阻断Rho/ROCK信号传导通路治疗大鼠脊髓损伤的实验研究

目的 观察阻断Rho/ROCK信号传导通路对大鼠脊髓损伤的治疗作用.方法 大鼠脊髓损伤动物模型随机分为3组,每组40只:1)假手术组:大鼠只行椎板切除术,不进行脊髓横断;2)对照组:大鼠脊髓横断损伤,腹腔注射生理盐水;3)Fasudil组:大鼠脊髓横断损伤,腹腔注射Fasudil.于不同时间点用RT-PCR检测RhoA mRNA水平、HE染色组织病理学观察及NF免疫荧光染色评价.结果 与对照组相比,脊髓损伤腹腔注射Fasudil组,BBB评分显著升高,RhoA mRNA水平显著降低,可见大量NF阳性纤维,部分纤维穿过脊髓横断部位,向尾端延伸.结论 阻断Rho/ROCK信号传导通路能较好地促进轴突再生及损伤脊髓运动和传导功能的恢复.     

辛伐他汀对老年去卵巢大鼠骨量丢失的治疗作用

目的观察辛伐他汀对老年去卵巢大鼠骨量丢失的治疗作用。方法10月龄SD大鼠行双侧卵巢切除术,术后2个月开始用药物治疗,用药2个月后用骨组织形态计量学方法测定大鼠第四腰椎松质骨静态、动态参数,大鼠第五腰椎体应用骨生物力学方法作椎体压缩试验。结果辛伐他汀使去卵巢大鼠骨小梁面积(%Tb.Ar)增加不明显,与去卵巢组相比,差异无统计学意义;但辛伐他汀可改善去卵巢大鼠椎骨的生物力学状况,表现在能使去卵巢大鼠的破坏载荷和破坏应力增加。结论辛伐他汀对老年去卵巢大鼠椎骨的生物力学状况有改善作用。     

GM-1预防大鼠急性脊髓损伤的研究

目的：探讨单唾液酸神经节苷脂（GM-1）对大鼠急性脊髓损伤的预防作用。方法：随机将126只大鼠分为3组，每组42只。A组（正常组）：行椎板切除术但不损伤脊髓；B组（对照组）：行椎板切除术，同时予脊髓损伤打击；C组（GM-1组）：术前应用GM-1，行椎板切除术，同时予脊髓损伤打击。脊髓损伤采用改良Allen’s打击法。术后24h、48h和72h采用胥少汀6级行为学评分及Rivlin斜板试验进行神经功能评价；1h和72h对大鼠脊髓损伤后运动诱发电位（MEP）潜伏期和波幅进行分析；8h、24h、48h和72h对损伤部位脊髓通过光镜和电镜进行病理学观察。结果：GM-1组与对照组相比，行为学评分障碍率及斜板障碍率较对照组低。神经功能评分提高；术后MEP潜伏期较对照组短，波幅下降较对照组小，MEP得到改善；光镜、电镜下见脊髓损伤轻。结论：预防性应用GM-1可能对减轻脊髓损伤有一定的作用。     

酪氨酸、米非司酮和睾酮对大鼠颗粒细胞凋亡的影响

大多数哺乳类动物的卵巢卵泡在排卵前闭锁，研究表明其发生机制是细胞凋亡。本实验观察了卵巢调控因子酪氨酸、米非司酮和睾酮对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。结果：米非司酮和睾酮促进凋亡，造成ＤＮＡ的片段化反应；而酪氨酸的作用则相反。与对照组相比，米非司酮和睾酮组血清雌二醇含量下降而孕酮含量升高；酪氨酸组血清雌二醇水平升高而孕酮水平下降。米非司酮和睾酮增加闭锁卵泡数，酪氨酸作用则相反。     

2型糖尿病性骨质疏松大鼠ADSCs成骨能力的研究

目的探讨2型糖尿病性骨质疏松(DOP)大鼠自身脂肪干细胞(ADSCs)的体外成骨分化能力。方法将60只SD大鼠分为对照组、骨质疏松组(OP组)及2型糖尿病性骨质疏松组(DOP组),每组20只。DOP组大鼠喂食高脂高糖饲料后于左下腹部经腹腔注射STZ先建立2型糖尿病大鼠模型,再行卵巢切除术建立2型糖尿病性骨质疏松模型;OP组大鼠行卵巢切除术建立骨质疏松大鼠模型,对照组仅切除卵巢周围脂肪。对照组随机选取10只大鼠,DOP组及OP组从建模成功的大鼠中各随机选取10只作研究。从各研究大鼠腹股沟区脂肪组织中分离脂肪干细胞,培养并传代,取第3代细胞作成骨结节染色及定量分析,PCR检测成骨基因RUNX2、OCN、OPN、ALP mRNA的表达。结果造模后DOP组大鼠BMD明显低于对照组及OP组(P0.05);三组大鼠ADSCs细胞形态学及增殖情况无显著性差异;显微镜下观察见DOP组与OP组ADSCs的钙化结节量较对照组少,DOP组钙化结节最少,并且缺少大片状结节,染色较浅;成骨定量分析结果可得DOP组ADSCs的OD值低于对照组及OP组,差异有统计学意义(P0.05);RT-PCR检测成骨基因的表达,DOP组与OP组RUNX2、OCN、OPN、ALP mRNA的表达量均低于对照组(P均0.05),DOP组与OP组相比较,DOP组RUNX2与ALPmRNA的表达量明显低于OP组(P0.05),而OCN与OPNmRNA的表达量两组无明显差异(P0.05)。结论 DOP大鼠ADSCs成骨分化能力较弱,弱于单纯骨质疏松大鼠,原因可能与高血糖状态下其ADSCs中ALP和RUNX2的表达减少有关。     

睾酮治疗对右心衰竭雄性大鼠心功能影响的研究

目的:临床实践及动物模型中发现雄性心力衰竭个体的性激素水平降低,尤其血浆睾酮水平降低。本研究拟在构建右心衰竭大鼠模型的基础上,采用睾酮生理补充疗法改善心功能,并探讨雄激素心脏保护作用的可能机制。方法:43只SD健康雄鼠随机分为3组:右心衰组(RHF,n=15):野百合碱一次性腹腔注射6周构建右心衰竭大鼠模型;睾酮治疗组(TT,n=15):大鼠野百合碱注射后第3天开始睾酮生理性补充;对照组(CON,n=13):同期等量生理盐水替代,其余处理同前。每2周各组大鼠取外周血,分别化学发光法、酶联免疫吸附法测外周血浆睾酮、TNF-α水平,流式细胞术检测外周血CD34+细胞含量。于第6周各组存活大鼠行右心系统血流动力学测定,取心脏、肺脏、肝脏组织行常规病理及免疫组化检测。结果:RHF组各项指标显示大鼠右心衰竭模型造模成功,且血浆睾酮水平逐渐下降、TNF-α水平增加明显;TT组大鼠睾酮生理性补充治疗后心功能改善明显,但不能完全逆转,血浆睾酮水平较RHF组大鼠有所恢复,TNF-α减少有显著性差异;TT组大鼠、RHF组大鼠外周血CD34+细胞含量、免疫组化示右心室心肌细胞CD34+表达无明显差异。结论:睾酮生理补充能够改善右心衰竭雄性大鼠的心功能,可能通过抑制炎症因子TNF-α等的释放,而非通过自体动员骨髓干细胞的途径起作用。睾酮生理补充可以作为右心衰竭治疗的新辅助手段之一。     

甲强龙对大鼠急性脊髓损伤后OMgp表达的影响

目的探讨甲强龙对急性脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓组织中少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(OMgp)表达的影响。方法将80只SD大鼠分为A组(单纯椎板切除对照组)、B组(急性脊髓损伤组)和C组(急性脊髓损伤后甲强龙治疗组),C组在损伤后早期从尾静脉注射甲强龙治疗。对各组大鼠后肢运动功能行BBB评分评价神经功能状况;分别在术后1、3、7、14 d处死各组大鼠,分别取受损节段脊髓行免疫组化染色;应用实时荧光定量PCR技术(RealTime-PCR)方法观察OMgp mRNA的表达。结果 B、C组大鼠在损伤后各个时间点后肢运动功能均有一定程度的恢复;B、C组各个时间点OMgp mRNA表达均显著高于A组(P<0.05),7 d时最高;C组在各个时间点的表达量显著低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠急性脊髓损伤后OMgp显著升高,早期应甲强龙对OMgp的表达具有明显的抑制作用。     

原花青素对大鼠急性脊髓损伤的保护作用及机制研究

[目的]探讨原花青素对大鼠急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的保护作用.[方法]SD大鼠随机分为假手术组(A组)、脊髓打击损伤组(B组)、原花青素治疗组(C组).A组行T8椎板切除术,不伤及脊髓.B、C组采用改良Allens撞击法制备大鼠T8急性SCI模型.C组术后立即腹腔注射原花青素100 mg/kg,A、B组术后立即腹腔注射等量的生理盐水.分别于术后不同时间点评价大鼠后肢运动功能,检测脊髓匀浆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量改变,观察脊髓组织病理学变化.[结果]术后A组大鼠后肢运动功能恢复.术后C组大鼠后肢运动功能较B组均有所改善,72 h后肢运动功能恢复更为显著(P＜0.01).术后48 hB组脊髓组织SOD活性较A组明显降低(P＜0.01),而MDA含量较A组明显增加(P＜0.01);应用GSPE后,术后48hC组脊髓组织SOD活性较B组明显升高(P＜0.01),脊髓组织MDA水平较B明显降低(P＜0.01);SCI后脊髓组织TNF-α含量、MPO活性均随时间推移逐渐增高;各时间点C组脊髓TNF-α含量、MPO活性较B组均有统计学意义(P＜0.01);A组大鼠各检测点脊髓组织形态结构均正常;B、C两组72 h切片变化最为显著;B组可见神经组织多灶性出血、大量神经元坏死、尼氏体溶解消失、核固缩变小及炎性细胞浸润;C组可见局部出血点、细胞轻度肿胀,胞质均匀及少量炎性细胞浸润.[结论] GSPE可明显改善大鼠运动功能,抑制氧化应激、炎症反应和细胞凋亡等,对SCI有神经保护作用.     

芦丁对去卵巢骨质疏松症大鼠的防治作用

目的探讨芦丁在去卵巢骨质疏松大鼠中发挥的抗骨质疏松作用,找到治疗绝经后骨质疏松症的新思路。方法取40只大鼠,10只行剖腹手术未摘除卵巢为假手术组,30只行去卵巢手术。去卵巢手术大鼠随机分成3组:OVX组(用生理盐水灌胃)、R5低剂量组[喂食芦丁剂量5 mg (kg·d)]、R10高剂量组[喂食芦丁剂量10 mg (kg·d)],每日灌胃一次,观察3个月。观察芦丁干预前后大鼠体重和子宫指数的变化,利用双能X线骨密度仪测定大鼠右侧股骨的骨密度(bone mineral density, BMD)。经HE染色分析左侧胫骨组织形态学。用ELISA方法检测IL-6,IFN-γ、TNF-α的含量,观察芦丁对炎性指标的影响。同时监测干预后的去卵巢大鼠体内E2、1,25(OH)2D3_、OCN水平变化。结果芦丁对去卵巢大鼠体重无显著影响,但干预组子宫指数显著升高,且提高了去卵巢大鼠的BMD,降低了OVX大鼠的炎症因子IL-6、TNF-α、INF-γ水平。芦丁干预后E2和1,25(OH)2D3水平显著升高,并且通过剂量依赖性逆转了大鼠的血清OCN水平,使骨小梁变厚。此外,芦丁显著改善了去卵巢大鼠骨小梁的平均厚度及平均骨体积分数。结论芦丁具有明显抗骨质疏松的活性,是一种理想的治疗骨质疏松症的备选药物。     

甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤后Nogo-A表达的影响

目的：探讨大剂量甲基强的松龙（MP）对急性脊髓损伤（SCI）大鼠脊髓组织中Nogo-A蛋白表达的影响。方法：将56只成年SD大鼠分为正常对照组（A组,n=8）、急性脊髓损伤组（B组,n=24）和急性脊髓损伤后大剂量MP治疗组（C组,n=24）,C组在损伤后早期从尾静脉注射大剂量MP治疗。分别在术后3、7、14d对B、C组大鼠后肢运动功能行BBB评分,再在各时间点处死动物,取受损节段脊髓行HE染色及免疫组化染色观察形态学变化和Nogo-A在脊髓组织中的分布特点;同时应用Western-blot方法测定各组相应时间点Nogo-A表达量,并与A组比较。结果：B、C组大鼠在损伤后各个时间点后肢运动功能均有一定程度的恢复,Nogo-A蛋白在各组大鼠脊髓组织中均呈阳性表达,分布于神经细胞的细胞浆和脊髓神经纤维周围呈包裹神经纤维的状态。B、C组各个时间点Nogo-A表达均显著高于A组（P〈0.05）,7d时最高,14d时的表达量仍高于正常组;C组在各个时间点的表达量显著低于B组,差异有显著性（P〈0.05）。结论：大鼠急性脊髓损伤后Nogo-A显著升高,早期应用大剂量MP对Nogo-A的表达具有明显的抑制作用。     

大鼠急性脊髓损伤时IκBα的表达及其意义

目的 研究大鼠急性脊髓损伤时抑制蛋白α(IkBa)表达变化规律。方法 将60只SD大鼠随机分为两组：损伤组48只大鼠，行脊柱椎板切除及脊髓打击术。对照组12只大鼠，仅行椎板切除术。应用免疫组织化学及Western blot分别测定脊髓细胞浆内IkBα的表达变化情况。免疫组织化学以细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性结果，Western blot以醋酸纤维素膜上出现棕色条带为阳性结果。结果 在损伤后1h，IkBα表达开始下降，12h降到最低点，损伤后24h表达开始回升，5d逐步恢复正常。结论 IkBα活性变化可作为急性创伤性脊髓损伤时炎症反应程度的一项观测指标，通过抑制IkBα磷酸化降解环节，成为抑制炎症反应的新途径。     

改良大鼠脊髓损伤模型椎管开窗方法的应用研究

目的 探讨新型改良大鼠脊髓损伤模型椎管开窗方法的实用性。 方法 将40只普通级成年SD大鼠按照随机数字表法分为2组：传统组（20只,采用传统蚕食法椎管开窗进行造模）、改良组（20只,采用椎板揭盖开窗法进行造模）,比较2组切口长度、手术时间、术中出血量及术后死亡率,并于术后不同时间点评价2组大鼠运动功能（basso beattie bresnahan,BBB）评分及HE染色结果判定脊髓功能障碍及造模成功与否。 结果 切口长度、手术时间、出血量及术后28 d死亡率的比较,改良组明显优于传统组,差异具有统计学意义（P<0.05）。2组大鼠术后BBB评分及HE染色结果提示以椎板揭盖开窗法制备大鼠脊髓损伤模型成功率与传统方法比较,差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 改良大鼠脊髓损伤模型椎板开窗相较传统椎管开窗方法有明显的优势,可广泛运用于脊髓损伤基础研究的模型制作。     

Baclofen对慢性神经痛大鼠镇痛效果的影响

目的　研究GABAB 受体激动剂baclofen对慢性神经痛大鼠痛阈的影响以及对脊髓c fos表达的影响 ,探讨脊髓GABA能系统在神经痛调节中的可能机制。方法　结扎大鼠左侧L5脊神经根建立慢性神经痛模型。SD大鼠 2 4只随机等分成 (1)假手术 +baclofen组 :大鼠背部假手术而未行神经根结扎 ,术后 2 8至 34d每天腹腔注射baclofen 10mg/kg两次 ;(2 )假手术组 :背部假手术后2 8至 34d每天腹腔注射 0 9%NaCl 2ml两次 ;(3)L5结扎 +baclofen组 :实施L5神经根结扎 ,术后2 8至 34d每天腹腔注射baclofen 10mg/kg两次 ;(4)L5结扎组 :实施L5神经根结扎 ,术后 2 8至 34d每天腹腔注射 0 9%NaCl 2ml两次。术后 1、3、7、10、14、2 1、2 8、35d测大鼠双后肢光热刺激性痛阈。术后 35d处死大鼠取出腰段脊髓 ,冰冻切片 ,免疫组化法检测c fos免疫阳性细胞。结果　 (1)术后 7～ 2 8d ,左L5脊神经结扎大鼠较假手术大鼠痛阈明显降低 (P <0 0 1)。术后 35d ,使用与不使用baclofen大鼠的假手术大鼠左后肢痛阈无显著变化 (P >0 0 5 ) ,双侧脊髓深层 (Ⅲ Ⅹ层 )FLI细胞无显著差异 (P >0 0 5 ) ;(2 )术后 35d ,使用baclofen的L5结扎大鼠的左后肢痛觉显著低于未使用baclofen的L5结扎大鼠 (P <0 0 1) ,前者脊髓深层 (Ⅲ Ⅹ层 )FLI细胞显著     

大剂量甲基强的松龙对大鼠急性脊髓半切损伤的早期神经保护作用

目的研究大剂量甲基强的松龙（methylprednisolone,MP）对大鼠急性脊髓半切损伤的早期神经保护作用。方法 50只SD大鼠随机取10只仅行椎板切除,作为对照组。其余40只随机分为2组,脊髓半切损伤组及MP治疗组各20只。各组动物再随机平分为2个小组,分别在脊髓半切损伤后1d、7d进行BBB法神经功能评分、脊髓组织形态学观察、神经中丝（neurofilament NF）和胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）免疫组化测定。结果脊髓半切损伤后立即使用大剂量MP明显提高了伤后7d时MP治疗组的BBB评分;对损伤脊髓的组织形态学有明显改善;明显提高了NF的表达,抑制了GFAP的表达。结论早期大剂量使用MP对大鼠急性脊髓半切损伤有神经保护作用。     

大鼠脊髓损伤后骨形态发生蛋白2表达变化的规律及意义

目的:观察大鼠脊髓损伤后损伤脊髓组织中骨形态发生蛋白2(BMP2)表达变化的时间及空间分布规律,探讨抑制BMP2增加的最佳时间及部位。方法:成年SD大鼠40只,随机分为5组:假手术组,损伤后1d组、3d组、7d组、14d组,每组8只。将大鼠麻醉后以T10棘突为中心,打开椎板,暴露脊髓,各损伤组使用NYU impactor打击器制作大鼠脊髓损伤模型,假手术组不做打击处理。分别于造模前后对各组大鼠进行运动功能BBB评分,于预定时间点处死动物,取损伤段(假手术组取相应节段)脊髓组织行HE染色和免疫组化染色,观察脊髓组织学改变并进行阳性细胞计数,采用方差分析进行组间比较。结果:造模前各组大鼠的BBB评分均为21分;造模后假手术组大鼠BBB评分高于各损伤组,且差异有显著性(P<0.01),各损伤组之间两两比较评分均无显著性差异(P>0.05)。HE染色假手术组大鼠脊髓组织结构清晰,层次规整,条理性强,灰质中可见较多的神经元,白质中可见大量纤维性星形胶质细胞;损伤组大鼠损伤处脊髓组织结构紊乱,层次感消失,可见弥散的血细胞,早期增多较晚期明显,脊髓灰质与白质中都可见因大量组织细胞溶解而遗留的组织空洞。各组脊髓灰、白质中均有BMP2表达,假手术组灰质中平均阳性细胞数为1.53±0.38个/HP,白质中为0.77±0.14个/HP;损伤后1d组灰质中为13.70±4.81个/HP,白质中为7.23±3.14个/HP;损伤后3d组灰质中为9.37±3.61个/HP,白质中为5.63±2.23个/HP;损伤后7d组灰质中为6.17±1.81个/HP,白质中为4.17±1.24个/HP;损伤后14d组灰质中为4.36±1.60个/HP,白质中为1.87±1.13个/HP;损伤各组BMP2平均阳性细胞数与假手术组相比较均有明显差异(P<0.01),各组灰质区BMP2平均阳性细胞数的增加均较白质区更为显著(P<0.01)。结论:脊髓损伤后损伤脊髓组织中BMP2的表达增加,损伤后1d最高,主要集中在损伤区灰质区。针对BMP2进行特异性抑制最好在损伤后第一天的脊髓灰质区实施。     

低剂量雌激素与中药联合用药有效防治大鼠去卵巢所致骨质丢失

目的　探讨低剂量雌激素与中药复方壮骨肾宝 (ZGSB)联合用药防治大鼠去卵巢所致的骨质疏松。方法　 4月龄SD大鼠行双侧卵巢切除术 ,建立骨质疏松动物模型。对照组行假手术。每组 8只 ,共分 6组 ,假手术组 (Sham)和去卵巢组 (OVX)均用蒸馏水 (溶剂对照 )灌胃 ,其余分别为 :OVX +1 7α 炔雌醇 1 0 0 μg·kg 1 ·d 1 (高剂量雌激素组 ) ;OVX +1 7α 炔雌醇 30 μg·kg 1 ·d 1 (低剂量雌激素组 ) ;OVX +壮骨肾宝 1 0 0mg·kg 1 ·d 1 ;(壮骨肾宝组 )和OVX +1 7α 炔雌醇 30 μg·kg 1 ·d 1 +壮骨肾宝 1 0 0mg·kg 1 ·d 1 (联合用药组 ) ,灌胃给药。所有动物给药时间为 1 0周 ,实验结束前 ,行体内双荧光标记 ,实验结束后 ,取胫骨近端松质骨不脱钙硬组织包埋 ,用骨组织形态计量学对骨的静态参数和动态参数进行图像分析及统计。结果　去卵巢后大鼠体重增加 ,子宫重量减轻 ,骨量减少 ,呈现高转换型的骨质疏松表现。雌激素高、低两组均可对抗去卵巢后出现的骨质疏松 ,但低剂量组作用较弱 ,两组均有刺激子宫作用。壮骨肾宝能部分增加去卵巢后大鼠的骨量 ,以促进骨合成为主 ,对破骨细胞的抑制作用较弱。低剂量雌激素与壮骨肾宝联合用药预防去卵巢大鼠骨质疏松的作用较佳 ,比单用雌激素或单用中药的效果明显 ,骨     

双侧卵巢摘除对雌性大鼠阴道血流的影响研究

目的 观察雌性大鼠双侧卵巢摘除后,不同时间阴道血流动力学的变化和性激素变化情况,探讨双侧卵巢摘除大鼠作为女性性唤起功能障碍动物模型的可行性.方法 25只健康成年雌性wistar大鼠(200～250g)分为5组(5只/组),以假手术组作为正常对照组(A组),其余各组大鼠均行双侧卵巢摘除术,根据术后不同时间段即3、7、14、28d设为B、C、D、E组,分别于术后3、7、14、28d行盆神经阴道支电流刺激,了解阴道壁血流变化情况,并检测卵巢摘除后不同时间各组大鼠血液雌二醇和睾酮水平.结果 与假手术组比较,卵巢摘除7d后,大鼠阴道血流峰值和曲线下面积明显下降(P＜0.01),卵巢摘除28d后下降最明显(P≤0.001);卵巢摘除后C、D、E组血清雌二醇水平较A组明显低下(P＜0.01);各组雌性大鼠血清睾酮之间无明显差异(P＞0.05).结论 雌性大鼠双侧卵巢摘除后阴道壁血流减低,可作为女性性唤起功能障碍阴道充血功能障碍研究的动物模型,可能与雌二醇水平降低有关,有待于进一步研究.     

骨癌痛大鼠脊髓脑啡肽表达的变化

目的观察脊髓脑啡肽在大鼠骨癌痛中的表达变化。方法雌性未交配Wistar大鼠72只,体重160～180g,随机均分为两组:骨癌痛组（B组）和空白对照组（C组）。B组制成骨癌痛模型,C组为假手术组,B组和C组分别在左胫骨中上端注射Walker256乳腺癌细胞2×10⁵个或PBS液,体积为10μl。所有大鼠于术前1d、术后7、14、21d时测定机械痛阈和左后肢抬足时间。大鼠行影像学检测判定其胫骨骨质破坏情况。两组于术后7、14、21d各取12只大鼠分别处死,取左侧胫骨作HE染色,组织学鉴定肿瘤生长及骨质破坏的程度;取腰膨大L₄～L₆脊髓组织,采用逆转录-定量聚合酶链反应（RT-PCR）测定前脑啡肽原（PENK）mRNA表达情况和放射免疫法（ELISA）检测脊髓组织中亮氨酸脑啡肽（L-EK）的含量变化。结果与C组比较,B组术后7、14、21d机械痛阈进行性下降（P<0.01）,左后肢抬足时间进行性延长（P<0.01）。与C组比较,B组术后7d脊髓PENK mRNA和L-EK增加,14、21d脊髓PENK mRNA和L-EK逐渐减少（P<0.01）。结论脊髓脑啡肽的表达在大鼠骨癌痛中明显变化,推测脊髓脑啡肽在骨癌痛产生和维持中起重要作用。     

大鼠卵巢体外低温机械灌注模型的建立

目的建立大鼠卵巢体外低温机械灌注(HMP)模型，并验证其有效性。 方法26只雌性8～10周龄SD大鼠，供体组、受体组、正常对照组和卵巢摘除组各6只，另有2只大鼠HMP结束后留取卵巢标本以备检测。供体组和取材大鼠获取卵巢和肾脏后置于0～4 ℃林格氏液中保存2 h，再行HMP 2 h。供体组大鼠卵巢组织HMP结束后移植至受体组大鼠左肾包膜下，移植7 d后检测血清抗苗勒管激素(AMH)水平，同时获取移植卵巢进行组织病理检查以及Ki67和CD31免疫组织化学染色。采用单因素方差分析比较正常对照组、卵巢摘除组和受体组大鼠血清AMH水平，采用t检验比较正常对照组和受体组卵泡计数以及Ki67和CD31阳性细胞面积百分比。P<0.05为差异有统计学意义。 结果HMP后的卵巢组织血管未见明显扩张，受体组大鼠移植7 d后的卵巢组织卵泡结构完整，成熟卵泡数为(7.0±0.6)个，低于正常对照组(26.3±3.4)个，差异有统计学意义(t＝5.633，P<0.05)。受体组血清AMH为(4.63±0.87)ng/mL，高于卵巢摘除组(2.55±0.16)ng/mL，低于正常对照组(7.39±1.04)ng/mL，但差异均无统计学意义(P均>0.05)。移植7 d后受体组大鼠卵巢组织Ki67和CD31阳性细胞面积百分比分别为(29.0±2.4)%和(12.3±1.0)%，正常对照组分别为(21.9±3.8)%和(12.6±1.2)%，差异均无统计学意义(t＝1.634和0.178，P均>0.05)。 结论本研究构建的大鼠卵巢体外HMP模型，方法简单，可短时间维持卵巢的正常功能，为卵巢器官保存提供了一个新的方式。     

壮骨强肌方对去势大鼠骨骼肌形态和功能的影响

目的 探讨壮骨强肌方对去卵巢模型大鼠的骨骼肌形态及功能的影响。方法 32只3月龄雌性SD大鼠常规饲养3个月后,随机分为假手术组8只和模型组24只,假手术组切除卵巢周围部分脂肪组织,模型组则切除双侧卵巢;术后喂养12周后,模型组再等分为3组,包括模型对照组、壮骨强肌方组和阿仑膦酸钠组,每组再抽取2只大鼠验证去卵巢模型造模成功。最后按照等效剂量换算公式予以各组灌胃处理,连续干预12周。灌胃结束后,测定大鼠的四肢抓力;取腓肠肌和比目鱼肌称重并计算骨骼肌质量指数,行HE染色观察肌纤维形态结构、测量肌纤维横截面积。结果 假手术组、壮骨强肌方组和阿仑膦酸钠组大鼠的四肢抓力、腓肠肌指数、小腿三头肌指数均明显高于模型组(P<0.05);假手术组和壮骨强肌方组的腓肠肌肌纤维平均横截面积均明显高于模型组(P<0.05),而阿仑膦酸钠组相对于模型组则无统计学意义(P>0.05);假手术组、壮骨强肌方组和阿仑膦酸钠组3者之间的差异均无统计学意义(P>0.05),在HE染色镜下3组大鼠的骨骼肌纤维形态结构均好于模型对照组。结论 壮骨强肌方能够明显改善去卵巢模型大鼠骨骼肌的形态和功能。