藏药紫堇治疗包虫病后棘球蚴的超微结构

包虫病患者经直茎紫堇总碱治疗后,其体内棘球蚴生发膜与原头节的超微结构有明显变化,透射电镜观察到生发膜皮层细胞细胞器排列紊乱,胞浆中微管明显扩张、破裂,线粒体呈退行性变。扫描电镜发现生发膜表面出现许多陷窝,原头节是外翻型,顶突界面缺损,部分头钩脱落,吸盘变形,体表出现虫蛀样损害。初步结果表明直茎紫堇对人体细粒棘球蚴与原头节有广泛的细胞内效应。     

大叶桉桉叶提取物对细粒棘球绦虫原头节的体外杀虫作用

目的探索大叶桉(Eucalyptus robusta)桉叶提取物体外抗细粒棘球绦虫原头节的活性。方法 2012年1-12月每月24日收集大叶桉成熟叶片,室内自然风干。用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和无水乙醇等4种不同极性的溶剂进行超声提取。将不同浓度的提取物与原头节孵育72 h,计算虫体死亡率,计算半数致死浓度(LC_(50))。结果不同溶剂提取物的性状和产率均不同,石油醚提取物为棕黑色油膏状,二氯甲烷、乙酸乙酯、无水乙醇提取物分别为墨绿色、乳粉色和乳白色粉末状。石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、无水乙醇提取物的平均产率分别为4.4%、2.1%、2.3%和2.3%,石油醚提取物的产率最高,其5月份的产率为5.4%。作用浓度为100μg/ml时,各月份桉叶的石油醚与二氯甲烷提取物对原头节的杀灭作用均达到100%;50μg/ml时,石油醚提取物的杀灭作用也基本达到100%,二氯甲烷提取物次之,强于乙酸乙酯和无水乙醇提取物。对石油醚和二氯甲烷提取物作进一步研究,结果显示,各月份石油醚提取物对原头节的杀灭作用由强到弱依次为631142510812719,其中6月份提取物的作用最强,LC_(50)为2.577μg/ml,95%置信区间为0.85~6.22μg/ml;各月份二氯甲烷提取物的杀灭作用由强到弱依次为:115104712698231,其中11月份的作用最强,LC_(50)为21.85μg/ml,95%置信区间为12.38~36.28μg/ml。结论大叶桉桉叶中含有抗细粒棘球蚴的活性成分,值得做进一步的分离、分析和鉴定。     

西伯利亚紫堇治疗继发性小鼠包虫病的效果

西伯利亚紫堇的醇提取物、水提取物和总生物碱,不论腹腔注射或口服均有抑制小鼠体内棘球蚴生长发育的作用。表现为囊肿减轻率70～85.2％,血清抗体滴度较对照组为低。扫描电镜可见蚴囊表面呈斑块状剥蚀及喷火口样凹陷。透射电镜观察到生发膜皮层细胞微绒毛发育不良,微管扩张、破裂、线粒体肿胀。作者认为西伯利亚紫堇中确实存在抗细粒棘球蚴的活性物质。     

化学剂与药物抗细粒棘球绦虫原头节的作用

本文报告3种化学剂与2种药物在体内与体外杀灭原头节的效果。终浓度为0.3％的北美黄连碱与原头节作用15min后,头节死亡率分别为68.9％和70.2％;终浓度为10％的乙醚-醋酸-乙醇混合液(乙醚:醋酸:乙醇为5:3:2)分别为56.2％和56.8％,较终浓度为0.3％的H_2O_2的杀头节效果(6.0％)为佳,0.004％吡喹酮与0.004％阿苯达唑在体外试验中与原头节作用15min未见有杀灭原头节效果。初步结果表明北美黄连碱和乙醚-醋酸-乙醇混合液具有较迅速和较强杀原头节作用。扫描电镜观察结果,经北美黄连碱作用后,原头节顶突质膜皱襞断裂,头钩排列紊乱、脱落,吸盘变形,头钩与吸盘表面膜内颗粒减少。     

异丙肌苷及其主要成分抗多房棘球蚴作用的体外研究

为研究异丙肌苷和其主要成分肌苷在体外抗多房棘球蚴和原头节的效果，运用RPMI1640作培养基体外培养原头节，后加入异丙肌苷或肌苷，使培养基中的药物浓度分别为1mM,2mM,4mM，连续培养9d，结果没有发现异丙肌苷和肌苷对多房棘球蚴的原头节和小囊有杀灭作用，所以尚不能认为异丙肌苷具有杀灭金房棘球蚴的直接作用。     

高强度聚焦超声波对细粒棘球绦虫原头节的杀伤效应

目的 探索高强度聚焦超声波(HIFU)对体外分离的细粒棘球绦虫原头节的急、慢性杀灭作用.方法 实验对象为感染细粒棘球蚴病的羊肝原头节.选择声功率为0(对照组)、25、50、100、200、250 W的超声波辐照离体原头节,每种功率辐照时间分别为5、10、20、30、40、50、60 s,观察HIFU对离体原头节的即刻杀灭作用.以不致即刻杀伤的超声剂量作用原头节后,观察HIFU对原头节的迟发性生长抑制作用.光镜下,根据台盼蓝排斥法染色结果及观察原头节形态变化计算原头节死亡率.结果 HIFU对原头节有明显的急性杀伤作用,在一定的功率和时间范围内有剂量-效应关系,不同功率和辐照时间对原头节死亡率的影响,组间比较差异均有统计学意义(F值分别为5201.59、1865.65,P＜0.05),且功率与辐照时间之间存在交互效应(F=214.50,P＜0.05).随着超声照射剂量增大,其生物学效应越明显,声功率≥200 W的短时照射即可致原头节全部即刻死亡,部分原头节被打碎.以不致原头节即刻杀伤的超声照射后,体外培养2～7 d的原头节死亡率均较对照组明显增高(P＜0.05),随超声剂量的增大抑制原头节生长作用增强,培养第2天开始,50 W×10 s组强于25 W×20 s组(P＜0.05).结论 HIFU能够即刻杀灭原头节并能抑制原头节在体外的生长.     

塞来昔布对细粒棘球蚴原头节生长及p-ERK2表达的影响

目的探索塞来昔布对细粒棘球蚴原头节体外生长及p-ERK2表达的影响。方法实验分组为1640培养基组、DMSO组、塞来昔布溶液(50、100、150、200μmol/L)中体外孵育,在倒置焦镜下观察原头节的形态变化,同时通过0.1%伊红染色显示原头节活力。运用Western blot检测DMSO、100、150、200μmol/L塞来昔布处理细粒棘球蚴原头节48h后p-ERK2蛋白的表达量。结果体外孵育7d后,DMSO组及空白1640对照组原头节的活力几乎没有改变。塞来昔布作用1d后,100、150、200μmol/L组原头节的活力均下降;作用3d后,200μmol/L组原头节全部被杀死,150μmol/L组的原头节活力为43.9%。100μmol/L、50μmol/L组对原头节的活力也有明显下降,但不及高浓度组显著。Western blot结果显示P-ERK2的表达量随浓度增加而下降趋势明显。结论塞来昔布能够抑制细粒棘球蚴原头节生长,这可能与塞来昔布下调P-ERK2的表达进而抑制ERK2信号传导通路有关。     

甘氨鹅脱氧胆酸对体外细粒棘球蚴原头节活力及ROS影响

目的 研究甘氨鹅脱氧胆酸(glycochenodeoxycholic acid, GCDCA)对体外细粒棘球蚴原头节活力及活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平的影响。方法 将细粒棘球蚴原头节分为对照组及GCDCA处理组(500、1 500、2 500 μ mol/ L),应用体外培养技术,通过伊红染色法每天定时在光学显微镜下观察原头节的活力并记录存活和死亡数目。使用试剂盒检测不同浓度GCDCA处理 24 h后各组原头节体内caspase-3酶活性变化;DCFH- DA染色法荧光显微镜观察 GCDCA作用24 h后原头节内 ROS水平变化。结果 500、1 500、2 500 μ mol/ L GCDCA处理后均可导致原头节活力减弱,且最高浓度组在第7 d时原头节全部死亡。500、1 500、2 500 μ mol/ L GCDCA组作用原头节24 h后 caspase-3酶活性与对照组相比明显升高(F=555.162, P<0.05)。500、1 500、2 500 μ mol/ L GCDCA作用原头节24 h后原头节内 ROS水平与对照组相比明显升高(F=216.901, P<0.05)。结论 GCDCA 能抑制体外原头节生长,促使原头节死亡,可能与活化caspase-3及提高原头节内ROS 水平相关,具体机制有待进一步研究。     

吡喹酮和阿苯达唑对细粒棘球蚴原头节超微结构的影响

体外培养试验证明,吡喹酮对细粒棘球蚴原头节(以下简称原头节)具有较强的杀灭作用,而阿苯达唑的则较差和缓慢。本文系报道用透射电镜观察此2种药物对原头节超微结构的影响。结果表明,体外培养的原头节经吡喹酮1μg/ml作用1h即见少数原头节的皮层细胞核染色质有集聚,胞浆内有空泡变化;集合管扩     

X线照射泡球蚴原头节的体外实验研究

目的探讨X线对体外培养的泡球蚴原头节的杀伤作用。方法无菌采集子午沙鼠体内的泡球蚴中含原头节的囊液,将其加入RPMI 1640培养液中培养。原头节体外培养3 d后分装至培养瓶中,每组10瓶,每瓶约含10 000个原头节,设空白对照组、低剂量组(15 Gy和30 Gy)、中剂量组(45 Gy和60 Gy)、高剂量组(75 Gy和90 Gy)、阿苯达唑组(2 500 ng/ml)、45 Gy X线+2 500 ng/ml阿苯达唑组和75 Gy X线+2 500 ng/ml阿苯达唑组。X线照射剂量率为200 cGy/min,源皮距为100 cm。体外培养第4天开始照射,每组共照射3次,每次间隔1 d。首次照射后第1天开始每天取原头节培养液,0.1%伊红染色,光镜下计数每100个原头节中着色原头节数目,每组计算300个原头节的平均死亡率,直至实验组原头节全部死亡为止。同时光镜下观察经X线照射后原头节的变化。结果不同放射剂量组的原头节死亡率与空白对照组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。阿苯达唑组原头节死亡率与放射线联合阿苯达唑组间的差异均有统计学意义(P<0.05),且显著高于空白对照组(P<0.05)。其中,X线...     

银杏叶提取物在眼科及心血管疾病中的治疗应用

银杏科银杏属植物银杏(Ginkgo Bilobal inn.)又名公孙树、白果树等,其叶和果具有重要的生理作用和药用价值.银杏叶提取物主要有效成分为黄酮类和银杏内酯类生理活性物质,简称为银杏叶提取物(GBE),是一种作用广泛、不良反应较少的天然药物.黄酮类活性成分具有抗氧化作用,特异性清除多种氧自由基、防止细胞老化和脂质过氧化对细胞膜的损伤.     

雄黄对细粒棘球蚴原头节体外生长及抗氧化酶活性的影响

目的初步探讨雄黄对体外细粒棘球蚴原头节生长及抗氧化酶的影响。方法在体外培养的基础上,将不同浓度雄黄分别作用细粒棘球蚴原头节2 d,光镜下观察原头节活力及形态变化;扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)观察原头节表面及内部超微结构改变;采用ELISA法测定SOD、ROS、HO-1和NQO-1表达情况;采用Caspase-3试剂盒检测原头节Caspase-3酶活性。结果250、500、1000、2000μmol/L雄黄体外作用于细粒棘球蚴原头节均能抑制其生长,雄黄作用2 d后光镜下观察原头节形态结构均发生改变,虫体萎缩,伊红染色呈红色(正常虫体为透明无色);SEM下观察原头节虫体皱缩,原头节正常形态被破坏;TEM下观察原头节内部微绒毛减少,合胞体带变薄、结构松散并有少量脂滴。EUSA检测SOD、HO-1和NQO-1活性均呈下降趋势,ROS和caspase-3酶活性均呈升高趋势(均P<0.05)。结论雄黄体外可抑制细粒棘球蚴原头节生长,破坏原头节形态结构,降低抗氧化酶活性,该抑制作用与机体抗氧化防御系统平衡失调有关。     

高吸水性树脂协同高强度聚焦超声对细粒棘球绦蚴原头节细胞酶活性的影响

目的为探索高吸水性树脂(Super Absorbent Resin,SAR)协同高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)对离体细粒棘球绦蚴原头节酶活性的影响。方法将离体原头节悬液(每mL含有2 000个原头节),分为4组:I组(仅原头节悬液)、Ⅱ组:仅SAR组( 0.01 gSAR)、III组(单纯HIFU照射)、IV组(HIFU照射+ 0.01gSAR)、Ⅴ组(HIFU照射+ 0.1 gSAR)。以声功率为100 w的高强度聚焦超声波辐照30 s,辐照后悬液涂片进行台盼兰及经冰冻切片酶组织化学染色,观察原头节形态学改变,并用半定量方法检测原头节内细胞的葡萄糖-6-磷酸酶和琥珀酸脱氢酶的活性。结果显示当超声剂量一定时,原头节的形态改变与SAR剂量有正效应关系,SAR量越大,其破坏程度越高。正常原头节透亮、外形完整,各实验组原头节深染或结构崩解。单纯HIFU照射组在作用60 s时,原头节死亡率为80.1%;HIFU结合不同量SAR两组原头节在HIFU作用10 s时,其死亡率分别为87.82%和89.1%。加入SAR后再经过HIFU照射各组原头节内细胞葡萄糖-6-磷酸酶和琥珀酸脱氢酶活性降低,明显低于单纯超声组(P<0.05),阴性对照组无酶反应物产。结论SAR能增加HIFU辐照对原头节的急性杀伤作用,使原头节内细胞的葡萄糖-6-磷酸酶活性和琥珀酸脱氢酶活性均显著低降低,从而影响其活力。     

高吸水性树脂协同高强度聚焦超声对细粒棘球绦蚴原头节细胞酶活性的影响北大核心CSCD

目的为探索高吸水性树脂(Super Absorbent Resin,SAR)协同高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)对离体细粒棘球绦蚴原头节酶活性的影响。方法将离体原头节悬液(每mL含有2 000个原头节),分为4组:I组(仅原头节悬液)、Ⅱ组:仅SAR组(0.01gSAR)、III组(单纯HIFU照射)、IV组(HIFU照射+0.01gSAR)、Ⅴ组(HIFU照射+0.1gSAR)。以声功率为100w的高强度聚焦超声波辐照30s,辐照后悬液涂片进行台盼兰及经冰冻切片酶组织化学染色,观察原头节形态学改变,并用半定量方法检测原头节内细胞的葡萄糖-6-磷酸酶和琥珀酸脱氢酶的活性。结果显示当超声剂量一定时,原头节的形态改变与SAR剂量有正效应关系,SAR量越大,其破坏程度越高。正常原头节透亮、外形完整,各实验组原头节深染或结构崩解。单纯HIFU照射组在作用60s时,原头节死亡率为80.1%;HIFU结合不同量SAR两组原头节在HIFU作用10s时,其死亡率分别为87.82%和89.1%。加入SAR后再经过HIFU照射各组原头节内细胞葡萄糖-6-磷酸酶和琥珀酸脱氢酶活性降低,明显低于单纯超声组(P<0.05),阴性对照组无酶反应物产。结论 SAR能增加HIFU辐照对原头节的急性杀伤作用,使原头节内细胞的葡萄糖-6-磷酸酶活性和琥珀酸脱氢酶活性均显著低降低,从而影响其活力。     

从卡欧属植物中提取的杀螺剂

在东非和西非广泛地生长着卡欧属(Khaya)植物,当地居民用来治疗人或家畜的某些疾病。这种植物的树干、心材和种子的化学鉴定已有描述,主要成份为柠檬苦素类似物,已知用1μM的柠檬苦素类似物在48小时内能杀死50％的恶性疟原虫,0.3μM在96小时内也能杀死同样量的疟原虫。作者调查了卡欧属植物提取物对小泡螺和椎实螺的作用。前者是血吸虫的中间宿主,     

阿苯达唑—葡聚糖纳米颗粒体外抗多房棘球蚴原头节的效果评价

目的 通过观察阿苯达唑-葡聚糖纳米颗粒(ABZ-GPs)和阿苯达唑(ABZ)对多房棘球蚴原头节的杀伤作用，评价ABZ-GPs对多房棘球蚴病的疗效，为葡聚糖颗粒作为抗包虫病药物载体奠定基础。方法 设置ABZ、葡聚糖纳米颗粒(GPs)组、ABZ-GPs组和对照组，各用药组以终浓度50μg/mL加入原头节培养基，每天用0.4%的台盼蓝染液染色以评价原头节存活情况，并使用扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)观察原头节超微结构的变化。结果 成功构建了ABZ-GPs,原头节与ABZ-GPs和ABZ共培养后，外翻型原头节明显增加，体表失去正常结构。培养第7 d开始至第10 d, ABZ-GPs组原头节存活率一直低于ABZ组，差异有统计学意义(t=3.091,P<0.05)。超微结构显示对照组和GPs组原头节吸盘清晰可见，体表微绒毛蓬松，角质层细胞形态均匀饱满；ABZ组原头节褶皱，吸盘变形，小钩排列紊乱，角质层见絮状空洞的分裂区域；ABZ-GPs组原头节明显褶皱，微绒毛消失，吸盘破坏，顶突小钩脱落，角质层广泛损伤，呈条状残留。结论 ABZ-GPs在体外对多房棘球蚴的杀伤作用优于ABZ原药。     

芒果甙抗氧化损伤作用研究进展

芒果甙是一种四羟基吡啶的碳糖甙，属双苯吡酮类化合物。现代药理和临床研究证明，芒果甙以及含芒果甙植物提取物具有多方面生理和药理作用，如抗脂质过氧化反应、抗癌、抗糖尿病、抗炎抗病毒、止咳、免疫调节等作用。现就其抗氧化损伤作用研究进展做一综述。     

阿霉素体外抗细粒棘球蚴原头节作用研究

目的研究阿霉素(Dox)对细粒棘球蚴原头节的体外抑制作用。方法 4 800个原头节随机分为空白对照组、 1%DMSO组、 Dox组(25、 50、 100、 200、 400、 600μmol/L),每组200个原头节,设3个平行组,体外干预24 h。伊红拒染实验检测Dox干预后原头节活力,统计存活率。扫描电镜观察Dox干预后原头节表面超微结构变化。单细胞凝胶电泳实验检测Dox干预后原头节DNA损伤程度。实时荧光定量PCR (qRTPCR)检测Dox干预后DNA损伤相关基因共济失调毛细血管扩张症突变激酶(ATM)、 p53、 DNA拓扑异构酶2A (Topo2a)的mRNA表达水平。结果伊红拒染实验结果显示,空白对照组、 1%DMSO组、 25、 50、 100、 200、 400、600μmol/L Dox组细粒棘球蚴原头节的存活率分别为(99.0±0.5)%、(98.6±0.3)%、(96.0±1.4)%、(80.3±4.8)%、(75.6±6.2)%、(53.2±3.0)%、(26.4±8.1)%和0, IC50为(267.9±7.1)μmol/L。与空白对照组相比,1%DMSO组、 25μmol/L Dox组原头节存活率差异无统计学意义(P 0.05), 50、 100、 200、400、 600μmol/L Dox组原头节存活率差异有统计学意义(P 0.01)。扫描电镜结果显示,空白对照组、 1%DMSO组原头节表面光滑,头节呈球形或椭圆形,顶突完整,微毛清晰可见;400μmol/L Dox组原头节吸盘变形,体部塌陷严重,顶突轻微变形,微毛明显脱落,虫体表层发生皱缩。单细胞凝胶电泳实验结果显示,100μmol/L Dox组原头节出现拖尾现象,彗星尾距(OTM)为16.6±1.7,与空白对照组(0.1±0.0)相比,差异有统计学意义(P 0.01)。qRTPCR结果显示,1%DMSO组原头节ATM、 p53和Topo2a mRNA相对表达量分别为1.0±0.1、 1.1±0.1、 1.3±0.9,与空白对照组(1.0±0.1、 1.0±0.4、 1.0±0.1)相比,差异无统计学意义(P 0.05)。100μmol/L Dox组原头节ATM、 p53和Topo2a mRNA相对表达量分别为38.6±3.5、 10.0±2.5、 54.0±0.8,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P 0.05)。结论Dox具有体外抗细粒棘球蚴原头节作用,可引起虫体DNA损伤,可能与ATM、 p53、Topo2a的mRNA相对表达量变化相关。     

枳椇子对实验性血脂异常大鼠的调脂作用

枳椇子(Semen hoveniae)是鼠李科枳椇属植物.近年来国内外学者对其降脂作用做了深入的研究.Hase等~[1]发现枳椇子水提取物能抑制肝脏TG及TC的蓄积;我国学者通过实验证实枳椇子能明显降低高脂饮食大鼠的血TC水平,同时具有降低肝脏指数的作用~[2].本实验主要观察中药枳椇子水煎液对实验性高脂血症大鼠的干预作用.     

氯舒隆和奥硝唑体外抗细粒棘球蚴原头节和多房棘球蚴的效果评价

目的研究氯舒隆和奥硝唑体外抗细粒棘球蚴原头节和多房棘球蚴的效果。方法从感染细粒棘球蚴绵羊肝脏中收集原头节;从感染长爪沙鼠腹腔中分离多房棘球蚴,加入预先接种人肝癌细胞的DMEM培养基中培养2个月后,收集直径为1~5 mm囊泡。实验分氯舒隆组(实验组)、奥硝唑组(实验组)、阿苯达唑组(阳性对照)和0.2%二甲基亚砜(DMSO)组(溶剂对照组)。每种药物设2个平行孔,终浓度均为40μmol/L,重复2次。每孔加细粒棘球蚴原头节约100个或多房棘球蚴囊泡25~35个。药物处理细粒棘球蚴原头节24、48、72、96、120、144和168 h后,显微镜下观察原头节形态,用台盼蓝染色,计算原头节存活率,组间存活率的比较采用方差分析。药物处理多房棘球蚴囊泡36 h和120 h后,显微镜下观察囊泡的形态学改变,测定培养上清液中碱性磷酸酶的活性,组间酶活性的比较采用卡方分析。结果氯舒隆、奥硝唑和阿苯达唑作用于原头节后,原头节颜色变深、钙颗粒减少、头钩脱落、头节外翻并伸长,0.2%DMSO对原头节形态无影响。氯舒隆、臭硝唑和阿苯达唑作用24、48、72、96、120、144和168 h后,原头节存活率分别为79%、70%、56%、42%、33%、16%、15%,86%、67%、63%、48%、32%、28%、21%和85%、71%、45%、36%、21%、15%、8%;0.2%DMSO组原头节存活率为100%。氯舒隆、奥硝唑和阿苯达唑组原头节存活率与0.2% DMSO组相比差异均有统计学意义(χ~2=147.83、130.58、170.37,P0.05)。氯舒隆、奥硝唑和阿苯达唑作用后,多房棘球蚴囊泡均塌陷、皱缩,0.2%DMSO对多房棘球蚴囊泡形态无影响。作用36 h后氯舒隆、奥硝唑、阿苯达唑和0.2% DMSO组培养上清液碱性磷酸酶的吸光度(A405)值分别为0.196±0.030、0.186±0.004、0.244±0.049和0.131±0.020,作用120 h后分别为0.431±0.006、0.271±0.004、0.423±0.007和0.116±0.004。氯舒隆、奥硝唑和阿苯达唑组与0.2%DMSO组相比差异均有统计学意义(t=0.006、0.004、0.007,P0.05)。结论氯舒隆和奥硝唑对体外培养的细粒棘球蚴原头节和多房棘球蚴均具有较强的作用,是潜在的抗棘球蚴药物。