别为2.0％,7.1％,22.2％,43.9％和67.3％,各病变组阳性率均显著高于正常宫颈组(P＜0.01);54例CCa中p53蛋白阳性者6例(11.5％),均为鳞癌,其中3例伴有HPVl6.18E6阳性。结论HPVl6.18型感染与CCa及其癌前病变的发生关系密切,HPVl6.18E6单克隆抗体可作为检测HPVl6.18感染及CCa早期诊断的标记之一。本研究显示p53基因突变与HPV感染无显著相关性。     

超声造影技术在宫颈癌中的应用及其与p16、p53表达的关系

目的采用超声造影技术对宫颈癌进行定量和定性分析,并探讨超声造影特点与p16、p53表达的关系。方法回顾性分析经手术已证实的40例宫颈癌患者,术前均行超声造影检查,记录超声造影增强特点和时间-强度曲线参数的特征,术后采用免疫组化法测定p16、p53表达的情况,并分析宫颈癌超声造影特征与p16、p53表达的关系。结果 (1)宫颈癌患者p16、p53阳性表达率分别为80%(32/40)和67.5%(27/40);(2)与p16、p53表达阴性组比较,p16、p53表达阳性组不均匀性增强和灌注缺损的概率均明显增加,两组之间的差异有统计学意义(P=0.025,P=0.020;P=0.015,P=0.006);(3)与p16、p53表达阴性组比较,p16、p53表达阳性组峰值强度(PI)均显著增高,差别具有统计学意义(t=2.307,P=0.027;t=3.012,P=0.005)。结论宫颈癌超声造影特征与p16、p53阳性表达之间存在一定关系,通过两者的综合评价,能够为宫颈癌的评估提供更有价值的临床信息。     

肿瘤抑制基因p53.p16与脑肿瘤

探索肿瘤抑制基因ｐ５３、ｐ１６变异在脑肿瘤发病中的意义。方法２３例脑肿瘤病人原发肿瘤标本用免疫组化ＬＳＡＢ法行肿瘤抑制基因Ｐ５３Ｐ１６蛋白检测。结果：星形细胞瘤Ⅰ级９例，ｐ１６蛋白４例表达３０％以下，５例不表达，ｐ５３蛋白３例表达３０％以下。     

p21waf1和p53及增殖细胞核抗原在肺癌组织中的表达

背景：细胞周期调控蛋白水平及其相互关系是良恶性细胞增殖的主要区别标准。目的：了解肺癌组织p21waf1和p53及增殖细胞核抗原蛋白表达情况。设计：病例对照。单位：武汉大学人民医院呼吸内科。对象：来自1996-10／1999-05武汉大学人民医院保存的胸外科手术和纤维支气管镜活检组织石蜡包埋标本135块。其中肺癌76块，肺良性疾病59块。肺癌组中患者男56例，女20例；年龄18-74岁。肺良性疾病组中患者男42例，女17例；年龄16-70岁。方法：用磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照。染色步骤按试剂盒说明进行。p21waf1采用高温高压修复法，p53采用微波修复法，增殖细胞核抗原无需抗原修复。①p21waf1和p53阳性染色判断标准：计数连续5个高倍镜视野中胞核染成黄褐色的阳性细胞所占比例，以≥10％为阳性，〈10％为阴性。②增殖细胞核抗原阳性判断标准：连续观察5个高倍镜视野，每个高倍镜视野计数100个细胞中胞核染成黄褐色的阳性细胞所占比例，取其平均值，记为增殖细胞核抗原标记指数。主要观察指标：p21waf1和p53及增殖细胞核抗原蛋白表达水平。结果：①肺癌组织p21waf1和p53蛋白表达阳性率分别为75％（57／76）和47％（36／76），增殖细胞核抗原标记指数显著高于肺良性疾病组织（0．44&;#177;0．32，0．09&;#177;0．14）。②肺癌组织p21waf1和p53及增殖细胞核抗原蛋白表达与肺癌临床分期及细胞分化程度无关。③肺鳞癌增殖细胞核抗原标记指数明显高于小细胞肺癌（0．51&;#177;0．33，0．30&;#177;0.36）。④肺癌组织p21waf1和p53表达与增殖细胞核抗原无关，而肺良性疾病组织p21waf1表达与增殖细胞核抗原有相关性。结论：肺癌组织p21waf1与p53蛋白表达明显上调，肺癌细胞增殖程度高。肺鳞癌细胞DNA损伤修复能力可能高于小细胞肺癌。肺良性疾病细胞增殖过程中，p21waf1和p53及增殖细胞核抗原3种蛋白作用协调。而肺癌细胞中3种蛋白作用不协调。     

p53抗体

血清p53抗体是p53蛋白激发人体免疫系统产生的自身免疫产物，其产生的具体机制尚不清楚，目前认为主要是由细胞内p53蛋白积聚引起的。血清p53抗体对肿瘤的早期诊断、预后判断，以及高危人群的监测均有一定的价值。     

宫颈癌组织中HPV16.18E6蛋白的表达及其与p53蛋白表达的关系

目的　观察人乳头状瘤病毒 (HPV) 16型和 18型早期蛋白E6及p5 3蛋白在宫颈癌 (CCa)中的表达 ,并分析二者的关系。方法　采用LSAB免疫组化法 ,检测多种宫颈病变中HPV16 .18E6蛋白的表达及CCa中p5 3蛋白的表达。标本包括正常宫颈组织 40例 ,宫颈湿疣 44例 ,宫颈上皮肉瘤变 (CIN)Ⅰ～Ⅱ级 45例 ,CINⅢ级 41例 ,CCa 5 2例。结果　上述宫颈病变组织中HPV16、18E6总阳性率分别为 :2 0 % ,7 1% ,2 2 2 % ,43 9%和 6 7 3% ,各病变组阳性率均显著高于正常宫颈组 (P <0 0 1) ;5 4例CCa中p5 3蛋白阳性者 6例 (11 5 % ) ,均为鳞癌 ,其中 3例伴有HPV16 .18E6阳性。结论　HPV16 .18型感染与CCa及其癌前病变的发生关系密切 ,HPV16 .18E6单克隆抗体可作为检测HPV16 .18感染及CCa早期诊断的标记之一。本研究显示p5 3基因突变与HPV感染无显著相关性     

p53,p16和PTEN基因蛋白在前列腺癌中的表达及意义

【目的】探讨 p5 3、p16和PTEN在前列腺癌组织中的表达及其与肿瘤分级、分期及转移的关系。【方法】应用免疫组化方法对 4 5例前列腺癌组织进行了p5 3、p16和PTEN蛋白检测。【结果】在前列腺癌组织中 p5 3、p16和PTEN蛋白表达阳率分别为 4 2 .2 % (19/ 4 5 )、5 7.8% (2 6 / 4 5 )和 31.1% (14 / 4 5 )。p5 3、p16和PTEN蛋白表达与前列腺癌分级、分期和转移相关 (P <0 .0 5 )。【结论】p5 3、p16和PTEN蛋白表达对辅助临床判断前列腺癌生物学行为和预测预后有一定参考价值     

膀胱移行细胞癌多药耐药基因与p53基因表达的临床研究

【目的】探讨膀胱癌中多药耐药基因（MDR1）与p53基因表达的临床意义。【方法】采用免疫组化（SABC）法对32例膀胱移行细胞癌中MDR1表达产物P—GP与p53基因产物p53蛋白进行了检测。【结果】32例膀胱移行细胞癌中P—GP、p53阳性率分别为41．0％和47．0％,且随膀胱癌的病理分级和临床分期而增高。T2～T4期同Tis～T1期相比,MDR1及p53的表达均差异有显著性。【结论】临床检测MDR1及p53可对膀胱癌患者提供更多的预后信息。     

良恶性胃黏膜中p21ras、表皮生长因子受体和p53蛋白的表达及意义

目的研究p21^ras、表皮生长因子受体（EGFR）和p53突变蛋白在良恶性胃黏膜组织中的表达及其对胃癌早期诊断的意义。方法应用免疫组织化学方法对31例胃癌、49例癌前病变、21例萎缩性胃炎和28例正常胃黏膜组织中的p21^ras、EGFR和p53突变蛋白的表达进行检测。结果31例胃癌组中,p21^ras、EGFR和p53突变蛋白的阳性表达率分别为64．5％、54．8％和32．3％;49例癌前病变组中,p21^ras、EGFR和p53突变蛋白的阳性表达率分别为59．2％、53．1％和22．4％;癌前病变组和胃癌组间3种基因蛋白的阳性表达率差异均无显著性（均为P〉0．05）,但均显著高于正常胃黏膜组（P〈0．05或P〈0．01）。结论胃癌和癌前病变胃黏膜组织中存在多种基因的表达异常,检测胃黏膜中p21^ras、EGFR和p53蛋白对胃癌早期诊断的意义不大。     

肺癌p53蛋白表达及其与淋巴结转移和分期的关系

应用链菌素亲生物素-过氧化物酶免疫组化方法观察了p53蛋白在92例肺癌组织的表达情况。结果p53蛋白在肺癌组织中表达的总阳性率为66．3％，正常细胞中未见表达。肺癌有淋巴结转移组p53蛋白的阳性率（75．5％）高于无淋巴结转移组（55．8％）（P＜0．05），Ⅲ～Ⅳ期肺癌p53蛋白的阳性率（82．9％），高于Ⅰ～Ⅱ期肺癌（56．1％）（P＜0．01）。结果表明，p53蛋白是肺癌较特异的肿瘤标记物，其表达与肺癌淋巴结转移及分期有关。     

胃癌组织中survivin表达与p53突变之间的初步分析

目的:探讨survivm基因表达与p53基因突变之间的关系。方法:应用免疫组化EnVision两步法检测140例胃癌组织中survivin和p53的表达状态并分析两者之间的关系。结果:胃癌组织中strvivin表达阳性率为46.4%(65/140),p53表达阳性率为47.9%(67/140)。根据p53表达的阳性指数0、1、2、3、4将140例胃癌组织分为5组,各组survivin表达阳性指数分别为2.01±2.514、0.17±0.495、2.80±1.789、4.73±1.272、6.50±0.707,组间具有显著差异(P<0.05)。67例p53表达阳性胃癌组织中,survivin表达阳性指数和p53表达阳性指数呈同步上升趋势(P<0.05)。结论:胃癌组织中survivin基因表达和p53基因突变在免疫组化检测水平上具有同步相关性     

结直肠癌p53基因点突变和蛋白表达的研究

目的了解中国人结直肠癌ｐ５３基因的突变谱，探讨聚合酶链反应－单链构象多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术用于研究结直肠癌中ｐ５３基因突变的可行性。方法应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测４１例结直肠癌ｐ５３基因突变，以ＡＢＣ免疫组织化学染色检测结直肠癌Ｐ５３蛋白的表达。结果３４％（１４／４１）的病例显示有ｐ５３基因突变，其中外显子５，６，７和８各有４，１，５和４例突变。２０例有Ｐ５３蛋白异常表达，阳性率为４９％。结论导致Ｐ５３蛋白异常堆积的ｐ５３基因突变是结直肠癌的一种常见的分子结构改变，可能在结直肠癌的发生和发展中起着重要的作用。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术是一简便、快速、有效的检测基因点突变的方法     

抗凋亡基因蛋白Survivin与p53蛋白在结直肠腺瘤中的表达及意义

目的探讨Survivin和p53蛋白在结直肠腺瘤转化和发展中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测Survivin和p53蛋白在45例结直肠腺瘤中的表达。另选结直肠高分化腺癌和正常结直肠黏膜各10例作为对照。结果45例腺瘤中有15例Survivin阳性表达,其中低级别腺瘤Survivin阳性表达率11％（3／26）,高级别腺瘤为63％（12／19）;正常黏膜和腺癌Survivin阳性表达率分别为0％（0／10）和90％（9／10）（P〈0．01）;低级别腺瘤Survivin阳性表达率与高级别腺瘤和腺癌差异均有显著性意义（P〈0．01）,但与正常结肠黏膜差异无显著性意义（P〉0．05）;而高级别腺瘤Survivin阳性表达率与正常黏膜和低级别腺瘤差异均有显著性意义（P〈0．01）,与腺癌也有差异（P〈0．05）;p53蛋白在低级别腺瘤、高级别腺瘤、正常黏膜和腺癌阳性表达率分别为15％（4／26）、73％（14／19）、O％（0／10）和90％（9／10）,其表达模式类似Survivin,差异也有显著性意义（P〈0．01或P〈0．05）;Survivin和p53蛋白表达呈正相关（r=0．52,P〈0．01）。结论Survivin和p53在结直肠腺瘤的恶性转化和发展中可能起重要作用,对结直肠腺瘤联合检测Survivin与p53有助于结直肠腺瘤恶性变的早期诊断和生物学行为的评估。     

FHIT和p53在子宫内膜癌中的表达及其意义

子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,约占女性生殖道肿瘤的20%～30%,近年来,EC发病率有上升趋势,但其发生、发展机制仍不明确.随着癌基因和抑癌基因的研究进展.人们已认识到EC的发生是一个多因素、多阶段、多基因变异累积的复杂过程.     

骨良恶性肿瘤Bcl-2和p53蛋白表达及意义

【目的】探讨Ｂｃｌ－２、ｐ５３在良恶性骨肿瘤组织中的蛋白表达情况及其生物学意义。【方法】应用ＡＢＣ免疫组化方法对３３例恶性骨肿瘤,包括１９例骨肉瘤,１４例软骨肉瘤和２２例良性骨肿瘤（骨软骨瘤）组织中Ｂｃｌ－２,ｐ５３的蛋白表达进行研究。【结果】恶性骨肿瘤组织中Ｂｃｌ－２,ｐ５３蛋白的阳性表达率分别为５１．５％和５４．５％,其中骨肉瘤组织为６３．２％和４７．４％,软骨肉瘤组织为３５．７％和６４．３％;良性骨肿瘤组织阳性表达率为１８．２％和２２．７％。恶性骨肿瘤组织Ｂｃｌ－２,ｐ５３蛋白阳性表达率明显高于良性骨肿瘤（Ｐ＜０．０５）,骨肉瘤组织Ｂｃｌ－２蛋白阳性表达率明显高于骨软骨瘤（Ｐ＜０．０１）,软骨肉瘤组织ｐ５３蛋白阳性率明显高于骨软骨瘤（Ｐ＜００５）。ＡＫＰ值增高组的恶性骨肿瘤组织ｐ５３蛋白阳性表达率（７５％）明显高于ＡＫＰ值正常值组（２０％,Ｐ＜０．０５）。【结论】Ｂｃｌ－２癌基因介导的凋亡紊乱和ｐ５３肿瘤抑制基因突变失活与恶性肿瘤的发生有关,Ｂｃｌ－２蛋白表达活性可能与骨肿瘤的恶性程度有关,ｐ５３肿瘤抑制基因突变失活是恶性肿瘤细胞成骨活性增强的因素之一。标记羊抗鼠ＩｇＧ和ＡＢＣ试剂,购自Ｓｉｇｍａ公