顺铂耳毒性机制及耳保护策略研究进展

顺铂作为抗癌一线用药,多用于卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肺癌、甲状腺癌等癌症的治疗,具有较强的广谱抗癌作用,也常伴有一些副作用,如肾毒性、耳毒性、骨髓抑制等.顺铂的耳毒性可导致双侧永久性听力损失,这会使患者的生活质量受到极大影响,特别是在言语交流和社会发展方面.因此,在应用顺铂治疗癌症的同时,也应注意加强对其耳毒性的防护...     

顺铂及其耳毒性

顺铂是一种用于化疗的铂制剂，在临床上广泛应用于抗肿瘤治疗。然而由于顺铂所具有的肾毒性和耳毒性以及神经毒性等毒副作用，致使其临床应用受到一定的限制。顺铂损害耳蜗的三个主要靶目标分别是血管纹和毛细胞以及螺旋神经节，这三个靶目标在顺铂的作用下都以细胞凋亡的方式实现其程序化自我毁灭，因此顺铂耳中毒模型是一个典型的内耳细胞凋亡模型。顺铂造成的细胞内氧自由基活动增加和抗氧化酶类的活性丧失是产生细胞损害的重要因素之一，因而抗氧化治疗可有效降低顺铂对耳蜗中上述三个靶目标的破坏程度。顺铂在Caspase（半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶）径路上激发的毛细胞凋亡是首先启动Caspase－8的活动，说明毛细胞膜表面的细胞死亡因子受体是顺铂诱导毛细胞凋亡的一根导火索；螺旋神经节细胞的凋亡却是被顺铂同时启动了Caspase－8和Caspase－9，因此螺旋神经节细胞的凋亡不但是因为细胞膜表面的死亡因子受体因受顺铂刺激而发出凋亡的信号，而且还会被从线粒体释放出的细胞色素C启动其凋亡自毁程序。肿瘤抑制基因p53是出现在顺铂耳中毒早期的一个促使细胞凋亡的重要“杀手”，应用Superarray技术发现顺铂激发的耳蜗毛细胞和螺旋神经节凋亡基因主要涉及p53，肿瘤坏死因子家族，Death domain family（死亡结构域家族），Bcl－2family，Card family（Caspase相关的招募域家族），和GTP signal transdution（三磷酸鸟苷信号转导）等多条凋亡通路，其中p53信号通路是顺铂诱导毛细胞和螺旋神经节凋亡的主线，因此应用p53抑制剂－Pifithrin仅可以通过有效阻止p53的活动而减轻顺铂诱导的毛细胞凋亡。分裂素激活的蛋白激酶在顺铂诱导的内耳细胞凋亡过程中也扮演了重要的角色．应用PD98059可以通过暂时抑制分裂素激活的蛋白激酶活性和p53磷酸化以及Caspase的活动延迟耳蜗毛细胞凋亡的起始阶段，但不能完全阻止病变的扩展，因而PD98059对顺铂引起的耳蜗毛细胞凋亡仅具有短期保护效应。     

顺铂耳毒性的研究

顺铂是临床上常用的抗癌药物之一，但有较强的肾毒性和耳毒性，其肾毒性可以通过水化疗法、利尿剂和肾保护剂的使用等方法得到明显缓解，其耳毒性除中断治疗外，尚无明确的防护措施，顺铂耳毒性的产生机制及防护方法就成为当前人们关注的热点。本文就顺铂对耳蜗形态学和功能的影响及其发生的可能机制和防治方法进行综述。     

顺氯氨铂的耳毒性

由于抗癌药物顺铂的广泛应用,对其副作用,如耳毒性引起临床普遍关注。本文就顺铂耳毒性特点、中毒因素、病理改变、中毒机制及预防方法等方面作简要综述。认为严密观察、给予适当治疗,可望改善其耳毒性作用。     

连翘酯苷对顺铂耳毒性防护作用的实验研究

目的观察连翘酯苷对顺铂耳毒性的防护作用并探讨其机制。方法将42只听力正常豚鼠随机分为空白组(10只):腹腔注射生理盐水8.0 ml·kg-1·d-1,连续8天;顺铂组(16只):腹腔注射顺铂2.0 mg·kg-1·d-1,连续8天;拮抗组(16只):前2天腹腔注射连翘酯苷25.0 mg·kg-1·d-1,第3天起腹腔注射连翘酯苷后30 min,再腹腔注射顺铂2.0 mg·kg-1·d-1,连续8天。每组豚鼠首次用药前及末次用药后第二天均行ABR检测,末次检测完毕后,心脏穿刺采血检测血清总超氧化物歧化酶(total superoxide disumutase,T-SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,最后断头处死并取耳蜗,行硝酸银染色全耳蜗铺片、耳蜗组织切片和扫描电镜观察。结果空白组、顺铂组、拮抗组用药后ABR阈值分别为7.57±4.59、41.65±6.56、30.63±5.02 dB nHL;血清T-SOD活性分别为186.18±23.46、82.61±36.12、123.53±30.76 U/ml;MDA含量分别为4.14±0.79、10.69±1.21、7.85±0.97 nmol/ml。拮抗组ABR阈值低于顺铂组(P<0.05),顺铂组血清中T-SOD活性最低,而MDA含量最高,差异有统计学意义(P<0.5)。顺铂组耳蜗外毛细胞缺失明显,平均缺失率为53.42%,毛细胞结构紊乱,血管纹紊乱、螺旋神经节细胞数减少,而拮抗组这些损害明显减轻。结论连翘酯苷在一定程度上可以防护顺铂所致的耳蜗损伤,机制可能与其清除耳蜗组织氧自由基、减少氧化应激反应有关。     

顺铂耳毒性的研究进展

顺铂被广泛用于治疗各种癌症,但具有一定的耳毒性作用。近年来的研究发现,顺铂可通过多种途径诱导听力减退,主要包括耳蜗组织损害、氧化应激损伤和细胞凋亡等。某些基因的突变或者缺失会加重或改善顺铂造成的耳毒性。另外,铁死亡也参与顺铂引起的耳毒性作用。对顺铂耳毒性相关机制的不断研究,将促进听力保护药物的研发及临床应用。     

顺铂耳毒性机制及抗氧化药物局部应用的预防作用

顺铂是临床普遍应用的广谱高效抗肿瘤药物,与多种抗肿瘤药有协同效应、无交叉耐药等特点,为当前联合化疗中最常用的药物之一。然而,顺铂的毒副作用严重困扰着癌症患者,其耳毒性尤为突出。顺铂耳毒性多为双侧、进展性、不可逆性、剂量依赖性听力损伤,往往导致成人、尤其是儿童患者出现语言交流障碍。大量研究证实,顺铂通过诱发活性氧(ROS)升高导致听觉毛细胞发生caspase-3激活的细胞凋亡。哺乳动物听觉毛细胞无自发再生能力,一旦损伤即为永久性。因此,顺铂耳毒性预防的药物研发或治疗策略开发至关重要。目前,越来越多的药物被证实在细胞和动物水平上具有顺铂耳毒性保护作用。然而,绝大部分药物经系统性用药后拮抗顺铂抗肿瘤疗效,无法实现临床上的有效应用。至今仍无有效顺铂耳毒性保护药物被批准上市。耳蜗局部鼓室内用药可部分缓解耳毒性保护候选药物对顺铂抗肿瘤疗效的干扰,但因顺铂需周期性用药,多次鼓室内给予耳毒性保护药物易引起局部创伤和感染。本文总结了具有代表性抗氧化药物预防顺铂耳毒性的基础和临床研究进展,为顺铂耳毒性新药研发提供理论依据。     

卡铂及其耳毒性

卡铂作为一种铂制剂广泛应用于临床抗肿瘤的化学治疗，其毒副作用主要包括耳毒性，肾毒性，神经毒性．和抑制骨髓造血系统等等。卡铂可以选择性破坏灰鼠的耳蜗内毛细胞和前庭I型毛细胞以及与之相联系的传入神经元。在卡铂引起的灰鼠单纯内毛细胞部分损害动物模型，动物具有正常的耳声发射和微音器电位以及听神经动作电位阈值．但总和电位和听神经动作电位的振幅却明显减小。在卡铂造成60％-90％的内毛细胞缺损的动物模型中，灰鼠在安静条件下对纯音的听觉条件反射阈可以保持正常，但在宽带或窄带噪声的掩蔽作用下，其纯音听觉反射阈值却明显提高，同时对听觉瞬时清晰度的辨别能力也明显降低。卡铂引起的内毛细胞和前庭I型毛细胞及其传入数据元的破坏过程往往伴随着钙激活蛋白酶的活动和Caspase-8的启动以及p53的过度调控从而引起细胞凋亡，同时可见琥珀酸脱氢酶，钠钾ATP酶，碱性磷酸酶和葡萄糖-6-磷酸酶活性的减弱以及钙激活ATP酶活性的增强。无论在灰鼠的活体动物实验还是离体培养条件下．卡铂都对灰鼠耳蜗内毛细胞和前庭I型毛细胞具有特殊的选择性破坏作用。卡铂对灰鼠听觉系统的损害除了导致内毛细胞和I型螺旋神经节凋亡之外。还会破坏耳蜗核神经元。但对下丘和听皮层的神经元却不造成致命性损坏。在耳蜗内毛细胞和I型螺旋神经节以及耳蜗核神经元被卡铂破坏之后．下丘和听皮层神经元对微弱的输入声刺激信号却表现出超乎寻常的敏感性提高。提示中枢神经元可能通过降低其某些抑制性神经递质的释放使神经元的活动代偿性增强．亦可能通过加强兴奋性神经递质的释放．或者通过神经元新长出的轴突和末梢而接受到更多的刺激信号，从而弥补了因周边听觉输入信号减弱而引起的听功能障碍，因此，卡铂耳中毒灰鼠模型还可成为一个研究听觉中枢重组现象或听神经病的理想实验动物模型。     

鼓室注射地塞米松拮抗顺铂耳毒性的研究

目的：探讨鼓室注射地塞米松对顺铂致听觉损伤的保护作用。方法将55只豚鼠分为4组：正常对照组（I组）10只,腹腔注射生理盐水16 ml／kg;地塞米松组（II组）15只,经鼓室注射地塞米松10 mg／ml;顺铂组（III组）15只,单次腹腔注射顺铂16 mg／kg;顺铂＋地塞米松组（IV组）15只,经鼓室注射地塞米松10 mg／ml ,1小时后腹腔注射顺铂16 mg／kg。给药前及给药后第7天测试各组豚鼠听性脑干反应（auditory brainstem response, ABR）,并检测耳蜗组织丙二醛（malondiadehyde,MDA）含量和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性。结果 I～IV组给药前ABR反应阈分别为28．50±4．74、28．67±5．82、26．67±4．88和27．33±5．30 dB nHL,差异无统计学意义（P＞0．05）;给药后I组和II组ABR反应阈分别为29．00±3．94和31．33±5．81 dB nHL,给药前后差异无统计学意义（P＞0．05）;给药后III组和IV组ABR反应阈为55．33±4．81、40．67±3．72 dB nHL,均显著高于给药前（P＜0．05）,但IV组ABR反应阈低于III组（P＜0．05）。给药后I组 MDA含量和SOD活性分别为2．01±0．07 mmol／L和234．10±13．09 U／ml,II组分别为2．06±0．09 mmol／L和233．20±13．24 U／ml,两组比较差异无统计学意义（P＞0．05）,III、IV组 MDA含量分别为5．74±0．17、3．51±0．18 mmol／L,显著高于I、II 组（均为P＜0．05）,但IV组 MDA含量显著低于 III 组（P＜0．001）;III、IV 组 SOD 活性分别为107．90±14．21、162．70±11．25 U／ml,明显低于I、II组（均为P＜0．05）,但IV组的SOD活性显著高于III组（P＜0．001）。结论鼓室注射地塞米松对顺铂耳毒性具有一定的拮抗作用。     

黑素和抑制剂对顺铂耳毒性的影响

作回顾了顺铂药效学、耳毒性及黑素和一些抑制剂对其耳毒性的影响；并就黑素、磷霉素和自由基清除剂ＬＡＺＡＲＯＩＤＳ与顺铂耳毒性的相互关系进行了实验研究，认为黑素是影响顺铂耳中毒易感性的一个肯定因素，磷霉素和Ｕ７８５１７Ｆ有希望成为预防顺铂耳中毒的保护剂。     

黄芪对顺铂耳毒性保护作用的实验研究

目的探讨黄芪是否对顺铂的耳毒性具有保护作用。方法健康SD大鼠40只随机分成4组,每组10只。对照组：生理盐水2ml／d腹腔注射6天;黄芪组：黄芪注射液5g&#183;kg^-1&#183;d。腹腔注射6天;顺铂组：顺铂4mg&#183;kg^-1&#183;d^-1腹腔注射6天;顺铂加黄芪组：腹腔注射黄芪5g&#183;kg^-1&#183;d^-1加顺铂4mg&#183;kg^-1&#183;d^-16天。用药前及用药后第7天行畸变产物耳声发射（DPOAE）检测,然后处死大鼠。每组半数动物冰冻连续切片,DNA末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测毛细胞凋亡;半数动物扫描电镜观察毛细胞形态。结果顺铂组用药后DPOAE幅值下降,毛细胞受损,并可观察到凋亡细胞,与对照组及黄芪组比较差异具有显著统计学意义（P〈0．01）。顺铂加黄芪组用药后DPOAE幅值上升,毛细胞受损减轻,凋亡细胞数量减少,与顺铂组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论黄芪能有效保护耳蜗免受顺铂的耳毒性损伤。     

葡萄糖酸锌对顺铂耳毒性保护作用的实验研究

本文用豚鼠做实验。用葡萄糖酸锌140mg／kg／日口服5天，然后同时用顺铂2mg／kg／口腹腔注射5天，与单纯顺铂腹腔注射组及生理盐水腹腔注射组对照，观察葡萄糖酸锌对顺铂的耳毒性有无保护作用。结果发现葡萄糖酸锌＋顺铂组豚鼠的耳廓反射的减退和耳蜗外毛细胞损害程度均较单用顺铂组轻，提示葡萄糖酸锌对顺铂的耳毒性有保护作用。