急性呼吸道感染患儿巨细胞病毒感染的研究

巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)在人群中感染非常普遍 ,但大多数呈亚临床不显性感染或潜伏感染 ,在宿主特殊的状态下 ,这种潜伏感染可被激活为其重要的生物学特征[1,2 ] 。为研究小儿急性呼吸道ＨＣＭＶ感染 ,根据 1994年全国小儿巨细胞病毒感染学术会议上拟定的诊断标准[3 ,4 ] ,选用ＨＣＭＶ ＩｇＭ为ＨＣＭＶ活动感染指标 ,对 2 5 0例冬春季急性呼吸道感染 (ＡＲＩ)患儿和 5 0名同期健康儿童进行了ＨＣＭＶ ＩｇＭ、呼吸道合胞病毒ＩｇＭ(ＲＳＶ ＩｇＭ) ,腺病毒ＩｇＭ(ＡｄＶ ＩｇＭ)特异抗体同步检测和部分临床资料分析。1　材料和方法1.1　病…     

病毒性造血祖细胞损伤的实验研究进展

临床研究已表明许多病毒感染可引起骨髓造血功能衰竭,其作用机制尚不明。近年随着造血祖细胞体外培养体系的建立与完善,为研究病毒对造血祖细胞的影响提供了重要的实验室依据,本文概括介绍近年研究的新进展。一、人巨细胞病毒(ｈｕｍａｎｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＨＣＭＶ)ＨＣＭＶ是一种在人群中广泛存在的感染因子,在正常人群中ＨＣＭＶ感染可超过50%,是引起小儿各种畸形和病残的主要原因之一[1]。近年又发现ＨＣＭＶ感染还可导致患儿严重的造血功能紊乱,主要表现为:异常淋巴细胞增多、肝脾肿大、血小板减少、粒细胞减少及贫血等[2…     

HCMV抗原（pp65）血症检测技术诊断活动性HCMV感染

人类巨细胞病毒（ｈｕｍａｎｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ，ＨＣＭＶ）感染在人群中广泛存在，自从１９８８年ＨＣＭＶ抗原血症检测技术建立以来，该技术发展迅速，检测外周血ＰＭＮＬｓ中的ＨＣＭＶ晚期结构抗原ｐｐ６５是早期、快速、准确、定量诊断活动性ＨＣＭＶ感染的主要手段。本综述主要涉及ＨＣＭＶ抗原（ｐｐ６５）血症检测技术及其临床意义的研究近况。     

儿童巨细胞病毒感染的实验室诊断研究进展

人巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)感染是目前我国小儿中最最常见的感染性疾病。亦是引起小儿各种畸形和病残的主要病因之一[1] 。新生儿先天性感染率大约占出生婴儿的 0 .5 -0 .1% [2 ] 。婴儿期死亡率高达 12 % ,幸存者中 80 % - 90 %有后遗症 ,即使无症状的ＨＣＭＶ感染患儿 ,10 % - 15 %亦可发生后遗症[3] 。ＨＣＭＶ感染亦可在新生儿期及围产期间通过获得而建立 ,并可能引起肺炎或脓肿 ,出血性胃肠炎及生长发育障碍[2 ] 。因而 ,儿童ＨＣＭＶ感染是一个值得重视的问题。ＨＣＭＶ感染的临床诊断通常较为困难 ,故需借助快速和准确的实验室检测方法…     

器官移植术后外周血巨细胞病毒及其抗原和DNA的检测

目的　探讨及时诊断器官移植受者术后活动性巨细胞病毒（ 简称ＣＭＶ） 感染。方法　采集３２ 例器官移植受者术后８９ 份血标本,同时用酶免疫组织化学作抗原血症和病毒分离培养作病毒血症的检测。再以原位杂交（ＩＳＨ） 和聚合酶链反应（ＰＣＲ） 作ＤＮＡ 血症的检测。结果　８９ 份血标本中,抗原血症阳性３５ 份（３９－３％ ）,病毒血症阳性２５ 份（２８－１ ％） ,ＤＮＡ 血症的位杂交检测阳性３７ 份（４１－６ ％） 及ＤＮＡ血症ＰＣＲ 检测阳性５１ 份（５７－３％ ）。结论　ＤＮＡ血症原位杂交和ＰＣＲ 技术及抗原血症的检测方法,具有检测率高且时间早的优点,能作为临床快速检测ＣＭＶ的方法。本结果与移植受者的临床症状相关,可作为监视器官移植受者术后ＣＭＶ感染和指导抗病毒治疗的依据     

器官移植术后人类巨细胞病毒感染的诊断

外周血白细胞 (ＷＢＣ)中人类巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)抗原的出现称之为抗原血症 ,我们采用ＥｎｖｉｓｉｏｎＴＭ 免疫组化法检测外周血白细胞中ＨＣＭＶ抗原从而诊断ＨＣＭＶ感染 ,达到了早期、快速的目的 ,并指导临床合理治疗。研究对象为广州地区 12 2例器官移植术后受者 ,其中肾移植 86例 ,骨髓移植 2 0例 ,肝移植 12例 ,脐血造血干细胞移植 4例。移植术后 2周起 ,每周采血 1次 ,2ｍｌ 次。共采集抗凝外周全血 32 8份。实验用试剂ＨＣＭＶ即刻早期、早期单克隆抗体 (ＤＤＧ9+ＣＣＨ2株 ) ,免疫组化ＥｎｖｉｓｉｏｎＴＭ 试剂盒均购自丹麦…     

肾移植术后巨细胞病毒抗原检测及其临床意义

目的 建立一种早期、快速诊断人巨细胞病毒（ｈｕｍａｎ ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＨＣＭＶ）感染的抗原检测方法,以了解肾移植术后受者的ＨＣＭＶ感染情况并探讨其临床意义。方法 利用抗ＨＣＭＶ前早期抗原和早期抗原的单克隆抗体,建立了免疫组化Ｅｎｖｉｓｉｏｎ＾ＴＭ二步法。用于检测外周血多形核白细胞（ＰＭＮＬ）中ＨＣＭＶ抗原（前早期抗原和早期抗原）,诊断ＨＣＭＶ活动性感染。结果 检测肾移植术后受者８６     

确定HCMV抗药性实验方法研究进展

ＨＣＭＶ感染免疫妥协的机体，通常是无症状的，但在ＡＩＤＳ和骨髓，实质器官移植病人，是引起发病和死亡的主要原因之一，确定有毒力，对抗病毒药物产生抗性的ＨＣＭＶ株，对临床治疗ＨＣＭＶ感染引起的相关疾病很有必要，目前实验室用来确定ＨＣＭＶ抗药性敏感性实验方法有多种，且在不断改进和更新。本文对这些实验方法在临床上应用及其研究进展予以综述。     

幼儿园儿童巨细胞病毒分离毒株的限制性酶切图谱分析

人巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)感染在儿童时期尤为常见。由于绝大多数ＨＣＭＶ感染无明显临床表现 ,其病毒的排出常为间歇性和多位点性 ,用传统的流行病学方法难以调查人群中ＨＣＭＶ的传播情况。为探讨幼儿园儿童中该病的流行情况及传播机制 ,我们对青岛市 2所幼儿园的儿童及其保育员和父母的尿标本进行病毒分离 ,并对分离出的部分ＨＣＭＶ毒株进行限制性酶切图谱分析 ,现将结果报告如下 :材料与方法病毒分离 :采集青岛市 2所幼儿园部分儿童的尿标本 ,经抗生素处理接种人胚肺成纤维细胞分离和培养病毒。分离毒株的鉴定 :用免疫过氧化物酶法 (Ｉ…     

移植受者术后CMV感染的早期诊断

巨细胞病毒 (Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＣＭＶ)感染是移植受者术后常见的并发症之一 ,建立早期、敏感的巨细胞病毒检测方法 ,对减少移植受者术后巨细胞病毒感染的发生有重要意义。本文通过检测血清中巨细胞病毒抗体 (ＣＭＶ Ａｂ) ,巨细胞病毒抗原 (ＣＭＶ Ａｇ)及巨细胞病毒核酸(ＣＭＶ ＤＮＡ) ,研究移植受者术后巨细胞病毒感染状况 ,探讨早期诊断ＣＭＶ的方法及意义。研究对象为本院移植受者 ,共 96例 ,其中肝移植 2 2例 ,骨髓移植 1 5例 ,肾移植 59例 ;男性 77例 ,女性 1 9例 ,平均年龄 3 6 1± 1 3 5岁 ( 1 3～ 68岁 ) ,术后同…     

人巨细胞病毒感染致血小板减少性紫癜病因研究

血小板减少性紫癜 (ＩＴＰ)是临床上常见的一类出血性疾病 ,其中部分患者常发生于病毒感染后。目前发现人类巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)、人细小病毒Ｂ19、风疹病毒等感染后均有可能引起血小板减少。ＨＣＭＶ感染相关性ＩＴＰ的发病机理目前尚未完全定论。我们检测了合并有ＨＣＭＶ感染的ＩＴＰ患者的巨核系祖细胞内的ＨＣＭＶ晚期抗原ｍＲＮＡ ,以探讨ＨＣＭＶ感染相关性ＩＴＰ可能的发病机制。对ＩＴＰ患者抗凝外周血和非抗凝外周血分别进行ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ ＤＮＡ和ＥＬＩＳＡ检测ＣＭＶ ＩｇＭ。选择ＨＣＭＶ及ＣＭＶＩｇＭ均阳性的病例共…     

人巨细胞病毒协同人乳头瘤病毒16型诱导宫颈上皮细胞癌变的研究

目的 探讨宫颈癌的发生发展与人乳头头瘤病毒（ＨＰＶ）和人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）协同感染的关系。方法 应用我室建立的ＨＰＶ１６永化化的人宫颈上皮细胞系,转染ＨＣＭＶ即早基因（ＩＥ）。结果 ＨＣＭＶ整合在细胞染色体中,协同ＨＰＶ１６促进宫颈上皮细胞的恶性转化,在裸鼠中形成肿瘤。结论 ＨＣＭＶ ＩＥ基因可协同ＨＰＶ１６恶性转化宫颈上皮细胞,并对其协同机制进行了细胞和分子生物学的探讨。     

人巨细胞病毒基质蛋白PP150是CTL识别的提呈抗原之一

用痘苗病毒载体ＰＳＣ１１构建编码人巨细胞病毒（ＣＭＶ）基质蛋白ＰＰ１５０的重组痘苗病毒，刺激５例血清ＣＭＶ阳性供体全部诱导出ＰＰ１５０特异性细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）反应。ＰＰ１５０特异性ＣＴＬ不仅能溶解Ｖａｃ．ＰＰ１５０感染细胞，也溶解ＣＭＶ感染细胞。在病毒感染早期（２小时）和用ＲＮＡ合成抑制剂ＡｃｔＤ阻止感染细胞病毒基因转录的条件下，ＰＰ１５０特异性ＣＴＬ能同样有效地溶解ＣＭＶ感染细胞。提示随病毒颗粒渗入的ＰＰ１５０在ＣＭＶＤＮＡ复制前即能有效地被提呈。上述结果表明，ＰＰ１５０是ＣＴＬ识别的抗原之一。     

人巨细胞病毒感染诱导宿主细胞凋亡的实验研究

人巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)活动性感染可以通过胎盘垂直传播 ,导致流产、畸形、死胎、新生儿神经系统及其他脏器的损害 ,已成为影响胎儿及新生儿生长发育的常见病原。现已证实 ,许多病毒性疾病 (如病毒性肝炎和艾滋病等 )的发生与凋亡失常有关〔1〕 。但目前有关ＨＣＭＶ与细胞凋亡的关系报道尚少。我们采用流式细胞技术对ＨＣＭＶ感染细胞进行细胞周期和凋亡分析 ,以探讨ＨＣＭＶ对宿主细胞的影响及机理。1　材料和方法1 1　病毒和细胞　ＨＣＭＶＡＤ16 9毒株由湖北省病毒研究所提供 ,按常规方法传代 ,滴定 ,其滴度为 10 3 ＴＣＩＤ5 0 0 .1…     

双重PCR技术同时检测母婴乳头瘤病毒和巨细胞病毒方法的建立

建立双重ＰＣＲ技术同时检测人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）和巨细胞病毒（ＨＣＭＶ），并将该方法应用于临床１７３例产妇和新生儿感染的检测，总阳性率达２０．２３％，结果证明该双重ＰＣＲ技术检测方法确实有效可行。     

肝炎患者外周血单个核细胞IL-18 mRNA和蛋白水平与HBV感染的关系

检测了慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(ＰＢＭＣ )ＩＬ 18基因及蛋白表达水平 ,以探讨ＩＬ 18在乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ )感染中的作用。1　材料与方法1 1　病例　慢性乙型肝炎 30例 ,排除合并感染其他病毒性肝炎 ,近 6月无应用影响免疫功能的药物。所有病例均检测血清ＨＢＶＤＮＡ水平 (斑点杂交法 )。1 2　方法　分别以逆转录 聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ )技术 ,流式细胞术检测ＩＬ 18基因的转录及表达水平。方法见文献[1]。ＰＢＭＣ内ＨＢＶＤＮＡ检测 ,抽提细胞内ＤＮＡ后采用ＰＣＲ法扩增。所得实验结果采用ＳＰＳＳ 8 0软件进…     

HCMV体外感染兔胚细胞敏感性研究

ＨＣＭＶ体外感染兔胚细胞敏感性研究孟红刘菊华李焱孙广莲石永玉吴惠联郭进林人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）具有严格专一宿主特性，研究ＨＣＭＶ动物宿主是近年令人关注的课题。本研究观察了ＨＣＭＶＡＤ１６９株接种于胎兔成纤维细胞增殖的情况。将ＨＣＭＶＡＤ１６９（引自...     

人巨细胞病毒感染诱导宿主细胞凋亡的实验研究

人巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)活动性感染可以通过胎盘垂直传播 ,导致流产、畸形、死胎、新生儿神经系统及其他脏器的损害 ,已成为影响胎儿及新生儿生长发育的常见病原。现已证实 ,许多病毒性疾病的发生与凋亡失常有关〔1〕。我们采用流式细胞技术对ＨＣＭＶ感染细胞进行细胞周期和凋亡分析 ,以探讨ＨＣＭＶ对宿主细胞的影响及机理。1　材料和方法1 1　病毒和细胞　ＨＣＭＶＡＤ16 9毒株由湖北省病毒研究所提供 ,按常规方法传代 ,滴定 ,其滴度为 10 3ＴＣＩＤ5 0 0 .1ｍｌ;人胚肺成纤维细胞 (ＨＥＬ)由同济医科大学附属同济医院儿科病毒室提供 ,…     

几种细胞因子对HSV-1感染单核巨噬细胞的影响

以ＨＳＶ－１接种Ｕ９３７和小鼠腹腔巨噬细胞，并在接种前后分别以不同的细胞因子处理细胞，借助病滴定、免疫荧光抗体试验检测病毒抗原，用ＰＣＲ检测病毒基因，研究了细胞因子对ＨＳＶ－１感染单核巨噬细胞的影响。结果报告如下。Ｍ－ＣＳＦ对ＨＳＶ－１感染Ｕ９３７细胞具有抑制作用。病毒接种前或后三天以２００Ｕ／ｍｌＭ－ＣＳＦ持续处理Ｕ９３７细胞，接种ＨＳＶ－１后病毒滴度的下降、病毒抗原及基因组ＤＮＡ的消失较末处理组迅速，Ｍ－ＣＳＦ还能拮抗ＬＰＳ对病毒增殖的促进作用。ＩＦＮ－α中和单抗与Ｍ－ＣＳＦ同时持续处理Ｕ９…     

PCR检测HCMV与HLA的相关性研究

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法和微量淋巴细胞毒的ＨＩＮ法分别进行了１５７例骨髓移植供受体的人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）和ＨＬＡ－Ａ，Ｂ位点抗原特异性进行了检测，探讨了ＨＣＭＶ感染和ＨＬＡ之间的相关关系，结果显示，在１５７例被测对象中，８５例ＨＣＭＶ感染阳性，７２例阴性，分别统计ＨＣＭＶ阳性组和阴性组的ＨＬＡ－Ａ，Ｂ位点抗原频率，发现ＨＬＡ－Ｂ５在ＨＣＭＶ阳性组中频率较高，而在阴性组中抗原频率较市制是是Ｈ