端粒、端粒酶及其肿瘤治疗中的应用研究

<正> 自本世纪30年代首先发现染色体末端即端粒是维持染色体完整所必需的结构,80年代首先发现了维持端粒长度的端粒酶以来,于90年代建立了肿瘤的“端粒-端粒酶”假说,使对于端粒酶能否作为肿瘤的特异性标记用以诊断以及能否通过抑制端粒酶来治疗肿瘤的研究成为肿瘤诊治研究的新热点。1 端粒、端粒酶的结构及功能1.1 端粒 早在20世纪30年代Muller发现染色体末端存在一种维持染色体稳定和完整的特殊结构—端粒(Telomere),它能防止染色体DNA降解、末端融合、缺失和非常重组。于20世纪80年代相继辨明了多种物种的端粒结构—由5～8bp且富含G碱基核苷酸串联重复序列和端粒结构蛋白构成,人和其他脊椎动物的端粒DNA均为(TTAGGG)n。 在DNA复制过程中是从5′～3′方向进行,由引物起始的聚合反应,DNA复制结束RNA引物降解,而与模板DNA5′端结合的引物降解后不能被增补,因此,在复制过程中染色体3′端的序列也就不断丢失,这就是“末端复制问题”,正是由于“末端复制问题”的存在,使端粒序列进行性缩短,当缩短至一定长度,细胞周期检查点(Check point)发出周期停止信号,细     

端粒酶与消化系肿瘤相关性研究进展

端粒是真核细胞染色体末端的特殊结构 ,在稳定染色体及防止染色体在复制时缩短等方面具有重要作用。端粒酶是催化合成并维持端粒一定序列的一种核糖核蛋白。端粒酶与肿瘤的关系已成为近年来肿瘤分子生物学领域最热门的课题之一。现就端粒酶的结构和功能及其在消化系肿瘤中的研究现状作一踪述。1　端粒、端粒酶的结构和功能　　端粒是位于真核细胞染色体末端的一种富含鸟嘌呤的 DNA-蛋白复合体。人类染色体端粒由 5’TTAGGG3’序列片段重复构成 ;不同细胞端粒长度不一 ,平均约为 1 0 kb。端粒的主要作用是参与 DNA复制、染色体位移及维…     

胸腹腔积液细胞端粒酶活性的表达

端粒是真核细胞染色体末端的特殊结构 ,即染色体末端的 DNA重复序列 ,能防止染色体 DNA降解、末端融合、异常重组与染色体缺失 [1 ] 。端粒被称为细胞的“分裂钟”,与细胞衰老与癌变密切相关。端粒的 DNA合成必须依赖端粒酶(telomerase) ,该酶是一种核糖核酸蛋白酶 ,其模板区的一段序列 5’CU AACCCU AAC3’与端粒序列互补 [2 ] ,通过逆转录合成端粒。近年来 ,端粒与端粒酶已成为医学、生物学界的研究热点。许多学者认为 ,端粒酶的激活和端粒长度的稳定是肿瘤细胞永生化所必需 [3]。笔者 1998年 6月～ 1999年 3月采用端粒重复扩增 -…     

端粒酶临床研究进展

端粒酶是一个以自身RNA为模板,逆转录出一段DNA以补充染色体DNA在复制中由于末端RNA引物被水解后,其缺口不能被DNA聚合酶修复而丢失的端粒末端DNA的核蛋白.     

端粒酶:肿瘤标记物及治疗新靶点

2009年度诺贝尔生理学或医学奖授予Blackburn EH、Greider CW和Szostak JW,以表彰他们发现了端粒和端粒酶保护染色体的机制.端粒是染色体末端由DNA重复序列组成的一种特殊结构,具有维持染色体结构稳定性的功能,会随染色体复制与细胞分裂而缩短.端粒酶作用于端粒,依靠自身RNA模板合成端粒DNA维...     

乙型肝炎病毒基因变异与肝病

乙型肝炎病毒(HBV)属DNA病毒,由于该类病毒复制需要有RNA聚合酶及逆转录酶的参与,所以DNA病毒极易发生变异。现已知HBV的变异与乙型病毒性肝炎多种多样的临床表现有密切的关系。1 HBV DNA的结构 HBV基因为3.2Kb,由两条链组成,呈环状结构。两条链的长度不同,其中一条链约占圆周的15～50％;另一条几乎为圆周的总长,但其两端并不连在一起。5’未端结合有引物蛋白,在3’末端与5’未端间约有10个硷基重叠,形成所谓的短末端伸延结构。DNA的正链(短链)5’末端附近有11个硷基重复序列,亦即DRI(nt1824～1834)、DR2(nt1590～1600)目前认为与HB-VDNA复制,并使DNA整合到肝细胞染色体内有关。     

端粒酶系统与衰老、寿命关系的研究进展

端粒 ,端粒酶统称为端粒酶系统 ,近年来 ,国内外对该系统与寿命、衰老及疾病关系的研究报道较多 ,现综述如下。1　端粒与端粒酶的结构与功能1.1　端粒　真核生物的染色体末端 ,有一段特殊的“DNA -蛋白质复合物[1 ] ” ,命名为端粒 ,发现于 1938年[2 ] 。其实 ,端粒就是染色体的天然末端。端粒DNA是一小段富含G的简单重复序列 ,人和哺乳动物的端粒DNA由 [5 '-AATGGG- 3']n反复串联而成 ,总长度约为 2～ 15kb[3] 。端粒DNA不具有编码蛋白质的功能 ,重复序列的数目也不固定 ,遗传上高度保守。富含G的 5 '- 3'链指向染色体末端 ,比其对…     

端粒、端粒酶与血液系统肿瘤

端粒与端粒酶的结构和功能 1.1 端粒(Telomere)是真核细胞染色体末端的DNA-蛋白质复合物.人类端粒重复序列为5'-TTAGGG-3',长度在体细胞约5～15kb,精子细胞15kb,外周血细胞10kb,它能防止染色体DNA降解、末端融合和非正常重组及染色体缺失,使体细胞不能无限增殖.体细胞DNA每复制一次其末端DNA即可丢失50～200bp,这与精子细胞有所不同.端粒酶(Telomerase)是由RNA和蛋白质组成的特殊核糖核蛋白复合体,具有逆转录酶活性,能以自身RNA为模板(5'-CUAACCCUAAC-3')合成端粒.人端粒酶主要包括三部分,即人端粒酶RNA(hTR)、端粒酶相关蛋白(TP1/TP2)、人端粒酶催化亚单位(hTRT/hEST2).在正常人体细胞中端粒酶活性表达受抑,而在肿瘤形成时可被激活.因此,在某些永生细胞和肿瘤细胞中随着DNA的复制,其端粒酶不会缩短.     

端粒及端粒长度研究新进展

端粒位于真核细胞染色体末端，它由DNA重复序列和特定的端粒结合蛋白相结合而形成的核染色质组成。端粒DNA是由一小段富含G的简单重复序列，人的端粒DNA序列是由一段高度保守的重复序列d（TTAGGG）n构成的特化区。端粒结合蛋白，主要成分是“端粒重复结合因子”（TRF）。端粒排列成高级的“T-环”结构，像“帽子”一样扣在染色体两端，防止染色体融合、重组、降解，维持其完整性和稳定性。端粒的这种保护功能在基因完整性和细胞生理学其他方面的调节起至关重要的作用。     

端粒及端粒酶与卵巢肿瘤关系的研究进展

近年来 ,随着细胞遗传学和分子生物学研究的进展 ,人们逐渐认识到端粒酶 (telomerase)在肿瘤的发生、发展中扮演着重要角色。卵巢肿瘤是常见的妇科肿瘤 ,现就端粒 (telomere)、端粒酶的生物学特性及其与卵巢肿瘤关系的研究进展作一综述。一、端粒、端粒酶端粒是真核细胞染色体末端的DNA重复序列与特异结合蛋白的复合体 ,富含鸟嘌呤。与引物结合的端粒不能随细胞分裂时DNA的复制而复制 ,所以端粒随细胞分裂而丢失 ,每次分裂丢失 5 0～ 2 0 0bp ,当端粒缩短至一阈长度 ( 1 .5kb)时 ,细胞出现增殖危机而走向衰老与死亡。所以 ,端粒的长度被称为细胞的“生命时钟”。一种逃避机制是端粒酶的激活。端粒酶是一种特殊的核糖核酸蛋白质聚合物 ,它能以自身RNA作为模板合成端粒 ,以弥补复制造成的端粒缩短。端粒酶还是细胞周期重要的调控因素之一 ,影响着细胞周期的进程。由于端粒酶的激活 ,肿瘤细胞一方面维持了端粒的长度 ,使细胞获得永生 ;另一方面使细胞周期缩短、生长变快。大量的研究已表明 ,端粒酶的活化与癌症的发生密切相关 ,端粒酶已成为抗肿瘤治疗的一个新靶点。人类端粒酶由RNA和蛋白质组成 ,包括人端...     

人乳头瘤病毒、端粒酶和宫颈癌(二)

2 端粒酶与宫颈癌2.1 端粒酶的分子生物学特征 端粒是真核染色体末端的DNA重复序列与特异性蛋白的复合体。其功能是保护染色体免遭降解、避免有害的端-端融合以及决定细胞的寿命。端粒酶是由一条含有与端粒DNA互补的RNA链和蛋白质组成的核糖核蛋白复合体,它能够以自身RNA为模板向染色体末端添加DNA重复序列来加长端粒。目前已经克隆的人类端粒酶亚单位有端粒酶RNA(hTR)、端粒酶结合蛋白1(hTP1)、端粒酶反转录蛋白(hTERT)。TP1主要起连接RNA和hTERT的作用,hTERT是催化亚单位。     

端粒及端粒酶与血液系肿瘤

<正>端粒(Telomere)和端粒酶(Telomerase)是近来生命科学研究的热点之一.正常细胞分裂多次后,端粒缩短达到一危机点几(Crisis),触发某一信号,于是细胞不再分裂而衰老、死亡.少数细胞逃逸危机点,激活端粒酶,从而永生化和恶变.端粒和端粒酶系统的研究对阐明细胞衰老和恶变机制,对于肿瘤的诊断和治疗以及抗衰老.都有重要的理论和实际意义.本文就端粒一端粒酶系统及其与一些血液系统肿瘤的关系作一综述.1端粒端粒位于真核细胞染色体末端,是末端DNA和蛋白质的复合体,该末端DNA在结构和功能方面均与其它DNA序列不同.人类染色体端粒由5’→3’方向简单重复的TTAGGG序列组成,重复次数约2000次.人类端粒序列的基本单元可与多种低等及高等生物的中期染色体末端相接合,可见端粒在生物进化上具有高度的保守性.不同细胞的端粒长度不一,精子端粒长度约为     

端粒酶活性与宫颈癌关系的研究概况

位于真核细胞染色体末端的DNA重复序列与结合蛋白组成的复合体称为端粒.其功能是维持染色体稳定,防止染色体降解、融合、重组和丢失.端粒酶是一种核糖核苷酸蛋白酶(RNA),其作用是以自身RNA为模板逆转录合成端粒的重复序列并接到染色体末端而维持其长度.除生殖细胞和少数造血细胞外,正常体细胞的端粒酶处于失活状态,当端粒酶被激活时,不断合成端粒重复序列DNA,补充细胞分裂时缩短的端粒,导致细胞无限增殖、永生化、转为恶性.研究表明,人类70%～95%的恶性肿瘤端粒酶活性增高,而癌旁或正常组织端粒酶无或低表达[1～3].故端粒酶作为目前最广谱的肿瘤标志物而倍受关注.宫颈癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一,其病死率占中国女性癌症的第二位.端粒酶与宫颈癌及癌前病变的发生、发展和预后有密切关系.现就端粒酶活性与宫颈癌的关系予以综述.     

端粒、端粒酶及其与皮肤疾病的关系

端粒为真核生物线性DNA末端的一组6核苷酸的串联重复序列5'-TTAGGG-3’。它能维持染色体末端稳定性，防止降解、融合、重排和DNA丢失。端粒的长度和端粒酶的活性有关，因此端粒酶的活性决定了细胞的寿命。端粒和端粒酶的研究涉及到细胞生物学的许多方面，本文仅就其与疾病的关系做一综述。     

端粒与端粒酶

<正>1 端粒 1.1 端粒的结构 20世纪30/40年代,Muller和McClintock首先认识到真核生物染色体的末端对维持染色体完整性和稳定性至关重要,从而提出端粒的概念。端粒(telomere)是指真核细胞线形染色体末端的一种特殊结构,由富含G的DNA重复序列和端粒结合蛋白构成的一种核蛋白复合物。不同种类细胞的端粒DNA序列并不相同,大多数长5～8bp,由这些重复单位组成的端粒突出于其互补链12～16个核苷酸内。人和其他哺乳类动物的端粒DNAJ序列由5′～>3′方向     

端粒酶检测在临床细胞学诊断中的应用

<正>1 端粒、端粒酶与人类肿瘤 1.1 端粒 端粒是指真核细胞线性染色体末端的一种特殊结构,由简单重复富含G的DNA序列和端粒结合蛋白组成。人类染色体端粒亚单位序列为5′TTAGGG3′,在体外形成发夹折叠的二级结构,为染色体末端提供了一个保护性“帽子”,使染色体免受外切酶的破坏,防止染色体间相互融合、重组,从而保证真正的遗传信息得以完整复制。     

聚合酶链式反应(PCR)

PCR(polymerase chain reaction)技术是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,这种方法被认为是生物技术方法学上的一次革命。具体方法是由高温变性、低温退火、适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,以达到使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是①置待扩增DNA于高温下解链成为单链模板;②人工合成的两个特异寡聚核苷酸引物在低温条件下分别与目的片段两端的两条链互补结合;③DNA聚合酶在72C条件下,将单核苷酸从引物3’端开始掺入,沿模板5’→3’方向延伸,合成DNA新链。由于每一周期所产生的DNA均能     

化疗药物诱导HL-60细胞凋亡过程中端粒酶hTERT的mRNA表达

0　引言　端粒是构成真核生物染色体的天然末端 .端粒酶是催化增加染色体末端端粒重复序列反应的核糖核酸蛋白复合物 ,由 RNA和蛋白质两部分组成 ,其 RNA有与端粒互补的模板及 3 端粒引物的识别位点 ;其蛋白质部分即端粒酶的催化亚基 ,具有以 RNA模板合成端粒 DNA的作用 .端粒酶催化亚基的编码基因是于 1997年由 Nakamura等 [1 ] 及 Mey-erson等 [2 ]两个小组几乎同时新克隆并分别命名为 h TRT和h EST2 ,后统一命名为 h TERT.近年来有关端粒酶的研究虽然已经较为深入 ,但关于药物诱导细胞凋亡过程中端粒酶催化亚基 h TERT基因表…     

端粒酶活性与恶性肿瘤相关性研究进展

端粒 (ｔｅｌｏｍｅｒｅ)是真核生物细胞染色质末端的一种特殊结构 ,由端粒ＤＮＡ和端粒蛋白构成。人端粒ＤＮＡ序列是由5’ - 3’方向的一段高度保守的ｄ(ＴＴＡＧＧＧ)ｎ组成的简单重复结构。此结构类似染色体的帽子 ,能防止染色体发生降解、端一端融合、重组和染色体丢失 ,因而起到稳定染色体的作用。在正常机体内 ,细胞每分裂一次 ,端粒将丢失 5 0～ 15 0个碱基对 ,随着细胞的分裂 ,端粒ＤＮＡ逐渐缩短 ,最终使细胞进入危机期 ,并导致细胞死亡 ,这就是所谓的“末端复制难题”。端粒酶 (ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ)是一种核糖核蛋白 ,由ＲＮＡ…