大肠癌术中门静脉血CK20 mRNA检测临床意义的探讨

目的检测大肠癌患者门静脉和外周血中细胞角蛋白(CK20)mRNA,探讨它作为大肠癌肿瘤细胞血行播散标志的临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测63例大肠癌患者术中抽取的门静脉和外周血中CK20 mRNA和癌胚抗原(CEA)表达的阳性率,并对所测结果进行分析和比较。结果Ducks A,B期和Ducks C,D期患者门静脉血CK20 mRNA阳性表达均明显高于外周血,差异有统计学意义。随着病情进展,门静脉和外周血中CK20 mRNA表达均显著提高(65% vs 96%;33% vs 54%),但仅门静脉结果差异有统计学意义(P<0.005,χ2=8.65)。比较不同时期不同部位CK20 mRNA与CEA表达差异时,除Ducks A,B期患者门静脉血中CK20 mRNA阳性率较CEA阳性率为高且具有统计学意义外,Ducks C,D期门静脉组和各期外周血组中CK20 mRNA阳性率和CEA阳性率差异无统计学意义。结论大肠癌患者门静脉中CK20 mRNA含量高于外周血,门静脉和外周血中CK20 mRNA的阳性表达可随病情进展而增加,因此可作为大肠癌肿瘤细胞血行播散标志,应用于手术后预后判断。     

联合检测大肠癌组织中血管内皮生长因子与门静脉血细胞角蛋白20mRNA的临床意义

目的探讨大肠癌病人肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）蛋白和门静脉血细胞角蛋白20（cytokeratin,CK20）mRNA作为血行播散标志物的临床意义。方法RT-PCR技术检测63例大肠癌病人门静脉血CK20mRNA表达阳性率,免疫组织化学方法检测肿瘤标本VEGF蛋白的表达。结果随着病情由Dukes A、B期向Dukes C、D期进展,门静脉血CK20 mRNA表达的阳性率由64．9％升高到96．2％（P〈0．01）。高、中分化肿瘤组织VEGF蛋白阳性率为50．0％,低、未分化时升高到92．3％（P〈0．01）。CK20 mRNA与VEGF作为单项指标测定时,阳性率分别为77．8％和58．7％,联合检测时阳性率显著升高（92．1％）。结论大肠癌病人门静脉血中CK20 mRNA和肿瘤组织VEGF作为衡量大肠癌浸润能力的指标,二者表达分别与Dukes分期和肿瘤恶性程度的关系密切。联合检测二者时,敏感性显著提高,可弥补单项指标检测的不足,值得在临床上推广。     

检测细胞角蛋白19和20对结直肠癌微转移的诊断意义

目的探讨检测细胞角蛋白19（CK19）和CK20的表达对结直肠癌微转移的诊断意义。方法采用RT-PCR方法检测44例结直肠癌患者（结直肠癌组）及18例非恶性病变腹部手术患者（良性病变组）门静脉血和外周血CK19和CK20的表达。结果良性病变组患者门静脉血和外周血均无CK19或CK20阳性表达。结直肠癌组患者外周血和门静脉血中CK19和（或）CK20均阳性表达者34例（77．3％）。与良性病变组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结直肠癌组外周血CK19和CK20的阳性表达率分别为36．4％和52．3％．门静脉血则分别为59．1％和72．7％,高于外周血的阳性表达率（P〈0．05）：Ⅲ期结直肠癌患者CK19和（或）CK20的阳性表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者（P〈0．05）。外周血CK19和（或）CK20阳性表达者术后转移或复发率61．5％,明显高于仅在门静脉血中CK19和（或）CK20阳性者的25．0％（P〈0．05）。结论外周血和门静脉血中CK19和CK20的RT—PCR检测是判断结直肠癌患者有无血行微转移的敏感和特异性诊断方法之一。     

RT-PCR 检测门静脉血CK20 mRNA对诊断结肠癌肝脏微转移的意义

目的:探讨结肠癌患者门静脉血CK20 mRNA的检测对肝脏微转移的诊断价值。方法:采用RT-PCR技术检测31例结肠癌患者门静脉血中CK20 mRNA。结果:全组检出CK20 mRNA阳性率为25.81%，随访时间平均（18.5±10.6）个月（6～32个月）。1例术中发现肝转移且门静脉血CK20为阳性; 术时未见肝脏转移而门静脉血CK20阳性的7例中3例术后（6～15个月）出现肝转移（42.85%）; 术时未见肝转移且门静脉血CK20阴性的23例，2例出现肝转移（8.69%）。结论:结肠癌术中门静脉血CK20 mRNA的检测对于患者的预后和指导治疗有参考价值。     

结直肠癌患者血液中CK20mRNA的表达

目的探讨结直肠癌患者血液中CK20 mRNA表达及其临床意义。方法采用RT-PCR法检测61例结直肠癌患者术前外周血和术中门静脉血以及20例健康自愿者与10例结直肠息肉患者外周血中CK20 mRNA表达。结果 61例结直肠癌患者术前外周血CK20 mRNA表达阳性率为41.0%(25/61),术中门静脉血中CK20mRNA表达阳性率为45.9%(28/61),两者差异无统计学意义(P>0.05)。结直肠癌患者外周血和门静脉血中CK20 mRNA表达均与肿瘤TNM分期?浸润深度?远处转移和区域淋巴结转移有关(P<0.05)。20例健康自愿者和10例结直肠息肉患者外周血中均无CK20 mRNA表达。结论 CK20是结直肠癌患者血液中反映微转移较为特异的肿瘤标志物,结直肠癌患者血液中CK20 mRNA表达与肿瘤的分期、浸润和转移有关。     

胃癌患者腹液中CK20 mRNA检测的临床意义

目的 探讨胃癌患者腹液中CK20 mRNA检测的临床意义.方法 用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测49例胃癌患者腹水或腹腔冲洗液CK20 mRNA的表达情况并以同期10例行非肿瘤手术患者作为对照,结合临床病理资料及随访结果进行分析.结果 腹水CK20 mRNA阳性率50.00%,腹腔冲洗液CK20 mRNA阳性率35.90%,两者差异无统计学意义(P＞0.05).胃癌组CK20 mRNA表达总阳性率38.78%,对照组均无阳性表达(P＜0.05).胃癌组CK20 mRNA检测阳性率显著高于病理细胞学检查阳性率(10.20%)(P＜0.05);CK20mRNA表达与有无淋巴结转移及肿瘤浸润深度相关(均P＜0.05),与组织分化程度无关(P＞0.05).CK20 mRNA阳性表达者的平均生存时间较阴性者显著缩短(20.95个月vs.33.24个月)(P＜0.01).结论 胃癌患者腹水或腹腔冲洗液中CK20 mRNA检测,可早期诊断腹腔微转移,有助于判断预后,指导治疗.     

乳腺癌外周血CK-19mRNA的表达及临床意义

目的：研究外周血CK-19 mRNA表达与乳腺癌临床生物学指标的关系,探讨其作为乳腺癌微转移标志物的可能性,并判断手术和化疗对血液微转移的影响。方法：应用RT-PCR技术检测50例乳腺癌患者（乳腺癌组）术前、术后第2天、第1次化疗结束后以及术后9～12个月外周血中CK-19 mRNA的表达情况,并以20例乳腺良性疾病（良性对照组）和20例正常健康女性（正常对照组）作为对照。结果：术前乳腺癌组外周血CK-19 mRNA阳性率为24.00%（12/50）,其中0～Ⅰ期15.38%（2/13）Ⅰ,Ⅰ期20%（6/30）Ⅰ,Ⅱ期57.14%（4/7）Ⅰ,Ⅱ期乳腺癌CK-19 mRNA阳性表达率明显高于0～Ⅱ、Ⅰ期（P〈0.05）;有淋巴结转移者42.11%（8/19）表达阳性,无淋巴结转移者12.94%（4/31）表达阳性,二者差异有统计学意义（P〈0.05）。良性疾病组CK-19 mRNA的阳性率为5.00%（1/20）,正常对照组均阴性,乳腺癌组与良性疾病组和正常对照组比较差异有统计学意义（P均〈0.01）。乳腺癌组术后第2天CK-19 mRNA阳性率为26%（13/50）,与术前比较差异无统计学意义（P〉0.05）。术后首次化疗结束后CK-19 mRNA阳性率为12%（6/50）,化疗前后差异有统计学意义（P〈0.01）。综合治疗9～12个月后CK-19 mRNA阳性率为10%（5/50）,与术前比较差异有统计学意义（P〈0.01）。外周血CK-19 mRNA阳性率与雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、CerbB2、p53状态无关。结论：CK-19 mRNA可作为检测乳腺癌患者外周血微转移的分子学标志物,有助于早期预测乳腺癌发生血道微转移,对指导治疗和评估预后具有重要意义。     

CK19/20检测对结直肠癌微转移的诊断意义

目的 探讨 CK19/20mRNART-PCR检测对结直肠癌微转移的诊断意义。方法 采用RT-PCR逆转录多聚酶链反应）方法检测42例结、直肠癌患者及对照组6例非恶性病变腹部手术患者骨髓血、门静脉血和外周血CK19mHNA及 CK20 mRNA的表达。结果 对照组6例患者无 CK19及 CK20阳性表达,CK19及CK20在42例结、直肠癌患者骨髓血、门静脉血及外周血中阳性表达分别为24/42、21/42、11/42及27/42、18/42、11/42,两间无显著差异（P>0.05）,骨髓和门静脉中表达比外周血高（P<0.01）,Dukes　C 期患者表达高于Dukes A、B期（P<0.05）。结论 CK19、CK20的RT-PCR检测是较敏感和特异的结、直肠癌微小转移指标,阳性表达患者有较高发生远处转移的危险。     

结直肠癌早期肝转移的预测

目的研究CK20 mRNA、CD44v6、血管内皮生长因子（VEGF）与结直肠癌肝转移的关系,探讨临床预测结直肠癌早期肝转移的有效的客观指标。方法应用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测50例结直肠癌患者回流门静脉血中CK20 mRNA,并同时应用免疫组织化学方法测定结直肠癌癌组织中CD44v6、VEGF的表达;并与良性病变对照组10例和正常组织对照组10例比较。结果结直肠癌患者门静脉血CK20 mRNA;癌组织中CD44v6、VEGF表达阳性率明显高于良性病变对照组（P〈0．01）和正常对照组（P〈0．01）;结直肠癌组织中CIM4v6及VEGF的表达与门静脉血中CK20 mRNA的表达有显著相关性（r．=0．933,r2=0．906,P〈0．05）;同时肝转移组CK20 mRNA、CD44v6、VEGF阳性表达率均高于非肝转移组（P〈0．05）。结论联合检测CD44v6、VEGF及CK20 mRNA预测结直肠癌肝转移,可提高预测的灵敏度及特异性,对于结直肠癌早期肝转移监测具有较高的临床价值。     

实时定量逆转录聚合酶链反应检测大肠癌患者术前外周血CK20 mRNA和CEA mRNA的临床意义

目的探讨大肠癌患者外周血CK20 mRNA和CEA mRNA的表达及其临床意义。方法采用实时定量逆转录聚合酶链反应（QRT-PCR）技术,对68例大肠癌患者及30例健康志愿者（对照组）术前外周血CK20 mRNA和CEA mRNA水平进行检测。结果在对照组中CK20 mRNA和CEA mRNA均无表达,而在大肠癌组中CK20 mRNA阳性表达率为45．6％,CEA mRNA阳性表达率为39．7％,二者联合检测阳性率为55．9％,较单项检测阳性率高（P〉0．05）,二者的表达与性别、肿瘤部位和肿瘤分化程度无明显相关,与肿瘤临床分期、淋巴结转移和肝脏转移明显相关。结论CK20 mRNA和CEA mRNA可作为大肠癌细胞血行播散的标志,联合检测有助于提高肿瘤微转移的检出率及判断预后。     

检测膀胱癌患者外周血中CK-20mRNA的临床意义

目的 :探讨膀胱肿瘤患者外周血中CK 2 0mRNA表达的临床意义。方法 :采用RT PCR技术检测 32例膀胱癌患者手术前、10例手术后及 10例健康者外周血标本中CK 2 0mRNA的表达。结果 :在手术前外周血中CK 2 0mRNA表达阳性率为 15 .6 % (5 / 32 ) ;在手术后外周血中CK 2 0mRNA表达阳性率为 2 0 .0 % (2 / 10 ) ,其中 1例术前外周血CK 2 0mRNA表达阴性 ,手术后变为阳性 ;健康者外周血均无CK 2 0mRNA表达。膀胱癌患者外周血中CK 2 0mRNA表达阳性率与肿瘤大小、数目无显著关系 (P >0 .0 5 ) ,但随着肿瘤分级、分期的增加 ,CK 2 0的检出率似有增加的趋势。结论 :以RT PCR技术检测膀胱癌患者外周血中CK 2 0mRNA的表达 ,可早期诊断和监测膀胱肿瘤细胞血行微转移。     

膀胱癌患者外周血细胞角蛋白20mRNA检测及意义

目的　探讨膀胱癌患者外周血中特异性细胞角蛋白 2 0 (CK 2 0 )mRNA在诊断中的意义。　方法　膀胱癌患者 91例 ,半巢式逆转录聚合酶链反应检测其外周血有核细胞成分中CK 2 0mRNA含量 ,2 5例健康人作为对照。　结果　 91例患者中 37例 (41 % )外周血CK 2 0mRNA阳性表达 ,其中证实有转移的 2 0例中 1 7例 (85 % )阳性 ;对照组 2 5例均为阴性。外周血细胞CK 2 0mRNA的阳性率在有远处转移的病例中显著升高 (P <0 .0 1 )。　结论　检测膀胱癌患者外周血中CK 2 0mRNA对早期发现膀胱癌细胞的血行播散有重要参考价值     

门静脉血CEA—mRNA、CK20-mRNA动态检测对早期诊断结直肠癌肝转移的意义

目的动态检测结直肠癌患者门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达情况，探讨其对早期诊断结直肠癌肝转移的临床意义。方法40例结直肠癌患者随机分为两组（各20例），实验组术中留置门静脉埋植式给药装置（implantable drug delivery system，IDDS），术后常规随访加用荧光定量RT—PCR方法动态检测门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达情况；对照组常规术后随访。结果两组病例术后发生肝转移的时间和比例无显著性差异，发生肝转移的病例中，在影像学检查检出病灶的同时，几乎均有外周血CEA的增高，3例未发生肝转移的病例也可见外周血CEA的增高，实验组发生肝转移的病例则在影像学检查检出病灶之前3-9月即有门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达阳性。结论门静脉血CEA—mRNA、CK20-mRNA动态检测比外周血CAE检测和影像学检查更敏感、特异性更高，是早期诊断结直肠癌肝转移的有效方法。     

胃癌阻断新技术降低癌细胞血行转移的临床研究

目的　评价胃癌阻断技术降低胃癌门静脉血内癌细胞播散的效果。方法　 2 3例胃癌患者 ,8例术中未采用胃癌阻断技术者为常规手术组 ,15例采用胃癌阻断技术者为阻断组 ,术前、术中抽门静脉血及阻断区域胃网膜静脉弓内静脉血 ,应用RT -PCR技术测定静脉血内CK19mRNA表达情况。结果　切除胃癌病灶之前 ,门静脉血内CK19mRNA的总阳性率为 34 7% ( 8/ 2 3) ,常规组和阻断组的阳性率分别为 37 5 % ( 3/ 8)和 33 3% ( 5 / 15 ) ;术中牵拉胃癌病灶时 ,常规组门静脉血CK19mRNA的阳性率为 87 5 % ( 7/ 8) ,而阻断组的阳性率为 6 7% ( 1/ 15 ) ,两组差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ;阻断组 15例患者癌灶阻断区域网膜血管弓内静脉血CK19mRNA均阳性。结论　术中采用胃癌阻断技术能有效的阻断胃癌细胞播散 ,防止手术操作引致的癌细胞远处转移     

VEGF和CK20mRNA联合检测在大肠癌病人中的意义

目的探讨大肠癌病人外周血细胞角蛋白(CK20 mRNA)和肿瘤组织VEGF蛋白作为大肠癌肿瘤细胞血行播散标志的临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和免疫组织化学方法检测63例大肠癌术中抽取的外周血CK20 mRNA和手术切除肿瘤组织中VEGF蛋白的表达,并对所测结果进行分析和比较。结果高、中分化和低、未分化大肠癌病人的CK20 mRNA和VEGF的阳性率分别为30.0%、50.0%和84.6%、92.3%,均有非常显著性差异(P<0.01)。DukesA、B期和C、D期大肠癌病人CK20 mRNA和VEGF的阳性率分别为32.4%、56.8%和53.8%、61.6%,无显著性差异(P>0.05)。CK20 mRNA与VEGF作为单项指标测定的阳性率分别为41.3%和58.3%,联合检测时阳性率升至69.8%,有非常显著性差异(P<0.01)。结论大肠癌病人外周血CK20 mRNA和肿瘤组织VEGF可作为衡量术后复发转移的有效指标;两者联合检测时,敏感性显著提高。