从补肾生血药对衰老小鼠骨髓GM-CSF基因转录水平的影响探讨肾生髓的分子基础

目的：为探讨肾生髓的分子基础,阐述肾生髓的本质相关基因,我们观察了补肾生血药对衰老小鼠骨髓粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（GM－SF)基因转录水平的影响。方法：采用老年小鼠和D－半乳糖致衰老小鼠两种衰老肾虚动物模型,分别连续灌服补肾生血药2个月和1个月,应用半定量逆转录－聚合酶链式反应技术（RT－PCR）检测小鼠骨髓有核细胞GM－CSF基因转录水平的变化。结果：老年小鼠和D－半乳糖致衰老小鼠骨髓有核细胞GM－CSF基因转录水平明显低于青年小鼠和正常对照小鼠,给药后则可明显得到提高。结论：补肾生血药起到滋阴补肾,益髓生血作用的分子机理之一,是促进骨髓GM－CSF基因的转录。GMCSF是肾生髓的分子基础之一,GM－CSF基因是肾生髓的本质相关基因之一。     

左归饮对老年小鼠脾细胞体外增殖和血清白细胞介素-2的影响

目的:探讨左归饮对老年小鼠免疫功能的影响.方法:通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定脾淋巴细胞增殖反应、酶联免疫(ELISA)法测定血清中白细胞介素-2(IL-2)水平.结果:老年小鼠脾细胞对刀豆蛋白A(ConA)应答增殖能力和血清中IL-2水平明显低于青年小鼠(P＜0.01和P＜0.05),左归饮可显著提高老年小鼠IL-2的含量,同时促进体外脾细胞增殖(P＜0.05和P＜0.01).结论:左归饮明显增强老年小鼠的免疫功能,使其恢复或接近青年小鼠状态,具有延缓衰老的作用.     

复方参七汤对D-半乳糖致衰老小鼠免疫系统的影响

目的 :从免疫学角度在器官水平及细胞因子水平探讨复方参七汤 ( F ST)对 D-半乳糖致衰老小鼠延缓衰老的作用机理。方法 :采用小鼠皮下注射 D-半乳糖 ,造成早衰模型。灌胃给药 6周后处死 ,取胸腺、脾脏及血清 ,用称重法对胸腺指数及脾指数进行测定 ,用放射免疫法 ( RIA )测定白细胞介素 -2 ( IL-2 )和肿瘤坏死因子 -α( TNF-α)的含量。结果 :D-半乳糖模型组与正常对照组比较 ,其胸腺指数、脾腺指数均明显降低 ( P<0 .0 5 ) ,其血清 IL-2含量也明显降低 ( P<0 .0 1) ;而血清 TNF-α水平却显著异常升高。经服用 FST后 ,各剂量组胸腺指数、脾脏指数及其血清 IL-2均显著升高 ( P<0 .0 5 ,P<0 .0 1) ,血清 TN F-α水平显著降低 ,且其影响都呈一定的量效关系。结论 :F ST对 D-半乳糖致衰老小鼠胸腺指数、脾腺指数、 IL -2都有升高作用 ,而对血清 TNF -α(恶液质 )的异常升高却有抑制作用 ,并可能是通过这些因素的调节来增强免疫功能 ,从而达到延缓衰老的目的     

补肾生髓方对D-半乳糖衰老模型大鼠学习记忆能力及衰老相关蛋白P16、P21的影响

目的:探讨补肾生髓方对衰老大鼠学习记忆能力及衰老相关蛋白P16、P21的影响。方法:将50只实验大鼠随机分成D-半乳糖衰老模型组、正常组、补肾生髓方组、六味地黄丸组、维生素E组共5个组。采用颈背部皮下注射D-半乳糖400mg/kg,连续4个月,制备衰老模型,同时给予相应药物灌胃,正常组给予等剂量0.9%氯化钠注射液。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,Western blot检测大鼠海马中P16、P21蛋白的表达。结果:补肾生髓方能够缩短D-半乳糖衰老大鼠到达平台的时间,降低衰老模型大鼠海马中P16、P21的含量。结论:补肾生髓方能够提高衰老大鼠的学习记忆能力,通过降低大鼠体内P16、P21的含量从而达到延缓衰老的目的。     

还少丹对D-半乳糖致衰老模型小鼠免疫功能的影响

目的观察还少丹对D-半乳糖致衰老模型小鼠免疫功能的影响,并探讨其延缓衰老的机制。方法将小鼠随机分成对照组、模型组和还少丹低、高剂量组。采用皮下注射D-半乳糖溶液制备亚急性衰老模型,还少丹低、高剂量组给予相应剂量的还少丹水煎液灌胃,对照组和模型组给予等量的蒸馏水灌胃,连续6周。测定各组小鼠胸腺指数和脾脏指数、脾组织IL-2水平及T淋巴细胞的增殖活性。结果与对照组比较,模型组小鼠胸腺和脾脏指数、IL-2水平和T淋巴细胞增殖活性明显降低(P<0.01);与模型组比较,还少丹低、高剂量组均能增加胸腺指数和脾脏指数,提高IL-2水平和T淋巴细胞增殖活性,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论还少丹可通过增加胸腺和脾脏指数来保护免疫器官,通过提高IL-2的水平及T淋巴细胞的增殖活性增加机体免疫活性,这可能是还少丹发挥抗衰老作用的机制之一。     

四君子汤、四物汤对亚急性衰老模型雌性小鼠IL-2影响的实验研究

目的:探讨四君子汤、四物汤对亚急性衰老模型雌性小鼠IL-2影响的差异性。方法:以D-半乳糖致衰老模型雌性小鼠为研究对象,观察四君子汤、四物汤对D-半乳糖致衰老模型雌性小鼠免疫因子IL-2水平的影响。结果:四君子汤组雄性小鼠的IL-2水平显著高于四物汤组和模型对照组的雄性小鼠;四物汤组雌性小鼠的IL-2水平显著高于四君子汤组和模型对照组的雌性小鼠。结论:四君子汤与四物汤对D-半乳糖致衰老模型雌性、雄性小鼠免疫因子IL-2的影响具有一定的差异性。     

枸杞多糖对衰老小鼠脑NO、NOS的影响

目的研究枸杞多糖对衰老小鼠NO、NOS的影响.方法采用老年小鼠和D-半乳糖致衰老小鼠,分别连续灌服枸杞多糖20mg/kg*d两个月和一个月,应用Griess法检测脑NO含量,双波长分光光度计测定NOS活性.结果老年小鼠和D-半乳糖致衰老小鼠脑NO含量、NOS活性明显低于青年小鼠和正常对照小鼠,给药后则可明显提高之.结论枸杞多糖能明显提高衰老小鼠脑NO含量和NOS活性.     

延衰合剂对D-半乳糖衰老小鼠脾脏病理及血清IL-2的影响

目的:研究延衰合剂(Yanshuai Mixture,YSM)对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠脾脏组织结构及血清白介素-2(IL-2)水平的影响。方法:用D-半乳糖(D-galactose,D-gal 120 mg.kg-1.d-1)连续sc 8周建立衰老模型小鼠,造模同时用YSMig,观察衰老小鼠脾脏指数、脾脏病理改变、酶联免疫分析法(ELISA)检测血清IL-2的变化。结果:与正常对照组脾脏指数(0.38±0.03)%比较,衰老模型小鼠脾脏指数(0.25±0.05)%降低,脾组织结构退化明显,IL-2水平(0.90±0.17)μg.L-1明显降低(P<0.05);用药后,延衰合剂高剂量组小鼠脾组织结构明显改善,脾脏指数(0.37±0.04)%增加,IL-2水平(2.47±0.77)μg.L-1增加(P<0.05)。YSM高剂量组作用优于补肾益寿胶囊组及YSM低、中剂量组(P<0.05)。结论:YSM可改善衰老小鼠脾脏病理结构,抑制IL-2水平的下降,提高免疫功能,可能具有良好的延缓衰老的作用。     

枸杞多糖对衰老小鼠原癌基因c—myc表达的影响

目的：探讨枸杞多糖抗衰老的分子机理。方法：采用老年小鼠和D－半乳糖致衰老小鼠两种衰老动物模型,分别连续灌服枸杞多糖2个月和1个月,应用半定量逆转录－聚合酶链式反应技术（RT－PCR）检测小鼠骨髓原癌基因c-myc表达的变化。结果：老年小鼠和D－半乳糖致衰老小鼠骨髓原癌基因c-myc表达是枸杞多糖抗衰老分子机理之一（P＜0．001）,给药后则可明显得到抑制（P＜0．05）。结论：抑制原癌基因c-myc表达是枸杞多糖抗衰老分子机理之一。     

千佛菌对老龄小鼠Th_1/Th_2漂移的影响

目的:通过研究千佛菌对D-半乳糖致衰老模型小鼠外周血Th1、Th2型细胞因子(IFN-γI、L-4)水平及I FN-γ/I L-4比值的影响,探讨千佛菌对衰老机体的免疫调节作用。方法:将小鼠随机分为正常对照组、衰老模型组、千佛菌大、小剂量组。除正常组外,其余均腹腔注射D-半乳糖制备衰老模型。千佛菌大、小剂量组分别以100%和50%药液每只每日0.4 mL灌胃,其余等量生理盐水灌胃。测定血清中IFN-γI、L-4含量并计算IFN-γ/IL-4比值,测定脾脏及胸腺指数。结果:模型组小鼠血清IFN-γI、L-4水平I、FN-γ/IL-4比值、脾脏及胸腺指数均明显降低,与正常组比较P0.001;与模型组比较,千佛菌大、小剂量组IFN-γI、L-4水平、脾脏及胸腺指数均明显升高P0.001I,FNγ/IL-4比值恢复;千佛菌大、小剂量组间IFN-γI、L-4比较P0.001。结论:千佛菌对D-半乳糖致衰老模型小鼠Th1、Th2型细胞因子水平及IFN-γ/IL-4比值具有升高作用,并能够显著增加小鼠的脾脏及胸腺指数,对D-半乳糖导致衰老的Th1/Th2免疫失衡具有一定的调节作用,能使之趋向恢复正常。     

异位宁对子宫内膜异位症大鼠血清白介素2及白介素10作用的实验研究

目的通过研究异位宁对子宫内膜异位症大鼠血清IL-2、IL-10的影响来阐述异位宁的作用机理。方法采用自体子宫组织块移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型。应用ELISA的方法,检测大鼠异位子宫内膜IL-2,IL-10含量。结果异位宁高剂量组IL-2含量明显高于模型对照,有显著性差异(P<0.01);IL-10含量明显低于模型对照组,有显著性差异(P<0.01)。结论异位宁可以通过降低IL-10水平,而升高IL-2进而提高细胞免疫功能,从而达到治疗子宫内膜异位症的目的。     

清开通灌肠液对内毒素性发热兔的退热效应及对血管活性肠肽、白介素-2的影响

目的:观察基于"脑-肠轴"学说组方的清开通灌肠液,对内毒素性发热兔的退热效应及VIP、IL-2在发热中的变化。方法:日本大耳白家兔60只,随机分成4组:正常组、模型组、清开灵组和清开通组。模型组、清开灵组及清开通组,各组经耳缘静脉注射无热源生理盐水稀释的内毒素,建立兔内毒素性发热模型。同时清开灵组、清开通组分别予以清开灵、清开通灌肠液灌肠。注射内毒素2h后,清开灵组、清开通组再予灌肠1次。4h后,各组动物随机抽取10只,采集脑、肠及外周血标本,用放射免疫法检测脑、肠及血浆中VIP、IL-2含量。持续观察每组另外5只动物体温变化情况,每间隔10min记录1次体温,连续测温12h。结果:清开灵组和清开通组动物的体温与模型组相比都有明显降低(P0.01),但清开通组降低比清开灵组更为显著(P0.05)。脑肠及血浆中VIP和IL-2的含量都显著低于模型组(P0.01),尤其清开通组较清开灵组降低幅度更大,二者有显著差异(P0.05)。结论:"清开"与"通腑"合治,较单一清开法在退热及提高机体免疫方面效果更著,VIP和IL-2在发热中起正调节作用。     

黄芪抗γ射线辐射对小鼠淋巴细胞增殖和IL-2的作用研究

目的 :从免疫学方面探讨中药黄芪对辐射损伤小鼠淋巴细胞增殖和 IL - 2的研究。方法 :用 10 0 %黄芪水浸出液定期给小鼠灌胃 ,行γ线照射后检测小鼠淋巴细胞增殖和 IL - 2的产生。结果 :用药组小鼠脾淋巴细胞增殖和 IL - 2产生有显著增强作用 ,与照射组相比均有非常显著性差异 (P<0 .0 1)。结论 :黄芪有明显抗 γ线辐射、促进小鼠淋巴细胞增殖和IL- 2产生的作用。     

基于“寒毒”理论探讨温阳益气解毒方治疗溃疡性结肠炎临床研究

目的:观察温阳益气解毒方治疗溃疡性结肠炎(UC)临床疗效,探讨修复肠黏膜的可能机制。方法:选择120例UC患者,按随机数字表法分为观察组和对照组各60例。对照组给予双歧杆菌三联活菌胶囊、谷氨酰胺肠溶胶囊、美沙拉嗪肠溶片治疗,观察组在对照组基础上加用温阳益气解毒方口服。治疗后比较2组中医证候积分、临床疗效、白细胞介素-1(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、三叶因子3(TFF3)、黏蛋白2(MUC2)及肠黏膜评分。结果:观察组总有效率为90.0%,显著高于对照组76.7%(P<0.05)。治疗前,2组单个中医症状积分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组腹痛、腹泻、脓血便、里急后重等症状评分低于治疗前,且观察组各个症状评分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组IL-1β、TNF-α、TFF3、MUC2水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组IL-1β、TNF-α水平较治疗前降低,TFF3、MUC2水平较治疗前升高;且观察组IL-1β、TNF-α水平低于对照组,TFF3、MUC2水平高于对照组;差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组肠黏膜评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组肠黏膜评分较治疗前降低,且观察组肠黏膜评分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:温阳益气解毒方可以提高UC治疗效果,且可以降低IL-1β、TNF-α表达,减轻炎性反应,增加TFF3、MUC2表达量,保护肠黏膜。     

山核桃树枝水煎剂的抑瘤作用及其对S180荷瘤小鼠IL-2和IL-4影响的实验研究

目的:探讨山核桃树枝水煎剂(DJM)的抑瘤作用及其对S180荷瘤小鼠外周血白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-4(IL-4)水平的影响。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法检测荷瘤鼠外周血IL-2和IL-4的水平。结果:DJM对荷瘤鼠的抑瘤率为35.68%,DJM对荷瘤鼠外周血IL-2水平较模型组明显升高(P<0.01),IL-4水平较模型组降低(P<0.05)。结论:DJM对S180荷瘤小鼠肿瘤组织的生长具有明显的抑制作用;DJM可通过提高荷瘤小鼠外周血IL-2水平,降低IL-4水平来逆转Th1/Th2漂移,发挥抗肿瘤作用。     

复方首乌水提液诱导淋巴细胞增生、白细胞介素2生成及巨噬细胞细胞毒效应的实验研究

复方首乌水提液(PMC)300mg/kg/天ip连续5天,可使大鼠脾细胞对ConA、PHA的增殖反应明显增强,IL-2生成显著提高,在体外PMC 1mg/ml与亚剂量0.25μgConA诱导的大鼠脾淋巴细胞增殖反应及IL-2生成也均见明显增强。用药大鼠腹腔Mφ超微结构显示活化,Mφ细胞毒效应亦明显升高。表明PMC可增加T细胞数量,提高T细胞功能,诱导Mφ活化。     

参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠IL-13,IL-23及COX-2,CREB表达的影响

目的:观察参苓白术散对脾虚湿困型溃疡型结肠炎大鼠结肠组织白细胞介素(IL)-13,IL-23及环氧合酶-2(COX-2),c AMP反应元件结合蛋白(CREB)表达的影响,探究其对溃疡性结肠炎作用机制。方法:将48只SPF级Wistar大鼠随机分为6组,分别是空白组、模型组、参苓白术散高、中、低剂量组和美沙拉秦组,每组8只,雌雄各半。除空白组,其余各组采用病证结合法复制脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠模型,即饮食、环境干预等措施联合2,4-二硝基苯磺酸灌肠。造模成功后,参苓白术散高、中、低剂量组分别按照24,12,6 g·kg-1·d-1,美沙拉秦组0.2 g·kg-1·d-1进行灌胃。连续灌胃21 d后采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠结肠组织IL-13,IL-23含量;实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测结肠组织IL-13,IL-23,COX-2,CREB mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织COX-2,CREB蛋白表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠结肠IL-13含量和IL-13 mRNA表达水平明显降低(P0.05),IL-23含量和IL-23 mRNA升高(P0.05),COX-2,CREB mRNA及蛋白相对表达量升高(P0.05)。与模型组比较,参苓白术散(高、中、低剂量)组大鼠结肠IL-13含量和IL-13 mRNA表达均升高,尤以参苓白术散高剂量组最显著(P0.05),IL-23含量和IL-23 mRNA降低(P0.05),COX-2,CREB mRNA表达及蛋白相对表达量降低(P0.05)。结论:参苓白术散可能调节脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠IL-13,IL-23及COX-2,CREB的表达,减少结肠的炎症反应。     

祛异康对子宫内膜异位症大鼠腹腔液IL-2、IL-6的影响

目的:观察中药祛异康对子宫内膜异位症大鼠腹腔液IL-2、IL-6的影响,探讨其治疗子宫内膜异位症的机理。方法:将40只健康雌性SD大鼠随机分为4组:A组只行开关腹,B、C、D组均行内膜移植,造模完成后,A、B组以生理盐水灌胃,C、D组分别给予中药祛异康、西药丹那唑灌胃,4周后开腹收集腹腔液测定IL-2I、L-6表达水平。结果:祛异康可以降低异位症大鼠腹腔液中IL-2及IL-6浓度(P<0.05;P<0.01)。结论:祛异康能明显改善腹腔微环境,其治疗子宫内膜异位症的作用机理可能是通过改变腹腔液微环境,降低细胞因子IL-2、IL-6的水平,从而抑制异位内膜生长来实现的。     

家兔前肢“商阳”“二间”“三间”“合谷”“曲池”穴巨显微解剖结构

目的:研究家兔前肢阳明经"商阳"二间"三间"合谷"曲池"穴区的层次结构。方法:先对各穴进行体表定位标识,然后针刺各穴,用多用电子穴位测定治疗仪协助探穴,以确定上述各穴定位准确性。空气栓塞处死家兔,打开胸腔后从锁骨下动脉注入不同浓度的ABS灌注液,使前肢血管全部染色清晰,在巨显微条件下逐一对腧穴进行层次解剖,观察并测量腧穴与周围组织结构的毗邻关系。结果:家兔前肢阳明经"商阳"二间"三间"合谷"曲池"穴浅层穴区以头静脉为主,桡神经浅支神经干和其分支为基础;深层穴区以桡动脉及分支、正中神经为基础。结论:"商阳"二间"三间"合谷"曲池"穴和头静脉,桡动、静脉及分支,桡神经浅支及正中神经有密切的关系,这是上述5个腧穴穴区的形态学基础。     

瘰疬宁与细胞因子IL-2及IL-2R

淋巴结结核,是人体感染结核杆菌引起的一种常见的肺外结核。人体免疫功能低下时,容易感染结核杆菌。细胞免疫力的强弱在结核病发生、发展与转归中起着关键性作用,特别是T细胞的数量与功能更为重要。IL-2由Th1细胞产生,能刺激抗原特异的T细胞增殖,是抗结核免疫中重要的细胞因子。瘰疬宁可使IL-2分泌增加,增强患者细胞免疫力。