DIG—DNA探针检测弓形虫核酸

应用ＰＣＲ技术，对弓形虫Ｂ１基因的部分序列进行体外扩增，获得２０７ｂｐ的特异性核酸片段，并通过地高辛配基（Ｄｉｇ－１１－ｄＵＴＰ）标记作为探针，通过斑点杂交试验检测弓形虫核酸。实验表明，该探针能与ＲＨ、ＳＨ１、ＺＳ１、ＺＳ２及ＧＬ１株弓形虫核酸特异性杂交，最低检测量为２５ｐｇ纯化弓形虫核酸。在急性感染弓形虫的小鼠，该探针可于感染后第２天（２４ｈ后），从组织（肝、脾、及肾）中检测到弓形虫核酸，第３天（４８ｈ后）可从部分小鼠（１／５）外周血中检测到弓形虫核酸。表明该探针具有特异、敏感、快速、实用的特点，可望用于弓形虫病的早期诊断，适用于基层及流行病学调查。     

聚合酶链反应技术检测弓形虫核酸的研究

本文通过克隆的ＲＨ株弓形虫核酸ＴＧＲ４片段，设计并合成了一对长度为２０ｂｐ的寡核苷酸引物，扩增靶序列长度为７７８ｂｐ，建立了聚合酶链反应技术检测弓形虫核酸的特异敏感方法。检测７株弓形虫株及临床疑似弓形虫病患者样本，均出现特异扩增带，而其它８种病原体以及正常人及动物的ＤＮＡ均未见特异扩增带。扩增产物用地高辛素标记作探针，与以上出现特异扩增带的ＤＮＡ模板能斑点杂交，而与无扩增带的其余模板ＤＮＡ无斑点杂交。结果显示，该引物具有高度的保守性及特异性。在含１０５个人白细胞中，可检测到２个弓形虫ＤＮＡ或１ｐｇＤＮＡ。并通过人工感染弓形虫鼠血样品的检测表明，所建立的聚合酶链反应体系具有高度的敏感性，能早期检出弓形虫感染样品，在弓形虫病的临床诊断中具有重要的应用价值。     

轮状病毒1,2血清型VP7蛋白基因的扩增及其克隆

用聚合酶链反应扩增了轮状病毒Ｗａ株（第１血清型）和ＤＳ－１株（第２血清型）的全长ＶＰ７蛋白基因，利用两引物５＇末端的多接头位点，以ｐＵＣ１８质粒为载体构建了含两株ＲＶＶＰ７基因ｃＤＮＡ拷贝的重组体。经ＰＣＲ扩增制备得１～４血清型ＲＶＶＰ７基因高变区（５１－３９２核苷酸）￣（３２）Ｐ标记核酸探针，对重组质粒型别进行了Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和斑点杂交鉴定，结果Ｗａ株ＶＰ７基因重组体只与１型探针呈强杂交信号，ＤＳ－１株重组体只与２型探针呈强杂交信号。     

利多组套式引物的测庚型肝炎病毒RNA

利用庚型肝炎病毒ＮＳ３－５区序列合成了四组套式引物，建立了灵敏，特异的 型肝炎病毒ＲＮＡ双扩增聚合酶链反应检测方法，用此方法检测了１０份庚型肝炎病毒抗体阳性患者血清及１０份阴性的健康人血清。前者不同组引物的检出率为ＮＳ３（１）引物９份了是性，ＮＳ３（２）引物８份阳性，ＮＳ４引物４份阳性，ＮＳ５（１）引物５份阳性，ＮＳ５（２）引物９份阳性；后者各组引物匀为阴性。结果表明，庚型肝炎病毒不同区域引物用于     

利用多组套式引物检测庚型肝炎病毒RNA

利用庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）ＮＳ３～５区序列合成了四组套式引物，建立了灵敏、特异的庚型肝炎病毒ＲＮＡ双扩增聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测方法。用此方法检测了１０份庚型肝炎病毒抗体阳性患者血清及１０份阴性的健康人血清。前者不同组引物的检出率为ＮＳ３（１）引物９份阳性，ＮＳ３（２）引物８份阳性，ＮＳ４引物４份阳性，ＮＳ５（１）引物５份阳性，ＮＳ５（２）引物９份阳性；后者各组引物检测均为阴性。结果表明，庚型肝炎病毒不同区域引物用于ＲＴ－ＰＣＲ检出率差异较大。ＮＳ３（１）及ＮＳ５（２）这两组引物检出率最高，更适合用于ＲＴ－ＰＣＲ检测庚型肝炎病毒ＲＮＡ。     

聚合酶链反应快速论断疱疹病毒性脑炎

选择疱疹病毒科病毒ＤＮＡ多聚酶基因高保守区中的１对引物，１次聚合酶链式反应可同时扩增疱疹病毒科的４种病毒相应的ＤＮＡ片段。根据扩增产物的分子量大小及对扩增产物酶切分析，可将标本中的４种病毒准确分型。用该法检测临床疑为病毒性脑炎患者和其他中枢神经系统疾病患者的脑脊液，脑炎组ＣＳＦ阳性率３０％，对照组ＣＳＦ阳性率６．７％；其中８例为ＨＳＶ１阳性，２例为ＨＣＭＶ阳性，１例为ＨＳＶ２阳性。     

间日疟原虫SSUrDNA特定片段的体外扩增及鉴定

根据已知序列，设计出一对含克隆位点的寡聚核苷酸引物，用于间日疟原虫ＳＳＵｒＤＮＡ特定片段扩增；采用双温度点ＰＣＲ法，从我国间日疟患者血样ＤＮＡ抽提物中，直接扩增出预期大小片段（约６４０ｂｐ），而培养红内期恶性疟原虫株、人源利什曼原虫株，人源弓形虫株及正常人ＤＮＡ样本均无此扩增带出现。扩增片段进一步经限制性酶切和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交分析，证实确为间日疟原虫ＳＳＵｒＤＮＡ目的片段。     

应用通用引物聚合酶链反应技术检测不同型别的登革病毒

利用特异抗体吸附的登革病毒，经含ＴｒｉｔｏｎＸ－１００的裂解缓冲液处理，释放出基因组ＲＮＡ，在同一管中进行逆转录聚合酶链扩增反应。采用这种方法利用保守性引物可检测出登革１型、２型和４型病毒参考株及我国海南岛登革２型病毒分离株的基因组序列，扩增产物约为５５０ｂｐ。用＾３２Ｐ－标记的分子克隆的登革２型病毒基因探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析证实了护增产物的特异性。利用这种技术还可从感染后２４ｈ的Ｃ     

RT—PCR用于脊髓灰质炎病毒的检测及定型

本研究中共用了４对引物，所设计的Ｐｏｌｉｏ０１、Ｐｏｌｉｏ０２引物对与核苷酸序列中高度保守的５’端非编码区的序列匹配，它们给我们提供了待检样品中是否有脊髓灰质炎病毒核苷酸的证据，扩增产物为１０９ｂｐ。在ＶＰ１区我们设计对３对区分Ｓａｂｉｎ株疫苗病毒３个血清型及用于区别脊髓灰质炎病毒疫苗株和野毒株的引物，各引物序列之间无互补，识别同型Ｓａｂｉｎ疫苗病毒准确可靠。Ｓａｂｉｎ１１、Ｓａｂｉｎ１２引种对不     

汉坦病毒R36株的基因分型研究

采用汉坦病毒Ｍ片段特异性核苷酸分型引物，对Ｒ３６等７株汉坦病毒进行反转录和聚合酶链式反应扩增鉴定，结果Ｒ３６株仅能被Ⅰ型分型引物扩增出特异性片段，而不能被Ⅱ型引物扩增；ＰＣＲ产物的序列分析结果表明，Ｒ３６与ＨＴＮ型病毒７６－１１８株的同源性为７８．４％，与ＳＥＯ型病毒Ｒ２２株的同源性为６８．１％。文中对Ｒ３６与汉坦病毒其它毒株的核苷酸同源性进行了配对比较。该项研究为从核苷酸水平对Ｒ３６株的分型，提供了科学依据。     

足背短肌的应用解剖

本文用手术显微镜及测微器在50侧(男30、女20)成人尸体的标本上对伸(足母)短肌和伸趾短肌的形态.血供和神经支配进行解剖与测量.伸(足母)短肌的长54.8±0.90mm,宽15.90±0.44mm厚3.46±0.18mm;伸趾短肌的长65.65±1.58mm,宽19,46±0.51mm,厚3.43±0.19mm.血供主要来自跗外侧动脉,其起点处的外径1.72±0.09mm,入肌处的外径0.82±0.06mm,可游离的长度24.85±1.41mm;肌肉由腓深神经分支支配.本文还讨论了该肌瓣的临床应用及作为供体时应注意的问题.     

大鼠角膜中央区SP样、CGRP样免疫阳性纤维的起源

向角膜中央区注射ＨＲＰ后，用抗ＳＰ和抗ＣＧＲＰ抗体对三叉神经节、颈上神经节和迷走神经节进行免疫组织化学处理。结果证明：双重阳性细胞出现于三叉神经节的内侧区且集中分布于背内侧部．ＣＧＲＰ样双重阳性细胞主要分布在节的背内侧部的周边区；ＳＰ样双重阳性细胞散在于节的背内侧部的深部。两者均为圆形或椭圆形。在颈上神经节和迷走神经节内未见双重阳性细胞。     

云南正常人角膜前曲率半径的测量

测定统计了云南正常人515例(1030)眼的角膜前曲率半径,结果如下:水平经线前曲率半径为7.728±0.301mm((?)±s);垂直经线前曲率半径为7.627±0.307mm.水平经线与垂直经线间以及男女性别间的测定值存在显著差异,而同性别中左右眼间无显著差异,随年龄增大,角膜前曲率半径值呈增大趋势.     

EFFECTS OF GLUCOCORTICOIDS ON DIFFERENTIATION OF ZONA GLOMERULOSA OF FETAL ADRENAL CORTEX OF RATS

The tissue differentiation of the zona glomerulosa of the fetal adrenal cortex of rats was studied by giving experimental treatments to the fetus in vivo. A low-glucocorticoid-condition was given to the fetus by bilateral adrenalectomy of pregnant rats for removing exogenous glucocorticoids from the fetus, and by brain aspiration of the fetuses for removing the fetal pituitary gland (ACTH) and endogenous glucocorticoids. When the fetus was placed under a low-glucocorticoid-condition for the last couple of days of gestation, poor differentiation of the zona glomerulosa occurred speciflcally in the fetal adrenal cortex. The degree of the poor differentiation seemed to be proportional to the duration of the low-glucocorticoid-condition. Supplemental administration of glucocorticoids could prevent this poor differentiation of the zona glomerulosa. These results indicate that the tissue differentiation of the zona glomerulosa of the fetal adrenal cortex depends much on glucocorticoids.     

川楝素对家蝇生长发育的影响

本文通过实验室饲养研究了川楝素对家蝇(Musca     

几种实验啮齿动物精母细胞联会复合体的初步观察

本文对实验啮齿动物豚鼠、兔、大白鼠、小白鼠(津白Ⅰ号、津白Ⅱ号和昆明种)精母细胞联会复合体进行了观察。其联会复合体基本组成是相同的,如都包括2条侧体和两侧体间的空间中的一条中体,并有较细的横丝等,但在形态上,还存在一定差异。同源染色体和其间的联会复合体,吸附于核内膜上,核内膜加厚形成板状物,其中体明显到达核膜。性泡是X染色体和Y染色体在减数分裂期间配对。小鼠核仁密切联系性泡。性泡也可紧密贴于核膜,中体上存在有数目不等的小结节。     

大鼠胸腺传入纤维在中枢内的跨节投射——CB-HRP法

本文将CB-HRP注入大鼠胸腺,研究了标记细胞在感觉神经节的分布及初级感觉终末在脊髓、脑干中的投射。结果表明:1.在双侧迷走神经结状节中有标记细胞;2.在C_1-T_5段双侧脊神经节中有标记细胞,推测这些标记细胞可能随交感神经传入,其中C_3-C_4段的投射可能随膈神经传入;3.脊髓中的标记终末,见于C_1-C_8节段,主要分布在Ⅰ层内;4.脑干中的标记终末,主要见于双侧孤束核的全长及连合核中。在疑核标记的节前神经元附近有的也可见终末分布,提示胸腺的一级传入与传出神经元间可能存在直接联系。     

改变力学环境后松质骨胞元结构的预测

松质骨是骨的重要组成部分,结构疏松、多孔,由针状、片状骨小梁组成多种胞体,其结构称为胞元结构。正常生理状态下,骨质的形成与吸收呈平衡态,骨结构稳定,当骨所处的力学环境发生变化时,骨的结构形态也随之变化。松质骨细观结构数值模拟变化的力学环境与骨结构的关系目前未见报道,本文是采用带有生理限定应力的自适应生理模型与有限元相结合的方法,在力学环境发生变化后用计算机预测松质骨胞元结构;定量的研究了松质骨胞元结构从一种优化平衡态到另一种平衡态与其力学环境的关系,模拟了松质骨胞元结构的变化与力学环境的适应性。把这种骨结构预测从宏观水平提高到细观水平。     

我国恶性疟原虫裂殖子表面蛋白MSP-2的抗原表位分析

根据我国恶性疟原虫株MSP-2基因序列,检索我国虫株MSP-2是否具有国外已鉴定的MSP-2抗原表位。结果显示,我国虫株MSP-2具有已鉴定的FC-27等位基因型可变区抗原表位STNS和DTPTATE。同时应用计算机辅助抗原表位分析技术对MSP-2进行抗原表位分析预测,并以合成肽技术鉴定了预测表位的免疫原性。抗原指数分析表明,MSP-2分子亲水性指数和侧链易曲性指数最高的区域分别位于aa153～166和aa65～72,而aa53～60可能是我国虫株特异的抗原表位。用4个合成肽进行免疫学鉴定,证实预测的表位可以诱导抗肽抗体反应,免疫血清可识别重组MSP-2和恶性疟原虫全抗原中MSP-2抗原区带,且合成肽可与我国流行区高度免疫人群免疫血清反应。由于这些表位存在于我国海南、云南、安徽株MSP-2序列中,可以作为研制我国恶性疟重组多价表位疫苗的候选抗原表位。