玻璃化技术冻存胚胎的基础与研究现状

在体外受精-胚胎移植(IVF-EF)治疗不孕症中,胚胎冻存技术使得剩余胚胎的保存成为可能,增加了治疗周期的胚胎移植次数和累积妊娠率。胚胎的冻存方法主要有4种:慢速冷却、慢速复温法;慢速冷却、快速复温法;超快速冻结法和玻璃化技术。目前临床多采用第2种方法,但是,玻璃化技术具有避免细胞外冰形成对胚胎的化学、物理损伤,操作简便,费时少,无需贵重的程序式降温仪等优点,而且一些动物实验表明,该方法较常规的慢速冷却、快速复温法获得更高的胚胎存活率。本文就玻璃化技术的方法设计、影响因素和研究现状进行综述。     

非程序性冷冻仪冻存人胚胎干细胞的方法

在人胚胎干细胞（human embryonic stem，hES）的研究中，有效的冻存方法非常重要。目前，冷冻Es细胞主要有两种方法：慢速冷冻一快速复温和超快速玻璃化法。慢冻法需要昂贵的程序性冷冻仪，而玻璃化法步骤繁琐且只能冻存小量细胞．不能满足临床应用。因此，本研究旨在寻找非程序性冷冻仪冻存大量hES细胞的方法。     

不同冷冻方案对人早期胚胎发育潜能的影响

目的:比较开放式、封闭式玻璃化冷冻技术及程序化慢速冷冻法对辅助生殖技术人早期胚胎冷冻复苏的效果.方法:回顾性分析622例胚胎冷冻复苏资料,将体外受精-胚胎移植(ⅣF-ET)患者第3天需要冷冻的胚胎,分别采用开放式、封闭式麦管玻璃化法及程序化慢速冷冻法冷冻,比较3组胚胎复苏率、空泡出现率、胚胎完整率、植入率、临床妊娠率、周期取消率、胚胎丢失率及流产率.结果:开放式冻存组共复苏280个周期、627个胚胎,胚胎复苏率、胚胎完整率、植入率和临床妊娠率分别为97.13％、94.89％、28.90％、52.61％,与程序化冷冻组(复苏165个周期、477个胚胎)胚胎复苏率(73.79％)、胚胎完整率(70.02％)、植入率(16.75％)和临床妊娠率(35.44％)相比差异有统计学意义(P＜0.05),与封闭式冻存组(复苏177个周期、400个胚胎)相比差异均无统计学意义(P＞0.05),3种冷冻组空泡出现率、周期取消率、胚胎丢失率及流产率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:两种玻璃化冷冻法能获得同样的冷冻效率,且均优于程序化冷冻法;封闭式麦管玻璃化法能更好地保存胚胎复苏后的发育潜能,是冻存人早期胚胎较为理想的方法.     

影响冻融胚胎存活的相关因素分析

目的:探讨年龄、受精方式、胚胎冷冻方法及胚胎冻存时间对冻融胚胎存活的影响.方法:回顾分析冻融胚胎移植(FET) 1255个周期,根据年龄、受精方式、胚胎冷冻方法及胚胎冻存时间进行分组,比较各组的冻融胚胎存活率、完全存活率及临床妊娠率.结果:玻璃化冷冻组冻融胚胎存活率、完全胚胎存活率及临床妊娠率分别为93.4％、95.9％、48.8％,程序化冷冻组冻融胚胎存活率、完全胚胎存活率及临床妊娠率分别为81.2％、54.9％、30.1％,两组差异有统计学意义(P＜0.05);年龄、受精方式、胚胎冻存时间对冻融胚胎存活率及完全胚胎存活率无明显影响(P＞0.05).结论:玻璃化冷冻胚胎技术比程序化冷冻胚胎技术能获得更高的冻融胚胎存活率、完全胚胎存活率及临床妊娠率,3年内的冻融胚胎可不考虑冻存时间对胚胎存活的影响.     

玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床初步应用

目的：探讨玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用效果。方法：对22例患者应用玻璃化冷冻保存技术冻存的82枚4～16细胞期的早期胚胎进行了解冻和移植。结果：82枚冷冻胚胎经解冻,存活65枚,存活胚胎均予移植,种植10枚,种植率为15.38%（10/65）,共进行了25个冷冻胚胎移植周期,获得8例妊娠,妊娠率32%（8/25）。结论：玻璃化冷冻保存技术是一种冷冻保存人类早期胚胎的有效方法,临床应用效果良好。     

玻璃化冷冻人类早期胚胎的研究进展

人类胚胎已经成功冷冻保存并在辅助生殖技术（ART）中起重要作用，目前多采用慢速冷冻-快速复温方法冷冻保存人早期胚胎，并取得较高的胚胎存活率，但此法需要昂贵的仪器、耗时，并且对于囊胚冷冻效果差。近年发展的玻璃化冷冻因其简单、快速、不需要昂贵仪器等优点越来越受到重视。就玻璃化冷冻在人类早期胚胎冷冻保存中的应用及其影响因素作一综述。     

卵巢组织冻存方案的优化研究进展

随着肿瘤治疗技术的提高,保护女性生育力逐渐引起了人们的关注。胚胎冷冻技术在各大生殖中心的运用使女性患者一定程度获益,但胚胎冷冻应用的局限性使卵巢组织冷冻成为研究的热点,而冷冻方法的研究成为第一难题。目前针对卵巢组织块的冷冻方法主要包括慢速程序化冷冻和玻璃化冷冻。相比卵巢组织块的冷冻方法,定向冷冻的应用在整个卵巢冷冻中更有优势。定向冷冻能使整个卵巢的冷却速度保持一致,从而降低整个卵巢在冷冻过程中的损伤。不同的冷冻方法对卵巢组织冷冻和(或)解冻移植后功能恢复的影响程度不同,因此寻找合适的冷冻方法对保证最佳冻存效率有着重要的意义。综述近期优化的卵巢组织冻存方案,为临床应用提供参考。     

玻璃化冷冻人类早期胚胎的研究进展

人类胚胎已经成功冷冻保存并在辅助生殖技术(ART)中起重要作用,目前多采用慢速冷冻-快速复温方法冷冻保存人早期胚胎,并取得较高的胚胎存活率,但此法需要昂贵的仪器、耗时,并且对于囊胚冷冻效果差.近年发展的玻璃化冷冻因其简单、快速、不需要昂贵仪器等优点越来越受到重视.就玻璃化冷冻在人类早期胚胎冷冻保存中的应用及其影响因素作一综述.     

玻璃化冷冻人类早期胚胎的研究进展

人类胚胎已经成功冷冻保存并在辅助生殖技术(ART)中起重要作用,目前多采用慢速冷冻-快速复温方法冷冻保存人早期胚胎,并取得较高的胚胎存活率,但此法需要昂贵的仪器、耗时,并且对于囊胚冷冻效果差。近年发展的玻璃化冷冻因其简单、快速、不需要昂贵仪器等优点越来越受到重视。就玻璃化冷冻在人类早期胚胎冷冻保存中的应用及其影响因素作一综述。     

卵子玻璃化冷冻在体外受精胚胎移植周期中的临床应用

目的:探讨卵子玻璃化冷冻保存的可行性,更好提高卵子复苏率、受精率,提高卵子冻存患者的妊娠率。方法:在河北医科大学第二医院生殖医学门诊行体外受精胚胎移植(IVF-ET)患者中,由于取卵日男方取精失败行卵子冻存。于2011年2月～2012年8月共行5例患者卵子冻存并复苏。结果:冷冻MII卵子55枚,复苏率94.5%(52/55),受精率92.3%(48/52),卵裂率95.8%(46/48),移植胚胎11枚,临床妊娠3例,冷冻保存胚胎22枚。结论:卵子玻璃化冷冻是可行的,可应用于取卵日取精困难的患者。     

人类冻融胚胎应用的探讨

目的：探讨冷冻胚胎的临床应用，提高试管婴儿成功率。方法：取IVF与ICSI剩余胚胎，采用慢速冷冻法冻存，快速解冻后用于临床，探讨其效果。结果：从1998年起实施31例胚胎冷冻，复苏后胚胎存活率达71．0％，妊娠率达22．2％。结论：采用冻融胚胎技术可以提高一次取卵的总妊娠率。     

玻璃化冻融胚胎移植妊娠结局的影响因素分析

目的:探讨玻璃化冻融胚胎移植妊娠结局的影响因素。方法:对接受玻璃化冻融胚胎移植患者的247个周期进行回顾性分析,根据患者的临床结局分为妊娠组(112例)和非妊娠组(135例)。对年龄、不孕原因、受精方式、冻融胚胎移植次数、移植胚胎数目、胚胎质量、子宫内膜厚度、子宫内膜准备方案、冻胚时间等9个可能影响因素进行分析。结果:妊娠组与非妊娠组的冻胚时间和子宫内膜厚度均有统计学差异(χ2=8.703,P=0.003;χ2=2.838,P=0.009),logistic多因素回归分析结果显示冻胚时间和子宫内膜厚度与妊娠结局有关。结论:玻璃化冻融胚胎移植受精后第3天冻胚比第2天冻胚的胚胎临床妊娠率更高;在一定范围内,移植日子宫内膜厚度11.0mm比≤11.0mm患者的妊娠率更高。     

胚胎冷冻时间对冻融胚胎移植结局的影响

目的：探讨玻璃化冷冻保存卵裂期胚胎的时间对冻融胚胎移植结局的影响。方法：回顾性分析2017年1月—2020年12月山西医科大学第一医院生殖医学中心进行卵裂期胚胎玻璃化冷冻复苏移植的3 847个周期,包括8 767枚冻融胚胎。根据胚胎冻存时间分为5组,≤1年组,（1~2]年组、（2~3]年组、（3~4]年组和>4年组,比较各组患者的一般情况、胚胎解冻复苏情况及临床结局的差异,并采用二分类Logistic回归分析取卵年龄、移植年龄、冻存时间、移植胚胎数和优质胚胎数对移植结局的影响。结果：各组患者取卵年龄、移植年龄、移植胚胎数、临床妊娠率及活产率比较,差异有统计学意义（P<0.05）。Logistic回归分析显示取卵年龄、移植年龄、冻存时间对临床妊娠、活产无影响（P>0.05）,移植胚胎数及优质胚胎数对临床妊娠、活产有影响（P<0.05）。结论：玻璃化冷冻保存卵裂期胚胎的时间对胚胎复苏及妊娠结局没有显著影响。     

玻璃化解冻和慢速解冻在程序化冷冻胚胎解冻移植中的比较研究

目的 探讨玻璃化解冻(vitrificative thawing,VT)和慢速解冻(slow thawing,ST)对程序化冷冻胚胎解冻移植的影响,优化程序化冷冻胚胎的解冻方案,从而提高不孕不育临床治疗效果.方法 选取2016年1月至2018年12月解放军第九六〇医院生殖医学中心行解冻胚胎移植的400例患者,使用随机数...     

玻璃化冷冻胚胎、配子及卵巢组织安全性研究进展

近年来玻璃化冷冻技术逐渐应用于生殖医学,多数学者认为,玻璃化冷冻胚胎的存活率、发育率、种植率和妊娠率高于程序化冷冻,且经济、便捷、快速,有取代传统慢速冷冻技术的趋势。但玻璃化冷冻胚胎、配子及卵巢组织历史短,其安全性一直受到关注,并认为其造成的细胞膜、透明带、遗传物质和代谢功能损伤是不可避免的。但选择不同的冷冻保护剂和冷冻载体对不同时期的胚胎、配子、卵巢组织进行玻璃化冷冻所造成的冷冻损伤不同。因此,寻求一种安全可靠的冷冻方法是生殖医学工作者追求的目标。     

玻璃化冷冻胚胎、配子及卵巢组织安全性研究进展

近年来玻璃化冷冻技术逐渐应用于生殖医学,多数学者认为,玻璃化冷冻胚胎的存活率、发育率、种植率和妊娠率高于程序化冷冻,且经济、便捷、快速,有取代传统慢速冷冻技术的趋势.但玻璃化冷冻胚胎、配子及卵巢组织历史短,其安全性一直受到关注,并认为其造成的细胞膜、透明带、遗传物质和代谢功能损伤是不可避免的.但选择不同的冷冻保护剂和冷冻载体对不同时期的胚胎、配子、卵巢组织进行玻璃化冷冻所造成的冷冻损伤不同.因此,寻求一种安全可靠的冷冻方法是生殖医学工作者追求的目标.     

影响玻璃化冻融胚胎移植妊娠结局的相关因素分析

目的分析影响玻璃化冻融胚胎移植周期妊娠结局的相关因素。方法回顾性分析2014年6月-2015年1月在该院进行冻融胚胎移植的2 298个周期,分为妊娠组与非妊娠组,比较两组年龄(以35岁为界)、内膜准备方案、内膜厚度(以8 mm为界)、移植胚胎数目及移植优质胚胎数目方面的差异。结果两组患者年龄、子宫内膜厚度、移植胚胎数目、移植优质胚胎数目比较,差异有统计学意义(P均0.05);Logistic回归分析结果显示,年龄、子宫内膜厚度、移植优质胚胎数目与患者临床妊娠结局之间存在回归关系。结论患者应尽可能于35岁之前行胚胎移植助孕治疗,移植日应将内膜厚度提高至8 mm以上。患者若有2枚以上的胚胎冻存,1个周期尽量移植2枚胚胎,最好为2枚优质胚胎,这样在保证高妊娠率的同时又可减少多胎妊娠的发生。     

辅助生殖实验室技术研究进展

自从1978年首例试管婴儿诞生以来，辅助生殖技术ART取得了重大进展。显微操作仪的使用，使胞浆内单精子注射(ICSI)治疗严重男性不育成为可能。显微操作技术还可用于辅助孵化、胚胎活检和核移植。序贯培养液的使用，使胚胎体外培养至囊胚期。未成熟卵母细胞的体外培养以及体外精子发生也取得了许多进展。另外，玻璃化技术的应用简化了卵子及胚胎的冻存，提高了卵子的冷冻存活和妊娠率。生殖医学领域的基因治疗尚处于基础试验阶段。     

共同培养与早期胚胎体外发育

共同培养即将早期胚胎在体外与输卵管上皮层等辅助细胞一起培养，模拟早期胚胎生长的生理环境，是提高体外受精－胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）成功率的一种方式。本文对其作用机理，建立方法应用方式及研究展望等进行综述。     

不同胚胎冷冻方法对冻融胚胎移植患者临床结局的影响

目的:比较人卵裂期胚胎玻璃化冷冻和慢速冷冻解冻后胚胎复苏率、卵裂球完整率、种植率以及临床妊娠率,评价两种方法的有效性。方法:选择2009年7月～2010年3月在辅助生殖中心行F-ET的89例患者,将其分为玻璃化冷冻组(46例)和慢速冷冻组(43例),比较解冻后胚胎复苏率、卵裂球完整率、种植率以及临床妊娠率。结果:玻璃化冷冻组与慢速冷冻组比较具有较高的胚胎复苏率(92.7%vs.66.1%)、卵裂球完整率(89.2%vs.61.4%)、种植率(21.1%vs.4.7%)以及临床妊娠率(47.8%vs.23.3%)。结论:玻璃化冷冻法解冻后胚胎复苏率高,卵裂球完整性好,胚胎具有更好地发育潜能,是人卵裂期胚胎冷冻的有效方法。